PENGARUH KONSUMSI IKAN ASIN KUNIRAN (Upeneus sulphureus) BERFORMALIN TERHADAP
PERTUMBUHAN DAN ORGAN DALAM TIKUS WISTAR (Rattus norvegicus)
LAPORAN SKRIPSI TEKNOLOGI HASIL PERIKANAN
Oleh: DYAH INNAMASARI
NIM. 0210830026
UNIVERSITAS BRAWIJAYA FAKULTAS PERIKANAN
MALANG 2007
PENGARUH KONSUMSI IKAN ASIN KUNIRAN (Upeneus sulphureus) BERFORMALIN TERHADAP
PERTUMBUHAN DAN ORGAN DALAM TIKUS WISTAR (Rattus norvegicus)
Laporan Skripsi Sebagai Salah Satu Syarat Untuk Memperoleh Gelar Sarjana
Perikanan Pada Fakultas Perikanan Universitas Brawijaya Malang
DYAH INNAMASARI 0210830026
MENYETUJUI, DOSEN PENGUJI I DOSEN PEMBIMBING I
Ir. TITIK DWI S, MP Ir. JA. SUMARDI, MS Tanggal : Tanggal :
DOSEN PENGUJI II DOSEN PEMBIMBING II
Ir. HARTATI KARTIKA N, MS Dr. Ir. HARDOKO, MS Tanggal : Tanggal :
MENGETAHUI, KETUA JURUSAN
Ir. MAHENO SRI WIDODO, MS Tanggal :
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan
rahmat dan karuniaNya sehingga penulisan laporan skripsi yang berjudul “Pengaruh
Konsumsi Ikan Asin Kuniran (Upeneus sulphureus) Berformalin terhadap Pertumbuhan
dan Organ Dalam Tikus Wistar (Rattus novergicus)” dapat diselesaikan oleh penulis.
Laporan ini disusun sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana di
Fakultas Perikanan Universitas Brawijaya.
Atas terselesaikannya laporan skripsi ini, penulis mengucapkan banyak terima
kasih kepada:
1. Bapak Ir. J. A. Sumardi, MS dan Dr. Ir. Hardoko, MS selaku dosen pembimbing
yang telah banyak memberikan pengarahan dan bimbingan
2. Seluruh staf dan karyawan Laboratorium Biokimia Fakultas Perikanan
Universitas Brawijaya Malang, Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu
(LPPT), Laboratorium Pangan dan Gizi, Pusat Antar Universitas (PAU) dan
Laboratorium Patologi Fakultas Kedokteran Hewan (FKH) Universitas Gadjah
Mada Yogyakarta yang telah memberikan bantuan fasilitas dan masukan selama
penelitian
3. Keluargaku tercinta (Bapak (alm), Ibu dan kakak-kakakku) yang telah membantu
dalam do’a dan materi, serta dukungan yang tiada hentinya
4. Teman-teman THP ’02 dan semua pihak yang telah membantu sampai
terselesaikannya laporan ini yang tidak dapat saya sebutkan satu per satu
Penulis menyadari bahwa laporan ini masih jauh dari sempurna. Oleh karena itu,
kritik dan saran yang bersifat membangun sangat penulis harapkan. Akhirnya penulis
berharap semoga karya ini bermanfaat dan dapat memberikan informasi bagi semua
pihak yang berminat dan membutuhkan.
Malang, Agustus 2007
Penulis
iii
DAFTAR ISI
Halaman
RINGKASAN ....................................................................................................... i
KATA PENGANTAR .......................................................................................... iii
DAFTAR ISI......................................................................................................... iv
DAFTAR TABEL................................................................................................. vii
DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... viii
DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ xi
1. PENDAHULUAN ............................................................................................ 1
1.1 Latar Belakang ............................................................................................... 1
1.2 Perumusan Masalah ....................................................................................... 3
1.3 Tujuan Penelitian ............................................................................................ 3
1.4 Kegunaan Penelitian ...................................................................................... 4
1.5 Hipotesis ......................................................................................................... 4
1.6 Tempat dan Waktu ......................................................................................... 4
2. TINJAUAN PUSTAKA .................................................................................. 5
2.1 Ikan Asin ......................................................................................................... 5
2.2 Ikan Kuniran (Upeneus sulphureus) ............................................................... 7
2.3 Formalin ......................................................................................................... 7
2.2.1 Tinjauan umum .................................................................................... 7
2.2.2 Penggunaan formalin sebagai pengawet makanan................................ 8
2.2.3 Toksisitas formalin................................................................................ 9
2.2.4 Ambang batas penggunaan formalin .................................................... 10
2.2.5 Mekanisme formalin dalam tubuh ........................................................ 11
3. MATERI DAN METODE PENELITIAN ....................................................... 13
3.1 Bahan ............................................................................................................. 13
3.1.1 Bahan yang diuji ................................................................................... 13
3.1.2 Bahan untuk ransum.............................................................................. 13
iv
3.1.3 Bahan untuk analisis kimia .................................................................. 14
3.1.4 Bahan untuk analisis organ ................................................................... 14
3.2 Peralatan ......................................................................................................... 15
3.3 Metode Penelitian .......................................................................................... 18
3.3.1 Prosedur penelitian ............................................................................... 19
3.3.1.1 Preparasi bahan uji ................................................................. 19
3.3.1.2 Pembuatan ransum ................................................................. 19
3.3.1.3 Prosedur pelaksanaan percobaan ............................................ 20
3.3.2 Parameter uji ........................................................................................ 24
3.3.2.1 Analisis proksimat tepung ikan dan ransum ........................... 24
3.3.2.2 Analisis formalin dalam ransum ............................................. 29
3.3.2.3 Jumlah ransum yang dikonsumsi dan berat badan tikus ......... 31
3.3.2.4 Analisis organ ......................................................................... 32
3.4 Analisis Data ................................................................................................... 34
4. HASIL DAN PEMBAHASAN......................................................................... 35
4.1 Komposisi Gizi .............................................................................................. 35
4.1.1 Ikan asin kuniran (Upeneus sulphureus) ................................................ 35
4.1.2 Ransum................................................................................................... 36
4.1.3 Konsentrasi formalin .............................................................................. 37
4.2 Pengaruh Jenis Ransum Terhadap Jumlah Konsumsi dan Berat Badan Tikus................................................................................................................ 40
4.2.1 Jumlah konsumsi ransum ....................................................................... 40
4.2.2 Berat badan tikus .................................................................................... 43
4.3 Pengaruh Konsumsi Ransum Berformalin Terhadap Berat dan Histologi Organ Dalam (Hati, Ginjal, Limpa) Tikus Percobaan .................................... 50
4.3.1 Hati ......................................................................................................... 50
4.3.2 Ginjal ..................................................................................................... 58
4.3.3 Limpa...................................................................................................... 65
5. KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................................ 71
5.1 Kesimpulan ............................................................................................... 71
5.2 Saran.......................................................................................................... 71
v
DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 72
LAMPIRAN ......................................................................................................... 78
vi
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
1. Daftar komposisi kimia ikan asin per 100 gr bahan ................................. 7
2. Sifat-sifat umum formaldehyde ................................................................ 8
3. Komposisi ransum tikus ............................................................................ 14
4. Denah rancangan faktor perlakuan ........................................................... 18
5. Hasil analisis proksimat ikan asin kuniran ............................................... 35
6. Komposisi gizi ransum standar dan perlakuan (%) ................................... 36
7. Kandungan formalin ransum perlakuan (%) ............................................. 37
8. Penurunan konsentrasi formalin setelah menjadi ransum.......................... 38
9. Data rerata berat hati dan persentase berat hati pada akhir konsumsi........ 51
10. Hasil diagnosa pada hati tikus percobaan .................................................. 53
11. Data rerata berat ginjal dan persentase berat ginjal pada akhir konsumsi . 59
12. Hasil diagnosa pada ginjal tikus kontrol dan perlakuan ............................ 61
13. Data rerata berat limpa dan persentase berat limpa pada akhir konsumsi . 66
14. Hasil diagnosa pada limpa tikus kontrol dan perlakuan ............................ 68
vii
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
1. Prosedur pembuatan tepung ikan asin kuniran berformalin ...................... 19
2. Prosedur kerja penelitian ........................................................................... 23
3. Prosedur pembuatan kurva standar formaldehid ....................................... 31
4. Reaksi formaldehid dengan protein ........................................................... 39
5. Grafik pengaruh konsumsi ransum dengan konsentrasi ikan berformalin yang berbeda terhadap jumlah ransum yang dikonsumsi tikus (A) lama konsumsi 1 bulan dan (B) lama konsumsi 2 bulan .................................... 40
6. Histogram pengaruh konsumsi ransum dengan konsentrasi ikan berformalin yang berbeda terhadap jumlah konsumsi ransum pada tikus 42
7. Grafik pengaruh konsumsi ransum dengan konsentrasi ikan berformalin yang berbeda terhadap berat badan tikus (A) lama konsumsi 1 bulan dan (B) lama konsumsi 2 bulan.................................................................. 44
8. Histogram pengaruh konsumsi ransum dengan konsentrasi ikan berformalin yang berbeda terhadap berat badan rata-rata tikus ............... 46
9. Grafik laju pertumbuhan berat badan tikus (A) lama konsumsi 1 bulan, (B) lama konsumsi 2 bulan ........................................................................ 48
10. Histogram pengaruh konsumsi ransum dengan konsentrasi ikan berformalin yang berbeda terhadap laju pertumbuhan berat badan tikus 50
11. Histogram pengaruh konsumsi ransum dengan konsentrasi ikan berformalin yang berbeda terhadap berat hati tikus................................. 52
12. Struktur histologis jaringan hati tikus kontrol (1 bulan) normal............... 53
13. Struktur histologis jaringan hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 15%:5% (1 bulan) normal............................................... 53
14. Struktur histologis jaringan hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 15%:5% (1 bulan) DH .................................................... 54
15. Struktur histologis jaringan hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 10%:10% (1 bulan) normal............................................. 54
16. Struktur histologis jaringan hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 10%:10% (1 bulan) DV .................................................. 54
17. Struktur histologis jaringan hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 5%:15% (1 bulan) normal............................................... 54
18. Struktur histologis jaringan hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 5%:15% (1 bulan) DV .................................................... 54
viii
19. Struktur histologis jaringan hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 0%:20% (1 bulan) normal............................................. 54
20. Struktur histologis jaringan hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 0%:20% (1 bulan) DH .................................................... 55
21. Struktur histologis jaringan hati tikus kontrol (2 bulan) normal............... 55
22. Struktur histologis jaringan hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 15%:5% (2 bulan) normal............................................... 55
23. Struktur histologis jaringan hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 15%:5% (2 bulan) DV............................................................ 55
24. Struktur histologis jaringan hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 10%:10% (2 bulan) normal............................................. 55
25. Struktur histologis jaringan hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 10%:10% (2 bulan) DV .................................................. 55
26. Struktur histologis jaringan hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 5%:15% (2 bulan) normal............................................... 56
27. Struktur histologis jaringan hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 5%:15% (2 bulan) DV .................................................... 56
28. Struktur histologis jaringan hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 0%:20% (2 bulan) DV .................................................... 56
29. Histogram pengaruh konsumsi ransum dengan konsentrasi ikan berformalin yang berbeda terhadap berat ginjal tikus.............................. 60
30. Struktur histologis jaringan ginjal tikus kontrol (1 bulan) normal ........... 62
31. Struktur histologis jaringan ginjal tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 15%:5% (1 bulan) normal ............................................. 62
32. Struktur histologis jaringan ginjal tikus perlakuan 10%:10% (1 bulan) normal ........................................................................................................ 62
33. Struktur histologis jaringan ginjal tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 5%:15% (1 bulan) normal.............................................. 62
34. Struktur histologis jaringan ginjal tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 5%:15% (1 bulan) N, CA................................................ 62
35. Struktur histologis jaringan ginjal tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 0%:20% (1 bulan) normal.............................................. 62
36. Struktur histologis jaringan ginjal tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 0%:20% (1 bulan) N,CA................................................ 63
37. Struktur histologis jaringan ginjal tikus kontrol (2 bulan) normal ............ 63
38. Struktur histologis jaringan ginjal tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 15%:5% (2 bulan) normal.............................................. 63
ix
39. Struktur histologis jaringan ginjal tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 15%:5% (2 bulan) N,CA................................................ 63
40. Struktur histologis jaringan ginjal tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 10%:10% (2 bulan) normal............................................ 63
41. Struktur histologis jaringan ginjal tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 10%:10% (2 bulan) N,CA.............................................. 63
42. Struktur histologis jaringan ginjal tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 5%:15% (2 bulan) normal.............................................. 64
43. Struktur histologis jaringan ginjal tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 5%:15% (2 bulan) N,CA................................................. 64
44. Struktur histologis jaringan ginjal tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 0%:20% (2 bulan) N,CA................................................. 64
45. Histogram pengaruh konsumsi ransum dengan konsentrasi ikan berformalin yang berbeda terhadap berat limpa tikus.............................. 67
46. Struktur histologis jaringan limpa tikus kontrol (1 bulan) normal............. 69
47. Struktur histologis jaringan limpa tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 15%:5% (1 bulan) normal............................................... 69
48. Struktur histologis jaringan limpa tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 10%:10% (1 bulan) normal............................................. 69
49. Struktur histologis jaringan limpa tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 5%:15% (1 bulan) normal............................................... 69
50. Struktur histologis jaringan limpa tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 0%:20% (1 bulan) normal............................................... 69
51. Struktur histologis jaringan limpa tikus kontrol (2 bulan) normal ............ 69
52. Struktur histologis jaringan limpa tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 15%:5% (2 bulan) normal............................................... 70
53. Struktur histologis jaringan limpa tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 10%:10% (2 bulan) normal............................................. 70
54. Struktur histologis jaringan limpa tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 5%:15% (2 bulan) normal............................................... 70
55. Struktur histologis jaringan limpa tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 0%:20% (2 bulan) normal............................................... 70
x
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman 1. Komposisi mineral mix dalam 1000 g ............................................................ 78
2. Komposisi vitamin "Superviton" setiap 2 kaplet ........................................... 79
3. Perhitungan jumlah tepung ikan yang dibutuhkan sebagai pengganti kasein. 80
4. Perhitungan kasar jumlah residu formalin yang berada pada ransum............. 82
5. Perhitungan pembuatan larutan formalin 7,5%............................................... 83
6. Kurva Standar Formaldehid ............................................................................ 84
7. Data jumlah ransum yang dikonsumsi tikus per 3 hari selama 1 bulan perlakuan (g) ................................................................................................... 85
8. Data jumlah ransum yang dikonsumsi tikus per 3 hari selama 2 bulan perlakuan (g) ................................................................................................... 86
9. Data berat badan tikus per 3 hari selama 2 bulan perlakuan (g) ..................... 87
10. Data berat badan tikus per 3 hari selama 2 bulan perlakuan (g) ..................... 88
11. Data laju pertumbuhan berat badan tikus per 3 hari selama 1 bulan perlakuan (g/hari) ............................................................................................ 89
12. Data laju pertumbuhan berat badan tikus per 3 hari selama 2 bulan perlakuan (g/hari) ............................................................................................ 90
13. Data berat organ dalam (hati, ginjal, limpa) tikus (g) ..................................... 91
14. Hasil analisis statistik jumlah ransum yang dikonsumsi tikus ........................ 92
15. Hasil analisis statistik berat badan tikus ......................................................... 96
16. Hasil analisis statistik laju pertumbuhan berat badan tikus ............................ 99
17. Hasil analisis statistik berat hati tikus ............................................................. 103
18. Hasil analisis statistik berat ginjal tikus .......................................................... 107
19. Hasil analisis statistik berat limpa tikus .......................................................... 111
20. Data rerata berat badan awal (hari ke-0) selama pemeliharaan ...................... 115
21. Hasil analisis homogenitas berat badan hari ke-0 .......................................... 116
22. Dokumentasi selama penelitian ...................................................................... 118
xi
RINGKASAN DYAH INNAMASARI. 0210830026. Pengaruh Konsumsi Ikan Asin Kuniran (Upeneus sulphureus) Berformalin Terhadap Pertumbuhan dan Organ Dalam Tikus Wistar (Rattus novergicus). (Dibawah bimbingan Ir. J. A. SUMARDI, MS dan Dr. Ir. HARDOKO, MS).
Pada penghujung tahun 2005, marak pemberitaan tentang beredarnya produk
makanan yang mengandung formalin di tengah masyarakat. Keberadaan formalin dalam
beberapa jenis makanan sebenarnya bukan hal baru. Namun kurangnya informasi atau
sosialisasi mengenai bahaya zat tersebut, dan sulitnya membedakan produk yang
diawetkan dengan formalin boleh jadi sebagai salah satu penyebab masyarakat seperti
bersikap tidak ambil peduli. Perilaku sebagian konsumen yang masih senang memilih
produk yang awet dan harga yang murah ditenggarai juga menjadi penyebab lain
mengapa formalin masih digunakan pada makanan. Beberapa survey menunjukkan
alasan produsen menggunakannya sebagai bahan pengawet karena daya awet serta mutu
produk yang dihasilkan menjadi lebih bagus.
Penggunaan formalin dalam bahan pangan sangat disesalkan karena formalin
merupakan bahan kimia berbahaya yang bersifat karsinogenik (penyebab kanker) dan
mutagen (menyebabkan perubahan fungsi sel dan jaringan). Kandungan formalin yang
tinggi dalam tubuh menyebabkan iritasi lambung, alergi, keracunan dan bahkan
kematian. Apabila tertelan ke dalam mulut maka dapat terjadi kerusakan hati, jantung,
otak, limpa, pankreas, sistem susunan syaraf pusat dan ginjal. Namun menurut
Yuswanto (2006), formalin yang berada di makanan tidak berbahaya karena
metabolisme formalin yang masuk ke tubuh manusia sangat cepat. Tubuh manusia akan
mengubah formalin menjadi CO2 dan air seni dalam waktu 1,5 menit. Jadi meski
formalin dikonsumsi dalam jangka waktu yang cukup lama, tidak akan terjadi proses
akumulasi dan menyebabkan toksifikasi.
Secara umum, penelitian ini bertujuan untuk mempelajari pengaruh makanan
berformalin terhadap kesehatan tikus percobaan. Adapun tujuan khususnya adalah untuk
menentukan efek konsumsi ikan asin berformalin dengan variasi konsentrasi yang
berbeda terhadap pertumbuhan dan organ dalam (hati, ginjal dan limpa) pada tikus
percobaan.
i
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Biokimia Fakultas Perikanan
Universitas Brawijaya Malang, Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu (LPPT)
dan Laboratorium Pangan dan Gizi, Pusat Antar Universitas (PAU) Universitas Gadjah
Mada, Yogyakarta pada bulan Januari-Maret 2007.
Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode eksperimen dengan
menggunakan Rancangan Acak Lengkap Faktorial. Data yang diperoleh kemudian
dianalisis dengan menggunakan ANOVA (Analysis of Variance) dan dianalisis lebih
lanjut dengan uji Tukey. Pada penelitian ini digunakan 2 faktor perlakuan dengan 3 kali
ulangan. Faktor perlakuan tersebut terdiri dari jangka waktu pemberian ransum (A) yang
terdiri dari 1 bulan (A1) dan 2 bulan (A2), dan faktor perbandingan konsentrasi kasein
dan tepung ikan asin berformalin pada ransum (B) terdiri dari 20%:0% (kontrol) (B1),
15%:5% (B2), 10%:10% (B3), 5%:15% (B4) dan 0%:20% (B5). Parameter uji yang
dilakukan meliputi analisis proksimat tepung ikan, ransum standar dan ransum
perlakuan, uji residu formalin ransum, jumlah ransum yang dikonsumsi, penimbangan
berat badan setiap 3 hari sekali dan penimbangan berat organ dalam (hati, ginjal dan
limpa) serta foto jaringan pada akhir pemeliharaan.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa konsumsi ransum yang mengandung ikan
asin berformalin mengakibatkan penurunan berat badan seiring dengan peningkatan
konsentrasi formalin. Berat badan paling rendah terdapat pada tikus perlakuan dengan
ransum (0%:20%). Adanya formalin dalam ransum menyebabkan jumlah konsumsi tikus
perlakuan menjadi rendah. Jumlah konsumsi paling rendah terdapat pada tikus perlakuan
dengan ransum (0%:20%). Konsumsi ransum yang mengandung ikan asin berformalin
pada tikus percobaan dapat mengakibatkan terjadinya degenerasi vakuola dan degenerasi
hidrofik pada hati dan nekrosis pada ginjal.
Saran untuk penelitian selanjutnya adalah perlu adanya penelitian lebih lanjut
tentang pengaruh konsumsi ransum berformalin terhadap kadar formaldehid dalam darah
dan urine pada tikus percobaan. Serta sebaiknya tidak menggunakan formalin sebagai
bahan pengawet makanan.
ii
1. PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Pada penghujung tahun 2005, marak pemberitaan tentang beredarnya produk
makanan yang mengandung formalin di tengah masyarakat. Keberadaan formalin dalam
beberapa jenis makanan sebenarnya bukan hal baru. Namun kurangnya informasi atau
sosialisasi mengenai bahaya zat tersebut, dan sulitnya membedakan produk yang
diawetkan dengan formalin boleh jadi sebagai salah satu penyebab masyarakat kita
seperti bersikap tidak ambil peduli. Perilaku sebagian konsumen yang masih senang
memilih produk yang awet dan harga yang murah ditenggarai juga menjadi penyebab
lain mengapa formalin masih digunakan pada makanan (Indra, 2006).
Alasan dari penyalahgunaan zat kimia berbahaya ini adalah alasan ekonomi,
dimana harga dari formalin yang relatif murah yaitu berkisar antara Rp. 3000,00 hingga
Rp. 8000,00 per liter, sehingga setiap orang mudah untuk mendapatkannya
(Anonymous, 2005a). Selain itu juga tingkat pengetahuan yang rendah mengenai bahan
pengawet juga merupakan faktor penyebab penggunaan formalin pada bahan pangan.
Beberapa survey menunjukkan alasan produsen menggunakannya sebagai bahan
pengawet karena daya awet serta mutu produk yang dihasilkan menjadi lebih bagus
(Astawan, 2006). Namun, makanan yang ditambahkan formalin dapat terlihat berbeda
secara fisik. Ikan basah yang ditambah formalin mempunyai ciri antara lain: warnanya
putih bersih, daging kenyal, insangnya berwarna merah tua bukan merah segar, daya
awet sampai beberapa hari dan tidak mudah busuk (Anonymous, 2005b).
Semula penggunaan formalin hanya disinyalir digunakan hanya pada bakso dan
mie, tetapi kemudian hampir semua bahan makanan yang biasa kita konsumsi
2
dinyatakan mengandung bahan kimia yang biasa digunakan sebagai pengawet mayat
tersebut (Anonymous, 2005a). Berdasarkan hasil penyelidikan Balai Pengawasan Obat
dan Makanan (Balai POM) membuktikan bahwa tahu, mi basah, ayam potong, bakso,
ikan asin, cumi dan jenis ikan lainnya adalah sebagian jenis makanan dengan kandungan
formalin berkadar tinggi yang beredar di masyarakat (Anonymous, 2006a). Menurut
hasil uji laboratorium manunjukkan hasil positif untuk hampir semua produk ikan asin di
teluk Jakarta. Dalam ikan asin kecil seperti jambal dan cumi-cumi, untuk setiap 10
gramnya terdapat lebih dari 1,5 ppm formalin ( Anonymous, 2005c).
Ikan asin merupakan produk yang tidak asing lagi bagi rakyat Indonesia karena
harganya murah dan mudah membuatnya. Hampir semua jenis ikan dapat dibuat
menjadi ikan asin, termasuk cumi-cumi, udang, daging kerang, teripang dan sebagainya
(Hadiwiyoto, 1993). Salah satu ikan asin yang terdapat di pasaran adalah ikan asin
kuniran. Berdasarkan penelitian Elvandari (2006), di beberapa pasar di Malang
ditemukan ikan asin kuniran yang mengandung formalin dengan residu 0,2% (2000
ppm) – 1,3% (13000 ppm).
Penggunaan formalin dalam bahan pangan sangat disesalkan karena formalin
merupakan bahan kimia berbahaya yang bersifat karsinogenik (penyebab kanker) dan
mutagen (menyebabkan perubahan fungsi sel dan jaringan). Kandungan formalin yang
tinggi dalam tubuh menyebabkan iritasi lambung, alergi, keracunan dan bahkan
kematian (Anonymous, 2006b). Ditambahkan oleh Judarwanto (2006), apabila tertelan
ke dalam mulut maka dapat terjadi kerusakan hati, jantung, otak, limpa, pankreas, sistem
susunan syaraf pusat dan ginjal. Menurut Koeman (1988), hati dan ginjal rentan
terhadap pengaruh bahan atau zat kimia. Kerentanan itu sebagian dapat diterangkan
berdasarkan posisinya dalam sirkulasi cairan badan. Seperti diketahui, hati dapat mudah
3
berhubungan melalui vena portae dengan zat yang diserap dari lambung-usus dan ginjal,
karena fungsi ekskresinya berhubungan erat sekali dengan darah dan zat yang terdapat di
dalamnya.
Namun menurut Yuswanto (2006), formalin yang berada di makanan tidak
berbahaya karena metabolisme formalin yang masuk ke tubuh manusia sangat cepat.
Tubuh manusia akan mengubah formalin menjadi CO2 dan air seni dalam waktu 1,5
menit. Jadi meski formalin dikonsumsi dalam jangka waktu yang cukup lama, tidak akan
terjadi proses akumulasi dan menyebabkan toksifikasi.
1.2 Perumusan Masalah
Pemakaian formalin dalam bahan makanan sangat berbahaya. Karena konsumsi
formalin dapat berdampak pada kesehatan manusia, baik bersifat akut (mual, muntah,
pusing, sakit perut, alergi) maupun kronis (gangguan pada pencernaan, hati, ginjal,
pankreas, sistem syaraf pusat dan kanker). Salah satu makanan yang mengandung
formalin yang ada di pasaran yaitu ikan asin kuniran. Menurut Elvandari (2006) residu
formalin ikan asin kuniran di pasaran yaitu 0,2% (2000ppm) – 1,3% (13000ppm).
