Download - 2009 Bnf Aam Modulo Vi m Rocchi
MARTA ROCCHIMARTA ROCCHIEspecialista en BacteriologEspecialista en Bacteriologíía a --UNC UNC Hospital Nacional de ClHospital Nacional de Clíínicas nicas -- UNCUNC
[email protected]@gmail.com
IDENTIFICACION DE BNF IDENTIFICACION DE BNF
MAS FRECUENTESMAS FRECUENTES
…… un continuo un continuo desafdesafííoo……
ampliamente ampliamente distribudistribuíídosdos en el ambienteen el ambientesobreviven en el ambiente hospitalariosobreviven en el ambiente hospitalariohay especies hay especies multirresistentesmultirresistenteshay especies hay especies psicrpsicróófilasfilas →→ bancos de sangrebancos de sangrepacientes hospitalizados con tratamiento pacientes hospitalizados con tratamiento
antibiantibióótico pueden colonizarsetico pueden colonizarse
QuQuéé sabemos de los BNF???sabemos de los BNF???
BurkholderiaBurkholderia pseudomalleipseudomalleiBurkholderiaBurkholderia malleimalleiBordetellaBordetella pertussispertussis -- B. B. parapertussisparapertussisBrucellaBrucella
PseudomonasPseudomonas aeruginosaaeruginosaAcinetobacterAcinetobacter baumanniibaumanniiStenotrophomonasStenotrophomonas maltophiliamaltophiliaComplejoComplejo BurkholderiaBurkholderia cepaciacepaciaAchromobacterAchromobacter xylosoxidansxylosoxidans
PatPatóógenos obligadosgenos obligados
PatPatóógenos oportunistasgenos oportunistas
son oportunistasson oportunistas
de baja virulenciade baja virulencia
se presentan en cultivos mixtosse presentan en cultivos mixtos
generalmente generalmente ……
es difes difíícil determinar cucil determinar cuáándo realizar ndo realizar pruebas de identificacipruebas de identificacióón y de n y de
susceptibilidadsusceptibilidad
segsegúún la n la significanciasignificancia clclíínicanica
cuando se lo recupera de un sitio cuando se lo recupera de un sitio normalmente estnormalmente estéérilril
CuCuáándo identificamos un BNF?ndo identificamos un BNF?
YY……hay ghay gééneros que sneros que síí
por lo general no es sencillopor lo general no es sencillo
se requiere de se requiere de ““pacienciapaciencia”…”…
si llegamos a si llegamos a ggééneronero…… AleluiaAleluia!! !!
Es fEs fáácil llegar a identificar cil llegar a identificar a nivel de especie?a nivel de especie?
CCóómo mo sospechamos unsospechamos un
BNF en el BNF en el laboratoriolaboratorio
desarrolla pobremente a las 24 desarrolla pobremente a las 24 hshsen en agaragar sangre o sangre o triptosatriptosa sojasoja
bacilo o bacilo o cocobacilococobacilo gramgram negativonegativo
alcaliniza el pico del TSI y no alcaliniza el pico del TSI y no produce cambios en el fondoproduce cambios en el fondo
Pico alcalinoPico alcalino
Fondo neutroFondo neutro
TSITSI
primero debemos tener en primero debemos tener en cuentacuenta……
morfologmorfologíía de las colonias: tamaa de las colonias: tamañño, bordes, o, bordes, consistencia, aspectoconsistencia, aspecto
presencia de pigmentopresencia de pigmentoel olor: frutal el olor: frutal ((PseudomonasPseudomonas aeruginosaaeruginosa, ,
AlcaligenesAlcaligenes faecalisfaecalis , , MyroidesMyroides, , EmpedobacterEmpedobacter brevisbrevis, ,
ChryseobacteriumChryseobacterium gleumgleum--indologenesindologenes)),,
amoniacal amoniacal StenotrophomonasStenotrophomonas maltophiliamaltophilia,,,, etcetc
……unauna vez seleccionada la colonia, vez seleccionada la colonia, hacemos el hacemos el ““GRAMGRAM””
Es fundamental y Es fundamental y orientativoorientativo ver la ver la MORFOLOGIA de la bacteria en cuestiMORFOLOGIA de la bacteria en cuestióónn
… cocoide??
……unun cocobacilococobacilo????Es un bacilo??Es un bacilo??
