Diagnóstico laboratorial TB

Mariano Alarcón ParraMR4 INFECTOLOGIA

HNERM – Noviembre 2015

¿POR QUÉ ES IMPORTANTE EL DX TBC?

• Un billón de individuos infectados con TBC.• 1.5 a 2 millones desarrollan enfermedad.• 1/5 infectado con HIV.• 250 000 TBC MDR entre 2010 a 2012.• 20 000 a 10000 XDR.

Bacteriología TBC• MTB complex• Forma «coma»/Largo de 2 a 4 micras. • Transmisión por gotas de Pffuger.• Pared celular rica en lípidos.• No toxinas, no flagelo.• Aeróbico.• Único reservorio: ser humano.

Patogenia de MTB

• TBC lenta replicación en condiciones adversas. ALTA QUIESCENCIA.

• Cantidad de inóculo, virulencia y desarrollo de inmunidad celular TH1.

• Complejo de Ghon : va a calcificarse (primaria)/o diseminación (secundaria)

• Lento diagnóstico

Talón de Aquiles de pruebas dx de TBC

Pacientes con baciloscopía negativa.

Pacientes viviendo con VIHPrueba diagnóstica inicial.

TB extrapulmonar

Relación entre poblaciones bacilares y pruebas dx

0 1 10 100 1000 10.000 100.000 1.000.000AFB per ml of sputum

X-Ray and clinical (15%)

Poor microscopy (30%)

Excellent microscopy (65%)

Culture, PCR (85%)

UNION INTERNACIONAL CONTRA LA UNION INTERNACIONAL CONTRA LA TUBERCULOSISTUBERCULOSIS

Y ENFERMEDADES RESPIRATORIAS (La Union)Y ENFERMEDADES RESPIRATORIAS (La Union)Prof. José A. Caminero

Baciloscopia Baciloscopia DirectaDirecta

- Técnica de Elección por:- Técnica de Elección por:

- Rapidez- Rapidez- Sencillez- Sencillez- Bajo Costo- Bajo Costo- Importancia Salud Pública:- Importancia Salud Pública:

¡ CONTAGIOSIDAD !¡ CONTAGIOSIDAD !

Tomar en cuenta falsos positivos.Tomar en cuenta correlación

cultivo + / Bk –Operador dependiente :

promedio ver 100 campos 5 a 10 minutos.

BK en muestras extrapulmonares

Un Un BK+ durante el TtoBK+ durante el Tto puede ser M.TB vivo, Muerto u otra Micob. puede ser M.TB vivo, Muerto u otra Micob.

• ¿Esputos seriados?: uno en el lugar de detección y el otro a la mañana siguiente.

• ¿Concentrado o directo? • Microscopía convencional es la más usada y la

más económica.• LED vs microscopía fluorescente, menos

contaminación y es la recomendada.

Baciloscopia DirectaBaciloscopia Directa

CULTIVOS

• Método fenotípico vs Genotípico:• Morfología / color / pruebas bioquímicas

(LJ /MIDDLEBROOK / GRIESS )• Detección de proteínas ribosomales /

Detección directa de ADN bacteriano

Generalidades de medios de cultivo • Contaminación.

• Transporte.• Uso de radiación.• Posibilidad de estudiar

sensibilidad.• Demora en resultados

En general permiten realizar pruebas de sensibilidad DEFINITIVAS

Técnicas de amplificación de AN (NAA)

GeneXpert/RIF

• La prueba depende de la prevalencia de la enfermedad. Si la resistencia a la rifampicina es baja y la población MR es baja, el VPP cae.

• Monoresistencia a R menor a 5% , es alto predictor de TBC MDR.

OMS : repetir el Xpert cuando haya alta sospecha de TB MDR, y población de riesgo.

7 bases estudiadasIncluidos 27 estudios y 6026

muestrasBasado en correlación con

CULTIVO SÓLIDO como gold standard

Resistencia a R: DSTHeterogenicidad : dx TBC ,

variación en método de cultivo , no uniformidad en procesar las

muestras.

8 Centros de Italia1493 muestrasRetrospectivo

238 + MTB CULTIVO / 38 con cultivo - / Xpert +

La resistencia a la R , predice MDR

MIC de antiTB

UNION INTERNACIONAL CONTRA LA UNION INTERNACIONAL CONTRA LA TUBERCULOSISTUBERCULOSIS

Y ENFERMEDADES RESPIRATORIAS (La Union)Y ENFERMEDADES RESPIRATORIAS (La Union)Prof. José A. Caminero

Mecanismos de resistencia a drogas

Genes frecuentemente mutados en la TBC resistente / MDR

Informa sobre mutaciones a KatG

e inhA

Genetic Mutations Associated with Isoniazid Resistance in Mycobacterium tuberculosis: A Systematic Review.Seifert M, et al.. PLoS ONE 2015; 10(3): e0119628. doi:10.1371/journal.pone.0119628

UNION INTERNACIONAL UNION INTERNACIONAL CONTRA LA TUBERCULOSISCONTRA LA TUBERCULOSIS

Y ENFERMEDADES Y ENFERMEDADES RESPIRATORIAS (La Union)RESPIRATORIAS (La Union)

Prof. José A. Caminero

• LPA’s vs DST : sensibilidad 97% , especificidad 99% para detectar resistencia R o asociada a H.

• No reemplazan a pruebas de sensibilidad convencional especialmente en XDR.

IGRAS vs InmunoSPOT HIV : LT diagnosis

• La evidencia actual sugiere similar performance. • Dado el performance subóptimo: usarlo depende de

las guías de manejo actuales.• IGRAs mayor especificidad en lugares con baja

incidencia de TBC y menor exposición a la misma.

Costo efectividad de los métodos dx para TBC