Berdasarkan gambaran di atas, permasalahan penelitian adalah apakah konsumsi ikan
asin kuniran berformalin sesuai kisaran residu di pasaran selama 2 bulan dapat
mempengaruhi pertumbuhan (berat badan) dan organ dalam (hati, ginjal, limpa) tikus
percobaan?
1.3 Tujuan Penelitian
Secara umum, penelitian ini bertujuan untuk mempelajari pengaruh makanan
berformalin terhadap kesehatan tikus percobaan.
4
Adapun tujuan khususnya adalah untuk mempelajari efek konsumsi ikan asin
berformalin dengan variasi konsentrasi yang berbeda terhadap pertumbuhan dan organ
dalam (hati, ginjal dan limpa) pada tikus percobaan.
1.4 Kegunaan Penelitian
Kegunaan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui apakah penggunaan
formalin sebagai bahan pengawet makanan dapat berpengaruh buruk terhadap kesehatan
khususnya pada organ hati, ginjal dan limpa.
1.5 Hipotesis
Diduga pemberian ikan asin kuniran berformalin sesuai residu di pasaran (0,2%
(2000ppm) – 1,3% (13000ppm)) selama 2 bulan berpengaruh terhadap pertumbuhan dan
organ dalam (hati, ginjal, limpa) tikus percobaan.
1.6 Tempat dan Waktu
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu
(LPPT) dan Laboratorium Pangan dan Gizi, Pusat Antar Universitas (PAU) Universitas
Gadjah Mada, Yogyakarta pada bulan Januari-Maret 2007.
2. TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Ikan asin
Ikan asin merupakan produk yang tidak asing lagi bagi rakyat Indonesia karena
harganya murah dan mudah membuatnya. Hampir semua jenis ikan dapat dibuat
menjadi ikan asin, termasuk cumi-cumi, udang, daging kerang, teripang dan sebagainya.
Langkah-langkah dalam proses pembuatanya meliputi : penyiangan, pencucian,
penggaraman, dan pengeringan (Hadiwiyoto, 1993). Ditambahkan oleh Murniyati dan
Sunarman (2000), ikan asin adalah ikan ikan yang telah mengalami proses penggaraman
dan pengeringan. Dalam skala nasional, ikan asin merupakan salah satu produk
perikanan yang mempunyai kedudukan penting, hampir 65% produk perikanan masih
diolah dan diawetkan dengan cara penggaraman.
Menurut Afrianto dan Liviawaty (1989), metode penggaraman ikan dapat
dilakukan dengan 4 cara, yaitu :
1. Penggaraman kering
Penggaraman kering menggunakan garam berbentuk kristal, caranya yaitu
menaburi ikan dengan garam kemudian disusun secara berlapis-lapis. Lapisan garam
akan menyerap keluar cairan di dalam tubuh ikan, sehingga kristal garam berubah
menjadi larutan garam yang dapat merendam seluruh lapisan ikan.
2. Penggaraman basah
Proses penggaraman dengan metode ini menggunakan larutan garam sebagai
media untuk merendam ikan. Larutan garam dipakai untuk mendehidrasi air/cairan
pada tubuh ikan sehingga kadar airnya berkurang.
6
3. Pelumuran garam (Kench salting)
Pengggaraman dengan cara ini hampir serupa dengan penggaraman kering,
bedanya metode ini tidak menggunakan bak kedap air. Ikan hanya ditumpuk dengan
menggunakan keranjang dan agar tidak dihinggapi lalat, permukaan ikan ditutup
dengan lapisan garam.
4. Penggaraman diikuti proses perebusan
Ikan pindang merupakan contoh ikan yang mengalami proses penggaraman yang
diikuti dengan perebusan.
Oleh karena itu, kita dapat menjumpai 3 macam ikan asin, yaitu ikan asin basah,
ikan asin kering, dan ikan asin rebus (Murniyati dan Sunarman, 2000).
Pengeringan ikan dapat dilakukan dengan cara tradisional yaitu dengan
menggunakan sinar matahari ataupun dengan menggunakan alat pengering mekanik.
Bila ikan dikeringkan tidak sampai cukup kering berbagai kerusakan timbul sebagai
akibat perubahan bakteri, jamur dan mungkin juga serangan serangga. Karena itu selama
proses pengeringan harus diperhatikan faktor-faktor penting yang mempengaruhinya
antara lain seperti kelembaban udara, suhu udara, kecepatan udara dan keadaan ikan
(Zaelanie dan Nurdiani, 2004).
Adapun komposisi kimia ikan asin dapat dilihat pada Tabel 1.
7
Tabel 1. Daftar komposisi ikan asin per 100 gram bahan Komponen Jumlah
Air Protein Lemak
Karbohidrat Kalsium Fosfor
Vitamin B1Vitamin A
Besi Energi
Bagian yang dapat dimakan
40 g 42 g 1,5 g
0 200 mg 300 mg 0,01 mg
0 SI 2,5 mg 193 kal
70 g Sumber : Sediaoetomo (2000)
2.2 Ikan Kuniran
Ikan kuniran merupakan ikan dari famili Mullidae yang mempunyai ciri-ciri ikan
berukuran kecil sampai sedang, badan compressed, tidak terdapat jari-jari keras maupun
jari-jari yang terpisah dari sirip anal, terdapat 2 sungut yang panjang di belakang radang
bawah, sirip dorsal kedua pendek, sirip caudal bercagak, terdapat di laut tropik dan
subtropik (Rahman et al., 1984). Nelson (1984) menyatakan bahwa ikan kuniran
merupakan jenis ikan demersal yang hidup di perairan pantai sampai kedalaman 40 m
dan memiliki panjang maksimum 28 cm dan umumnya 20 cm.
2.3 Formalin
2.2.1 Tinjauan umum
Formalin adalah larutan yang tidak berwarna dan baunya sangat menusuk. Dalam
formalin terkandung sekitar 37% formaldehid dalam air. Biasanya ditambahkan
methanol hingga 15% sebagai pengawet. Formalin dikenal luas sebagai bahan
pembunuh hama (desinfektan) dan banyak digunakan dalam industri. Penggunaan
formalin adalah sebagai pembunuh kuman sehingga dapat dimanfaatkan untuk
8
pembersih lantai, kapal, gudang, dan pakaian; bahan pada pembuatan sutra buatan, zat
pewarna, cermin kaca, dan bahan peledak; bahan pengawet produk kosmetika dan
pengeras kuku; pencegah korosi untuk sumur minyak; cairan pembalsam ( pengawet
mayat ); dan dalam konsentrasi yang sangat kecil ( < 1% ) digunakan sebagai pengawet
untuk berbagai barang konsumen seperti pembersih rumah tangga, cairan pencuci piring,
pelembut, perawat sepatu, sampo mobil, lilin dan pembersih karpet (Anonymousc,
2006). Adapun sifat-siat umum formaldehid dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Sifat-sifat umum formaldehid Sifat-sifat umum formaldehid
Rumus molekul CH2O Densitas dan fase 1 g/m3, gas Kelarutan dalam air >100 g/100 ml (200C) Kelarutan dalam ethanol,acethon dan DMSO >100 g/100 ml Kelarutan dalam ether, benzene dan pelarut organik
Larut
Kelarutan dalam kloroform Tidak larut Titik cair -1170C (1560K) Titik didih -19,30C (253,90K)
Sumber : Anonymous (2006d)
Sejauh ini, pemanfaatan formalin tidak dilarang untuk bahan pembunuh hama
(desinfektan) dan bahan dalam berbagai industri. Namun, setiap pekerja yang terlibat
dalam pengangkutan dan pengolahan bahan ini harus berhati-hati mengingat risiko yang
berkaitan dengan bahan ini cukup besar (Anonymous, 2005b).
2.2.2 Penggunaan formalin sebagai bahan pengawet makanan
Keberadaan formalin dalam beberapa jenis makanan sebenarnya bukan hal baru.
Namun kurangnya informasi atau sosialisasi mengenai bahaya zat tersebut, dan sulitnya
membedakan produk yang diawetkan dengan formalin boleh jadi sebagai salah satu
penyebab masyarakat kita seperti bersikap tidak ambil peduli. Perilaku sebagian
9
konsumen yang masih senang memilih produk yang awet dan harga yang murah
ditenggarai juga menjadi penyebab lain mengapa formalin masih digunakan pada
makanan (Indra, 2006). Untuk memastikan apakah sebuah produk pangan mengandung
formalin atau tidak dibutuhkan uji laboratorium. Namun, makanan yang ditambahkan
formalin dapat terlihat berbeda secara fisik. Ikan basah yang ditambah formalin
mempunyai ciri antara lain: warnanya putih bersih, daging kenyal, insangnya berwarna
merah tua bukan merah segar, daya awet sampai beberapa hari dan tidak mudah busuk
(Anonymous, 2005b).
Penggunaan formalin untuk mengawetkan produk perikanan oleh para nelayan
dipicu oleh tingginya harga solar dan mahalnya harga es batu untuk mengawetkan ikan.
Penggunaan formalin dapat mengurangi biaya operasional melaut karena harganya cuma
Rp 7.000 per liter. Setelah dicampur air, satu liter formalin cukup untuk mengawetkan
10 ton ikan hasil tangkapan di tengah laut. Padahal, jika menggunakan es balok,
membutuhkan sekitar 350 es balok seharga Rp 2,62 juta. Sehingga selisihnya sangat
jauh. Oleh karena itu, nelayan lebih memilih menggunakan formalin dari pada es balok
untuk megawetkan ikan. Mereka tidak mempertimbangkan dampak penggunaan obat
berbahaya tersebut bagi kesehatan konsumen (Anonymous, 2005 ). a
2.2.3 Toksisitas formalin
Dampak konsumsi formalin pada kesehatan manusia dapat bersifat:
Akut : efek pada kesehatan manusia yang dapat langsung terlihat, seperti:
iritasi, alergi, mata memerah dan berair, mual, muntah, rasa terbakar pada
tenggorokan, sakit perut dan pusing.
10
Kronik : efek pada kesehatan manusia yang akan terlihat setelah terkena dalam
jangka waktu yang lama dan berulang, seperti: iritasi kemungkin parah, mata berair,
gangguan pada : pencernaan, hati, ginjal, pankreas, sistem syaraf pusat, menstruasi
dan pada hewan percobaan dapat menyebabkan kanker sedangkan pada manusia
diduga bersifat karsinogen (menyebabkan kanker). Mengkonsumsi bahan makanan
yang mengandung formalin, efek sampingnya terlihat setelah jangka panjang, karena
terjadi akumulasi formalin dalam tubuh (Anonymous, 2005b).
Formalin termasuk karsinogenik golongan IIA. Golongan I adalah yang sudah
pasti menyebabkan kanker, berdasarkan uji lengkap. Sedangkan golongan IIA adalah
baru taraf diduga karena data hasil uji pada manusia masih kurang lengkap. Dalam
jumlah sedikit formalin akan larut dalam air serta akan dibuang ke luar bersama cairan
tubuh. Faktor imunitas tubuh sangat berperan terhadap dampak formalin di dalam tubuh,
jika imunitas rendah, sangat mungkin formalin dengan kadar yang rendah pun bisa
berdampak buruk terhadap kesehatan (Astawan, 2006).
Meskipun demikian, perendaman dalam air selama 60 menit mampu
menurunkan kadar formalin sampai 61,25 persen, dengan air leri mencapai 66,03 persen,
sedang pada air garam hingga 89,53 persen. Ini artinya hanya dengan perlakuan dan
pengetahuan yang baik sebelum dikonsumsi, kadar formalin akan hilang (Sukesi, 2006).
2.2.4 Ambang batas penggunaan formalin
Formaldehid secara alami sudah ada dalam bahan makanan mentah dalam
kisaran 1 mg/kg hingga 90 mg/kg. American Conference of Govermental and Industrial
Hygienist (ACGIH) menetapkan ambang batas untuk formaldehid adalah 0,4 ppm.
Sementara National Institute for Occupational Safety and Health (NIOSH)
11
merekomendasikan paparan limit untuk para pekerja adalah 0,016 ppm selama periode 8
jam, sedangkan untuk 15 menit 0,1 ppm, sedangkan yang berbahaya bagi kesehatan pada
kadar 20 ppm (Anonymous, 2005d).
Menurut International Programme on Chemical Safety (IPCS), secara umum
ambang batas aman di dalam tubuh adalah 1 miligram per liter. IPCS adalah lembaga
khusus dari tiga organisasi di PBB, yaitu ILO, UNEP, serta WHO, yang mengkhususkan
pada keselamatan penggunaan bahan kimiawi. Bila formalin masuk ke tubuh melebihi
ambang batas tersebut maka dapat mengakibatkan gangguan pada organ dan sistem
tubuh manusia. Akibat yang ditimbulkan tersebut dapat terjadi dalam waktu singkat atau
jangka pendek dan dalam jangka panjang, bisa melalui hirupan, kontak langsung atau
tertelan (Judarwanto, 2006).
2.2.5 Mekanisme formalin dalam tubuh
Proses metabolisme formalin yang masuk ke dalam tubuh manusia sangat cepat.
Tubuh manusia akan mengubah formalin menjadi CO2 dan air seni dalam waktu 1,5
menit. Secara alami, setiap liter darah manusia mengandung formalin 3 mililiter.
Sedangkan formalin yang masuk bersama makanan akan didegradasi menjadi CO2 dan
dibuang melaui alat pernapasan. Jadi, meskipun formalin dikonsumsi dalam jangka
waktu yang cukup lama, tidak akan terjadi proses akumulasi dan menyebabkan
toksifikasi (Yuswanto, 2006).
Formaldehid dapat masuk dalam tubuh setelah kita menghirup, meminum
ataupun memakannya atau ketika formaldehid kontak langsung dengan kulit.
Formaldehid dengan cepat terserap dari hidung masuk ke paru-paru. Begitu juga dengan
formaldehid yang termakan atau terminum, juga akan dengan cepat terserap. Sedangkan
12
untuk kontak dengan kulit, hanya bagian kecil saja yang terserap. Sekali terserap
formaldehid dimetabolisme dengan sangat cepat. Hampir semua jaringan dalam tubuh
mempunyai kemampuan untuk memetabolismekan dan memecah formaldehid. Salah
satunya membentuk asam format dan dikeluarkan melalui urine. Formaldehid juga dapat
dikeluarkan sebagai CO2 dalam tubuh. Tubuh juga diperkirakan bisa memetabolisme
formaldehid dan bereaksi dengan DNA atau protein untuk membentuk molekul yang
lebih besar sebagai tambahan DNA atau protein tubuh. Formaldehid tidak disimpan
dalam jaringan lemak (Anonymous, 1999).
Ditambahkan oleh Judarwanto (2006), dalam jumlah sedikit, formalin akan larut
dalam air serta akan terbuang ke luar bersama cairan tubuh. Sehingga formalin sulit
terdeteksi keberadaannya di dalam darah. Imunitas tubuh sangat berperan dalam
berdampak tidaknya formalin di dalam tubuh. Jika imunitas tubuh rendah atau
mekanisme pertahanan tubuh rendah, sangat mungkin formalin dengan kadar rendah pun
bisa berdampak buruk terhadap kesehatan. Usia anak khususnya bayi dan balita adalah
salah satu usia yang rentan untuk mengalami gangguan ini. Secara mekanik integritas
mukosa (permukaan) usus dan peristaltik (gerakan usus) merupakan pelindung
masuknya zat asing masuk ke dalam tubuh. Secara kimiawi asam lambung dan enzim
pencernaan menyebabkan denaturasi zat berbahaya tersebut. Secara imunologik sIgA
(sekretori Imunoglobulin A) pada permukaan mukosa dan limfosit pada lamina propia
dapat menangkal zat asing masuk ke dalam tubuh. Pada usia anak, usus imatur (belum
sempurna) atau sistem pertahanan tubuh tersebut masih lemah dan gagal berfungsi
sehingga memudahkan bahan berbahaya masuk ke dalam tubuh yang sulit untuk
dikeluarkan. Hal ini juga akan lebih mengganggu pada penderita gangguan saluran cerna
yang kronis seperti pada penderita autism, alergi dan sebagainya.
3. MATERI DAN METODE PENELITIAN
3.1 Bahan
3.1.1 Bahan yang diuji
Bahan yang diuji adalah ikan kuniran (Upeneus sulphureus) yang diasin yaitu
dibuat dari ikan kuniran segar dengan panjang 20-25 cm dan berat ± 150 gram/ekor,
yang diperoleh dari Muncar Banyuwangi sebanyak 5 kg yang kemudian dibuat menjadi
ikan asin di Laboratorium. Ikan asin ini dibuat dengan penambahan formalin pada saat
perendaman (selama 12 jam) dengan konsentrasi 7,5% dari pengenceran formalin 37%
dihitung berdasarkan volume per volume dan selanjutnya diolah menjadi tepung.
3.1.2 Bahan untuk ransum
Pada penelitian ini terdapat 2 macam ransum tikus percobaan, yaitu ransum
standar dan ransum perlakuan. Adapun bahan-bahan yang digunakan dalam pembuatan
kedua ransum tersebut yaitu :
• protein (kasein) yang diperoleh dari Pusat Antar Universitas (PAU) Universitas
Gadjah Mada Yogyakarta
• lemak (minyak jagung) produksi PT. Intiboga Sejahtera Jakarta, diperoleh dari
toko Candra Malang
• Carboxy Methyl Cellulose (CMC) makanan diperoleh dari Laboratorium
Penelitian Pusat Antar Universitas (PAU) Universitas Gadjah Mada Yogyakarta
• vitamin merk ”Superviton” produksi PT. Erela Semarang diperoleh dari apotek
Sejati, Malang
• mineral mix diperoleh dari PT. Panadia Corporation Indonesia Malang
14
• karbohidrat (tepung maizena) "Honiq" diperoleh dari toko Candra Malang.
Komposisi ransum standar dan perlakuan dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Komposisi ransum tikus Jenis ransum
Ransum perlakuan (%) Bahan Ransum standar (%)* 15 : 5 10 : 10 5 : 15 0 : 20
Kasein : Tepung ikan Minyak jagung CMC makanan Mineral mix1
Vitamin mix2
Air Tepung maizena
20 : 0 5 5 4 1 5 60
15 : 5 5 5 4 1 5 60
10 : 10 5 5 4 1 5 60
5 : 15 5 5 4 1 5 60
0 : 20 5 5 4 1 5 60
Keterangan: 1) Lampiran 1. 2) Lampiran 2. *) National Research Council (NRC), 1978.
3.1.3 Bahan untuk analisis kimia
Bahan kimia yang digunakan untuk analisis meliputi bahan untuk uji proksimat
dan uji residu formalin. Bahan kimia untuk analisis proksimat antara lain : petroleum
benzene, kertas saring, aquades, H2SO4 pekat, K2S2O4, HgO, indikator metil merah,
NaOH, HCl dan larutan K2S. Bahan yang digunakan untuk uji residu formalin antara
lain : phenylhidrasine hydrochloride 7,5%; Potasium Ferricyanide 5%; Sodium
hydroxide 10% dan isopropil alkohol 45%.
3.1.4 Bahan untuk analisis organ
Bahan yang digunakan untuk membuat preparat organ yang akan dianalisis
meliputi : fiksatif bouin; alkohol (30%, 50%, 70%, 80%, 90% dan 100%); alkohol:xilol
dengan perbandingan 3:1; 1:1; 1:3; xilol:parafin dengan perbandingan 3:1; 1:1; 1:3; xilol
murni; parafin; Meyer’s albumin; Hematoxilin-eosin; kertas filter; Canada balsam;
aquadest.
15
3.2 Peralatan
Penelitian ini menggunakan hewan percobaan tikus putih wistar (Rattus
norvegicus) yang diperoleh dari Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu (LPPT)
Universitas Gadjah Mada Yogyakarta. Tikus wistar (Rattus norvegicus) yang digunakan
berjenis kelamin jantan yang berumur 21 hari dengan berat antara 48,20 – 61,80 gram.
Data rerata berat badan awal pemeliharaan dapat dilihat pada Lampiran 20. Tikus ini
merupakan salah satu hewan coba yang banyak digunakan dalam penelitian karena : (1)
bersifat omnivore (pemakan segala); (2) mempunyai jaringan yang hampir sama dengan
manusia; (3) kebutuhan zat gizinya serupa dengan manusia. Tikus strain ini pertama kali
dikembangkan oleh Wistar Institut of Biology and Anatomy, secara luas digunakan untuk
penelitian laboratorium. Ukuran tubuhnya lebih kecil daripada tikus Spraque-Dowley
dan sangat mudah menyesuaikan diri dengan lingkungannya. Sifatnya sangat jinak
asalkan tidak diganggu (Astuti, 1986).
Alat yang digunakan untuk membuat tepung ikan antara lain adalah pisau,
baskom plastik, blender, ayakan, dan loyang alumunium. Alat yang digunakan untuk
membuat ransum pakan tikus antara lain timbangan, baskom plastik, cetakan pelet,
loyang, dan oven. Sedangkan alat yang digunakan untuk analisis proksimat seperti
timbangan analitik "Mettler Toledo" dengan kapasitas maximum 210 g dan minimum
0,01 g, kertas saring, erlenmeyer "Pyrex-Iwaki glass" 250 ml, gelas piala, gelas ukur
"Pyrex-Iwaki glass" 100 ml, buret, mortar, rangkaian alat destruksi, pipet volume 25 ml,
statif, bola hisap, spatula, labu destruksi, labu destilasi, peralatan untuk ekstraksi lemak
(goldfisch), oven "Binder", desikator "Nikko", dan muffle "Nabertherm". Alat yang
digunakan untuk analisis residu formalin antara lain timbangan analitik, mortar, pipet
16
volume 10 ml, pipet volume 25 ml, beaker glass 500 ml, kertas saring,
spectrophotometer ”Genesis 20” dengan panjang gelombang 520-1000 nm.
Alat yang digunakan untuk pemeliharaan tikus terdiri dari kandang tikus berupa
box persegi panjang terbuat dari plat tembaga dengan tutup di bagian atas kandang dan
nampan penampung sisa pakan serta feses tikus dibagian bawahnya. Ukuran kandang,
panjang x lebar x tinggi = 62,5cm x 20cm x 15cm dengan bagian dalam disekat sehingga
menjadi 5 bagian. Kandang tikus dilengkapi dengan perlengkapan lain seperti tempat
ransum dan botol minum. Sebagai tempat ransum digunakan tempat pakan burung yang
dikaitkan dengan menggunakan kawat. Botol minum terbuat dari bahan gelas yang pada
bagian mulutnya disumbat dengan karet dan pada bagian tengahnya diberi lubang untuk
meletakkan pipa aluminium yang berguna untuk pengeluaran air.
Alat yang digunakan untuk membuat preparat organ (histologi) dengan metode
”Parafin” terdiri dari : beaker glass ”Duran” 100 ml, spatula, labu ukur ”Duran” 100 ml
dan 10 ml, mikrotom putar AO 820, oven ”Memmert” tipe U 30 dan S 25, obyek dan
cover glass ”Assintent dan Sea Gull no 18”, mikroskop monokuler ”Euromex” tipe
3402, mikroskop fotomikrografi ”Nikon 300”, mikrometer okuler dan obyektif, neraca
digital elektrik (sartorius), gelas pewarnaan, hot plate dan dissection set.
3.3 Metode Penelitian
Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode eksperimen.
Percobaan eksperimen adalah untuk menyelidiki ada tidaknya hubungan sebab akibat
serta seberapa besar hubungan tersebut dengan cara memberi perlakuan tertentu pada
kelompok eksperimen dan menyelidiki kontrol untuk pembanding (Nazir, 1988).
17
Pada penelitian ini akan dilakukan pengujian pengaruh konsumsi ransum yang
kaseinnya disubtitusi dengan ikan asin kuniran (Upeneus sulphureus) berformalin
selama 1 dan 2 bulan terhadap pertumbuhan dan organ dalam (hati, ginjal dan limpa)
tikus wistar (Rattus novergicus), caranya dengan membandingkan berat badan, berat
masing-masing organ dalam (hati, ginjal dan limpa) serta kondisi organ itu sendiri antara
tikus kontrol dan tikus perlakuan dengan pemberian ikan asin kuniran berformalin. Pada
penelitian ini digunakan 2 faktor perlakuan yaitu :
1. Jangka waktu pemberian ransum (A), dengan sub perlakuan yang terdiri dari :
- Lama pemberian ransum 1 bulan (A1)
- Lama pemberian ransum 2 bulan (A2)
2. Perbandingan konsentrasi kasein dan tepung ikan asin berformalin pada ransum (B),
dengan sub perlakuan yang terdiri dari :
- ransum dengan perbandingan antara kasein dan tepung ikan asin kuniran 20%:0%
(kontrol) (B1)
- ransum dengan perbandingan antara kasein dan tepung ikan asin kuniran 5%:15%
(B2)
- ransum dengan perbandingan antara kasein dan tepung ikan asin kuniran 10%:10%
(B3)
- ransum dengan perbandingan antara kasein dan tepung ikan asin kuniran 15%:5%
(B4)
- ransum dengan perbandingan antara kasein dan tepung ikan asin kuniran 0%:20%
(B5)
Adapun denah rancangan faktor perlakuan dapat dilihat pada Tabel 4.