PseudomonasPseudomonas fluorescentesfluorescentesAcinetobacterAcinetobacter baumanniibaumanniiComplejoComplejo BurkholderiaBurkholderia cepaciacepaciaStenotrophomonasStenotrophomonas maltophiliamaltophiliaAlcaligenesAlcaligenes faecalisfaecalis ((exex A.odoransA.odorans))AchromobacterAchromobacter xylososoxidansxylososoxidans
ElizabethkingiaElizabethkingia meningosepticameningosepticaMyroidesMyroidesChryseobacteriumChryseobacterium gleumgleum--indologenesindologenes
Veamos pues cVeamos pues cóómo identificar:mo identificar:
Las pruebas CLAVE para iniciar la Las pruebas CLAVE para iniciar la identificaciidentificacióón son:n son:
OXIDASAOXIDASA(+)(+) ((--)) ((--))(+)(+)
MOVILIDADMOVILIDAD
(+)(+)((--))
OXIDASA
MovilidadMovilidad+
GRUPO GRUPO AA GRUPO GRUPO CC GRUPO GRUPO DD
MovilidadMovilidad-
+ +GRUPO GRUPO BB
- -
ARBITRARIAMENTEARBITRARIAMENTE……
GRUPO GRUPO AAGénero Pseudomonas
Pseudomonas aeruginosaP.fluorescens - P.putidaP.veronii - P.monteiliiP.mosseilii - P.stutzeriP.stuzeri like (CDC grupo Vb3)P.mendocina-P.alcaligenesP.pseudoalcaligenes
AchromobacterAlcaligenes faecalisRhizobium- BalneatrixShewanellaMethylobacteriumRoseomonasOchrobactrumSphingomonasAgrobacteriumOligella - BordetellaCDC grupo I; WO-1; O-1; O-2; O-3; OFBA-1
Ex PseudomonasBurkholderia-Ralstonia-Cupriavidus-PandoraeaComamonas (Delftia)Acidovorax-Brevundimonas
OXIDASA
MovilidadMovilidad+
GRUPO GRUPO AA+
Grupo Grupo fluorescentefluorescente
P. P. aeruginosaaeruginosaP. P. fluorescensfluorescensP. P. putidaputida
P. P. veroniiveroniiP. P. monteiliimonteiliiP. P. mosseiliimosseilii
pioverdinapioverdinaGrupo Grupo fluorescentefluorescente
KingKing BB FLNFLN
ADH +ADH +4242ººCC 44ººCC Gel Gel
•• P. P. aeruginosaaeruginosa ++ -- +/+/--
•• P. P. fluorescensfluorescens -- + + ++
•• P. P. putidaputida -- -- --
Grupo Grupo fluorescentefluorescente
TestigoTestigo ADH ADH ++
ENTEROBACTERIA BNF
TestigoTestigoTestigoTestigoADH +ADH + ADH +ADH +
ARGININA DEHIDROLASA
OXIDASA
MovilidadMovilidad+
GRUPO GRUPO AA+
Grupo Grupo fluorescentefluorescente
Pruebas Pruebas marcadoras marcadoras fenotfenotíípicas picas
Pruebas marcadoras fenotPruebas marcadoras fenotíípicas mpicas míínimasnimas
Acido de lactosa
Resistencia al colistín
Decarboxilación de Lisina
Hidrólisis de la Acetamida
Denitrificación
Pigmento
Acido de glucosa
Hidrólisis de la Arginina
GRUPO GRUPO AA
Acido de LACTOSA (FLN Acido de LACTOSA (FLN –– OF)OF)
BurkholderiaSphingomonas
RhizobiumAgrobacterium
Grupo O3 Ralstonia
Pseudomonas spp
Lisina Lisina decarboxilasadecarboxilasa
positivapositiva
ComplejoBurkholderia cepacia
GRUPO GRUPO AA
AcidoAcido
Resistencia al COLISTResistencia al COLISTÍÍNN
BurkholderiaRalstonia
Pandoraea
ComplejoB. cepacia
GRUPO GRUPO AA
LDC positivaLDC positiva
ACETAMIDA positivaACETAMIDA positivaGRUPO GRUPO AA
AchromobacterAchromobacterxylosoxidansxylosoxidans
-
XilosaXilosa ++ADHADH
ComplejoComplejoB. B. cepaciacepacia
LDC +LDC +Olor frutal y Olor frutal y
Gas NOGas NO--22
AlcaligenesAlcaligenesfaecalisfaecalis
P. P. aeruginosaaeruginosa
+
P. aeruginosa - Alcaligenes faecalisAchromobacter spp - B. cepacia (50%)
Bordetella - Delftia
+
DenitrificaciDenitrificacióónn
P. P. aeruginosaaeruginosa no fluorescenteno fluorescente
P.mendocinaP.mendocina -- P.stutzeriP.stutzeriP. P. stutzeristutzeri--likelike
