določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...shizociti določitev deleža v krvnem razmazu...
TRANSCRIPT
![Page 1: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/1.jpg)
DOLOČANJE SHIZOCITOV V SKLADU
S PRIPOROČILI IN UPORABNOST
PARAMETRA FRAGMENTIRANI
ERITROCITI (FRC)
Lidija Pušnik
![Page 2: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/2.jpg)
UVOD
• Shizocite v periferni krvi najdemo pri različnih bolezenskih stanjih
• Zlati standard za določitev deleža shizocitov je mikroskopski pregled razmaza
• Mednarodni svet za standardizacijo v hematologiji (The International Council for Standardization in Haematoloy –ICSH) je izdal strokovna priporočila za določanje shizocitov v krvnem razmazu (l. 2012)
• Na tržišču obstajajo analizatorji, ki omogočajo kvantitativno določitev fragmentiranih eritrocitov (parameter FRC)- namenjen v raziskovalne namene
![Page 3: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/3.jpg)
Vzrok pojava SHIZOCITOV
Motnje v eritropoezi
Intravaskularne mehanske poškodbe (TTP)
Pridobljene in prirojene napake v membrani eritrocitov
Opeklinska stanja
Fiziološko
![Page 4: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/4.jpg)
TROMBOTIČNA TROMBOCITOPENIČNA PURPURA (TTP) IN HEMOLITIČNO UREMIČNI SINDROM (HUS)
• Urgentno stanje zahteva takojšnje zdravljenje
• Za potrditev TTP ni specifičnega diagnostičnega testa
• Najdba shizocitov v razmazu krvi je ključna za postavitev diagnoze TTP
• Pri najdbi shizocitov v razmazu krvi je potrebno določati delež shizocitov več dni zapored
![Page 5: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/5.jpg)
SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu
PARAMETER FRC Določitev na analizatorju
![Page 6: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/6.jpg)
KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA SHIZOCITOV V SKLADU S PRIPOROČILI ICSH
• Potrebno je upoštevati natančna morfološka merila za opredelitev shizocitov
• Za določitev shizocitov je potrebno pod 1000x povečavo prešteti 1000 eritrocitov in rezultate podati v odstotkih
• Ob prisotnosti trombocitopenije in shizocitov v razmazu krvi lahko pomislimo na TTP
• Pomemben diagnostični kriterij za potrditev TTP je delež shizocitov višji od 1%
• Določitev parametra FRC na hematološkem analizatorju ima visoko negativno napovedno vrednost in je lahko v pomoč pri odločitvi za mikroskopsko določitev deleža shizocitov
![Page 7: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/7.jpg)
MORFOLOŠKA OPREDELITEV SHIZOCITOV
• Do izdaje smernic po priporočilih ICSH morfološka merila niso bila natančno opredeljena
• V literaturi najdemo različne izraze za morfološko opredelitev shizocitov (nepravilno ukrivljeni eritrociti, atipični hipokromni eritrociti, eritrocitne sence)
• Pomembno je, da je debelina razmaza ustrezna in da so eritrociti enakomerno razporejeni ter se ne prekrivajo. V repu razmaza namreč najdemo shizocite ter mikrosferocite kot artefakt
![Page 8: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/8.jpg)
Eritrociti morajo biti enakomerno razporejeni in se ne prekrivajo
Pri 100x povečavi poiščemo vidno polje, ter ocenimo kakovost preparata. S 600x povečavo izberemo ustrezno področje za štetje shizocitov.
Vrednotenje shizocitov ni
mogoče
![Page 9: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/9.jpg)
Za oceno deleža shizocitov mora biti tehnično ustrezen preparat
Tehnično neustrezen preparat, vzrok v
sami izdelavi ter postopku barvanja razmaza.
Napaka v predanalitski fazi pri postopku odvzema krvi.
![Page 10: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/10.jpg)
Med shizocite vključimo odtrgane dele eritrocitov, majhne delce različnih oblik, včasih z ostrimi koti (trikotniki).
![Page 11: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/11.jpg)
• Pozorni moramo biti na shizocite v obliki polmeseca, ki jih moramo razlikovati od drepanocitov (te najdemo pri srpasto celični anemiji).
![Page 12: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/12.jpg)
Upoštevamo tudi poškodovane eritrocite, ki so večji od majhnih fragmentov s konkavnim segmentom, imenovane keratociti (celice z rogovi).