18
Tabel 4. Denah rancangan faktor perlakuan Ulangan
A B I II III Total Rata-rata
B1 B2 B3 B4
A1 B5
B1 B2 B3 B4
A2 B5
Berdasarkan perlakuan yang dilakukan maka penelitian ini dapat dirancang
dengan menggunakan Rancangan Acak Lengkap Faktorial. Menurut Yitnosumanto
(1993), model untuk Rancangan Acak Lengkap (RAL) faktorial adalah:
Yijk = μ + αi + βj+ (αβ)ij + εijk
Dimana: Yijk = Nilai pengamatan untuk perlakuan ke-i pada ulangan ke-j
μ = Nilai tengah umum
αi = Pengaruh waktu pada taraf ke-j
βj = Pengaruh substitusi konsentrasi tepung ikan berformalin pada taraf ke-i
(αβ)ij = Pengaruh interaksi lama waktu perlakuan dan substitusi konsentrasi tepung
ikan berformalin pada taraf ke-i dan ke-j
εijk = Galat percobaan pada perlakuan A taraf ke-i, perlakuan B taraf ke-j
Data yang diperoleh kemudian dianalisis dengan menggunakan ANOVA
(Analysis of Variance) dan dianalisis lebih lanjut dengan uji Tukey. Digunakannya uji
Tukey adalah dimaksudkan untuk mengetahui perbedaan yang terjadi antara faktor
perlakuan yang digunakan beserta interaksinya.
19
3.3.1 Prosedur penelitian
3.3.1.1 Preparasi bahan uji
Sebelum dilakukan penelitian, langkah pertama dalam penelitian ini adalah
preparasi bahan uji yaitu pembuatan tepung ikan asin. Ikan direndam dalam larutan
garam 30% dan formalin 7,5% selama 12 jam. Prosedur pembuatan tepung ikan asin
kuniran berformalin dapat dilihat pada Gambar 1.
Ikan kuniran segar
Air bersih Dicuci dan disiangi
Direndam dalam larutan garam 30% dan formalin 7,5%
Didiamkan 12 jam
Dikeringkan dalam oven pada suhu 70oC selama 6 jam
Ikan asin kuniran kering
Digiling
Diayak
Tepung ikan
Gambar 1. Prosedur pembuatan tepung ikan asin kuniran berformalin (Afrianto dan Liviawaty, 1989, modifikasi)
3.3.1.2 Pembuatan ransum
Pada penelitian ini terdapat 2 jenis ransum tikus precobaan, yaitu ransum standar
dan ransum perlakuan. Komposisi ransum standar yang digunakan dalam penelitian ini
20
mengikuti ransum standar National Research Council (NRC) (1978). Adapun komposisi
ransum standar ini adalah kasein, minyak jagung, Carboxy Methyl Cellulose (CMC)
makanan, mineral mix, vitamin mix, air, dan tepung maizena (lihat Tabel 3). Komposisi
ransum perlakuan, yaitu ransum standar yang kaseinnya 20% diganti dengan tepung
ikan asin berformalin dengan konsentrasi masing-masing 5%, 10%, 15% dan 20% (lihat
Tabel 3).
Cara pembuatan kedua jenis ransum sama, yaitu semua bahan ransum
dimasukkan satu per satu, dicampur dan diaduk secara merata. Bahan-bahan yang telah
tercampur rata dibentuk menjadi pellet kemudian dioven selama 21 jam, suhu 60°C dan
selanjutnya diukur residu formalin yang terkandung di dalamnya. Ransum dibuat tiap 2
hari sekali, ransum standar dan perlakuan setelah dikemas dalam plastik disimpan pada
suhu kamar. Pembuatan ransum perlakuan dilakukan dengan mengganti proporsi kasein
dengan tepung ikan asin dan menyetarakan kandungan kalorinya berdasarkan base
kalori. Penyetaraan kalori ini dilakukan dengan menghitung kalori pada tepung ikan asin
dengan menggunakan perbandingan protein : lemak : karbohidrat = 4 : 9 : 4 (Yuniati,
2004). Perhitungan substitusi kasein dengan tepung ikan asin dapat dilihat pada
Lampiran 3.
3.3.1.3 Prosedur pelaksanaan percobaan
Secara garis besar prosedur penelitian dapat dilihat pada Gambar 2. Mula-mula
tikus wistar jantan berumur 21 hari diadaptasi selama 7 hari dengan lingkungan
pemeliharaan dengan cara menempatkan setiap tikus dalam kandangnya (dikandangkan
secara individu) dengan kondisi kandang sebagai berikut: cukup cahaya, ventilasi udara
dalam kandang cukup dan suhu udara pada suhu kamar. Tujuan tikus dikandangkan
21
secara individu dan tertutup adalah agar tikus tidak terpengaruh atau terganggu dengan
tikus yang lain dan agar lebih mudah untuk mengontrol kebutuhan ransum pakan dan air
minum serta jumlah feses yang dihasilkan. Tujuan dari tikus diadaptasi selama 7 hari
adalah untuk penyesuaian dengan lingkungan, mengontrol kesehatan dan berat
badannya, serta menyeragamkan makanannya (Wikanta et al., 2003).
Pada saat adaptasi, tikus diberi makan dengan ransum standar dan minum secara
ad libitum, yaitu tikus diberi kebebasan untuk makan dan minum sesuai dengan
keinginannya. Pemberian ransum tikus setiap harinya dapat dihitung berdasarkan berat
badannya yaitu 5% dari berat badan tikus (Wasito, 1991/1992). Pemberian ransum setiap
harinya sebesar 10–15 gram. Menurut Astuti (1986), rata-rata kebutuhan makanan tikus
dewasa perharinya sebesar 15 gram. Kemudian tikus ditimbang berat badannya.
Setelah masa adaptasi, tikus dibagi menjadi 5 kelompok dimana kelompok 1
merupakan kelompok kontrol (20% kasein : 0% tepung ikan) yaitu tikus yang diberi
ransum standar; kelompok 2 yaitu tikus diberi ransum perlakuan dengan konsumsi
tepung ikan asin berformalin (bahan baku tepung ikan telah direndam formalin 7,5%
selama 12 jam) dengan perbandingan kasein : protein ikan = 15% : 5%; kelompok 3
yaitu tikus yang diberi ransum perlakuan dengan konsumsi tepung ikan asin berformalin
(bahan baku tepung ikan telah di rendam formalin 7,5% selama 12 jam) dengan
perbandingan kasein : protein ikan = 10% : 10%; kelompok 4 yaitu tikus yang diberi
ransum perlakuan dengan konsumsi tepung ikan asin berformalin (bahan baku tepung
ikan telah di rendam formalin 7,5% selama 12 jam) dengan perbandingan kasein :
protein ikan = 5% : 15%; kelompok 5 yaitu tikus yang diberi ransum perlakuan dengan
konsumsi tepung ikan asin berformalin (bahan baku tepung ikan telah di rendam
formalin 7,5% selama 12 jam) dengan perbandingan kasein : protein ikan 0% : 20%.
22
Pemberian ransum secara ad libitum. Kemudian tikus dipelihara selama 60 hari
dan dilakukan penimbangan berat badan setiap 3 hari sekali. Pada hari terakhir dari
bulan pertama dan bulan kedua pemeliharaan, dilakukan pembedahan untuk mengamati
bagian-bagian organ dalam tikus, yaitu : hati, ginjal dan limpa untuk ditimbang dan
diamati. Adapun prosedur kerjanya dapat dilihat pada Gambar 2.
23
Tikus jantan berumur 21 hari (30 ekor)
Ditimbang
Ditimbang berat badan setelah adaptasi
Dibagi menjadi 2 kelompok
Diadaptasi selama 7 hari dengan pemberian ransum standart
1 kelompok dipelihara selama 1 bulan dan dibagi menjadi 5 sub
kelompok perlakuan yaitu: 20%:0% (kontrol); 15%:5%; 10%:10%;
5%:15%; dan 0%:20%
1 kelompok dipelihara selama 2 bulan dan dibagi menjadi 5 sub
kelompok perlakuan yaitu: 20%:0% (kontrol); 15%:5%; 10%:10%;
5%:15%; dan 0%:20%
Ransum diberikan secara ad libitum tiap hari
Ditimbang berat badan tiap 3 hari sekali selama
pemeliharaan
- Dibedah, diambil organnya (hati, ginjal, dan limpa) (pada akhir pemeliharaan)
- Ditimbang berat masing-masing organ (pada akhir pemeliharaan)
- Pemeriksaan anatomi organ (pada akhir pemeliharaan)
Gambar 2. Prosedur kerja penelitian
24
3.3.2 Parameter uji
Parameter uji yang dilakukan pada penelitian ini meliputi analisis proksimat
tepung ikan asin, analisis proksimat ransum standart (kasein 20%) dan ransum perlakuan
(kasein diganti dengan 5%, 10%, 15% dan 20% tepung ikan asin berformalin) yang
bertujuan untuk mengetahui kandungan gizi dan kalori pada ransum standar dan
perlakuan sehingga diharapkan tikus mendapatkan asupan gizi dan kalori yang sesuai,
jumlah ransum yang dikonsumsi, uji residu formalin ransum, penimbangan berat badan
setiap 3 hari sekali dan penimbangan berat organ dalam serta uji anatomi organ dalam
pada akhir pemeliharaan bulan pertama dan kedua.
3.3.2.1 Analisis proksimat tepung ikan dan ransum
• Kadar Air (Sudarmadji et al., 1997)
Metode yang digunakan untuk menentukan kadar air adalah metode
Thermogravitimetri. Menurut Sudarmadji et al. (1989), prinsip dari metode ini adalah
menguapkan air yang ada dalam bahan dengan jalan pemanasan. Kemudian menimbang
bahan sampai berat konstan yang berarti semua air sudah diuapkan.
Tujuan dari analisis kadar air ini adalah untuk mengetahui kadar air pada ransum
perlakuan untuk selanjutnya dibandingkan dengan ransum standar dan untuk mengetahui
pengaruh pemberian formalin pada ransum pakan perlakuan terhadap kadar air.
Menurut Sudarmadji et al. (1997) penentuan kadar air dengan menggunakan
metode Termogravimetri adalah sebagai berikut:
- Timbang sampel yang berupa serbuk sebanyak 2 gram dalam botol timbang yang telah
diketahui beratnya. Kemudian keringkan dalam oven pada suhu (100-105)0C selama
semalam, kemudian didinginkan dalam desikator dan ditimbang beratnya.
25
- Pengurangan berat merupakan banyaknya air dalam bahan, dengan perhitungan:
Wet bases (wb) =sampelberat
akhirberatsampel)berattimbangbotol(berat −+ x 100%
Dry bases (db) = timbangbotolberatakhirberat
akhirberatsampel)berattimbangbotol(berat−
−+ x 100%
Hasil analisis kadar air dalam tepung ikan berformalin dapat dilihat pada Tabel 5
dan ransum dapat dilihat pada Tabel 6.
• Kadar Abu (Sudarmadji et al., 1997)
Metode yang digunakan untuk penentuan kadar abu adalah metode secara
langsung atau sering disebut metode Muffle, yaitu bila suatu contoh jika dipijarkan
sampai suhu sekitar 650oC, maka akan mengakibatkan kandungan dari semua zat
organik dalam contoh akan hilang menguap karena teroksidasi dan yang tersisa hanya
mineral yang disebut abu (Anonymous, 1975).
Tujuan dari analisis kadar abu adalah untuk menera jumlah mineral dalam
ransum perlakuan dan dibandingkan dengan ransum standar. Menurut Sudarmadji et al.
(1997) prosedur penentuan kadar abu dengan menggunakan metode pemanasan adalah
sebagai berikut: timbang 2 gram sampel dalam krus porselen yang telah kering dan telah
diketahui beratnya, kemudian pijarkan dalam muffle sampai diperoleh abu berwarna
keputih-putihan dengan suhu (550-660)0C. Masukkan kurs yang berisi abu ke dalam
desikator dan ditimbang kadar abu setelah dingin.
Kadar abu = 100%x akhirberat
porselen kursberat -akhirberat
Hasil analisis kadar abu dalam tepung ikan berformalin dapat dilihat pada Tabel
5 dan ransum dapat dilihat pada Tabel 6.
26
• Kadar Protein (Sudarmadji et al., 1997)
Metode yang digunakan untuk penentuan kadar protein adalah metode makro
Kjeldahl. Prinsip dari metode ini adalah penentuan protein berdasarkan oksidasi bahan-
bahan berkarbon dan konversi nitrogen menjadi amonia. Selanjutnya amonia bereaksi
dengan kelebihan asam membentuk amonium sulfat. Larutan dibuat menjadi basa, dan
amonia diuapkan untuk kemudian diserap dalam larutan asam borat. Nitrogen yang
terkandung dalam larutan dapat ditentukan jumlahnya dengan titrasi menggunakan HCl
0,02N (Apriyantono et al., 1989).
Tujuan analisis kadar protein adalah untuk mengetahui kadar protein pada
ransum perlakuan setelah disubtitusi dengan tepung ikan sehingga diharapkan tikus
percobaan mendapat asupan gizi dan kalori yang sesuai.
Menurut Sudarmadji et al. (1997) prosedur penentuan kadar protein dengan
menggunakan metode makro Kjeldahl adalah sebagai berikut:
- Timbang 1 g bahan dan masukkan dalam labu Kjeldahl. Kemudian tambahkan 7,5 g
K2S2O4, 0,35 g HgO dan 15 ml H2SO4 pekat. Panaskan semua bahan dalam labu
Kjeldahl dalam lemari asam sampai mendidih dan cairan jernih. Teruskan pemanasan
tambahan lebih kurang 1 jam. Matikan api pemanas dan biarkan menjadi dingin.
Kemudian tambahkan 100 ml aquades dalam labu Kjeldahl dan beberapa lempeng Zn,
juga ditambahkan 15 ml larutan K2S 4 % dan akhirnya tambahkan perlahan-lahan
larutan NaOH 50% sebanyak 50 ml. Pasanglah labu Kjeldahl dengan segera pada alat
destilasi.
− Panaskan labu Kjeldahl perlahan-lahan sampai dua lapisan cairan tercampur,
kemudian panaskan dengan cepat sampai mendidih.
27
− Destilat ini ditampung dalam erlenmeyer yang telah diisi dengan 50 ml larutan
standar HCl 0,1 N dan 5 tetes indikator metil merah. Lakukan destilasi sampai
destilat yang tertampung sebanyak 75 ml.
− Titrasi destilat yang diperoleh dengan standar NaOH (0,1 N) sampai warna kuning.
− Buatlah juga larutan blanko dengan mengganti bahan dengan aquades, lakukan
destruksi, destilasi dan titrasi seperti pada sampel.
− Perhitungan :
% kadar N = ( ) 14,008x100x 1000 x sampel gram
sampel NaOH mlblanko NaOH ml −
Hasil analisis kadar protein dalam tepung ikan berformalin dapat dilihat pada
Tabel 5 dan ransum dapat dilihat pada Tabel 6.
• Kadar Lemak (Sudarmadji et al., 1997)
Tujuan analisis kadar lemak adalah untuk mengetahui kadar lemak pada ransum
perlakuan setelah disubtitusi dengan tepung ikan sehingga diharapkan tikus percobaan
mendapat asupan gizi dan kalori yang sesuai.
Metode yang digunakan adalah metode goldfisch. Prinsip dari analisis kadar
lemak adalah untuk mengetahui kandungan lemak atau minyak suatu sampel dengan
cara mengekstraksi dengan pelarut organik non polar seperti petroleum ether (PE) dan
pelarut polar seperti metanol. Lemak yang dipisahkan dapat diketahui beratnya setelah
pelarut diuapkan atau tidak secara langsung dengan menimbang sisa sampel yang tidak
terekstraksi. Tujuan dari analisis kadar lemak adalah menentukan kadar lemak yang
terdapat dalam ransum yang diberikan.
Prosedur kerja analisis kadar lemak adalah sebagai berikut sampel kering
sebanyak 5 gram dibungkus dengan kertas saring yang telah diketahui beratnya dan
28
dimasukkan dalam thimble lalu dipasang pada gelas penyangga yang berada tepat
dibawah kondensor alat destilasi Goldfisch. Selanjutnya petroleum ether sebagai pelarut
dimasukkan dalam gelas piala dan dipasang pada kondensator kemudian air pendingin
pada kondensor dialirkan. Ekstraksi ini dilakukan selama 3-4 jam. Setelah ekstraksi
selesai, sampel dalam thimble diambil dan dilakukan pengeringan dalam oven pada suhu
1000C sampai konstan. Berat residu (hasil ekstraksi) dalam botol timbang dinyatakan
sebagai berat lemak. Perhitungan kadar lemak sebagai berikut :
(berat sampel+berat kertas saring)-berat akhir % kadar lemak = x 100 % berat sampel awal
Hasil analisis kadar lemak dalam tepung ikan berformalin dapat dilihat pada
Tabel 5 dan ransum dapat dilihat pada Tabel 6.
• Kadar Karbohidrat (Winarno, 1992)
Tujuan analisis kadar karbohidrat adalah untuk mengetahui kadar karbohidrat
pada tepung ikan asin berformalin dan ransum perlakuan setelah disubtitusi dengan
tepung ikan sehingga diharapkan tikus percobaan mendapat asupan gizi dan kalori yang
sesuai. Kadar karbohidrat ditentukan sebagai karbohidrat by difference. Karbohidrat by
difference diperhitungkan sebagai 100 persen dikurangi kadar protein, kadar lemak,
kadar air, dan kadar abu. Menurut Winarno (1992), ada beberapa cara analisis yang
dapat digunakan untuk memperkirakan kandungan karbohidrat dalam bahan makanan,
yang paling mudah adalah dengan cara perhitungan kasar (proximat analysis) atau juga
disebut Carbohydrate by Difference. Ditambahkan bahwa yang dimaksud dengan
proximat analysis adalah suatu analisis dimana kandungan karbohidrat termasuk serat
kasar diketahui bukan melalui analisis tetapi melalui perhitungan :
% karbohidrat = 100 % - % ( protein + lemak + abu + air )
29
Hasil analisis kadar karbohidrat dalam tepung ikan berformalin dapat dilihat
pada Tabel 5 dan ransum dapat dilihat pada Tabel 6.
3.3.2.2 Analisis formalin dalam ransum (Barbour, B and C. Packers, 1962)
Tujuan dari analisis kadar formalin pada ransum adalah untuk mengetahui
apakah konsentrasi formalin pada ransum yang akan dikonsumsi oleh tikus sesuai
dengan kisaran residu formalin pada produk perikanan di pasaran (0,2%-1,3%). Adapun
prosedur preparasi sampel dan uji formalin adalah sebagai berikut.
a. Preparasi sampel
1. Timbang sebanyak 20 gram sampel dan larutkan dalam isopropyl 45% hingga
volumenya 250 ml.
2. Haluskan dengan blender selama 2 menit.
3. Sentrifuge dengan kecepatan 250 rpm, lalu saring dengan kertas saring.
b. Prosedur uji
1. Ambil larutan sampel sebanyak 0,5 ml dalam tabung reaksi dan tambahkan 0,5
ml isopropyl alkohol 45%, kemudian tambahkan 0,5 ml phenylhydrazine
hydrochoride. Biarkan dalam keadaan tegak selama 10 menit.
2. Tambahkan 0,3 ml potassium ferricyanide dan biarkan dalam keadaan tegak
selama 5 menit.
3. Tambahkan 2 ml larutan NaOH dan tunggu selama 4 menit.
4. Encerkan larutan tersebut hingga 20 ml dalam tabung reaksi dengan
menambahkan isopropyl alkohol 45%.
5. Encerkan dengan aquades sampai volumenya 25 ml.
30
6. 10 menit setelah pengenceran awal (menjadi 20 ml), larutan tersebut diukur
absorbansinya menggunakan spektrofotometer panjang gelombang 580 nm
terhadap blanko reagen.
7. Tentukan jumlah kandungan formalin dengan cara membandingkan dengan
kurva standart absorbansi formalin.
Prosedur pembuatan kurva standar menurut Sastrohamidjodo (1992) adalah
sebagai berikut:
1. Membuat larutan formaldehid 1%; 2%; 3%; 4% dan 5% dari larutan formaldehid
37% dengan perhitungan V1 x M1 = V2 x M2 sama seperti disebutkan di atas.
Berdasarkan perhitungan pada pembuatan kurva standart, yang diukur adalah
kadar formaldehid dalam produk. Untuk mengembalikan ke kadar formalin
dalam produk yaitu dengan mengalikan konsentrasi formaldehid dengan 37%.
Sebagai contoh kadar formaldehid 0,0729% maka: 0,0729 x 37% = 0,027
2. Ukur nilai absorbansinya dengan menggunakan spektronik 20 dengan panjang
gelombang 580 nm.
3. Buat kurva dari nilai-nilai absorbansi yang diperoleh, hingga didapatkan
persamaan garis liniernya. Skema kerja pembuatan kurva standar dapat dilihat
pada Gambar 3, sedangkan kurva standar formaldehid dapat dilihat pada
Lampiran 6.
31
3 ml larutan standar formaldehid konsentrasi 1%; 2%; 3%; 4%, dan 5%
diukur nilai absorbansinya dengan spektronik 20 λ 580 nm
data absorbansi larutan standar formalin
dibuat kurva standar dan dicari persamaan garisnya
persamaan kurva standar formaldehid
Gambar 3. Prosedur pembuatan kurva standar formaldehid
3.3.2.3 Jumlah ransum yang dikonsumsi dan berat badan tikus
Prinsip pemberian ransum adalah berdasarkan persentase berat badan tikus.
Menurut Wasito (1992), konsumsi pakan untuk tikus adalah 5% dari berat badan tikus.
Ransum diberikan pada tikus secara ad libitum (bebas makan). Jumlah ransum yang
dikonsumsi dapat diketahui dengan menghitung selisih ransum yang diberikan dengan
sisa ransum. Sisa ransum ditimbang setiap hari dimana sebelum ditimbang, sisa ransum
tersebut dikeringkan di bawah sinar matahari selama satu hari.
Berat badan tikus dapat diketahui dengan menimbang tikus dengan
menggunakan timbangan. Menimbang tikus, prinsipnya adalah tikus dipegang pada
bagian dada, telunjuk dan ibu jari diletakkan dibawah rahang, masukkan ke dalam
timbangan dan catat beratnya (Astuti, 1986). Berat badan tikus dihitung tiap 3 hari sekali
dengan menggunakan timbangan analitik sebelum tikus diberi makan. Jumlah ransum
yang dikonsumsi dan berat badan tikus secara berurutan dapat dilihat dengan jelas pada
Gambar 6 dan Gambar 8.
32
3.3.2.4 Analisis organ (Sudarwati, et al., 1983)
Tujuan analisis organ tikus wistar adalah untuk mengetahui pengaruh konsumsi
ransum berformalin terhadap kesehatan, khususnya organ dalam tikus wistar (hati, ginjal
dan limpa). Tikus dibunuh dengan pemotongan vena jugularis di leher dan dibedah pada
bagian perut dengan mengunakan gunting dan pinset. Organ hati, ginjal dan limpa
diambil dan ditimbang beratnya dengan menggunakan timbangan analitik. Kemudian
dimasukkan ke dalam botol organ yang telah berisi formalin 10%. Untuk analisa
jaringan, organ-organ tersebut dimasukkan dalam Phosphat Buffer Sallin (PBS),
dipotong kecil-kecil 0,5 cm3 dan dicuci dengan PBS sebanyak 3 kali. Potongan organ
dimasukkan cawan petri yang berisi larutan Eagle’s MEM yang telah dicampur horse
serum (dengan membandingkan konsentrasi horse serum 5% dari Eagle’s MEM).
Tahapan pembuatan preparat organ dengan metode parafin meliputi :
1. Fiksasi dengan merendam jaringan dalam larutan Bouin selam 24 jam.
2. Pencucian dengan menggunakan alkohol 50% yang ditujukan untuk menghilangkan
sisa-sisa bahan fiksatif.
3. Dehidrasi
Pada tahap ini dilakukan dengan merendam jaringan dalam alkohol dari konsentrasi
rendah ke konsentrasi tinggi (alkohol 50%, 70%, 90%, 95% dan 100%). Perlakuan
ini dilakukan untuk menghilangkan air dari jaringan.
4. Penjernihan
33
Tahap ini dilakukan dengan merendam jaringan dalam larutan alkohol:xylol dengan
perbandingan 3:1; 1:1; 1:3 dan kemudian dilanjutkan dengan perendaman dalam
xylol murni. Proses ini berfungsi untuk menghilangkan sisa-sisa dehidran.
5. Infiltrasi
Tahap ini dilakukan dengan merendam jaringan dalam larutan xylol:parafin (parafin
420C-460C) dengan perbandingan 3:1; 1:1; 1:3 dan kemudian dilanjutkan dengan
perendaman pada parafin murni. Proses ini berfungsi untuk mengisi rongga-rongga
dalam jaringan.
6. Embedding
Tahap ini dilakukan dengan memasukkan jaringan dalam parafin keras (560C-580C)
yang berfungsi untuk menyelubungi jaringan untuk memudahkan pengirisan.
7. Pengirisan
Pengirisan dilakukan dengan menggunakan mikrotom dengan ketebalan 5-6μm.
Hasil pengirisan berupa pita-pita yang berisi jaringan.
8. Penempelan
Proses ini dilakukan dengan menempelkan pita-pita jaringan pada kaca preparat
dengan menggunakan perekat Meyer’s-Albumin, kemudian dipanaskan di atas hot
plate dengan suhu 100C.
9. Deparafinasi
Proses ini dilakukan dengan merendam preparat dalam xylol. Proses ini bertujuan
untuk menghilangkan sisa-sisa parafin dalam jaringan.
34
10. Pewarnaan
Proses ini dilakukan secara simultan dengan menggunakan Hematoxilin-eosin.
11. Penutupan
Preparat yang selesai diwarnai ditutup dengan kaca penutup dengan menggunakan
perekat entellan.
12. Pengamatan
Pengamatan preparat dilakukan dibawah mikroskop cahaya binokuler perbesaran
400x dan 1000x dan untuk memperjelas penampakan preparat, dilakukan pemfotoan
jaringan dengan mikroskop fotomikrografi.
13. Hasil
Hasil dari foto jaringan pada organ hati, ginjal dan limpa berturut-turut dapat dilihat
pada Gambar 12, 13, dan 14; Gambar 16 dan 17; Gambar 19 dan 20.
