Download - 3EM #05 Biologia molecular (2017)
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Prof. Kyoshi Beraldo | Centro de Ensino São José
Biologia molecular3ºEM2017
aula
#05março
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Bactéria: uma ferramenta•Ciclo rápido• E.coli duplica em 20min.
• Populações pequenas• bilhões em uma placa de petri
•DNA circular e pequeno• Plasmídeos• pedaços extra de DNA• intercambiáveis
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#05Biomol
Bactéria
Enzimarestrição
Eletrofor.Paternid.
Vetores
Transgenia
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Enzimas de restrição•Cortam DNAem locais específicos• Ex: enzima
bacteriana Eco RI corta onde houverG|AATT CC TTTA|G• vendidas por
laboratóriosProf. Kyoshi Beraldo
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Enzimarestrição
Eletrofor.Paternid.
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Enzimas de restrição• DNA submetido a uma
enzima sofre cortes sempre nos mesmos locais• Ex: DNA do vírus SV40
tratado com enzima Hind IIé cortada em 11 fragmentos
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Estrutura do DNA• "Escada" do DNA composta de fosfato e desoxirribose• Posição dos carbonos: 5' em cima, 3' em baixo
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Replicação do DNA• Novos nucleotídeos adicionados somente no sentido 5' -> 3'
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Replicação do DNA• Complexo enzimático - DNA polimerase, Primase etc.
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Eletroforese•Analogia: • trens de tamanhos variados e desconhecidos• trem menor chega mais rápido
•Cromatografia: processo semelhante
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Eletro
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Eletroforese•Gel de análise genética de milhos "cavalo de tróia"
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Teste de paternidade•Trechos de DNA VTNR
• número variável de repetições em sequência
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Sequenciamento de DNA• Método Sanger• Bases nitrogenadas
marcadas radioativamente
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Bactérias•Plasmídiocomo vetor
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Bactérias•Vírus bacteriófagocomo vetor
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Transgenia
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Bactérias•Transgenia: produção de insulina humana
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Bactéria
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Plantas• Plasmídio da
bactériaAgrobacterium
• Multiplicaçãodo DNA
• Injeção doDNA em planta
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Animais
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Éxons e Íntrons• Íntron - região do DNA que não codifica aminoácidos• presentes no DNA de eucariotos
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Splicing•O mesmo
trecho de DNA podeser transcritode formasdistintas
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