(CDC (CDC grupoVb3grupoVb3))AchromobacterAchromobacter xylosoxidansxylosoxidansR.pickettiR.picketti--OchrobactrumOchrobactrumOligellaOligella--RhizobacteriumRhizobacteriumBurkholderiaBurkholderia pseudomalleipseudomallei
GRUPO GRUPO AA
P stutzeri
ADH ADH ––AlmidAlmidóón +n +
Maltosa +Maltosa +ManitolManitol ++
PIGMENTOPIGMENTOGRUPO GRUPO AA
PARDO/TOSTADOPARDO/TOSTADOP.stutzeriP.stutzeri
P P stutzeristutzeri--likelike (CDC (CDC grupoVb3grupoVb3))ShewanellaShewanella
NARANJANARANJAB. B. vesicularisvesicularis
AMARILLOAMARILLOB.vesicularisB.vesicularisP. mendocinaP. mendocinaSphingomonasSphingomonasAgrobacteriumAgrobacteriumBalneatrixBalneatrixAcidovoraxAcidovoraxGrupos CDCGrupos CDC
ROSADOROSADORoseomonasRoseomonas
MethylobacteriumMethylobacteriumAzospirillumAzospirillum
ARGININA ARGININA dehidrolasadehidrolasapositivapositiva
GRUPO GRUPO AA
PseudomonasPseudomonas grupo fluorescentegrupo fluorescenteP. mendocinaP. mendocinaP. P. stutzeristutzeri--likelike (CDC (CDC grupoVb3grupoVb3))P. P. luteolaluteolaOchrobactrumOchrobactrum anthropianthropiBurkholderiaBurkholderia pseudomalleipseudomalleiB. B. malleimalleiAcidovoraxAcidovorax facilisfacilis--delafieldiidelafieldii
ADH +ADH +
Acido de GLUCOSA negativa (OF)Acido de GLUCOSA negativa (OF)
Bordetella – Oligella – DelftiaAlcaligenes faecalis - Cupriavidus (ex R.paucula)
Roseomonas – Methylobacterium – ShewanellaA.xylosoxidans subsp denitrificans
Pseudomonas CDC grupo 1 - P.pseudoalcaligenes -
GRUPO GRUPO AA
BNF inactivos, inertes a los H de CBNF inactivos, inertes a los H de Csignificacisignificacióón cln clíínica dudosanica dudosaidentificaciidentificacióón fenotn fenotíípica dificultosapica dificultosa
Olor frutal y Olor frutal y Gas NOGas NO--
22
Alcaligenesfaecalis
OXIDASA
MovilidadMovilidad
GRUPO GRUPO AA+
Grupo Grupo fluorescentefluorescente
Pruebas Pruebas marcadoras marcadoras fenotfenotíípicas picas
GRUPO GRUPO BB
-
+
ElizabethkingiaElizabethkingia meningosepticameningosepticaC. C. gleumgleum--indologenesindologenesEmpedobacterEmpedobacter brevisbrevisMyroidesMyroides sppsppSphingobacteriumSphingobacterium sppspp..PedobacterPedobacter sppsppSphingomonasSphingomonas paucimobilispaucimobilisOligellaOligella urethralisurethralisPsycrobacterPsycrobacter immobilisimmobilis ((glucgluc v)v)PsycrobacterPsycrobacter phenilpyruvicusphenilpyruvicusWeeksellaWeeksella virosavirosaBergeyellaBergeyella zoohelcumzoohelcum
NeisseriaNeisseria weaveriweaveriN. N. elongataelongata subspsubsp. . nitroreducensnitroreducensMoraxellaMoraxella sppsppParacoccusParacoccus yeeiyeei ((EOEO--2)2)
Bacilo Bacilo GilardiGilardi Grupo 1Grupo 1CDC grupo CDC grupo IIcIIc, , IIeIIe, , IIgIIg, , IIhIIh, , IIiIIiCDC grupo EOCDC grupo EO--3, EF3, EF--4b4bBrucellaBrucella sppsppAdvenellaAdvenella incenataincenataHaemabacterHaemabacterLanbacterLanbacterAlishewanellaAlishewanella
GRUPO GRUPO BB
Nuevos gNuevos gééneros neros ex Gex Gééneronero FlavobacteriumFlavobacteriumElizabethkingiaElizabethkingia F. F. meningosepticummeningosepticum
meningosepticameningoseptica
ChryseobacteriumChryseobacterium F. F. gleumgleumF. F. indologenesindologenesF. F. balustinumbalustinum -- CDC CDC llbllbF. F. indoltheticumindoltheticum