3.4 Analisis Data Data yang diperoleh kemudian dianalisis dengan menggunakan ANOVA
(Analysis of Variance) dan dianalisis lebih lanjut dengan uji Tukey HSD (SPSS versi
11.50) yang bertujuan untuk mengetahui ada tidaknya perbedaan yang terjadi antara
faktor perlakuan dengan yang digunakan beserta interaksinya.
4. HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1. Komposisi Gizi
4.1.1 Ikan asin kuniran (Upeneus sulphureus)
Pada penelitian ini, penambahan ikan berformalin pada ransum tikus dilakukan
dalam bentuk tepung. Hal ini bertujuan untuk memudahkan tercampurnya ikan
berformalin dengan bahan-bahan lain dalam pembuatan ransum. Hasil analisis proksimat
dari tepung ikan asin dapat dilihat pada Tabel 5.
Tabel 5. Hasil analisis proksimat ikan asin kuniran
Keterangan : *) PT. New Zealand **) Anonymous (2005e) ***) 2 ulangan
Tujuan dari analisis proksimat tepung ikan asin berformalin ini adalah untuk
mengetahui kandungan gizi tepung ikan yang akan digunakan sebagai pengganti kasein
pada ransum tikus perlakuan sehingga diharapkan kebutuhan tikus perlakuan terpenuhi.
Hasil analisis proksimat tepung ikan asin berformalin (direndam dengan 7,5% formalin
dan 30% garam) menunjukkan bahwa kandungan gizi terbesar adalah protein yaitu
sebesar 72,02%. Menurut Winarno (1992) protein merupakan salah satu sumber bahan
pangan yang berfungsi sebagai bahan bakar, zat pembangun dan pengatur dalam tubuh.
Kadar proksimat tepung ikan (%) Parameter Uji Kasein
(%)* Tanpa direndam
formalin ** Direndam dengan formalin 7,5%***
Protein Lemak Air Abu
88,53 0
11,47 0
71,62 4,24 10,95 7,09
Karbohidrat (by difference) 0 6,1
72,02±0,94 3,74±0,40 10,18±0,04 10,53±0,55 3,54±1,13
4.1.2 Ransum
Analisis proksimat juga dilakukan pada ransum, baik pada ransum standar
maupun ransum perlakuan. Tujuannya adalah untuk mengetahui jumlah komposisi gizi
yang terdapat dalam setiap ransum yang berfungsi sebagai zat nutrisi (protein, lemak,
karbohidrat, vitamin dan mineral), selain itu untuk menunjang proses pertumbuhan tikus.
Hasil analisis proksimat ransum tikus dapat dilihat pada Tabel 6.
Tabel 6. Komposisi gizi ransum standar dan perlakuan (%) Jenis Ransum
Perlakuan (kasein : tepung ikan berformalin (%))* Parameter
Uji Standar 15 : 5 10 : 10 5 : 15 0 : 20
Protein Lemak Air Abu Karbohidrat
21,5±0,69 4,97±0,03 9,68±0,68 4,5±0,78
59,36±0,56
19,60±0,09 5,17±0,07 10,09±0,16 5,58±0,23 59,56±0,38
18,01±0,13 5,28±0,09 10,21±0,03 6,06±0,27 60,45±0,26
16,15±0,1 6,12±0,46
10,27±0,13 6,82±0,06 60,65±0,44
14,20±0,18 6,87±0,15 10,61±0,21 7,48±0,23 60,84±0,42
Keterangan : * = 2 ulangan
Hasil analisis proksimat menunjukkan bahwa proporsi zat gizi pada ransum
perlakuan yang dibutuhkan oleh tikus sudah sesuai dengan standar National Research
Council (NRC). Berdasarkan hasil analisis proksimat dapat diketahui bahwa kadar
protein pada ransum perlakuan sedikit lebih rendah dibandingkan dengan ransum
standar, sedangkan untuk kadar lemak, air, abu dan karbohidrat cenderung lebih tinggi.
Hal ini dikarenakan adanya substitusi tepung ikan asin berformalin pada ransum
perlakuan yang didasarkan pada base kalori, dimana komposisi gizi yang terkandung
dalam tepung ikan asin berformalin terdiri atas protein, karbohidrat, lemak, air dan abu
sedangkan komposisi gizi kasein hanya protein. Selain itu formalin yang terkandung
pada ransum perlakuan juga mempengaruhi kandungan air pada ransum perlakuan,
dimana menurut Kiernan (2000) formalin mengandung 37%-40% formaldehid dan 60%-
63% air. Ditambahkan oleh Small (2004) bahwa reaksi antara formaldehid dan air akan
menghasilkan metilen glikol selanjutnya dapat berpolimerisasi membentuk polisimetilen
dan air. Untuk lebih jelasnya dapat dilihat pada reaksi berikut :
CH2O + H2O HO-CH2-OH HO-CH2-OH + HO-CH2-OH HO- (CH2O)2-H + H2O HO-(CH2O)n-1-H + HO-CH2-OH HO-(CH2O)n-H + H2O
4.1.3 Konsentrasi formalin
Pada penelitian ini juga dilakukan analisis kadar formalin (kuantitatif) pada
tepung ikan asin dan juga ransum perlakuan. Berdasarkan analisis kadar formalin yang
dilakukan diketahui kandungan formalin pada ikan asin sebesar 3,35%. Sedangkan
kandungan formalin pada ransum perlakuan dapat dilihat pada Tabel 7.
Tabel 7. Kandungan formalin ransum perlakuan (%) Parameter uji Perbandingan (%) jenis
ransum perlakuan Kadar formaldehid (%) Kadar formalin (%) 15 : 5 0,381±0,0008 0,141±0,0003 10 : 10 0,762±0,0019 0,282±0,0007 5 : 15 1,146±0,0038 0,424±0,0014 0 : 20 1,522±0,0019 0,563±0,0007
Keterangan : ulangan = 2
Tujuan dari analisis formalin secara kuantitatif pada ransum perlakuan adalah
untuk mengetahui seberapa besar residu formalin pada tiap ransum perlakuan.
Berdasarkan hasil tersebut dapat diketahui bahwa kisaran residu formalin pada ransum
perlakuan masih dalam kisaran residu formalin di pasaran (± 0,2%) yaitu antara 0,1410
% sampai 0,5623 %. Semakin tinggi jumlah tepung ikan yang disubtitusikan maka
semakin tinggi pula residu formalinnya. Residu formalin paling rendah terdapat pada
ransum perlakuan dengan subtitusi kasein dengan tepung ikan asin berformalin 5%.
Residu formalin tertinggi terdapat pada ransum perlakuan subtitusi kasein dengan
tepung ikan asin berformalin 20%. Sehingga dapat diketahui bahwa semakin tinggi
proporsi tepung ikan yang terkandung pada ransum maka semakin tinggi pula
konsentrasi formalin yang terkandung dalam ransum. Data penurunan konsentrasi
formalin pada ransum perlakuan dapat dilihat pada Tabel 8.
Tabel 8. Penurunan konsentrasi formalin setelah menjadi ransum Perbandingan (%)
jenis ransum (kasein : tepung ikan
berformalin)
Konsentrasi formalin sebelum diproses menjadi
ransum (%)
Konsentrasi formalin setelah diproses menjadi
ransum (%)
Penurunan konsentrasi
formalin (%)
20% : 0% 15% : 5% 10% : 10% 5% : 15% 0% : 20%
0 0,1675 0,3351 0,5052 0,6712
0 0,141±0,0003 0,282±0,0007 0,424±0,0014 0,563±0,0007
0 15,80±0,17 15,875±0,22 15,645±0,29 16,015±0,22
Keterangan : ulangan = 2
Menurut Elvandari (2006), penurunan konsentrasi formalin dapat dihitung
dengan rumus :
%1001
21 xX
XXX −=
Ket : X = penurunan konsentrasi formalin (%)
X 1 = konsentrasi formalin awal
X2 = konsentrasi formalin ransum
Berdasarkan Tabel 8 dapat diketahui bahwa penurunan konsentrasi formalin pada
ransum perlakuan cukup rendah meskipun pada proses pembuatan ransum dilakukan
proses pengeringan pada suhu 600C selama 21 jam. Hal tersebut dapat terjadi karena
titik didih formalin berada di atas 600C. Menurut Instanref (2006), jika formaldehid
dalam bentuk larutan seperti formalin, titik didihnya meningkat menjadi 96ºC.
Tingginya residu formalin yang terdapat pada ransum perlakuan selain disebabkan oleh
tingginya titik didih formalin juga disebabkan karena ikan memiliki kandungan protein
yang tinggi sehingga dapat dengan mudah berikatan dengan formalin. Menurut Kiernan
(2000), kelompok aldehid dapat berkombinasi dengan nitrogen dan beberapa atom
karbon pada protein membentuk ikatan silang -CH2- yang dinamakan dengan jembatan
metilen. Lebih jelasnya dapat dilihat pada Gambar 4.
Gambar 4. Reaksi formaldehid dengan protein
Pada Gambar 4 (A) merupakan reaksi penambahan formaldehid pada protein, (B)
reaksi formaldehid dengan molekul protein yang lain membentuk ikatan silang metilen
dan (C) menjelaskan lebih detail tentang ikatan silang rantai samping dari lisin dengan
atom nitrogen dari peptida. Berdasarkan hal tersebut menjelaskan bahwa tidak
menurunnya kandungan formalin secara signifikan pada ransum yang telah melalui
proses pengeringan pada suhu 600C selama 21 jam disebabkan karena formalin telah
berikatan dengan protein yang terdapat pada ikan asin kuniran.
4.2 Pengaruh Jenis Ransum Terhadap Jumlah Konsumsi dan Berat Badan Tikus 4.2.1 Jumlah konsumsi ransum
Jumlah ransum yang dikonsumsi oleh tikus dapat diketahui dengan menghitung
selisih antara jumlah ransum yang diberikan dengan sisa ransum masing–masing tikus.
Penghitungan jumlah ransum yang dikonsumsi tikus dihitung setiap hari selama 1 dan 2
bulan. Jumlah ransum yang dikonsumsi tikus dengan selang 3 hari dapat dilihat pada
Lampiran 7 dan Lampiran 8. Jumlah konsumsi ransum rata-rata (g/g berat badan) per 3
hari selama pemeliharaan 1 dan 2 bulan dapat dilihat pada Gambar 5.
0.00
0.02
0.04
0.06
0.08
0.10
0.12
0 3 6 9 12 15 18 21 24 27 30
lama konsumsi (hari)
jum
lah
kons
umsi
(g
/g b
erat
bad
an/h
ari)
20% : 0% 15 % : 5% 10% : 10% 5% : 15% 0% : 20%
(A)
0.00
0.02
0.04
0.06
0.08
0.10
0.12
0 3 6 9 12 15 18 21 24 27 30 33 36 39 42 45 48 51 54 57 60
lama konsumsi (hari)
jum
lah
kons
umsi
(g
/g b
erat
bad
an/h
ari)
20% : 0% 15 % : 5% 10% : 10% 5% : 15% 0% : 20%
(B) Gambar 5. Grafik pengaruh konsumsi ransum dengan konsentrasi ikan berformalin yang
berbeda terhadap konsumsi ransum (A) lama konsumsi 1 bulan dan (B) lama konsumsi 2 bulan
Gambar di atas menunjukkan bahwa jumlah konsumsi tikus kontrol dan
perlakuan pada hari ke-0 baik pada bulan pertama maupun pada bulan kedua tidak ada
perbedaan yang menonjol. Namun di antara perlakuan-perlakuan yang ada dapat
diketahui bahwa tikus perlakuan dengan ransum (0% : 20%) jumlah yang dikonsumsi
adalah paling rendah baik pada bulan pertama maupun kedua.
Analisis statistik (Lampiran 14) menunjukkan bahwa ransum dengan subtitusi
kasein dengan tepung ikan berformalin dengan konsentrasi yang berbeda berpengaruh
nyata terhadap jumlah ransum yang dikonsumsi (p<0,05). Hal ini berarti bahwa jumlah
ransum yang dikonsumsi tikus dipengaruhi oleh perbedaan konsentrasi formalin tepung
ikan dalam ransum. Sedangkan lama konsumsi tidak berpengaruh nyata terhadap jumlah
ransum yang dikonsumsi (p>0,05), dan tidak terjadi interaksi antara konsentrasi ransum
berformalin dengan lama konsumsi terhadap jumlah ransum yang dikonsumsi oleh tikus
(p>0,05). Dari hasil uji BNJ (Beda Nyata Jujur) untuk konsentrasi formalin ransum,
jumlah ransum yang dikonsumsi tikus kontrol tidak berbeda nyata (p>0,05) dengan tikus
perlakuan (5% : 15%); (10% : 10%); dan (15% : 5%), tetapi berbeda nyata (p<0,05)
dengan tikus perlakuan (0% : 20%). Sedangkan jumlah konsumsi ransum tikus
perlakuan (0% : 20%) berbeda nyata (p<0,05) dengan tikus perlakuan kontrol (20% :
0%); (5% : 15%); (10% : 10%); dan (15% : 5%). Jumlah konsumsi tikus perlakuan (0% :
20%) adalah yang paling rendah. Hal ini dikarenakan oleh tingginya konsentrasi
formalin tepung ikan yang disubtitusikan dalam ransum, yaitu 20%. Sehingga tikus
mengalami penurunan nafsu makan. Hal ini karena ransum berformalin mempunyai bau
yang menyengat (formalin) sehingga tikus tidak mau makan dan akhirnya tikus sakit.
Untuk lebih jelasnya dapat dilihat pada Gambar 6.
(0.0
682±
0.00
98)b
(0.0
788±
0.01
23)b
(0.0
747±
0.00
19)b
(0.0
775±
0.00
46)b
(0.0
552±
0.00
06)a
(0.0
705±
0.00
16)b
(0.0
692±
0.00
17)b
(0.0
787±
0.00
52)b
(0.0
792±
0.00
25)b
(0.0
580±
0.00
13)a
0.00
0.01
0.02
0.03
0.04
0.05
0.06
0.07
0.08
0.09
20% : 0% 15% : 5% 10% : 10% 5% : 15% 0% : 20%
ransum yang dikonsumsi
jum
lah
kons
umsi
(g
/g b
erat
bad
an/h
ari)
konsumsi 1 bulan konsumsi 2 bulan
Gambar 6. Histogram pengaruh konsumsi ransum dengan konsentrasi ikan
berformalin yang berbeda terhadap jumlah konsumsi ransum pada tikus
Pada Gambar 6 dapat dilihat bahwa jumlah konsumsi ransum paling tinggi
adalah pada tikus dengan perlakuan subtitusi kasein dengan tepung ikan berformalin
(15% : 5%) dengan lama konsumsi 1 bulan. Jumlah konsumsi terendah terdapat tikus
pada perlakuan subtitusi kasein dengan tepung ikan berformalin (0% : 20%) dengan
lama konsumsi 1 bulan. Hal ini diduga karena tikus perlakuan (0% : 20%) sudah
mengalami sakit sehingga nafsu makannya menurun. Menurut Lu (1995), adanya suatu
zat kimia dalam makanan dapat mengganggu selera makan sehingga akhirnya
menurunkan konsumsi makanan, dimana konsumsi makanan merupakan salah satu
respons bertingkat, respons akan meningkat bersama meningkatnya dosis atau asupan.
Secara umum jumlah ransum yang dikonsumsi tikus kontrol dan perlakuan dalam
penelitian sudah sesuai dengan standar. Menurut Wasito (1991/1992), konsumsi pakan
untuk tikus adalah 5% dari berat badan tikus, dimana berat badan tikus berkisar antara
138,21-40,09g.
4.2.2 Berat badan tikus
Penimbangan berat badan tikus bertujuan untuk mengetahui perkembangan berat
badan tikus yang telah diberi ransum standar dan ransum perlakuan secara ad libitum.
Penimbangan berat badan ini dilakukan setiap 3 hari sekali selama 30 hari pada lama
konsumsi 1 bulan dan 60 hari pada lama konsumsi 2 bulan. Penimbangan dilakukan
dengan menggunakan timbangan digital dan dilakukan sebelum pemberian ransum pada
hari itu. Data berat badan tikus per 3 hari selama pemeliharaan dapat dilihat pada
Lampiran 9 dan Lampiran 10. Grafik perkembangan berat badan per 3 hari selama 1
bulan dan 2 bulan dapat dilihat pada Gambar 7.
0
20
40
60
80
100
120
140
0 3 6 9 12 15 18 21 24 27 30
lama pemeliharaan (hari)
bera
t bad
an (g
)
20% : 0% 15% : 5% 10% : 10% 5% : 15% 0% : 20%
(A)
0
20
40
60
80
100
120
140
160
180
200
220
0 3 6 9 12 15 18 21 24 27 30 33 36 39 42 45 48 51 54 57 60
lama pemeliharaan (hari)
bera
t bad
an (g
)
20% : 0% 15% : 5% 10% : 10% 5% : 15% 0% : 20%
(B) Gambar 7. Grafik pengaruh konsumsi ransum dengan konsentrasi ikan berformalin yang
berbeda terhadap berat badan tikus (A) lama konsumsi 1 bulan dan (B) lama konsumsi 2 bulan
Berdasarkan grafik di atas dapat diketahui bahwa berat badan tikus pada awal
pemeliharaan pada umumnya sama yaitu antara 48,20 – 61,80 gram. Data rerata berat
badan awal (hari ke-0) selama pemeliharaan dapat dilihat Lampiran 20 dan hasil analisis
homogenitas berat badan hari ke-0 dapat dilihat pada Lampiran 21. Pada tikus kontrol
dan tikus dengan perlakuan subtitusi kasein dengan tepung ikan berformalin (15% : 5%);
(10% : 10%); dan (5% : 15%) mulai hari ke-3 sampai akhir bulan pertama dan kedua
terus mengalami kenaikan. Sedangkan untuk tikus dengan perlakuan (0% : 20%) mulai
hari ke-3 sampai akhir bulan pertama dan kedua mengalami penurunan berat badan. Hal
ini sebanding dengan jumlah konsumsi rata-rata yang memang rendah, dan diduga
karena ransum mengandung formalin dengan konsentrasi yang cukup tinggi sehingga
menurunkan nafsu makan, yang pada akhirnya berat badan tikus menjadi turun. Menurut
Lu (1995), adanya suatu zat kimia dalam makanan dapat menurunkan berat badan,
dimana berat badan merupakan salah satu respons bertingkat, respons akan meningkat
bersama meningkatnya dosis atau asupan.
Hasil analisis statistik (Lampiran 15) menunjukkan bahwa perbedaan konsentrasi
formalin dalam ransum dan lama konsumsi berpengaruh nyata (p<0,05) terhadap berat
badan tikus. Terjadi interaksi antara konsentrasi formalin ransum dengan lama
pemeliharaan terhadap berat badan tikus. Hasil analisis ragam antara lama konsumsi
dengan berat badan rata-rata tikus, menunjukkan bahwa berat badan tikus selama 1
bulan berbeda nyata dengan berat badan tikus yang selama 2 bulan (p<0,05). Hal ini
berarti bahwa lama pemeliharaan dan perbedaan konsentrasi formalin dalam tepung ikan
yang disubtitusi pada ransum memberikan pengaruh terhadap berat badan tikus.
Berdasarkan uji BNJ (Beda Nyata Jujur) untuk konsentrasi ransum,
menunjukkan bahwa berat badan tikus kontrol (20% : 0%) berbeda nyata (p<0,05)
dengan tikus perlakuan (15% : 5%), (5% : 15%) dan (0% : 20%), tetapi tidak berbeda
nyata (p>0,05) dengan tikus perlakuan (10% : 10%). Sedangkan untuk tikus perlakuan
(15% : 5%) tidak berbeda nyata (p>0,05) dengan tikus perlakuan (10% : 10%), tetapi
berbeda nyata dengan tikus perlakuan (20% : 0%), (5% : 15%) dan (0% : 20%).
Sehingga dapat diketahui bahwa berat badan tikus dipengaruhi oleh perbedaan
konsentrasi formalin dalam ransum, semakin tinggi konsentrasi formalin maka berat
badan tikus akan semakin rendah. Berat badan tikus perlakuan (0% : 20%) adalah yang
paling rendah. Hal ini dikarenakan oleh tingginya konsentrasi formalin tepung ikan yang
disubtitusikan dalam ransum, yaitu 20%. Sehingga tikus mengalami penurunan nafsu
makan yang mengakibatkan berat badan turun. Untuk lebih jelasnya dapat dilihat pada
Gambar 8.
(48.
98±3
.72)
a
(78.
14±1
.30)
b
(87.
06±4
.40)
cd
(84.
78±5
.83)
c
(87.
07±0
.85)
d
(52.
03±4
.42)
a
(100
.44±
2.98
)b
(128
.45±
6.07
)cd
(123
.25±
6.58
)c
(138
.20±
5.69
)d
0.00
20.00
40.00
60.00
80.00
100.00
120.00
140.00
160.00
20% : 0% 15% : 5% 10% : 10% 5% : 15% 0% : 20%
ransum yang dikonsumsi
bera
t bad
an (g
)
pemeliharaan 1 bulan pemeliharaan 2 bulan
Gambar 8. Histogram pengaruh konsumsi ransum dengan konsentrasi ikan berformalin yang berbeda terhadap berat badan rata-rata tikus
Berdasarkan Gambar 8, dapat diketahui bahwa semakin tinggi konsentrasi
subtitusi kasein dengan tepung ikan berformalin semakin rendah berat badan tikus. Berat
badan tertinggi terdapat pada tikus dengan perlakuan kontrol (20% : 0%) dengan
konsumsi selama 2 bulan, sedangkan berat badan terendah terdapat pada tikus dengan
perlakuan (0% : 20%). Hal tersebut terjadi karena jumlah konsumsi yang rendah (pada
perlakuan (0% : 20%)) dan nilai gizi ransum yang mengandung formalin menjadi rendah
karena zat-zat gizi pada ransum terutama protein telah berikatan dengan gugus aldehid
dalam formalin sehingga sulit dicerna dan mengganggu proses metabolisme makanan
yang pada akhirnya dapat mengganggu pertumbuhan tikus sehingga tubuh tikus menjadi
kurus.
Berdasarkan data berat tikus yang diperoleh, dapat dihitung laju pertumbuhan
tikus selama masa pemeliharaan. Menurut Effendie (1997), laju pertumbuhan relatif
adalah panjang/bobot yang dicapai dalam suatu periode tertentu yang dibandingkan
dengan panjang/bobot tubuh awal periode. Faktor-faktor yang mempengaruhi laju
pertumbuhan relatif adalah jumlah pakan yang tersedia, ukuran/berat awal, dan jumlah
pakan yang dikonsumsi. Menurut Sitompul dan Bambang. G (1995), laju pertumbuhan
relatif berat badan tikus dapat dihitung dengan perhitungan sebagai berikut:
LPR (g/hari) = 12
12
ttWW
−−
Ket : W2 = Berat badan pada hari ke-x
W1= Berat badan pada hari sebelumnya
t2 = Hari ke-x
t1 = Hari sebelumnya
Data laju pertumbuhan berat badan tikus selama 1 bulan dan 2 bulan dapat dilihat
pada Lampiran 11 dan Lampiran 12. Sedangkan grafik laju pertumbuhannya dapat
dilihat pada Gambar 9.
-2.00
-1.00
0.00
1.00
2.00
3.00
4.00
5.00
0 3 6 9 12 15 18 21 24 27 30
Lama pemeliharaan (hari)
Laju
per
tum
buha
n (g
/har
i)
20% : 0% 15% : 5% 10% : 10% 5% : 15% 0% : 20%
(A)
-2.00
-1.00
0.00
1.00
2.00
3.00
4.00
5.00
0 3 6 9 12 15 18 21 24 27 30 33 36 39 42 45 48 51 54 57 60
lama pemeliharan (hari)
Laju
per
tum
buha
n (g
/har
i)
20% : 0% 15% : 5% 10% : 10% 5% : 15% 0% : 20%
(B) Gambar 9. Grafik laju pertumbuhan berat badan tikus (A) lama konsumsi 1 bulan, (B)
lama konsumsi 2 bulan
Grafik diatas menunjukkan bahwa laju pertumbuhan berat badan tikus tidak
stabil. Hal ini diduga karena tikus tidak dapat beradaptasi dengan ransum yang diberikan
sehingga jumlah konsumsi menjadi tidak stabil yang mengakibatkan laju pertumbuhan
juga tidak stabil.
Berdasarkan hasil analisis statistik (Lampiran 16) menunjukkan bahwa subtitusi
kasein dengan tepung ikan berformalin pada ransum dengan konsentrasi yang berbeda
dan lama pemeliharaan berpengaruh nyata terhadap laju pertumbuhan relatif berat badan
tikus (p<0,05). Tidak terjadi interaksi antara konsentrasi formalin ransum dengan lama
konsumsi terhadap laju pertumbuhan relatif berat badan tikus (p>0,05). Hal ini berarti
bahwa perbedaan konsentrasi formalin tepung ikan yang disubtitusikan dalam ransum
dan lama pemeliharaan mempengaruhi laju pertumbuhan tikus, dimana semakin tinggi
konsentrasi formalin dalam ransum maka semakin rendah laju pertumbuhannya.
Berdasarkan hasil uji BNJ (Beda Nyata Jujur) pada laju pertumbuhan berat badan
tikus, menunjukkan bahwa laju pertumbuhan berat badan rata-rata tikus kontrol berbeda
nyata (p<0,05) terhadap laju pertumbuhan berat badan tikus perlakuan (5% : 15%) dan
(0% : 20%), dan tidak berbeda nyata (p>0,05) terhadap laju pertumbuhan berat badan
tikus perlakuan (15% : 5%) dan (10% : 10%). Sedangkan laju pertumbuhan berat badan
tikus perlakuan (15%:5%) tidak berbeda nyata terhadap laju pertumbuhan berat badan
tikus perlakuan (20% : 0%) atau kontrol, tetapi berbeda nyata dengan tikus perlakuan
(10% : 10%); (5% : 15%) dan (0% : 20%). Perbedaan laju pertumbuhan ini disebabkan
karena pertambahan berat badan pada tiap tikus tidak sama atau berbeda sehingga laju
pertumbuhannya juga berbeda. Hasil analisis ragam antara lama konsumsi dengan laju
pertumbuhan berat badan tikus, menunjukkan bahwa laju pertumbuhan berat badan tikus
pada bulan pertama berbeda nyata dengan laju pertumbuhan berat badan pada bulan
kedua (p<0,05). Untuk lebih jelasnya dapat dilihat dalam bentuk histogram pada Gambar
10.
