- DIAGRAM ALIR CARA KERJA

a. Preparasi dan Ekstraksi

1,4 kg berat kering daun manja

(A.marmelos),dimaserasi dengan

metanol selama 3X24 jam.

Berwarna hjau pekat

dievaporasi

ekstrak metanol dengan berat

40,20 gram.

Difraksinasi

dengan n-heksan

Ekstrak kental n-heksan

Dievaporasi

sampai kering

Ekstrak n-heksan 9,30 gram

Fraksinasi dangan kromatografi cair

vacum (KKV)

b. Fraksinasi

9,3 gram ekstrak n-heksan difraksinasi dengan

kromatografi kolom cair vakum (KKV), dengan

meningkatkan eluen

31 Fraksi

Dilakukan

penggabungan

Isolat diperoleh dari 7 fraksi

c. Pemurnian

Isolat dari KKV dimurnikan dengan cara

kristalisasi dengan pelarut n-heksan-klooform

Kristal jarum warna putih, dan titi

leleh 149-1420C

ditentukan dengan KLT sistem

3 eluen yg berbeda

maka isolat (senyawa) sudah murni

d. Identifikasi

- Uji golongan steroid dan terpenoid

5 tetes ekstrak pada plat tetes, dibiarkan

hingga pelarutnya menguap, + anhidrat asam

asetat, dibiarkan mengering, + 2-3 tetes asam

sulfat pekat + pereaksi liebermann-burchard

Adanya terpenoid terjadi warna merah-ungu

sedangkan steroid warna hijau-biru

- Uji golongan alkaloid

5 tetes ekstrak, pada plat tetes, +

dragendrorff dan wagner,

Terbentuk endapan, dimana dragendroff

memberikan endapan merah dan wagner

endapan coklat

- Uji golongan flavonoid

5 tetes ekstrak pada plat tetes + 2 tetes FeCL3

5%

Terjadi perubahan warna kehijauan atau

hitam biru

- idntifikasi lanjutan menggunakan

spektroskopi infra merah (IR) untuk

mengetahui gugus fungsi yang

terdapat pada senyawa tersebut.