EmpedobacterEmpedobacter brevisbrevis F. breveF. breveMyroidesMyroides sppspp F. F. odoratumodoratumFlavobacteriumFlavobacterium sppspp F. F. aquatileaquatile y otras especiesy otras especies
no encontradas en no encontradas en muestras clmuestras clíínicasnicas
OXIDASA
MovilidadMovilidad
GRUPO GRUPO AA+
Grupo Grupo fluorescentefluorescente
Pruebas Pruebas marcadoras marcadoras fenotfenotíípicas picas
GRUPO GRUPO BB
-
INDOL
+ -
+
GRUPO GRUPO BBINDOL +
GLUCOSAGLUCOSA +ESCULINAESCULINA +
DNAsaDNAsa ++ManitolManitol ++DNAsaDNAsa --
ManitolManitol --
Elizabethkingiameningoseptica
Chryseobacteriumgleum-indologenes
GRUPO GRUPO BBINDOL -
GLUCOSA GLUCOSA -
DNAsaDNAsa ++Urea +Urea +
NeisseriaNeisseria weaveriweaveri -- MyroidesMyroidesN. N. elongataelongata subspsubsp. . nitroreducensnitroreducensMoraxellaMoraxella sppspp--Bacilo Bacilo GilardiGilardi Grupo 1Grupo 1CDC grupo CDC grupo IIcIIc, , IIe,IIgIIe,IIg, , IIhIIh, , IIiIIi
MyroidesMyroides sppspp
OXIDASA
MovilidadMovilidad
GRUPO GRUPO AA+
Grupo Grupo fluorescentefluorescente
Pruebas Pruebas marcadoras marcadoras fenotfenotíípicas picas
GRUPO GRUPO BB
-
INDOL
+ -
GRUPO GRUPO CC+
+MovilidadMovilidad
-
GRUPO GRUPO CC
StenotrophomonasStenotrophomonas maltophiliamaltophiliaComplejoComplejo BurkholderiaBurkholderia cepaciacepacia (14% (14% oxox -- ))BurkholderiaBurkholderia gladioligladioli (53% (53% oxox -- ))
PseudomonasPseudomonas luteolaluteola ((exex ChryseomonasChryseomonas))PseudomonasPseudomonas oryzihabitansoryzihabitans (ex(ex FlavimonasFlavimonas))BordetellaBordetella trematumtrematumSphingomonasSphingomonas paucimobilispaucimobilis (6% son (6% son oxox --))MassiliaMassilia timonaetimonae
GRUPO GRUPO CC
Lisina Lisina decarboxilasadecarboxilasa
positivapositiva++TestigoTestigo
DNAsaDNAsa+
-
Complejo Burkholderia cepacia
StenotrophomonasStenotrophomonasmaltophiliamaltophilia
OXIDASA
MovilidadMovilidad
GRUPO GRUPO AA+
Grupo Grupo fluorescentefluorescente
Pruebas Pruebas marcadoras marcadoras fenotfenotíípicas picas
GRUPO GRUPO BB
-
INDOL
+ -
GRUPO GRUPO CC
MovilidadMovilidad-
+GRUPO GRUPO DD
-
+
LDC
+
GRUPO GRUPO DD
AcinetobacterAcinetobacter sppspp..CDC grupo EOCDC grupo EO--55CDC grupo NOCDC grupo NO--11BordetellaBordetella holmessiholmessiBordetellaBordetella parapertussisparapertussisSphingomonasSphingomonas paucimobilispaucimobilis
(es m(es móóvil entre 18vil entre 18--2222ººC, no a 37C, no a 37ººCC))BrucellaBrucella caniscanis
morfología cocoidecocoide a cocobacilarcocobacilarNO NO reducen los NO3
- a NO2-32 genoespecies – 17 especies
AcinetobacterAcinetobacter sppspp..
Glucosa(+) no hemolGlucosa(+) no hemolíítico 44tico 44ººCC A.baumanniiA.baumannii
A A haemolyticushaemolyticusGlucosa(+) hemolGlucosa(+) hemolííticotico
A A lwoffiilwoffiiGlucosa (Glucosa (--) ) ……
REPASANDO Y REPASANDO Y CONCLUYENDOCONCLUYENDO……
MOVILIDAD MOVILIDAD Punto de partidaPunto de partiday OXIDASAy OXIDASA Elementales en la identificaciElementales en la identificacióón de BNFn de BNF
AROMA DEL CULTIVOAROMA DEL CULTIVO olor frutal, amoniacalolor frutal, amoniacal
CARACTERISTICASCARACTERISTICAS Pigmentos solubles e insolublesPigmentos solubles e insolublesCULTURALESCULTURALES Forma, borde. ConsistenciaForma, borde. Consistencia
PERFIL de RESISTENCIAPERFIL de RESISTENCIA PolimixinaPolimixina, AG,, AG,CarbapenemesCarbapenemes
API 20 NEAPI 20 NE RRáápido, de fpido, de fáácil manejocil manejo