(2.0
2±0.
50)c
d
(1.8
7±0.
02)c
(2.1
6±0.
07)d
(1.4
5±0.
01)b
(-0.3
9±0.
04)a(2.4
8±0.
02)c
d
(2.0
6±0.
08)c
(2.4
2±0.
09)d
(1.5
2±0.
08)b
(-0.1
1±0.
10)a
-2.00
-1.00
0.00
1.00
2.00
3.00
0% 5% 10% 15% 20%
konsentrasi formalin
laju
per
tum
buha
n (g
/har
i)
konsumsi 1 bulan konsumsi 2 bulan
Gambar 10. Histogram pengaruh konsumsi ransum dengan konsentrasi ikan berformalin
yang berbeda terhadap laju pertumbuhan berat badan tikus Berdasarkan histogram di atas dapat dilihat bahwa laju pertumbuhan berat badan
rata-rata tertinggi terdapat pada tikus kontrol atau perlakuan (20% : 0%) pada lama
konsumsi 2 bulan. Sedangkan laju pertumbuhan berat badan rata-rata pada tikus
perlakuan lebih rendah, terutama pada tikus dengan perlakuan (0% : 20%) pada lama
konsumsi 1 bulan. Hal ini disebabkan karena adanya formalin dalam ransum perlakuan
yang mengakibatkan berat badan pada tikus perlakuan rendah sehingga laju
pertumbuhannya juga rendah.
4.3 Pengaruh Konsumsi Ransum Berformalin Terhadap Berat dan Histologi
Organ Dalam (Hati, Ginjal, Limpa) Tikus Percobaan 4.3.1 Hati
Hati merupakan organ parenkim yang ukurannya terbesar, mempunyai fungsi
yang banyak dan kompleks, antara lain : berperan metabolisme karbohidrat, protein dan
lemak, penyimpanan vitamin, besi dan tembaga, konyugasi dan ekstraksi steroid adrenal
dan gonad, dan detoksifikasi sejumlah zat endogen dan eksogen (Price dan Wilson,
1988). Pengukuran berat hati tikus dilakukan untuk mengetahui berat hati tikus setelah
diberi ransum perlakuan selama 1 dan 2 bulan. Penimbangan hati tikus dilakukan setelah
tikus dibedah dan diambil hatinya kemudian dimasukkan dalam timbangan dan dicatat
beratnya. Penimbangan berat hati tikus diukur pada akhir pemeliharaan 1 bulan dan 2
bulan. Data berat hati tikus dapat dilihat pada Lampiran 13 dan untuk data rerata berat
hati dan persentase berat hati pada 1 dan 2 bulan dapat dilihat pada Tabel 9.
Tabel 9. Data rerata berat hati dan persentase berat hati pada akhir konsumsi Lama
pemeliharaan (bulan)
Jenis ransum
Berat hati (g)
Berat badan sebelum dibedah
(g)
Persentase berat hati (%)*
20% : 0% 4,47±0,153 123,10±9,48 3,638±0,21 15% : 5% 4,30±0,000 119,83±0,42 3,599±0,03 10% : 10% 4,47±0,115 126,97±5,61 3,518±0,12 5% : 15% 3,77±0,115 105,83±0,45 3,568±0,09
1
0% : 20% 1,63±0,153 44,37±3,91 3,755±0,05 20% : 0% 6,87±0,551 208,30±1,30 3,295±0,24 15% : 5% 5,90±0,265 187,98±5,37 3,299±0,29 10% : 10% 6,37±0,252 206,83±6,44 3,085±0,10 5% : 15% 4,90±0,266 153,47±5,13 3,340±0,20
2
0% : 20% 1,77±0,250 51,10±6,56 3,510±0,05 Keterangan : ulangan = 3
* = berat hati / berat badan sebelum dibedah x 100%
Berdasarkan hasil analisis statistik pada (Lampiran 17) menunjukkan bahwa
perbedaan konsentrasi formalin pada ransum dan lama pemeliharaan berpengaruh nyata
(p<0,05) terhadap berat hati tikus, dan tidak terjadi interaksi (p>0,05) antara konsentrasi
formalin pakan dengan lama konsumsi terhadap berat hati tikus. Hal ini berarti bahwa
perbedaan konsentrasi formalin tepung ikan pada ransum memberikan pengaruh pada
persentase berat hati tikus, dimana dengan adanya formalin dalam ransum
mengakibatkan berat hati tikus menjadi besar karena mengalami pembengkakan. Untuk
lebih jelasnya dapat dilihat dalam bentuk histogram pada Gambar 11.
(3.6
38±0
.21)
ab
(3.5
99±0
.03)
a
(3.5
18±.
12)a
(3.5
68±0
.09)
ab
(3.7
55±0
.05)
b
(3.2
95±0
.24)
ab
(3.2
99±0
.29)
a
(3.0
85±0
.10)
a
(3.3
40±0
.20)
ab
(3.5
10±0
.05)
b
0.00
0.50
1.00
1.50
2.00
2.50
3.00
3.50
4.00
20% : 0% 15% : 5% 10% : 10% 5% : 15% 0% : 20%
ransum yang dikonsumsi
pers
enta
se b
erat
hat
i (%
)
konsumsi 1 bulan konsumsi 2 bulan
Gambar 11. Histogram pengaruh konsumsi ransum dengan konsentrasi ikan berformalin yang berbeda terhadap berat hati tikus
Berdasarkan gambar di atas, dapat dilihat bahwa adanya formalin yang
terkandung dalam ransum yang dikonsumsi membuat persentase berat hati semakin
besar, sehingga dapat disimpulkan bahwa organ hati berkembang tidak normal karena
organ hati mengalami pembengkakan.
Pada penelitian ini juga dilakukan foto jaringan pada organ hati yang bertujuan
untuk mengetahui anatomi jaringan hati sehingga dapat diketahui pengaruh konsumsi
ikan berformalin terhadap organ dalam tikus yang salah satunya adalah hati.
Berdasarkan hasil foto jaringan maka dapat dilakukan pemeriksaan histopatologi
(anatomi jaringan) untuk mengetahui ada atau tidak pengaruh dari konsumsi ransum
yang mengandung ikan berformalin dengan konsentrasi dan lama konsumsi yang
berbeda terhadap anatomi jaringan hati tikus. Hasil diagnosa pada hati tikus dapat dilihat
pada Tabel 10. Sedangkan hasil dari foto jaringan organ hati dapat dilihat pada Gambar
12 sampai Gambar 28.
Tabel 10. Hasil diagnosa pada hati tikus percobaan
Keterangan :
TAP : Tidak ada perubahan spesifik dari jaringan atau organ
DV : Adanya bentukan vakuola lemak yang berbatas jelas pada sitoplasma sel hati
DH : Degenerasi hidrofik (ditandai dengan kebengkakan sel), perubahan bisa bersifat reversibel atau irreversibel
Gambar 12. Struktur histologis jaringan
hati tikus kontrol (1 bulan) normal
Gambar 13. Struktur histologis jaringan
hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 15%:5% (1 bulan) normal
Faktor Jumlah tikus (ekor)
Lama pemeliharaan
(bulan)
Jenis ransum (kasein : tepung ikan
berformalin) (%)
Normal (TAP)
Mengalami degenerasi
vakuola (DV)
Mengalami degenerasi
hidrofik (DH)
20% : 0% 3 0 0 15% : 5% 2 0 1 10% : 10% 2 1 0 5% : 15% 2 1 0
1
0% : 20% 2 0 1 20% : 0% 3 0 0 15% : 5% 2 1 0 10% : 10% 1 2 0 5% : 15% 1 2 0
2
0% : 20% 0 3 0
1
4
2 3
1
2 3
4
Gambar 14. Struktur histologis jaringan
hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 15%:5% (1 bulan) DH
Gambar 16. Struktur histologis jaringan
hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 10%:10% (1 bulan) DV
Gambar 18. Struktur histologis jaringan
hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 5%:15% (1 bulan) DV
Gambar 15. Struktur histologis jaringan
hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 10%:10% (1 bulan) normal
3
1 2
4
5
3
1
5
3
1
2
1
3
6
3
1
4
2
Gambar 17. Struktur histologis jaringan hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 5%:15% (1 bulan) normal
1
4
3 6
3 2
Gambar 19. Struktur histologis jaringan hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 0%:20% (1 bulan) normal
Gambar 20. Struktur histologis jaringan
hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 0%:20% (1 bulan) DH
Gambar 22. Struktur histologis jaringan
hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 15%:5% (2 bulan) normal
Gambar 24. Struktur histologis jaringan
hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 10%:10% (2 bulan) normal
1 3
5
1
2
3
4
Gambar 21. Struktur histologis jaringan hati tikus kontrol (2 bulan) normal
1
2
6
6
3
3
2
4
Gambar 23. Struktur histologis jaringan hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 15%:5% (2 bulan) yang DV
1 3
2
2
6
3
Gambar 25. Struktur histologis jaringan hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 10%:10% (2 bulan) DV
Gambar 26. Struktur histologis jaringan
hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 5%:15% (2 bulan) normal
Gambar 28. Struktur histologis jaringan
hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 0%:20% (2 bulan) DV
1
6
3
2
3
4
1 Gambar 27. Struktur histologis jaringan
hati tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 5%:15% (2 bulan) DV
Keterangan : Penampang melintang;
pewarnaan HE; pembesaran 400X; 1.Vena sentralis; 2. Sinusoid (mengalami penyempitan akibat pembengkakan sel); 3. Inti; 4. Hepatosit; 5. Timbunan air; 6. Timbunan lemak trigliserida
2
6
3
Berdasarkan pada Tabel 10 dapat diketahui bahwa organ hati pada bulan pertama
pada semua tikus kontrol (20% : 0%) tidak mengalami perubahan yang spesifik, pada
tikus perlakuan (15% : 5%) dan (0% : 20%) masing-masing 2 tikus tidak mengalami
perubahan yang spesifik dan 1 tikus mengalami DH (Degenerasi Hidrofik), pada tikus
perlakuan (10% : 10%) dan (5% : 15%) masing-masing 2 tikus tidak mengalami
perubahan yang spesifik dan 1 tikus mengalami DV (Degenerasi Vakuola). Sedangkan
organ hati pada bulan kedua pada tikus kontrol (20% : 0%) tidak mengalami perubahan
yang spesifik, pada tikus perlakuan (15% : 5%) 2 tikus tidak mengalami perubahan yang
spesifik dan 1 tikus mengalami DV (Degenerasi Vakuola), pada tikus perlakuan (10% :
10%) dan (5% : 15%) masing-masing 1 tikus tidak mengalami perubahan yang spesifik
dan 2 tikus mengalami DV (Degenerasi Vakuola), dan pada tikus perlakuan (0% : 20%)
semua tikus mengalami DV.
Hati ialah alat tubuh yang termudah terkena perlemakan, perubahan biasanya
mulai di pusat (sentral) (Djojopranoto, 1960). Pada Gambar 13, dapat dilihat hati
mengalami Degenerasi Vakuola atau perlemakan hati, yaitu terjadi karena adanya
penimbunan lemak berlebih pada sitoplasma hati. Perlemakan hati disebabkan terjadinya
defisiensi protein, karena protein terikat dengan formaldehid sehingga sulit dicerna dan
disintesis. Defisiensi protein ini mengakibatkan, berkurangnya penggunaan trigliserida
dari pemecahan lemak dalam pembentukan lipoprotein, yang merupakan bentuk lemak
yang bisa masuk dalam sistem sirkulasi, baik saluran darah maupun limpa. Trigliserida
berlebih tersebut akan tertimbun dalam hati (Price dan Wilson, 1985).
Menurut Atmodjo (1990), degenerasi hidropik merupakan pembengkakan sel
dengan penimbunan lebih banyak air dan metabolit dalam vakuola-vakuola yang
terbentuk dalam sitoplasma. Pada Gambar 14 dapat dilihat bahwa sel-sel hati mengalami
degenerasi hidropik, yang mirip dengan perlemakan hati, hanya saja sitoplasma sel yang
terkena tampak bervakuola, tetapi isinya air bukan lemak. Penyebab dari degenerasi
hidropik hampir sama dengan perlemakan hati, yaitu adanya gangguan metabolisme dan
cedera sel. Cedera pada sel mengakibatkan hilangnya pengaturan volume pada bagian-
bagian sel. Biasanya, untuk menjaga kestabilan lingkungan di dalam sel, harus
mengeluarkan energi metabolik untuk memompa ion natrium keluar dari sel. Jika ada
gangguan, baik itu proses metabolismenya ataupun adanya cedera sel, misal pada
membran, maka sel tidak dapat memompa ion natrium yang cukup. Terjadinya kenaikan
konsentrasi ion natrium di dalam sel, menyebabkan osmosis air masuk dalam sel.
Akibatnya sel mengalami pembengkakan. Pada saat air tertimbun dalam sitoplasma,
organel-organel sitoplasma juga menyerapnya, sehingga menyebabkan pembengkakan
seluruh isi sel (Price dan Wilson, 1985).
Menurut Djojopranoto (1960), kerusakan sel DH lebih berat dan sel dapat mati,
meskipun pada dasarnya degenerasi ini juga bersifat reversibel. Kelainan ini dapat
disebabkan karena keracunan kloroform dan karbon tetraklorida dan pada anoxia. Pada
penelitian ini degenerasi vakuola dan degenerasi hidropik yang terjadi pada hati tikus
termasuk degenerasi vakuola yang disebabkan oleh intoksifikasi zat kimia, dimana zat
kimia yang digunakan pada penelitian ini adalah formalin.
4.3.2 Ginjal
Ginjal merupakan fungsi vital sebagai pengatur volume dan komposisi kimia
darah (dan lingkungan internal) dengan mengekskresikan cairan dan air secara selektif.
Kalau kedua ginjal karena sesuatu hal gagal melakukan fungsinya, maka kematian akan
terjadi dalam waktu 3 sampai 4 minggu kemudian. Fungsi vital ginjal dilakukan dalam
organ dengan filtrasi plasma darah melalui glomerulus, diikuti dengan proses reabsorpsi
sejumlah cairan dan air yang dibutuhkan di sepanjang tubulus ginjal (Price dan Wilson,
1982). Setiap ginjal dilingkupi kapsul tipis dari jaringan fibrus yang rapat
membungkusnya, dan membentuk pembungkus yang halus. Di dalamnya terdapat
struktur-struktur ginjal. Warnanya ungu tua dan terdiri atas bagian korteks di sebelah
luar, dan bagian medula di sebelah dalam (Pearce, 1982).
Pengukuran berat ginjal tikus dilakukan untuk mengetahui berat ginjal tikus
setelah diberi ransum perlakuan selama 1 dan 2 bulan. Penimbangan ginjal tikus
dilakukan setelah tikus di bedah dan diambil ginjalnya kemudian dimasukkan dalam
timbangan dan dicatat beratnya. Penimbangan berat ginjal tikus diukur pada akhir
pemeliharaan 1 bulan dan 2 bulan. Data berat ginjal tikus dapat dilihat pada Lampiran 13
dan untuk data rerata berat ginjal dan persentase berat ginjal pada 1 dan 2 bulan dapat
dilihat pada Tabel 11.
Tabel 11. Data rerata berat ginjal dan persentase berat ginjal pada akhir konsumsi Lama
pemeliharaan (bulan)
Jenis ransum
Berat ginjal (g)
Berat badan sebelum dibedah
(g)
Persentase berat ginjal (%)*
20% : 0% 1,09±0,10 123,10±9,48 0,896±0,18 15% : 5% 1,13±0,06 119,83±0,42 0,900±0,08 10% : 10% 0,97±0,06 126,97±5,61 0,905±0,02 5% : 15% 0,50±0,10 105,83±0,45 0,907±0,05
1
0% : 20% 2,17±0,11 44,37±3,91 1,073±0,11 20% : 0% 1,97±0,06 208,30±1,30 1,040±0,05 15% : 5% 2,13±0.06 187,98±5,37 1,056±0,04 10% : 10% 1,63±0,11 206,83±6,44 1,039±0,01 5% : 15% 0,67±0,06 153,47±5,13 1,048±0,03
2
0% : 20% 1,09±0,10 51,10±6,56 1,152±0,14 Keterangan : ulangan = 3
* = berat ginjal / berat badan sebelum dibedah x 100%
Berdasarkan hasil analisis statistik pada (Lampiran 18) menunjukkan bahwa
subtitusi kasein dengan tepung ikan berformalin pada ransum dengan konsentrasi yang
berbeda berpengaruh nyata (p<0,05) terhadap berat ginjal tikus, lama pemeliharaa
berpengaruh nyata (p<0,05) terhadap berat ginjal tikus, dan tidak terjadi interaksi
(p>0,05) antara konsentrasi formalin pakan dengan lama konsumsi terhadap berat ginjal
tikus. Hal ini berarti bahwa perbedaan konsentrasi formalin tepung ikan pada ransum
memberikan pengaruh pada persentase berat ginjal tikus, adanya formalin dalam ransum
mengakibatkan berat ginjal tikus menjadi besar. Berdasarkan uji BNJ untuk konsentrasi
formalin dalam pakan, menunjukkan bahwa berat organ ginjal tikus kontrol tidak
berbeda nyata (p>0,05) dengan tikus perlakuan (15% : 5%); (10% : 10%); (5% : 15%),
tetapi berbeda nyata (p<0,05) dengan tikus perlakuan (0% : 20%). Semakin tinggi
konsentrasi formalin dalam ransum maka semakin besar persentase berat ginjal. Pada
tikus perlakuan (0% : 20%) berat ginjal paling tinggi, hal ini dikarenakan oleh tingginya
konsentrasi formalin dalam ransum. Untuk lebih jelasnya dapat dilihat dalam bentuk
histogram pada Gambar 29. (0
.896
±0.1
8)a
(0.9
00±0
.08)
a
(0.9
05±0
.02)
a
(0.9
07±0
.05)
a
(1.0
73±0
.11)
b
(1.0
40±0
.05)
a
(1.1
52±0
.14)
b
(1.0
48±0
.03)
a
(1.0
39±0
.01)
a
(1.0
56±0
.04)
a
0.00
0.20
0.40
0.60
0.80
1.00
1.20
1.40
20% : 0% 15% : 5% 10% : 10% 5% : 15% 0% : 20%
jenis ransum yang dikonsumsi
pers
enta
se b
erat
gin
jal (
%)
konsumsi 1 bulan konsumsi 2 bulan
Gambar 29. Histogram pengaruh konsumsi ransum dengan konsentrasi ikan berformalin yang berbeda terhadap berat ginjal tikus
Berdasarkan Gambar 29 dapat diketahui bahwa berat ginjal tikus berbeda pada
tiap bulan dan konsentrasi, dimana berat ginjal tikus perlakuan lebih tinggi dari pada
berat ginjal tikus kontrol. Berat ginjal tikus tertinggi terdapat pada tikus dengan ransum
perlakuan subtitusi kasein dengan tepung ikan berformalin pada konsentrasi (0% : 20%)
dengan lama konsumsi 2 bulan, dan berat ginjal tikus terendah terdapat pada tikus yang
diberi ransum kontrol (20% : 0%) dengan lama konsumsi 1 bulan. Sehingga dapat
disimpulkan bahwa ginjal berkembang tidak normal dimana ginjal mengalami
pembengkakan yang diakibatkan oleh banyaknya sel-sel mati yang menyumbat tubuli
ginjal. Menurut Koeman, 1987), terjadinya nekrosis pada sel tubuli primer akan disertai
dengan penyumbatan dengan material yang telah mati di dalam tubuli ginjal sehingga
ginjal akan membengkak dan fungsinya terganggu.
Pada penelitian ini juga dilakukan foto jaringan pada organ ginjal yang bertujuan
untuk mengetahui anatomi jaringan ginjal sehingga dapat diketahui pengaruh konsumsi
ikan berformalin terhadap organ dalam tikus yang salah satunya adalah ginjal.
Berdasarkan hasil foto jaringan maka dapat dilakukan pemeriksaan histopatologi
(anatomi jaringan) untuk mengetahui ada atau tidak pengaruh dari konsumsi ransum
yang mengandung ikan berformalin dengan konsentrasi dan lama konsumsi yang
berbeda terhadap anatomi jaringan ginjal tikus. Hasil diagnosa pada ginjal tikus dapat
dilihat pada Tabel 12. Sedangkan hasil dari foto jaringan organ ginjal dapat dilihat pada
Gambar 30 sampai Gambar 44.
Tabel 12. Hasil diagnosa pada ginjal tikus kontrol dan perlakuan
Keterangan :
Faktor Jumlah tikus (ekor) Lama
pemeliharaan (bulan)
Jenis ransum (kasein : tepung ikan
berformalin) (%) Normal (TAP) Mengalami nekrosis
(N,CA)
20% : 0% 3 0 15% : 5% 3 0 10% : 10% 3 0 5% : 15% 2 1
1
0% : 20% 2 1 20% : 0% 3 0 15% : 5% 1 2 10% : 10% 1 2 5% : 15% 1 2
2
0% : 20% 0 3
TAP : Tidak ada perubahan spesifik dari jaringan atau organ N : Nekrosis (kematian sel yang ditandai dengan lisis atau piknotik pada inti dan
sitoplasma eosinofilik) pada epitel tubuli ginjal CA : Timbunan massa kalsium yang berwarna kebiruan pada daerah tubuli ginjal
yang mengalami nekrosis
Gambar 30. Struktur histologis jaringan
ginjal tikus kontrol (1 bulan) normal
Gambar 32. Struktur histologis jaringan
ginjal tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 10%:10% (1 bulan) normal
Gambar 34. Struktur histologis jaringan
ginjal tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 5%:15% (1 bulan) N,CA
3 5
6 3
1 4 2 1 5 2
Gambar 31. Struktur histologis jaringan
ginjal tikus perlakuan kasein :tepung ikan asin berformalin 15%:5% (1 bulan) normal
3
5 2 1 2 1 5 Gambar 33. Struktur histologis jaringan
ginjal tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 5%:15% (1 bulan) normal
2 7
5 8 2 1 Gambar 35. Struktur histologis jaringan
ginjal tikus perlakuan kasein :tepung ikan asin berformalin 0%:20% (1 bulan) normal
Gambar 36. Struktur histologis jaringan
ginjal tikus perlakuan kasein :tepung ikan asin berformalin 0%:20% (1 bulan) N, CA
Gambar 38. Struktur histologis jaringan
ginjal tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 15%:5% (2 bulan) normal
Gambar 40. Struktur histologis jaringan
ginjal tikus perlakuan kasein :tepung ikan asin berformalin 10%:10% (2 bulan) normal
1 2
5
2
8
Gambar 37. Struktur histologis jaringan ginjal tikus kontrol (2 bulan) normal
Gambar 39. Struktur histologis jaringan
ginjal tikus perlakuan kasein : tepung ikan asin berformalin 15%:5% (2 bulan) N, CA
Gambar 41. Struktur histologis jaringan
ginjal tikus perlakuan kasein :tepung ikan asin berformalin 10%:10% (2 bulan) N, CA
7 3 3
3
8
7 5
8
2
9 1
3
5
Gambar 42. Struktur histologis jaringan
ginjal tikus perlakuan kasein :tepung ikan asin berformalin 5%:15% (2 bulan) normal
Gambar 44. Struktur histologis jaringan
ginjal tikus perlakuan kasein :tepung ikan asin berformalin 0%:20% (2 bulan) N, CA
2
9
7 5 1
2 3
Gambar 43. Struktur histologis jaringan ginjal tikus perlakuan kasein :tepung ikan asin berformalin 5%:15% (2 bulan) N, CA Keterangan: Penampang melintang;
pewarnaan HE; pembesaran 400X; 1. Glomerulus; 2. Kapsul Bowman; 3. Tubula berpilin proksimal; 4.Tubula berpilin distal; 5. Inti sel normal 6. Lapisan parietal; 7.Timbunan masa kalsium; 8. Inti sel mengalami piknosis; 9. Inti sel mengalami karioreksis
2
1 8
7
Berdasarkan Tabel 12 dapat diketahui bahwa organ ginjal pada bulan pertama
pada semua tikus kontrol (20% : 0%) dan tikus perlakuan (15%: 5%); (10% : 10%)
tidak mengalami perubahan yang spesifik dari jaringan atau organ, pada perlakuan (5% :
15%) dan (0% : 20%) masing-masing terdapat 2 tikus normal dan 1 tikus mengalami
N,CA (Nekrosis, Calsifikasi; nekrosis pada epitel tubuli ginjal dan timbunan massa
kalsium yang berwarna kebiruan pada daerah tubuli ginjal yang mengalami nekrosis).
Sedangkan organ ginjal tikus pada bulan kedua pada perlakuan (0% : 20%) tidak
mengalami perubahan yang spesifik atau normal, pada perlakuan (15%: 5%); (10% :
10%); dan (5% : 15%) masing-masing terdapat 1 tikus normal dan 2 tikus mengalami
N,CA, dan pada perlakuan (0% : 20%) semua tikus mengalami N,CA. Sehingga dapat
diketahui bahwa konsentrasi dan lama konsumsi (lama pemaparan formalin pada tubuh
tikus) berpengaruh terhadap terjadinya kerusakan anataomi jaringan ginjal tikus (N,CA).
Jika kandungan formalin dalam tubuh tinggi maka formalin akan bereaksi secara kimia
dengan hampir semua zat didalam sel, sehingga menekan fungsi sel dan menyebabkan
kematian sel yang menyebabkan kerusakan pada organ tubuh (Anonymous, 2006b).