![Page 13: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/13.jpg)
Med shizocite štejemo tudi t.i.mikrosferocite, ki so manjši od 5 µm ter intenzivno obarvani
![Page 14: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/14.jpg)
Diagnostično je smiselno določanje shizocitov le takrat, kadar le ti prevladujejo v razmazu krvi in ni prisotne poikilocitoze
![Page 15: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/15.jpg)
NAMEN DELA
• Uskladiti mikroskopsko določitev shizocitov po priporočili ICSH, ki bi nadomestila rutinsko metodo
• Primerjati delež shizocitov določen z rutinsko in novo metodo z vrednostjo parametra določenega na hematološkem analizatorju
• Ugotoviti diagnostično občutljivost in specifičnost za parameter FRC določen na analizatorju
![Page 16: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/16.jpg)
VZORCI
N=272
33; 12%
60; 22%
179; 66%
Otroci
Novorojenčki
Bolniki s krvnimiboleznimi
![Page 17: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/17.jpg)
PRIMERJAVA MIKROSKOPSKE DOLOČITVE SHIZOCITOV Z RUTINSKO IN METODO SKLADNO S SMERNICAMI • Povezava med obema
metodama je odlična
• Ugotovili smo, da so vrednosti shizocitov določene z novo metodo višje od vrednosti določenimi z rutinsko metodo
![Page 18: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/18.jpg)
PARAMETER FRC HEMATOLOŠKEGA ANALIZATORJA
Opozorilo »Fragments« Rutinska metoda
Resnično negativni 80 (34,3%)
Lažno negativni 4 (1,7%)
Resnično pozitivni 89 (38,2%)
Lažno pozitivni 60 (25,7%)
Občutljivost 95,7%
Specifičnost 57,1%
Pozitivna napovedna vrednost 59,7%
Negativna napovedna vrednost 95,2%
![Page 19: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/19.jpg)
PRIMERJAVA VREDNOSTI PARAMETRA FRC Z MIKROSKOPSKO DOLOČITVIJO SHIZOCITOV
• Delež FRC je bil za 0,6% večji od deleža določenega z mikroskopskim štetjem
• Razlika med deležem shizocitov določenim z novo metodo in parametrom FRC je manjša kot pri mikroskopski določitvi deleža shizocitov z rutinsko metodo
• Shizocite smo potrdili pri 119-ih vzorcih
![Page 20: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/20.jpg)
PRIMERJAVA DOLOČITVE PARAMETRA FRC IN SHIZOCITOV DOLOČENIMI Z NOVO METODO, KJER JE DELEŽ SHIZOCITOV MED 0,5-1,5%
• N=69
• Pri 17-ih bolnikih, kjer je bil delež shizocitov >3%
![Page 21: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/21.jpg)
DOLOČANJE SHIZOCITOV PRI SKUPINI BOLNIKOV S TTP
• V raziskavo so bili vključeni štirje pacienti s potrjeno diagnozo TTP
• Dnevno smo spremljali delež shizocitov
![Page 22: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/22.jpg)
BOLNIKI S TTP PO ZDRAVLJENJU S PLAZMAFEREZO
![Page 23: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/23.jpg)
ZAKLJUČEK
• Za določanje deleža shizocitov smo uvedli metodo v skladu s priporočili ICSH
• Z novo metodo lahko bolj natančno določimo delež shizocitov, hkrati pa je bolj primerna za spremljanje deleža shizocitov med samim zdravljenjem pri bolnikih s TTP
• Parameter FRC je uporaben v presejalne namene zaradi visoke negativne napovedne vrednosti
![Page 24: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/24.jpg)
ZAHVALA
Helena Podgornik
Nada Snoj
Alenka Trampuš Bakija
Karmen Dežman
Natalija Hozjan Komac
Alenka Babnik
Ivanka Nerad
Katarina Zorko
Tadej Furlan
Hermina Čibej
Špela Orešnik
![Page 25: Določanje shizocitov v skladu s priporočili in …...SHIZOCITI Določitev deleža v krvnem razmazu PARAMETER FRC Določitev na analizatorju KLJUČNE ZAHTEVE ZA DOLOČITEV DELEŽA](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022041623/5e4094c4c299133b0931839d/html5/thumbnails/25.jpg)
ZAHVALJUJEM SE ZA VAŠO POZORNOST