Menurut Djojopranoto (1960), nekrosis adalah kematian sel/sekelompok sel,
atau sebagian dari pada alat tubuh yang masih mempunyai hubungan dengan tubuh yang
hidup dan tanda-tanda kematian sel terdapat pada inti sel, nekrosis juga merupakan suatu
proses yang dinamik sehingga memerlukan waktu untuk mengadakan berbagai
perubahan morfologi. Ditambahkan oleh Atmodjo (1990), pada nekrosis tahapan
perubahan morfologi yang nyata pada inti sel adalah 1. piknosis (penggumpalan
kromatin dengan selaput inti berkerut), 2. karyorheksis (membran inti pecah dan isinya
mengadakan fragmentasi), 3. karyolisis atau kromatolisis (melarutnya seluruh inti).
Pada dasarnya nekrosis terjadi akibat organ kekurangan asupan O2 yang dapat terjadi
karena beberapa sebab, antara lain: ischamia atau anemia lokal, agens fisik, agens kimia,
agens biologik, dan kepekaan yang berlebihan. Pada penelitian ini N,CA yang terjadi
pada ginjal tikus disebabkan oleh agens kimia, yaitu formalin.
4.3.3 Limpa
Limpa adalah suatu massa besar sel-sel limfoid dan retikuloendotel yang terletak
dalam aliran darah. Sinusoid-sinusoid limpa terisi darah bukan cairan limfe. Struktur
limpa memungkinkan interaksi yang erat antara limfosit, makrofag, dan benda-benda
yang dibawa aliran darah (Price dan Wilson, 1985). Limpa terdiri atas jalinan struktur
jaringan ikat. Di antara jalinan-jalinan itu terbentuk isi limpa atau pulpa yang terdiri atas
jaringan limfe dan sejumlah besar sel darah. Limpa dibungkus oleh kapsul yang terdiri
atas jaringan kolagen dan elastik dan beberapa serabut otot halus (Pearce, 1982).
Pengukuran berat limpa tikus dilakukan untuk mengetahui berat limpa tikus
setelah diberi ransum perlakuan selama 1 dan 2 bulan. Penimbangan limpa tikus
dilakukan setelah tikus di bedah dan diambil limpanya kemudian dimasukkan dalam
timbangan dan dicatat beratnya. Penimbangan berat limpa tikus diukur pada akhir
pemeliharaan 1 bulan dan 2 bulan. Data berat limpa tikus dapat dilihat pada Lampiran 13
dan untuk data rerata berat limpa tikus dan persentase berat badan pada 1 dan 2 bulan
dapat dilihat pada Tabel 13.
Tabel 13. Data rerata berat limpa dan persentase berat limpa pada akhir konsumsi Lama
pemeliharaan (bulan)
Jenis ransum
Berat limpa (g)
Berat badan sebelum dibedah
(g)
Persentase berat limpa (%)*
20% : 0% 0,37±0,07 123,10±9,48 0,298±0,04 15% : 5% 0,37±0,08 119,83±0,42 0,300±0,04 10% : 10% 0,33±0,09 126,97±5,61 0,283±0,03 5% : 15% 0,17±0,06 105,83±0,45 0,313±0,05
1
0% : 20% 0,80±0,10 44,37±3,91 0,334±0,11 20% : 0% 0,73±0,06 208,30±1,30 0,384±0,05 15% : 5% 0,83±0,06 187,98±5,37 0,388±0,04 10% : 10% 0,6±0,00 206,83±6,44 0,400±0,02 5% : 15% 0,2±0,00 153,47±5,13 0,386±0,02
2
0% : 20% 0,37±0,07 51,10±6,56 0,346±0,02 Keterangan : ulangan = 3
* = berat limpa / berat badan sebelum dibedah x 100%
Berdasarkan hasil analisis statistik pada (Lampiran 19) menunjukkan bahwa
subtitusi kasein dengan tepung ikan berformalin pada ransum dengan konsentrasi yang
berbeda tidak berpengaruh nyata terhadap berat limpa tikus (p>0,05), tetapi lama
konsumsi berpengaruh nyata terhadap berat limpa tikus (p<0,05), dan tidak terjadi
interaksi antara konsentrasi formalin pakan dengan lama konsumsi terhadap berat limfa
tikus (p>0,05). Berdasarkan uji BNJ untuk konsentrasi formalin dalam ransum,
menunjukkan bahwa berat organ limpa tikus kontrol tidak berbeda nyata dengan tikus
perlakuan (p>0,05). Untuk lebih jelasnya dapat dilihat dalam bentuk histogram pada
Gambar 45. (0
.298
±0.0
4)a
(0.3
00±0
.04)
a
(0.2
83±0
.03)
a
(0.3
13±0
.05)
a
(0.3
34±0
.11)
a
(0.3
84±0
.05)
a
(0.3
88±0
.04)
a
(0.4
00±0
.02)
a
(0.3
86±0
.02)
a
8(0.
346±
0.02
)a
0.0000.0500.100
0.1500.2000.2500.300
0.3500.4000.450
20% : 0% 15% : 5% 10% : 10% 5% : 15% 0% : 20%
jenis ransum yang dikonsumsi
pers
enta
se b
erat
lim
pa (%
)
konsumsi 1 bulan konsumsi 2 bulan
Gambar 45. Histogram pengaruh konsumsi ransum dengan konsentrasi ikan berformalin yang berbeda terhadap berat limpa tikus
Berdasarkan histogram diatas dapat dilihat bahwa berat limpa tikus berbeda pada
tiap bulan dan konsentrasi, berat limpa tikus tertinggi terdapat pada tikus yang diberi
ransum perlakuan subtitusi kasein dengan tepung ikan berformalin pada konsentrasi
(10% : 10%) dengan lama konsumsi 2 bulan dan berat limpa terendah terdapat pada
tikus yang diberi ransum perlakuan subtitusi kasein dengan tepung ikan berformalin
pada konsentrasi (10% : 10%) dengan lama konsumsi 1 bulan.
Pada penelitian ini juga dilakukan foto jaringan pada organ limpa tikus yang
bertujuan untuk mengetahui anatomi jaringan limpa sehingga dapat diketahui pengaruh
konsumsi ikan berformalin terhadap organ dalam tikus yang salah satunya adalah limpa.
Berdasarkan hasil foto jaringan maka dapat dilakukan pemeriksaan histopatologi
(anatomi jaringan) untuk mengetahui ada atau tidak pengaruh dari konsumsi ransum
yang mengandung ikan berformalin dengan konsentrasi dan lama konsumsi yang
berbeda terhadap anatomi jaringan limpa tikus. Hasil diagnosa pada limpa tikus dapat
dilihat pada Tabel 14. Sedangkan hasil dari foto jaringan organ limpa dapat dilihat pada
Gambar 46 sampai Gambar 55.
Tabel 14. Hasil diagnosa pada limpa tikus kontrol dan perlakuan
Keterangan :
Faktor Jumlah tikus (ekor)
Lama pemeliharaan
(bulan)
Jenis ransum (kasein : tepung ikan
berformalin) (%) Normal (TAP)
Mengalami degenerasi vakuola
atau nekrosis (DV/N,CA)
20% : 0% 3 0 15% : 5% 3 0 10% : 10% 3 0 5% : 15% 3 0
1
0% : 20% 3 0 20% : 0% 3 0 15% : 5% 3 0 10% : 10% 3 0 5% : 15% 3 0
2
0% : 20% 3 0
TAP = Tidak ada perubahan spesifik dari jaringan atau organ
N = Nekrosis (kematian sel yang ditandai dengan lisis atau piknotik pada inti dan
sitoplasma eosinofilik) pada epitel tubuli ginjal
CA = Timbunan massa kalsium yang berwarna kebiruan pada daerah tubuli ginjal
yang mengalami nekrosis
DV = Adanya bentukan vakuola lemak yang berbatas jelas pada sitoplasma sel hati
Gambar 46. Struktur histologis jaringan
limpa tikus kontrol (1 bulan) normal
Gambar 48. Struktur histologis jaringan
limpa tikus perlakuan kasein :tepung ikan asin berformalin 10%:10% (1 bulan) normal
Gambar 50. Struktur histologis jaringan
limpa tikus perlakuan kasein :tepung ikan asin berformalin 0%:20% (1 bulan) normal
4 4
2
2 1
4 1 3 Gambar 47. Struktur histologis jaringan
limpa tikus perlakuan kasein :tepung ikan asin berformalin 15%:5% (1 bulan) normal
4 4
1
2 3 1
2 Gambar 49. Struktur histologis jaringan
limpa tikus perlakuan kasein :tepung ikan asin berformalin 5%:15% (1 bulan) normal
1 1
3 3 Gambar 51. Struktur histologis jaringan
limpa tikus kontrol (2 bulan) normal
2 4
Gambar 52. Struktur histologis jaringan
limpa tikus perlakuan kasein :tepung ikan asin berformalin 15%:5% (2 bulan) normal
Gambar 54. Struktur histologis jaringan
limpa tikus perlakuan kasein :tepung ikan asin berformalin 5%:15% (2 bulan) normal
2
3 Gambar 53. Struktur histologis jaringan
limpa tikus perlakuan kasein :tepung ikan asin berformalin 10%:10% (2 bulan) normal
Gambar 55. Struktur histologis jaringan
limpa tikus perlakuan 0%:20% (2 bulan) normal
Keterangan: Penampang melintang; pewarnaan HE; pembesaran 400X 1. Pusat pembenihan; 2. Pulpa putih; 3. Pulpa merah; 4. Inti.
Berdasarkan hasil pemeriksaan anatomi jaringan limpa pada Tabel 14, dapat
diketahui bahwa pada semua jaringan limpa tikus perlakuan tidak terjadi perubahan
morfologi atau dapat dikatakan semua jaringan limpa tikus masih normal.
1
2
1 3
3 2
1
3 1
2 4
5. KESIMPULAN DAN SARAN
5.1. Kesimpulan
Penggantian kasein dengan tepung ikan asin berformalin (sesuai dengan kisaran
residu di pasaran) pada ransum pakan tikus berbahaya bagi pertumbuhan dan
kesehatan tikus.
Pengkonsumsian ikan asin berformalin mengakibatkan penurunan berat badan
seiring dengan peningkatan konsentrasi formalin. Berat badan paling rendah terdapat
pada tikus perlakuan dengan ransum (0%:20%).
Adanya formalin dalam ransum menyebabkan jumlah konsumsi tikus perlakuan
menjadi rendah. Jumlah konsumsi paling rendah terdapat pada tikus perlakuan
dengan ransum (0%:20%).
Pengkonsumsian ikan asin berformalin dapat mengakibatkan terjadinya degenerasi
vakuola dan degenerasi hidrofik pada hati dan nekrosis pada ginjal.
5.2. Saran
Sebaiknya tidak menggunakan formalin sebagai bahan pengawet makanan
Perlu adanya penelitian lebih lanjut tentang pengaruh konsumsi ransum berformalin
terhadap kadar formaldehid dalam darah dan urine pada tikus percobaan.
DAFTAR PUSTAKA
Afrianto, E. dan E. Liviawaty. 1989. Pengawetan dan Pengolahan Ikan. Penerbit Kanisius. Yogyakarta. 125 hal
. 1975. Prosedur Analisa kimia Komposisi Dan Kesegaran Ikan. Akademi Usaha Perikanan. Jakarta. 55 hal
. 1999. Formaldehyde. http://www.eco-usa.net.formaldehyde.htm. Diakses 19 Maret 2006. 2 hal
. 2005 . a Kami Terpaksa Menggunakan Formalin.
http://www.kompas.com/Kesehatan/news. Diakses 8 Agustus 2006. 1 hal
. 2005b. Formalin. http://www.pom.go.id. 2 hal
. 2005c. Ancaman Ikan Asin, Mie Basah, Baso, Tahu. http://www.blog.boleh.com/s/sn/snhadi/?pv43092. Diales 30 Maret 2006. 1-2 pp.
. 2005d. Mengenal Formalin. http://www.suarapembaharuan.com. Diakses
20 Juli 2006. 2 hal . 2005e. Pengembangan Limbah Sebagai Bahan Baku Sekunder Untuk
Pakan dan Pupuk. http://www.ampl.or.id.mht. Diakses 21 Agustus 2006. 1 hal . 2006a. Awas Bahaya Formalin. http://www.suara-merdeka.co.id. Diakses
20 Juli 2006. 3 hal.
. 2006b. Tahu, Makanan Favorit yang Keamanannya Perlu Diwaspadai. http://www.indosiar.com. Diakses 20 Juli 2006. 1 hal
. 2006c. Mengenal Formalin dan Bahayanya. http://www.pom.go.id. 2 hal
. 2006d. Formaldehyde. http://www.wikipedia.org/wiki/formaldehyde.
Diakses 6 Agustus 2006. 3 hal AOAC. 1990. Official of Analysis of The Assosiation of Official Analytical Chemist.
Editor: Horwitsz, W. Assosiation of Official Analytical Chemist. Washington Apriyantono, A., D. Fardiaz, N.L. Puspitasari, Sedarnawati dan S. Budiyanto. 1989.
Petunjuk Laboratorium Analisis Pangan. Institut Pertanian Bogor. Bogor. 229 hal
73
Astawan, M. 2006. Mi, Lezat Bergizi Tetapi Rawan Formalin. http://www.indosiar.com. Diakses 6 Agustus 2006. 5 hal
Astuti, M. 1986. Uji Gizi I. Pusat Antar Universitas Pangan dan Gizi. Universitas
Gadjah Mada. Yogyakarta. 57 hal Atmodjo, P, A. 2001. Album Patologi Anatomi : Fakultas Kedokteran Universitas
Airlangga. Surabaya. 83 hal Barbour, B and C. Packers. 1962. Collected Method Pacific Fisheries Technologist. P.
7a. Kanada. Djojopranoto, M. 1963. Buku Pelajaran Patologi. Djilid I. Dasar-dasar Patologi. Fakultas
Kedokteran Universitas Airlangga. Surabaya. 183 hal Effendie, M. I. 1997. Biologi Perikanan. Yayasan Pustaka Nusantara. Yogyakarta. 163
hal Elvandari, R. 2006. Pengaruh Cara dan Konsentrasi Perendaman Larutan Formalin
dalam Pembuatan Ikan Asin Kuniran (Upeneus moluccensis) Terhadap Residunya dalam Produk Setelah Digoreng. Skripsi. Teknologi Hasil Perikanan. Fakultas Perikanan. Universitas Brawijaya. Malang. Tidak dipublikasikan. 91 hal.
Hadiwiyoto, S. 1993. Teknologi Hasil Perikanan. Jilid 1. Penerbit Liberty. Yogyakarta.
275 hal Instanref. 2006. Chemical, Toxicity, Safety and Enviromental Analysis Information for
Formadehyde. http://instatref.com/formald.htm. diakses tanggal 20 juli 2006.2pp Indra. 2006. Ancaman Formalin di Makanan Kita. http://www.pom.go.id. Diakses 8
Agustus 2006. 2 hal Judarwanto, W. 2006. Pengaruh Formalin Bagi Sistem Tubuh. http://puterakembara.org.
Diakses tanggal 8 Agustus 2006. 3 hal Kiernan. J.A. 2000. Formaldehyde, Formalin, Paraformaldehyde and Glutaraldehyde:
What They Are and What They Do. http://publish.uwo.cankiernan/foermglut.htm. Diakses tanggal 20 juli 2006. 1-2 pp.
Koeman, J. D. 1988. Pengantar Umum Toksikologi. Penerjemah : R.H. Yudono. Gadjah
Mada University Press. Yogyakarta. Hal 34-81 Lu, F. C. 1995. Toksikologi Dasar : Asas, Organ Sasaran dan Penilaian Resiko.
Penerjemah : Edi Nugroho, Zunilda S. B dan Iwan Darmansyah. Universuitas Indonesia Press. Jakarta
74
Muhammad, S. 1992. Diktat Kuliah: Dasar-dasar Metodologi Penelitian dan Rancangan Percobaan. Fakultas Perikanan Universitas Brawijaya. Malang. 317 hal
Murniyati, A.S. dan Sunarman. 2000. Pendinginan Pembekuan dan Pengawetan Ikan.
Kanisius. Yogyakarta. 220 hal Murrachman; Soetrisno, I. dan J. A. Sumardi. 1983. Cara Analisa Komposisi Kimia
Daging Ikan dan Hasil Perairan Lainnya. Universitas Brawijaya. Malang Nasional Research Council (NRC). 1978. Nutrient Requirements of Laboratory Animal.
Nacional Academy of Sciences. Washington. Page 23 Nazir, M. 1988. Metode Penelitian. Ghalia Indonesia. Jakarta. 622 hal Nelson, J. S. 1984. Fishes of the World. 2nd edition. A Willey Interscience Publication.
United States of America Pearce, E. 1982. Anatomi dan Fisiologi untuk Paramedis. PT. Gramedia. Jakarta. 344 hal Price, S. A dan L. M Wilson. 1982. Patofisiologi Konsep Klinik Proses-proses Penyakit.
Bagian 2. Edisi 2. Alih Bahasa : Adji Dharma. EGC Penerbit Buku Kedokteran. Jakarta. 486 hal
_______________________. 1985. Patofisiologi Konsep Klinik Proses-proses Penyakit.
Bagian 1. Edisi 2. Alih Bahasa : Adji Dharma. EGC Penerbit Buku Kedokteran. Jakarta. 645 hal
PT. New Zealand. 2005. Komposisi Protein Pada Produk Calcium Caseinat. Jakarta Rachman A.D., D. Afriati, dan Sutyiati, M. 1984. Icthyologi I. Fakultas Perikanan
Universitas Brawijaya. Malang. 91 hal Sediaoetama, A. D. 2000. Ilmu Gizi Untuk Mahasiswa dan Profesi. Jilid 1. Dian Rakyat.
Jakarta. 319 hal Sitompul, S.M., Bambang, G. 1995. Analisis Pertumbuhan Tanaman. Universitas Gajah
Mada Press. Yogyakarta. 72 hal Small, N. E. 2004. Using Activities for Reaction Kinetics.
http://chemical.good.uk/people/jack/Projects/proj2003.net/small.LAP.doc. Diakses pada tanggal 6 Agustus 2006. 7 hal.
Sudarmadji, S., B. Haryono dan Suhardi. 1989. Analisa Bahan Makanan dan Pertanian.
Liberty. Yogyakarta. 171 hal Sudarmadji. S, B. Haryono dan Suhardi. 1997. Prosedur Analisa Untuk Bahan Makanan
dan Pertanian. Liberty. Yogyakarta. 160 Hal
75
Sudarwati, S., Suntoro, dan S. Handari. 1983. Metode Pewarnaan (Histologi dan Histokimia). Bhratara Karya Aksara. Jakarta. 394 hal
Sukesi. 2006. Cara Baru Kurangi Kadar Formalin. http://www.its.ac.id. Diakses 8
Agustus 2006. 1 hal Wasito. 1991/1992. Hewan Model Dalam Uji Gizi. Pusat Antar Universitas. Pangan dan
Gizi. Universitas Gadjah Mada. Yogyakarta. 175 Hal Wikanta, T. Khaerani dan L. Rahayu. 2003. Pengaruh Pemberian Natrium Alginat Pada
Penurunan Kadar Glukosa Darah Tikus. Jurnal Penelitian Perikanan Indonesia Volume 8 Nomor 6. hal 22-23
Winarno, F. G. 1992. Kimia Pangan dan Gizi. PT. Gramedia Pustaka Utama. Jakarta.
247 hal Yitnosumanto, S. 1993. Percobaan Analisis dan Interpretasinya. PT Gramedia Pustaka
Utama. Jakarta. 299 hal Yuniati, H. 2004. Analisis Zat Gizi Bahan Makanan untuk Melengkapi Daftar
Komposisi Bahan Makanan. Kumpulan Laporan Penelitian. http://www.p3gizi.litbang.depkes.go.id. Diakses 21 Agustus 2006. 1 hal
Yuswanto. 2006. Formalin Tidak Berbahaya. http://www.jawapos.co.id. Diakses 20 Juli
2006. 2 hal Zaelanie, K. dan R. Nurdiani. 2004. Diktat Kuliah Teknologi Hasil Perikanan I. Fakultas
Perikanan Universitas Brawijaya. Malang
Lampiran 1. Komposisi mineral mix dalam 1000 g
Sumber : Muchtadi, 1989.
Jenis mineral Jumlah mineral NaCl
KI
KH2PO4
MgSO4 anhidrid
CaCO3
FeSO4 7H2O
MnSO4 7H2O
ZnSO4 7H2O
CuSO4 5H2O
139,3
0,79
389
57,3
381,4
27,0
4,01
0,548
0,477
CoCl2 6H2O 0.023
Lampiran 2. Komposisi vitamin ”Superviton” setiap 2 Kaplet Komposisi Jumlah
Vitamin A
Vitamin D
Vitamin B1
Vitamin B2
Vitamin B6
Vitamin B12
Vitamin C
Niacinamide
Choline Bitartrate
Vitamin H
Vitamin E
Vitamin K
Dx-Calcium Pantothenas
Inositol
Folic Acid
dl-Methionone
Glutamic Acid
Molybdenum
I-Lysine Monohydrochloride
Para-Aminobenzoic Acid
Iron (Ferrous Sulphate)
Iodine (Pot iodide)
Copper (Cupric Sulphate)
Manganese (Mang Sulphate)
Phosporous (Calcium Phosph)
Magnesium (Mag. Sulphate)
Zinc (Zinc Sulphate)
Sulphur Brewer’s Yeast
Sodium
Potassium
Calcium (Calcium Phosph)
5000 IU
400 IU
5,0 mg
2,0 mg
1,0 mg
5,0 mg
25,0 mg 10,0 mg
3,0 mg
0,1 ng
5,0 mg 2,0mg 1,0 mg
0,5 mg
0,25 mg
1,25mg
5,0 mg
0,25mg
1,25 mg
5,0 mg
0,25 mg
0,25 mg
1,0 mg
10,0 mg
0,3 mg 1,0mg
0,5 mg
10,0 mg
0,1mg 1,0mg
0,05 mg
2,0 mg
0,05 mg
5,0 mg
5,0 mg
10,0 mg
Sumber: PT. Erela, Semarang
Lampiran 3. Perhitungan jumlah tepung ikan asin kuniran berformalin yang dibutuhkan sebagai pengganti kasein
• Rata-rata kebutuhan makanan tikus dewasa perharinya sebesar 15 gram
• Faktor perlakuan sebanyak 4, yaitu perbandingan tepung ikan dan kasein 5%:15%; 10%:10%; 15%:5% dan 20%:0%.
• Lama pengamatan 1 dan 2 bulan
• Persentase kasein dalam 15 gram (kebutuhan pakan perhari) 20% (3 gram).
• Kandungan protein kasein dalam 10 gram adalah 88,53% sehingga dalam 3 gram
= gramx 66,23100
53,88=
• Kandungan kalori kasein dalam 3 gram = 2,66 gram x 4 Kkal = 10,64 Kkal.
• Kandungan protein tepung ikan asin kuniran berformalin dalam 100 gram = 72,02 gram Kandungan lemak tepung ikan asin kuniran berformalin dalam 100 gram = 3,74 gram Kandungan karbohidrat tepung ikan asin kuniran berformalin dalam 100 gram = 3,54 gram
• Kandungan kalori tepung ikan dalam 3 gram :
Protein dalam 3 gram = 606,202,72100
3=x gram ; 2,606 gram x 4 Kkal = 8,64
Kkal
Lemak dalam 3 gram = 112,074,3100
3=x gram; 0,112 gram x 9 Kkal = 1,0098
Kkal
Karbohidrat dalam 3 gram = 1062,054,3100
3=x gram; 0,1062 gram x 4 Kkal =
0,425 Kkal Kandungan kalori total = 8,64 Kkal + 1,0098 Kkal + 0,425 Kkal = 10,07 Kkal
Perlakuan 1. Jumlah tepung ikan yang dibutuhkan pada proporsi tepung ikan : kasein (5%:15%):
• Kandungan kalori kasein = KkalKkal 66,24
64,10=
• Substitusi = gramgramx 792,0307,1066,2
=
Jumlah tepung ikan yang dibutuhkan pada proporsi tepung ikan : kasein (5%:15%) : 0,792 gram x 3 ulangan x 90 hari = 213,84 gram
Perlakuan 2. Jumlah tepung ikan yang dibutuhkan pada proporsi tepung ikan : kasein (10%:10%):
• Kandungan kalori kasein = KkalxKkal 32,52
64,10
• Substitusi = gramgramx 585,1307,1032,5
=
Jumlah tepung ikan yang dibutuhkan pada proporsi tepung ikan: kasein (10%:10%) : 1,585 gram x 3 ulangan x 90 hari = 427,95 gram Perlakuan 3. Jumlah tepung ikan yang dibutuhkan pada proporsi tepung ikan : kasein (15%:5%) :
• Kandungan kalori kasein = gramKkalx 98,7464,103
=
• Substitusi = gramgramx 377,2307,1098,7
=
Jumlah tepung ikan yang dibutuhkan pada proporsi tepung ikan: kasein (15%:5%) : 2,377 gram x 3 ulangan x 90 hari = 641,79 gram Perlakuan 4. Jumlah tepung ikan yang dibutuhkan pada proporsi tepung ikan : kasein (20%:0%):
• Kandungan kalori kasein = 8,325 Kkal.
• Substitusi = gramgramx 17,3307,1064,10
=
Jumlah tepung ikan yang dibutuhkan pada proporsi tepung ikan : kasein (0%:20%): 3,14 gram x 3 ulangan x 90 hari = 847,8 gram
Sehingga jumlah total tepung ikan yang dibutuhkan (gram)
= 213,84 g + 427,95 g + 641,79 g + 847,8 g = 2131,38 gram
Lampiran 4. Perhitungan kasar jumlah residu formalin yang berada pada ransum
Perendaman ikan dilakukan menggunakan formalin 7,5% selama 12 jam dan
didapatkan residu 3,35%.
Residu formalin yang ada di pasaran sebesar 0,2% (berdasarkan residu formalin
pada ikan hasil survei yang dilakukan pada penelitian sebelumnya)
Jumlah residu formalin setelah ditambahkan pada per 100 gram :
Perlakuan 1. Proporsi kasein : tepung ikan = 15:5
M1 x n1 = M2 x n2
100 x n1 = 5 x 3,35% n1 = 0,1675%
Perlakuan 2. Proporsi kasein : tepung ikan = 10:10
M1 x n1 = M2 x n2
100 x n1 = 10 x 3,35% n1 = 0,335%
Perlakuan 3. Proporsi kasein : tepung ikan = 5:15 M1 x n1 = M2 x n2
100 x n1 = 15 x 3,35% n1 = 0,5025%
Perlakuan 4. Proporsi kasein : tepung ikan = 0:20 M1 x n1 = M2 x n2
100 x n1 = 20 x 3,35% n1 = 0,67%
Lampiran 5. Perhitungan pembuatan larutan formalin 7,5%
N1 x V1 = N2 x V2
37% x V1= 7,5% x (500 ml - V1)
V1 = 84,27 ml
Larutan formalin 37% yang dibutuhkan untuk membuat larutan formalin 7,5% sebanyak
500 ml adalah 84,27 ml.
Lampiran 6. Kurva Standar Formaldehid
Lampiran 7. Data jumlah ransum pakan yang dikonsumsi tikus per 3 hari selama 1 bulan perlakuan (g)
Perlakuan (kasein : tepung ikan berformalin) Hari ke- 20% : 0% 15 % : 5% 10% : 10% 5% : 15% 0% : 20%
1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 0 2.8 2.4 2.5 3.60 1.70 3.40 2.00 2.60 3.10 1.80 4.40 2.90 3.10 2.90 1.803 4.03 4.73 4.07 4.40 2.90 5.30 3.67 3.87 4.10 2.47 6.20 2.97 2.87 2.63 3.306 4.1 5.23 4.13 5.50 4.60 6.53 5.70 5.23 7.17 5.20 7.57 6.23 3.00 2.93 3.209 4.77 6.3 4.7 6.10 4.97 7.97 2.97 6.20 6.80 6.97 5.27 5.07 2.97 3.23 3.0712 6.63 5.97 6.63 7.33 7.23 8.27 6.60 6.83 7.07 6.93 6.90 7.10 3.00 3.07 3.2515 7.57 7.1 7.53 7.80 7.30 8.30 5.20 6.90 7.67 6.17 4.83 6.47 3.13 2.94 2.5318 5.6 7.83 5.53 8.27 8.00 8.27 5.97 7.30 8.33 6.60 6.67 6.77 3.04 2.75 2.9321 5.47 8.93 5.6 8.00 8.10 7.63 7.13 8.00 8.80 6.97 5.10 6.97 2.95 3.03 3.5024 6.1 9.23 6.13 8.33 8.07 8.20 9.50 8.87 8.83 7.37 6.63 7.53 3.10 3.05 3.1027 4.67 7.93 4.57 8.20 7.80 8.10 10.03 9.40 9.23 7.30 6.60 7.27 3.08 2.98 2.8230 6.55 10.55 6.55 8.20 8.05 8.30 8.70 9.85 9.50 7.25 7.75 7.50 2.86 2.95 3.18
Lampiran 8. Data jumlah ransum pakan yang dikonsumsi tikus per 3 hari selama 2 bulan perlakuan (g)
Perlakuan (kasein : tepung ikan berformalin) Hari ke- 20% : 0% 15 % : 5% 10% : 10% 5% : 15% 0% : 20%
1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 0 2.50 2.40 2.20 3.80 1.00 2.40 3.50 2.00 2.20 1.10 2.30 1.90 2.20 1.20 1.803 4.63 5.07 5.20 5.43 3.27 4.13 3.03 6.70 6.20 3.43 5.07 5.13 1.83 4.83 1.706 5.03 6.17 6.17 4.20 6.40 5.47 5.70 7.70 7.77 7.40 6.07 6.77 3.23 4.50 3.909 6.33 7.63 7.63 7.03 7.07 6.77 4.97 7.83 8.80 7.97 6.53 5.83 4.30 4.70 3.6312 5.87 7.07 7.23 7.90 7.57 7.60 6.17 8.57 8.73 8.23 7.93 6.50 2.50 2.70 3.7715 7.03 8.03 8.93 7.53 8.37 7.13 5.87 8.90 8.83 6.33 6.97 6.27 2.90 3.07 2.4718 7.90 8.77 9.43 8.13 8.23 8.37 6.43 8.70 8.83 8.00 6.37 7.70 3.23 3.13 3.8021 8.90 8.90 8.80 8.50 8.03 8.07 7.90 10.33 10.33 7.80 7.53 7.60 4.63 4.77 3.6324 8.20 7.80 7.83 8.43 8.37 7.67 10.20 11.30 11.53 7.60 7.83 8.13 3.60 5.00 4.6327 7.97 10.00 9.97 8.37 8.20 10.23 9.67 11.13 11.33 8.87 7.50 8.27 3.27 3.63 5.3730 10.27 10.53 10.60 7.97 8.87 8.33 10.23 11.63 11.67 9.23 7.93 9.13 2.90 3.80 3.8333 9.20 11.13 11.30 8.53 8.33 8.80 10.60 11.20 11.30 9.67 7.30 9.50 4.83 2.60 3.5736 9.77 11.03 11.37 8.40 8.97 10.03 10.87 11.53 11.47 8.27 9.67 10.03 2.53 2.00 4.1039 9.47 11.60 11.33 8.77 8.83 9.50 10.67 11.33 11.43 8.03 9.40 9.93 4.10 4.33 4.3742 9.50 11.20 11.23 6.47 9.10 8.77 11.43 11.47 11.23 4.60 9.10 10.47 3.87 4.47 3.1345 10.10 11.40 11.27 5.83 11.37 9.20 11.30 11.57 11.30 5.87 8.47 9.60 3.00 2.40 3.6348 11.20 12.40 12.43 7.60 12.40 10.80 11.40 12.97 11.60 8.13 10.17 12.43 3.50 4.90 3.6051 11.97 11.83 11.77 7.47 12.60 11.17 11.57 13.27 13.43 9.77 11.07 12.33 2.43 2.07 2.7354 13.47 13.80 13.63 8.43 12.93 11.57 11.83 12.73 12.53 11.00 10.57 11.47 3.00 3.83 3.7057 12.83 11.97 12.03 9.33 13.63 10.70 12.00 13.20 12.80 9.63 9.70 7.23 2.40 2.97 2.5360 11.00 10.70 10.30 9.60 12.80 11.40 11.90 12.00 8.50 7.10 9.60 9.60 3.60 2.60 2.85
Lampiran 9. Data berat badan tikus per 3 hari selama 1 bulan perlakuan (g)
Perlakuan (kasein : tepung ikan berformalin) Hari ke- 20% : 0% 15 % : 5% 10% : 10% 5% : 15% 0% : 20%
1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 0 48.20 59.50 61.20 57.10 59.10 58.20 51.80 58.70 56.40 57.80 58.10 58.20 59.40 58.30 54.303 48.60 56.60 58.30 55.90 67.50 55.70 53.70 62.00 59.90 56.50 57.60 56.30 57.30 54.50 52.906 58.30 65.60 67.30 59.70 76.80 55.40 61.40 65.70 65.10 60.20 58.30 61.20 55.40 51.60 48.609 65.00 66.50 68.20 66.20 75.60 62.80 62.70 72.90 71.10 64.00 62.10 67.10 52.20 52.10 44.70
12 76.50 80.90 82.60 69.90 90.10 68.60 72.40 78.60 78.60 68.10 68.70 74.80 50.40 50.70 42.3015 83.00 90.20 91.90 79.50 92.30 74.80 78.80 87.90 85.90 74.30 74.80 79.00 52.80 48.40 39.8018 94.10 95.70 97.40 87.60 100.90 84.20 84.90 95.30 95.80 80.60 81.10 85.90 51.10 46.90 41.8021 107.20 101.80 103.50 96.40 102.20 94.50 92.70 102.20 106.50 86.80 88.80 90.20 48.50 48.60 44.6024 118.00 105.30 107.00 103.80 106.40 101.30 104.00 109.40 117.30 95.40 96.30 95.40 49.00 48.40 42.0027 124.80 109.60 111.30 110.00 114.60 111.20 118.80 119.70 122.00 100.00 101.50 101.90 48.80 45.80 42.2030 134.00 116.80 118.50 119.50 120.30 119.70 120.60 131.20 129.10 105.40 106.30 105.80 48.10 44.70 40.30
Lampiran 10. Data berat badan tikus per 3 hari selama 2 bulan perlakuan (g)
Perlakuan (kasein : tepung ikan berformalin) Hari ke- 20% : 0% 15 % : 5% 10% : 10% 5% : 15% 0% : 20% 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 0 49.70 54.60 52.30 54.10 57.10 58.20 53.10 54.50 56.40 57.40 58.30 56.50 57.50 58.10 57.803 50.10 53.60 51.30 51.80 59.20 55.80 57.00 57.80 60.40 56.40 56.40 57.10 52.00 59.40 56.206 59.80 65.30 63.00 58.60 68.60 62.10 63.10 62.50 66.20 60.40 58.90 60.80 47.60 55.80 52.809 66.50 74.70 72.40 68.80 76.70 61.50 66.80 70.30 74.20 63.80 63.80 65.60 47.60 51.30 50.70
12 78.00 85.60 83.30 80.40 86.70 70.00 74.10 78.50 82.80 71.00 68.20 68.90 47.70 49.20 48.8015 84.50 98.60 96.30 86.60 91.50 76.30 80.50 87.20 91.90 76.70 73.70 73.80 48.40 51.00 46.8018 95.60 111.40 109.10 98.30 100.80 85.20 86.30 95.20 101.80 81.60 78.30 77.30 46.80 50.00 49.5021 108.70 118.20 115.90 107.00 109.20 94.60 93.30 104.40 111.40 89.00 82.90 82.00 47.90 57.00 53.1024 119.50 127.00 124.70 115.40 114.60 101.70 102.70 111.10 120.20 96.90 90.80 88.50 47.50 54.80 50.9027 126.30 140.40 138.10 125.40 122.90 114.60 113.50 118.10 125.50 100.10 94.90 93.90 44.10 54.90 51.5030 135.50 151.50 149.20 132.00 129.40 122.40 118.70 127.60 136.00 104.90 100.50 98.00 41.20 55.20 50.8033 147.60 159.80 157.50 135.60 134.50 129.60 125.00 136.80 142.90 108.60 107.70 102.60 43.40 53.10 49.0036 158.20 172.10 169.80 146.30 141.10 140.00 136.50 146.80 152.90 112.20 112.40 106.00 44.90 54.80 51.3039 160.00 177.30 175.00 146.60 150.30 146.00 143.60 154.20 158.40 116.50 115.00 109.10 46.80 57.10 54.2042 163.00 184.00 181.70 144.30 155.90 157.80 154.80 159.10 167.50 117.70 120.40 115.60 47.90 59.70 52.7045 176.80 190.70 188.40 148.80 162.70 165.00 163.20 169.40 173.00 118.60 123.80 117.70 47.70 59.80 53.1048 195.10 194.80 192.50 151.90 167.80 169.90 170.90 180.20 182.70 123.70 130.10 126.00 48.60 60.90 54.8051 192.00 208.90 206.60 161.30 167.80 180.60 180.80 190.60 192.60 130.10 138.50 134.90 49.60 60.90 54.4054 204.60 198.90 196.60 171.60 178.20 189.90 187.70 198.20 198.30 137.30 146.70 144.70 50.40 61.20 55.3057 200.80 210.20 207.90 176.20 188.70 195.20 193.80 205.90 203.00 142.60 152.00 149.40 47.00 59.40 52.7060 207.60 209.80 207.50 182.90 187.40 193.60 200.00 212.80 207.70 147.80 157.80 154.80 44.40 57.50 51.40
Lampiran 11. Data laju pertumbuhan berat badan tikus per 3 hari selama 1 bulan perlakuan (g/hari)
perlakuan (kasein : tepung ikan berformalin) Hari ke- 20% : 0% 15 % : 5% 10% : 10% 5% : 15% 0% : 20%
1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 0 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.003 0.13 -0.97 -0.97 -0.40 2.80 -0.83 0.63 1.10 1.17 -0.43 -0.17 -0.63 -0.70 -1.27 -0.476 3.23 3.00 3.00 1.27 3.10 -0.10 2.57 1.23 1.73 1.23 0.23 1.63 -0.63 -0.97 -1.439 2.23 0.30 0.30 2.17 -0.40 2.47 0.43 2.40 2.00 1.27 1.27 1.97 -1.07 0.17 -1.30
12 3.83 4.80 4.80 1.23 4.83 1.93 3.23 1.90 2.50 1.37 2.20 2.57 -0.60 -0.47 -0.8015 2.17 3.10 3.10 3.20 0.73 2.07 2.13 3.10 2.43 2.07 2.03 1.40 0.80 -0.77 -0.8318 3.70 1.83 1.83 2.70 2.87 3.13 2.03 2.47 3.30 2.10 2.10 2.30 -0.57 -0.50 0.6721 4.37 2.03 2.03 2.93 0.43 3.43 2.60 2.30 3.57 2.07 2.57 1.43 -0.87 0.57 0.9324 3.60 1.17 1.17 2.47 1.40 2.27 3.77 2.40 3.60 2.87 2.50 1.73 0.17 -0.07 -0.8727 2.27 1.43 1.43 2.07 2.73 3.30 4.93 3.43 1.57 1.53 1.73 2.17 -0.07 -0.87 0.0730 3.07 2.40 2.40 3.17 1.90 2.83 0.60 3.83 2.37 1.80 1.60 1.30 -0.23 -0.37 -0.63
Lampiran 12. Data laju pertumbuhan berat badan tikus per 3 hari selama 2 bulan perlakuan (g/hari)
perlakuan (kasein : tepung ikan berformalin) 20% : 0% 15 % : 5% 10% : 10% 5% : 15% 0% : 20%
Hari ke-
1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 0 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 3 0.13 -0.33 -0.33 -0.77 0.70 -0.80 1.30 1.10 1.33 -0.33 -0.63 0.20 -1.83 0.43 -0.536 3.23 3.90 3.90 2.27 1.60 2.10 2.03 1.57 1.93 1.33 0.83 1.23 -1.47 -1.20 -1.139 2.23 3.13 3.13 3.40 2.70 -0.20 1.23 2.60 2.67 1.13 1.63 1.60 0.00 -1.50 -0.7012 3.83 3.63 3.63 3.87 3.33 2.83 2.43 2.73 2.87 2.40 1.47 1.10 0.03 -0.70 -0.6315 2.17 4.33 4.33 2.07 1.60 2.10 2.13 2.90 3.03 1.90 1.83 1.63 0.23 0.60 -0.6718 3.70 4.27 4.27 3.90 3.10 2.97 1.93 2.67 3.30 1.63 1.53 1.17 -0.53 -0.33 0.90 21 4.37 2.27 2.27 2.90 2.80 3.13 2.33 3.07 3.20 2.47 1.53 1.57 0.37 2.33 1.20 24 3.60 2.93 2.93 2.80 1.80 2.37 3.13 2.23 2.93 2.63 2.63 2.17 -0.13 -0.73 -0.7327 2.27 4.47 4.47 3.33 2.77 4.30 3.60 2.33 1.77 1.07 1.37 1.80 -1.13 0.03 0.20 30 3.07 3.70 3.70 2.20 2.17 2.60 1.73 3.17 3.50 1.60 1.87 1.37 -0.97 0.10 -0.2333 4.03 2.77 2.77 1.20 1.70 2.40 2.10 3.07 2.30 1.23 2.40 1.53 0.73 -0.70 -0.6036 3.53 4.10 4.10 3.57 2.20 3.47 3.83 3.33 3.33 1.20 1.57 1.13 0.50 0.57 0.77 39 0.60 1.73 1.73 0.10 3.07 2.00 2.37 2.47 1.83 1.43 0.87 1.03 0.63 0.77 0.97 42 1.00 2.23 2.23 -0.77 1.87 3.93 3.73 1.63 3.03 0.40 1.80 2.17 0.37 0.87 -0.5045 4.60 2.23 2.23 1.50 2.27 2.40 2.80 3.43 1.83 0.30 1.13 0.70 -0.07 0.03 0.13 48 6.10 1.37 1.37 1.03 1.70 1.63 2.57 3.60 3.23 1.70 2.10 2.77 0.30 0.37 0.57 51 -1.03 4.70 4.70 3.13 0.00 3.57 3.30 3.47 3.30 2.13 2.80 2.97 0.33 0.00 -0.1354 4.20 -3.33 -3.33 3.43 3.47 3.10 2.30 2.53 1.90 2.40 2.73 3.27 0.27 0.10 0.30 57 -1.27 3.77 3.77 1.53 3.50 1.77 2.03 2.57 1.57 1.77 1.77 1.57 -1.13 -0.60 -0.8760 2.27 -0.13 -0.13 2.23 -0.43 -0.53 2.07 2.30 1.57 1.73 1.93 1.80 -0.87 -0.63 -0.43
Lampiran 13. Data berat organ dalam (hati, ginjal, limpa) tikus (g)
Hati
Faktor perlakuan Ulangan Lama konsumsi Konsentrasi 1 2 3
20% : 0% 4.60 4.50 4.3015% : 5% 4.30 4.30 4.3010% : 10% 4.40 4.60 4.405% : 15% 3.70 3.90 3.70
1 bulan 0% : 20% 1.80 1.60 1.50
20% : 0% 6.50 7.50 6.6015% : 5% 6.10 5.60 6.0010% : 10% 6.10 6.40 6.605% : 15% 4.60 5.10 5.00
2 bulan
0% : 20% 1.50 2.00 1.80 Ginjal
Faktor perlakuan Ulangan Lama konsumsi Konsentrasi 1 2 3
20% : 0% 1.10 0.90 1.3015% : 5% 1.06 1.00 1.2010% : 10% 1.10 1.20 1.105% : 15% 0.90 1.00 1.00
1 bulan 0% : 20% 0.60 0.50 0.40
20% : 0% 2.10 2.30 2.1015% : 5% 2.00 1.90 2.0010% : 10% 2.10 2.20 2.105% : 15% 1.50 1.70 1.70
2 bulan 0% : 20% 0.60 0.70 0.70
Limpa
Faktor perlakuan Ulangan Lama konsumsi Konsentrasi 1 2 3
20% : 0% 0.40 0.40 0.3015% : 5% 0.40 0.30 0.4010% : 10% 0.30 0.40 0.405% : 15% 0.30 0.30 0.40
1 bulan 0% : 20% 0.20 0.10 0.20
20% : 0% 0.90 0.70 0.8015% : 5% 0.70 0.80 0.7010% : 10% 0.80 0.80 0.905% : 15% 0.60 0.60 0.60
2 bulan 0% : 20% 0.20 0.20 0.20
Lampiran 14. Hasil analisis statistik jumlah ransum pakan yang dikonsumsi tikus
Between-Subjects Factors
0% 65% 610% 615% 620% 61 bulan 152 bulan 15
01234
konsentrasiformalin
12
lama konsumsi
Value Label N
Descriptive Statistics
Dependent Variable: jumlah konsumsi
6.8167 .97521 37.0533 .15948 36.9350 .63827 67.8800 1.23305 36.9200 .17436 37.4000 .94700 67.4733 .18771 37.8700 .52374 37.6717 .41354 67.7533 .45960 37.9133 .25146 37.8333 .34273 65.5167 .06429 35.8033 .13204 35.6600 .18243 67.0880 1.09308 157.1120 .83369 157.1000 .95524 30
lama konsumsi1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal
konsentrasi formalin0%
5%
10%
15%
20%
Total
Mean Std. Deviation N
Tests of Between-Subjects Effects
Dependent Variable: jumlah konsumsi
20.197a 9 2.244 7.163 .000 .7631512.300 1 1512.300 4827.260 .000 .996
18.332 4 4.583 14.629 .000 .7454.320E-03 1 4.320E-03 .014 .908 .001
1.860 4 .465 1.484 .244 .2296.266 20 .313
1538.762 3026.462 29
SourceCorrected ModelInterceptKONSENTBULANKONSENT * BULANErrorTotalCorrected Total
Type III Sumof Squares df Mean Square F Sig.
Partial EtaSquared
R Squared = .763 (Adjusted R Squared = .657)a.
1. konsentrasi formalin
Univariate Tests
Dependent Variable: jumlah konsumsi
18.332 4 4.583 14.629 .000 .7456.266 20 .313
ContrastError
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
Partial EtaSquared
The F tests the effect of konsentrasi formalin. This test is based on the linearly independentpairwise comparisons among the estimated marginal means.
2. lama konsumsi
Univariate Tests
Dependent Variable: jumlah konsumsi
4.320E-03 1 4.320E-03 .014 .908 .0016.266 20 .313
ContrastError
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
Partial EtaSquared
The F tests the effect of lama konsumsi. This test is based on the linearly independentpairwise comparisons among the estimated marginal means.
3. lama konsumsi * konsentrasi formalin
Dependent Variable: jumlah konsumsi
6.817 .323 6.143 7.4917.880 .323 7.206 8.5547.473 .323 6.799 8.1477.753 .323 7.079 8.4275.517 .323 4.843 6.1917.053 .323 6.379 7.7276.920 .323 6.246 7.5947.870 .323 7.196 8.5447.913 .323 7.239 8.5875.803 .323 5.129 6.477
konsentrasi formalin0%5%10%15%20%0%5%10%15%20%
lama konsumsi1 bulan
2 bulan
Mean Std. Error Lower Bound Upper Bound95% Confidence Interval
Post Hoc Tests konsentrasi formalin
Multiple Comparisons
Dependent Variable: jumlah konsumsiTukey HSD
-.4650 .32315 .611 -1.4320 .5020-.7367 .32315 .193 -1.7037 .2303-.8983 .32315 .077 -1.8653 .06871.2750* .32315 .006 .3080 2.2420
.4650 .32315 .611 -.5020 1.4320-.2717 .32315 .915 -1.2387 .6953-.4333 .32315 .670 -1.4003 .53371.7400* .32315 .000 .7730 2.7070
.7367 .32315 .193 -.2303 1.7037
.2717 .32315 .915 -.6953 1.2387-.1617 .32315 .986 -1.1287 .80532.0117* .32315 .000 1.0447 2.9787
.8983 .32315 .077 -.0687 1.8653
.4333 .32315 .670 -.5337 1.4003
.1617 .32315 .986 -.8053 1.12872.1733* .32315 .000 1.2063 3.1403
-1.2750* .32315 .006 -2.2420 -.3080-1.7400* .32315 .000 -2.7070 -.7730-2.0117* .32315 .000 -2.9787 -1.0447-2.1733* .32315 .000 -3.1403 -1.2063
(J) konsentrasi formal5%10%15%20%0%10%15%20%0%5%15%20%0%5%10%20%0%5%10%15%
(I) konsentrasi formal0%
5%
10%
15%
20%
MeanDifference
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound95% Confidence Interval
Based on observed means.The mean difference is significant at the .05 level.*.
Homogeneous Subsets jumlah konsumsi
Tukey HSDa,b
6 5.66006 6.93506 7.40006 7.67176 7.8333
1.000 .077
konsentrasi formalin20%0%5%10%15%Sig.
N 1 2Subset
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.Based on Type III Sum of SquaresThe error term is Mean Square(Error) = .313.
Uses Harmonic Mean Sample Size = 6.000.a.
Alpha = .05.b.
jumlah konsumsi * konsentrasi formalin
ANOVA Table
18.332 4 4.583 14.094 .0008.130 25 .325
26.462 29
(Combined)Between GrouWithin GroupsTotal
jumlah konsumsi konsentrasi forma
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
jumlah konsumsi * lama konsumsi
ANOVA Table
.004 1 .004 .005 .94726.458 28 .94526.462 29
(Combined)Between GroupWithin GroupsTotal
jumlah konsum* lama konsums
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
Lampiran 15. Hasil analisis statistik berat badan tikus
Between-Subjects Factors
0% 66666
1 bulan 152 bulan 15
05101520
konsentrasiformalin
12
lama konsumsi
Value Label N
Tests of Between-Subjects Effects
Dependent Variable: berat badan
24734.602a 9 2748.289 174.635 .000 .987258583.538 1 258583.538 16431.238 .000 .999
15264.644 4 3816.161 242.491 .000 .9807331.721 1 7331.721 465.881 .000 .9592138.237 4 534.559 33.968 .000 .872
314.746 20 15.737283632.887 30
25049.348 29
SourceCorrected ModelInterceptKONSENTLAMAKONSENT * LAMAErrorTotalCorrected Total
Type III Sumof Squares df Mean Square F Sig.
Partial EtaSquared
R Squared = .987 (Adjusted R Squared = .982)a.
1. konsentrasi formalin Univariate Tests
Dependent Variable: berat badan
15264.644 4 3816.161 242.491 .000 .980314.746 20 15.737
ContrastError
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
Partial EtaSquared
The F tests the effect of konsentrasi formalin. This test is based on the linearly independentpairwise comparisons among the estimated marginal means.
2. lama konsumsi Univariate Tests
Dependent Variable: berat badan
7331.721 1 7331.721 465.881 .000 .959314.746 20 15.737
ContrastError
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
Partial EtaSquared
The F tests the effect of lama konsumsi. This test is based on the linearly independentpairwise comparisons among the estimated marginal means.
3. konsentrasi formalin * lama konsumsi
Dependent Variable: berat badan
87.073 2.290 82.296 91.851138.200 2.290 133.422 142.978
84.783 2.290 80.006 89.561123.253 2.290 118.476 128.031
87.063 2.290 82.286 91.841128.450 2.290 123.672 133.228
78.137 2.290 73.359 82.914100.437 2.290 95.659 105.214
48.983 2.290 44.206 53.76152.030 2.290 47.252 56.808
lama konsumsi1 bulan2 bulan1 bulan2 bulan1 bulan2 bulan1 bulan2 bulan1 bulan2 bulan
konsentrasi formalin0%
5
10
15
20
Mean Std. Error Lower Bound Upper Bound95% Confidence Interval
Post Hoc Tests konsentrasi formalin
Multiple Comparisons
Dependent Variable: berat badanTukey HSD
8.6183* 2.29036 .010 1.7647 15.47204.8800 2.29036 .246 -1.9736 11.7336
23.3500* 2.29036 .000 16.4964 30.203662.1300* 2.29036 .000 55.2764 68.9836-8.6183* 2.29036 .010 -15.4720 -1.7647-3.7383 2.29036 .495 -10.5920 3.115314.7317* 2.29036 .000 7.8780 21.585353.5117* 2.29036 .000 46.6580 60.3653-4.8800 2.29036 .246 -11.7336 1.97363.7383 2.29036 .495 -3.1153 10.5920
18.4700* 2.29036 .000 11.6164 25.323657.2500* 2.29036 .000 50.3964 64.1036
-23.3500* 2.29036 .000 -30.2036 -16.4964-14.7317* 2.29036 .000 -21.5853 -7.8780-18.4700* 2.29036 .000 -25.3236 -11.616438.7800* 2.29036 .000 31.9264 45.6336
-62.1300* 2.29036 .000 -68.9836 -55.2764-53.5117* 2.29036 .000 -60.3653 -46.6580-57.2500* 2.29036 .000 -64.1036 -50.3964-38.7800* 2.29036 .000 -45.6336 -31.9264
(J) konsentrasi forma51015200%1015200%515200%510200%51015
(I) konsentrasi forma0%
5
10
15
20
MeanDifference
(I-J) Std. Error Sig. Lower BoundUpper Bound95% Confidence Interval
Based on observed means.The mean difference is significant at the .05 level.*.
Homogeneous Subsets berat badan
Tukey HSDa,b
6 50.50676 89.28676 104.01836 107.7567 107.75676 112.6367
1.000 1.000 .495 .246
konsentrasi formalin20155100%Sig.
N 1 2 3 4Subset
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.Based on Type III Sum of SquaresThe error term is Mean Square(Error) = 15.737.
Uses Harmonic Mean Sample Size = 6.000.a.
Alpha = .05.b.
Means berat badan * konsentrasi formalin
ANOVA Table
5264.644 4 3816.161 9.750 .0009784.704 25 391.3885049.348 29
(Combined)Between GroupWithin GroupsTotal
berat badan *konsentrasi forma
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
berat badan * lama konsumsi
ANOVA Table
7331.721 1 7331.721 11.587 .0027717.628 28 632.7725049.348 29
(Combined)Between GroupWithin GroupsTotal
berat badan *lama konsums
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
Univariate Tests
Dependent Variable: berat badan
7524.951 1 7524.951 409.507 .000 .953367.512 20 18.376
ContrastError
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
Partial EtaSquared
The F tests the effect of lama konsumsi. This test is based on the linearly independentpairwise comparisons among the estimated marginal means.
Lampiran 16. Hasil analisis statistik laju pertumbuhan berat badan tikus
Between-Subjects Factors
0% 65% 610% 615% 620% 61 bulan 152 bulan 15
01234
konsentrasiformalin
12
lama konsumsi
Value Label N
Descriptive Statistics
Dependent Variable: laju pertumbuhan
2.0267 .49652 32.4767 .02887 32.2517 .39962 61.8667 .02082 32.0633 .07767 31.9650 .11912 62.1600 .06928 32.4133 .09074 32.2867 .15642 61.4467 .01155 31.5233 .08145 31.4850 .06686 6-.3900 .04359 3-.1367 .06351 3-.2633 .14706 61.4220 .98863 151.6680 .99936 151.5450 .98470 30
lama konsumsi1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal
konsentrasi formalin0%
5%
10%
15%
20%
Total
Mean Std. Deviation N
Tests of Between-Subjects Effects
Dependent Variable: laju pertumbuhan
27.560a 9 3.062 109.535 .000 .98071.611 1 71.611 2561.491 .000 .99226.997 4 6.749 241.419 .000 .980
.454 1 .454 16.235 .001 .448
.109 4 2.731E-02 .977 .442 .163
.559 20 2.796E-0299.730 3028.119 29
SourceCorrected ModelInterceptKONSENTLAMAKONSENT * LAMAErrorTotalCorrected Total
Type III Sumof Squares df Mean Square F Sig.
Partial EtaSquared
R Squared = .980 (Adjusted R Squared = .971)a.
1. konsentrasi formalin Univariate Tests
Dependent Variable: laju pertumbuhan
26.997 4 6.749 241.419 .000 .980.559 20 2.796E-02
ContrastError
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
Partial EtaSquared
The F tests the effect of konsentrasi formalin. This test is based on the linearly independentpairwise comparisons among the estimated marginal means.
2. lama konsumsi Univariate Tests
Dependent Variable: laju pertumbuhan
.454 1 .454 16.235 .001 .448
.559 20 2.796E-02ContrastError
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
Partial EtaSquared
The F tests the effect of lama konsumsi. This test is based on the linearly independentpairwise comparisons among the estimated marginal means.
3. konsentrasi formalin * lama konsumsi
Dependent Variable: laju pertumbuhan
2.027 .097 1.825 2.2282.477 .097 2.275 2.6781.867 .097 1.665 2.0682.063 .097 1.862 2.2652.160 .097 1.959 2.3612.413 .097 2.212 2.6151.447 .097 1.245 1.6481.523 .097 1.322 1.725-.390 .097 -.591 -.189-.137 .097 -.338 6.470E-02
lama konsumsi1 bulan2 bulan1 bulan2 bulan1 bulan2 bulan1 bulan2 bulan1 bulan2 bulan
konsentrasi formalin0%
5%
10%
15%
20%
Mean Std. Error Lower Bound Upper Bound95% Confidence Interval
Post Hoc Tests konsentrasi formalin
Multiple Comparisons
Dependent Variable: laju pertumbuhanTukey HSD
.2867 .09653 .052 -.0022 .5755-.0350 .09653 .996 -.3239 .2539.7667* .09653 .000 .4778 1.0555
2.5150* .09653 .000 2.2261 2.8039-.2867 .09653 .052 -.5755 .0022-.3217* .09653 .025 -.6105 -.0328.4800* .09653 .001 .1911 .7689
2.2283* .09653 .000 1.9395 2.5172.0350 .09653 .996 -.2539 .3239.3217* .09653 .025 .0328 .6105.8017* .09653 .000 .5128 1.0905
2.5500* .09653 .000 2.2611 2.8389-.7667* .09653 .000 -1.0555 -.4778-.4800* .09653 .001 -.7689 -.1911-.8017* .09653 .000 -1.0905 -.51281.7483* .09653 .000 1.4595 2.0372
-2.5150* .09653 .000 -2.8039 -2.2261-2.2283* .09653 .000 -2.5172 -1.9395-2.5500* .09653 .000 -2.8389 -2.2611-1.7483* .09653 .000 -2.0372 -1.4595
(J) konsentrasi forma5%10%15%20%0%10%15%20%0%5%15%20%0%5%10%20%0%5%10%15%
(I) konsentrasi forma0%
5%
10%
15%
20%
MeanDifference
(I-J) Std. Error Sig. Lower BoundUpper Bound95% Confidence Interval
Based on observed means.The mean difference is significant at the .05 level.*.
Homogeneous Subsets laju pertumbuhan
Tukey HSDa,b
6 -.26336 1.48506 1.96506 2.2517 2.25176 2.2867
1.000 1.000 .052 .996
konsentrasi formalin20%15%5%0%10%Sig.
N 1 2 3 4Subset
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.Based on Type III Sum of SquaresThe error term is Mean Square(Error) = 2.796E-02.
Uses Harmonic Mean Sample Size = 6.000.a.
Alpha = .05.b.
laju pertumbuhan * konsentrasi formalin ANOVA Table
26.997 4 6.749 150.351 .0001.122 25 .045
28.119 29
(Combined)Between GrouWithin GroupsTotal
laju pertumbuhan konsentrasi forma
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
laju pertumbuhan * lama konsumsi
ANOVA Table
.454 1 .454 .459 .50327.665 28 .98828.119 29
(Combined)Between GroupWithin GroupsTotal
laju pertumbuha* lama konsums
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
Lampiran 17. Hasil analisis statistik berat hati tikus Between-Subjects Factors
0% 65% 610% 615% 620% 61 bulan 152 bulan 15
01234
konsentrasiformalin
12
lama konsumsi
Value Label N
Descriptive Statistics
Dependent Variable: berat hati
3.63833 .210155 33.29533 .243537 33.46683 .276921 63.59933 .026026 33.29933 .295121 33.44933 .249218 63.51800 .124435 33.08500 .099242 33.30150 .257643 63.56800 .087790 33.34033 .203525 33.45417 .187620 63.75500 .051643 33.50967 .049166 33.63233 .141740 63.61573 .130224 153.30593 .219604 153.46083 .237255 30
lama konsumsi1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal
konsentrasi formalin0%
5%
10%
15%
20%
Total
Mean Std. Deviation N
Tests of Between-Subjects Effects
Dependent Variable: berat hati
1.091a 9 .121 4.476 .003359.321 1 359.321 13269.067 .000
.330 4 8.252E-02 3.047 .041
.720 1 .720 26.582 .0004.092E-02 4 1.023E-02 .378 .822
.542 20 2.708E-02360.953 30
1.632 29
SourceCorrected ModelInterceptKONSENTLAMAKONSENT * LAMAErrorTotalCorrected Total
Type III Sumof Squares df Mean Square F Sig.
R Squared = .668 (Adjusted R Squared = .519)a.
1. konsentrasi formalin Univariate Tests
Dependent Variable: berat ginjal
9.268E-02 4 2.317E-02 3.098 .039.150 20 7.480E-03
ContrastError
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
The F tests the effect of konsentrasi formalin. This test is based on the linearlyindependent pairwise comparisons among the estimated marginal means.
2. lama konsumsi Univariate Tests
Dependent Variable: berat ginjal
.128 1 .128 17.137 .001
.150 20 7.480E-03ContrastError
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
The F tests the effect of lama konsumsi. This test is based on the linearlyindependent pairwise comparisons among the estimated marginal means.
3. konsentrasi formalin * lama konsumsi
Dependent Variable: berat hati
3.638 .095 3.440 3.8373.295 .095 3.097 3.4943.599 .095 3.401 3.7983.299 .095 3.101 3.4983.518 .095 3.320 3.7163.085 .095 2.887 3.2833.568 .095 3.370 3.7663.340 .095 3.142 3.5393.755 .095 3.557 3.9533.510 .095 3.311 3.708
lama konsumsi1 bulan2 bulan1 bulan2 bulan1 bulan2 bulan1 bulan2 bulan1 bulan2 bulan
konsentrasi formalin0%
5%
10%
15%
20%
Mean Std. Error Lower Bound Upper Bound95% Confidence Interval
Post Hoc Tests konsentrasi formalin
Multiple Comparisons
Dependent Variable: berat hatiTukey HSD
.01750 .095008 1.000 -.26680 .30180
.16533 .095008 .433 -.11897 .44963
.01267 .095008 1.000 -.27163 .29697-.16550 .095008 .433 -.44980 .11880-.01750 .095008 1.000 -.30180 .26680.14783 .095008 .540 -.13647 .43213
-.00483 .095008 1.000 -.28913 .27947-.18300 .095008 .336 -.46730 .10130-.16533 .095008 .433 -.44963 .11897-.14783 .095008 .540 -.43213 .13647-.15267 .095008 .510 -.43697 .13163-.33083* .095008 .018 -.61513 -.04653-.01267 .095008 1.000 -.29697 .27163.00483 .095008 1.000 -.27947 .28913.15267 .095008 .510 -.13163 .43697
-.17817 .095008 .362 -.46247 .10613.16550 .095008 .433 -.11880 .44980.18300 .095008 .336 -.10130 .46730.33083* .095008 .018 .04653 .61513.17817 .095008 .362 -.10613 .46247
(J) konsentrasi formal5%10%15%20%0%10%15%20%0%5%15%20%0%5%10%20%0%5%10%15%
(I) konsentrasi formal0%
5%
10%
15%
20%
MeanDifference
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound95% Confidence Interval
Based on observed means.The mean difference is significant at the .05 level.*.
Homogeneous Subsets
berat hati
Tukey HSDa,b
6 3.301506 3.44933 3.449336 3.45417 3.454176 3.46683 3.466836 3.63233
.433 .336
konsentrasi formalin10%5%15%0%20%Sig.
N 1 2Subset
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.Based on Type III Sum of SquaresThe error term is Mean Square(Error) = 2.708E-02.
Uses Harmonic Mean Sample Size = 6.000.a.
Alpha = .05.b.
berat hati * konsentrasi formalin
ANOVA Table
.330 4 .083 1.584 .2091.302 25 .0521.632 29
(Combined)Between GrouWithin GroupsTotal
berat hati *konsentrasi forma
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
berat hati * lama konsumsi
ANOVA Table
.720 1 .720 22.086 .000
.913 28 .0331.632 29
(Combined)Between GroupWithin GroupsTotal
berat hati *lama konsums
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
Lampiran 18. Hasil analisis statistik berat ginjal tikus
Between-Subjects Factors
0% 65% 610% 615% 620% 61 bulan 152 bulan 15
01234
konsentrasiformalin
12
lama konsumsi
Value Label N
Descriptive Statistics
Dependent Variable: berat ginjal
.89633 .175571 31.04000 .048497 3
.96817 .139510 6
.89933 .075884 31.05567 .039678 3
.97750 .101317 6
.90467 .015373 31.03933 .009238 3
.97200 .074627 6
.90767 .046929 31.04767 .029143 3
.97767 .084265 61.07300 .109503 31.15200 .137568 31.11250 .119326 6
.93620 .110983 151.06693 .073308 151.00157 .113845 30
lama konsumsi1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal
konsentrasi formalin0%
5%
10%
15%
20%
Total
Mean Std. Deviation N
Tests of Between-Subjects Effects
Dependent Variable: berat ginjal
.226a 9 2.514E-02 3.361 .01130.094 1 30.094 4023.308 .000
9.268E-02 4 2.317E-02 3.098 .039.128 1 .128 17.137 .001
5.400E-03 4 1.350E-03 .180 .946.150 20 7.480E-03
30.470 30.376 29
SourceCorrected ModelInterceptKONSENTLAMAKONSENT * LAMAErrorTotalCorrected Total
Type III Sumof Squares df Mean Square F Sig.
R Squared = .602 (Adjusted R Squared = .423)a.
1. konsentrasi formalin Univariate Tests
Dependent Variable: berat ginjal
9.268E-02 4 2.317E-02 3.098 .039.150 20 7.480E-03
ContrastError
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
The F tests the effect of konsentrasi formalin. This test is based on the linearlyindependent pairwise comparisons among the estimated marginal means.
2. lama konsumsi Univariate Tests
Dependent Variable: berat ginjal
.128 1 .128 17.137 .001
.150 20 7.480E-03ContrastError
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
The F tests the effect of lama konsumsi. This test is based on the linearlyindependent pairwise comparisons among the estimated marginal means.
3. konsentrasi formalin * lama konsumsi
Dependent Variable: berat ginjal
.896 .050 .792 1.0001.040 .050 .936 1.144
.899 .050 .795 1.0031.056 .050 .952 1.160
.905 .050 .801 1.0091.039 .050 .935 1.143
.908 .050 .804 1.0121.048 .050 .944 1.1521.073 .050 .969 1.1771.152 .050 1.048 1.256
lama konsumsi1 bulan2 bulan1 bulan2 bulan1 bulan2 bulan1 bulan2 bulan1 bulan2 bulan
konsentrasi formalin0%
5%
10%
15%
20%
Mean Std. Error Lower Bound Upper Bound95% Confidence Interval
Post Hoc Tests konsentrasi formalin
Multiple Comparisons
Dependent Variable: berat ginjalTukey HSD
-.00933 .049933 1.000 -.15875 .14009-.00383 .049933 1.000 -.15325 .14559-.00950 .049933 1.000 -.15892 .13992-.14433 .049933 .061 -.29375 .00509.00933 .049933 1.000 -.14009 .15875.00550 .049933 1.000 -.14392 .15492
-.00017 .049933 1.000 -.14959 .14925-.13500 .049933 .089 -.28442 .01442.00383 .049933 1.000 -.14559 .15325
-.00550 .049933 1.000 -.15492 .14392-.00567 .049933 1.000 -.15509 .14375-.14050 .049933 .072 -.28992 .00892.00950 .049933 1.000 -.13992 .15892.00017 .049933 1.000 -.14925 .14959.00567 .049933 1.000 -.14375 .15509
-.13483 .049933 .089 -.28425 .01459.14433 .049933 .061 -.00509 .29375.13500 .049933 .089 -.01442 .28442.14050 .049933 .072 -.00892 .28992.13483 .049933 .089 -.01459 .28425
(J) konsentrasi forma5%10%15%20%0%10%15%20%0%5%15%20%0%5%10%20%0%5%10%15%
(I) konsentrasi forma0%
5%
10%
15%
20%
MeanDifference
(I-J) Std. Error Sig. Lower BoundUpper Bound95% Confidence Interval
Based on observed means.
Homogeneous Subsets berat ginjal
Tukey HSDa,b
6 .968176 .972006 .977506 .977676 1.11250
.061
konsentrasi formalin0%10%5%15%20%Sig.
N 1Subset
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.Based on Type III Sum of SquaresThe error term is Mean Square(Error) = 7.480E-03.
Uses Harmonic Mean Sample Size = 6.000.a.
Alpha = .05.b.
berat ginjal * konsentrasi formalin
ANOVA Table
.093 4 .023 2.045 .119
.283 25 .011
.376 29
(Combined)Between GroupWithin GroupsTotal
berat ginjal *konsentrasi forma
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
berat ginjal * lama konsumsi
ANOVA Table
.128 1 .128 14.491 .001
.248 28 .009
.376 29
(Combined)Between GroupWithin GroupsTotal
berat ginjal *lama konsums
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
Lampiran 19. Hasil analisis statistik berat limpa tikus
Between-Subjects Factors
0% 65% 610% 615% 620% 61 bulan 152 bulan 15
.0001.0002.0003.0004.000
konsentrasiformalin
1.0002.000
lama konsumsi
Value Label N
Descriptive Statistics
Dependent Variable: berat limpa
.29800 .044508 3
.38467 .050013 3
.34133 .063610 6
.29933 .043662 3
.38767 .037220 3
.34350 .060477 6
.28333 .030072 3
.39967 .023502 3
.34150 .068137 6
.31267 .050540 3
.38567 .017786 3
.34917 .052412 6
.33400 .111718 3
.34633 .019296 3
.34017 .072021 6
.30547 .056062 15
.38080 .032890 15
.34313 .059222 30
lama konsumsi1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal1 bulan2 bulanTotal
konsentrasi formalin0%
5%
10%
15%
20%
Total
Mean Std. Deviation N
Tests of Between-Subjects Effects
Dependent Variable: berat limpa
5.180E-02a 9 5.756E-03 2.306 .0573.532 1 3.532 1415.453 .000
3.075E-04 4 7.687E-05 .031 .9984.256E-02 1 4.256E-02 17.056 .0018.929E-03 4 2.232E-03 .895 .4854.991E-02 20 2.495E-03
3.634 30.102 29
SourceCorrected ModelInterceptKONSENTLAMAKONSENT * LAMAErrorTotalCorrected Total
Type III Sumof Squares df Mean Square F Sig.
R Squared = .509 (Adjusted R Squared = .288)a.
1. konsentrasi formalin Univariate Tests
Dependent Variable: berat limpa
3.075E-04 4 7.687E-05 .031 .9984.991E-02 20 2.495E-03
ContrastError
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
The F tests the effect of konsentrasi formalin. This test is based on the linearlyindependent pairwise comparisons among the estimated marginal means.
2. lama konsumsi Univariate Tests
Dependent Variable: berat limpa
4.256E-02 1 4.256E-02 17.056 .0014.991E-02 20 2.495E-03
ContrastError
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
The F tests the effect of lama konsumsi. This test is based on the linearlyindependent pairwise comparisons among the estimated marginal means.
3. konsentrasi formalin * lama konsumsi
Dependent Variable: berat limpa
.298 .029 .238 .358
.385 .029 .325 .445
.299 .029 .239 .359
.388 .029 .328 .448
.283 .029 .223 .343
.400 .029 .340 .460
.313 .029 .253 .373
.386 .029 .326 .446
.334 .029 .274 .394
.346 .029 .286 .406
lama konsumsi1 bulan2 bulan1 bulan2 bulan1 bulan2 bulan1 bulan2 bulan1 bulan2 bulan
konsentrasi formalin0%
5%
10%
15%
20%
Mean Std. Error Lower Bound Upper Bound95% Confidence Interval
Post Hoc Tests konsentrasi formalin
Multiple Comparisons
Dependent Variable: berat limpaTukey HSD
-.00217 .028841 1.000 -.08847 .08414-.00017 .028841 1.000 -.08647 .08614-.00783 .028841 .999 -.09414 .07847.00117 .028841 1.000 -.08514 .08747.00217 .028841 1.000 -.08414 .08847.00200 .028841 1.000 -.08430 .08830
-.00567 .028841 1.000 -.09197 .08064.00333 .028841 1.000 -.08297 .08964.00017 .028841 1.000 -.08614 .08647
-.00200 .028841 1.000 -.08830 .08430-.00767 .028841 .999 -.09397 .07864.00133 .028841 1.000 -.08497 .08764.00783 .028841 .999 -.07847 .09414.00567 .028841 1.000 -.08064 .09197.00767 .028841 .999 -.07864 .09397.00900 .028841 .998 -.07730 .09530
-.00117 .028841 1.000 -.08747 .08514-.00333 .028841 1.000 -.08964 .08297-.00133 .028841 1.000 -.08764 .08497-.00900 .028841 .998 -.09530 .07730
(J) konsentrasi forma5%10%15%20%0%10%15%20%0%5%15%20%0%5%10%20%0%5%10%15%
(I) konsentrasi forma0%
5%
10%
15%
20%
MeanDifference
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound95% Confidence Interval
Based on observed means.
Homogeneous Subsets berat limpa
Tukey HSDa,b
6 .340176 .341336 .341506 .343506 .34917
.998
konsentrasi formalin20%0%10%5%15%Sig.
N 1Subset
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.Based on Type III Sum of SquaresThe error term is Mean Square(Error) = 2.495E-03.
Uses Harmonic Mean Sample Size = 6.000.a.
Alpha = .05.b.
berat limpa * konsentrasi formalin ANOVA Table
.000 4 .000 .019 .999
.101 25 .004
.102 29
(Combined)Between GroupWithin GroupsTotal
berat limpa *konsentrasi forma
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
berat limpa * lama konsumsi
ANOVA Table
.043 1 .043 20.150 .000
.059 28 .002
.102 29
(Combined)Between GroupWithin GroupsTotal
berat limpa *lama konsums
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
Lampiran 20. Data rerata berat badan awal (hari ke-0) selama pemeliharaan
Lama pemeliharaan Jenis ransum perlakuan 1 bulan 2 bulan 15% : 5% 56.30±7.07 52.20±2.45 10% : 10% 58.13±1.00 56.47±2.12 5% : 15% 55.63±3.51 54.67±1.66 0% : 20% 58.03±0.21 57.40±0.90
Lampiran 21. Hasil analisis homogenitas berat badan hari ke-0
Test of Homogeneity of Variances
berat badan awal
5.705 4 25 .002
LeveneStatistic df1 df2 Sig.
ANOVA
berat badan awal
60.538 4 15.134 1.882 .145201.072 25 8.043261.610 29
Between GroupsWithin GroupsTotal
Sum ofSquares df Mean Square F Sig.
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: berat badan awalTukey HSD
-3.0500 1.63736 .362 -7.8587 1.7587-.9000 1.63736 .981 -5.7087 3.9087
-3.4667 1.63736 .244 -8.2754 1.3421-3.3167 1.63736 .283 -8.1254 1.49213.0500 1.63736 .362 -1.7587 7.85872.1500 1.63736 .686 -2.6587 6.9587-.4167 1.63736 .999 -5.2254 4.3921-.2667 1.63736 1.000 -5.0754 4.5421.9000 1.63736 .981 -3.9087 5.7087
-2.1500 1.63736 .686 -6.9587 2.6587-2.5667 1.63736 .531 -7.3754 2.2421-2.4167 1.63736 .587 -7.2254 2.39213.4667 1.63736 .244 -1.3421 8.2754
.4167 1.63736 .999 -4.3921 5.22542.5667 1.63736 .531 -2.2421 7.3754
.1500 1.63736 1.000 -4.6587 4.95873.3167 1.63736 .283 -1.4921 8.1254
.2667 1.63736 1.000 -4.5421 5.07542.4167 1.63736 .587 -2.3921 7.2254-.1500 1.63736 1.000 -4.9587 4.6587
(J) konsentrasi formal5%10%15%20%0%10%15%20%0%5%15%20%0%5%10%20%0%5%10%15%
(I) konsentrasi formal0%
5%
10%
15%
20%
MeanDifference
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound95% Confidence Interval
Homogeneous Subsets berat badan awal
Tukey HSDa
6 54.25006 55.15006 57.30006 57.56676 57.7167
.244
konsentrasi formalin0%10%5%20%15%Sig.
N 1
Subsetfor alpha
= .05
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.Uses Harmonic Mean Sample Size = 6.000.a.
Lampiran 22. Dokumentasi selama penelitian
Gambar 1. Pembuatan ransum
Gambar 2. Ransum kontrol dan perlakuan
Gambar 3. Penimbangan ransum
Gambar 4. Tikus wistar jantan
Gambar 5. Kandang pemeliharaan tikus percobaan
Gambar 6. Penimbangan tikus
Gambar 7. Pembedahan pada bagian abdomen
Gambar 8. Pengambilan organ hati
Gambar 9. Pengambilan organ ginjal
Gambar 10. Pengambilan organ limpa
Gambar 11. Botol organ yang berisi formalin 10% dan
organ dalam tikus