dentaltex - home - aitex...t1.1. actualización de conocimientos relacionados con la materia. los...

DENTALTEX

DISEÑO, OBTENCIÓN Y

COMPORTAMIENTO BIOLÓGICO DE

UN VELO DE NANOFIBRAS A DOS

CARAS PARA EL TRATAMIENTO DE

LA ENFERMEDAD PERIODONTAL

Este proyecto cuenta con el apoyo de la Conselleria d’Economia Sostenible, Sectors

Productius, Comerç i Treball de la Generalitat Valenciana, a través del IVACE.

2 | P á g i n a



3 | P á g i n a

ÍNDICE DE CONTENIDO

1. FICHA TÉCNICA DEL PROYECTO............................................................ 4

2. ANTECEDENTES Y MOTIVACIONES ........................................................ 6

3. OBJETIVOS DEL PROYECTO .................................................................. 8

4. PLAN DE TRABAJO ............................................................................ 10

5. RESULTADOS OBTENIDOS ................................................................. 25

6. TRANSFERENCIA A EMPRESAS............................................................ 28

7. COLABORADORES EXTERNOS DESTACADOS ........................................ 31



4 | P á g i n a

1.FICHA TÉCNICA DEL PROYECTO



5 | P á g i n a

Nº EXPEDIENTE IMAMCI/2018/1

TÍTULO COMPLETO

DENTALTEX. Diseño, obtención y

comportamiento biológico de un velo de

nanofibras a dos caras para el

tratamiento de la enfermedad

periodontal.

PROGRAMA Plan de Actividades de Carácter no

Económico 2018

ANUALIDAD 2018

PARTICIPANTES AITEX

COORDINADOR AITEX

ENTIDADES

FINANCIADORAS

IVACE – INSTITUT VALENCIÀ DE

COMPETITIVITAT EMPRESARIAL

www.ivace.es

ENTIDAD

SOLICITANTE AITEX

C.I.F. G03182870

Este proyecto cuenta con el apoyo de la Conselleria d’Economia Sostenible,

Sectors Productius i Treball, a través de IVACE (Institut Valencià de Competitivitat Empresarial)

http://www.ivace.es/



6 | P á g i n a

2.ANTECEDENTES Y MOTIVACIONES



7 | P á g i n a

Debido a la morfología y capacidad de liberación de fármacos y/o principios activos de los

velos de nanofibras, hacen que su utilización como barrera en la terapia periodontal

pudiese justificar una alternativa óptima a las membranas sin aditivos que se utilizan

actualmente.

La terapia periodontal tiene como objetivo la regeneración del periodonto. El conjunto del

periodonto está compuesto por la encía, el hueso alveolar y los ligamentos periodontales.

El método con mayor eficacia como terapia para tratar enfermedades periodontales es, en

la actualidad, la Regeneración Tisular Guiada (RTG). Básicamente consiste en colocar una

barrera física sobre el defecto periodontal, excluyendo así a los tejidos gingivales durante

las etapas tempranas de curación. Es decir, se trata de separar la zona ósea de la zona

que recubre el diente (zona periodontal).



8 | P á g i n a

3.OBJETIVOS DEL PROYECTO



9 | P á g i n a

El objetivo principal del presente proyecto ha sido desarrollar un velo de nanofibras

bioabsorbible a dos caras, capaz de aportar por cada una de ellas propiedades específicas

para el tratamiento de las distintas zonas afectadas por una enfermedad periodontal.

De tal forma que, una cara del velo estaría destinada a la regeneración del hueso alveolar

y la otra capa, destinada a la regeneración de los ligamentos periodontales y el cemento

radicular.

Para lograr el objetivo propuesto se optó por desarrollar la tecnología de electrospinning,

con la que es posible obtener un velo de nanofibras poliméricas aplicando un alto potencial

eléctrico a una disolución polimérica precursora que puede aditivarse fácilmente con

fármacos específicos. Para el tratamiento de la zona ósea se utilizarían sales inorgánicas

de calcio que provoquen la diferenciación de células en osteoblastos y para el tratamiento

de la zona del ligamento periodontal se utilizaría un fármaco para diferenciar células en

cementoblastos.

Planteando conseguir un prototipo final que cumpla con los siguientes requisitos:

• Ser bioabsorbibles, no tóxico y no antigénico

• Evitar la penetración de células a través del prototipo

• Poseer la suficiente rugosidad que sirva de matriz para la proliferación de células

óseas o dentales

• Capaz de liberar principios activos específicos para las diferenciadas zonas de

aplicación (sales minerales para la zona ósea y un factor de crecimiento del

cemento para la zona dental)

• Capacidad de aislar el defecto óseo

• Tejido estable, bien vascularizado y con alto grado de compatibilidad

• Manejo sencillo



10 | P á g i n a

4.PLAN DE TRABAJO



11 | P á g i n a

CRONOGRAMA DEL PROYECTO

TRABAJOS REALIZADOS POR PAQUETE DE TRABAJO

I. PREPARACIÓN TÉCNICA DEL PROYECTO

T1.1. Actualización de conocimientos relacionados con la materia.

Los objetivos de este paquete de trabajo eran:

− Actualizar la base de conocimiento sobre electrospinning en los campos de

aplicación del proyecto.

− Estudiar los artículos y las patentes concedidas sobre los productos que se pretende

desarrollar, analizar los solicitantes y la tendencia prevista respecto a años

anteriores.

− Conocer el mercado de los productos existentes y las propiedades deseables de

dichos productos.

Artículos técnicos.

El estudio del arte incluye artículos técnicos con la información relevante como el título,

los autores, el año de publicación y el resumen del contenido técnico (abstract).

Los criterios para buscar, comprobar y seleccionar los artículos han sido los siguientes:

− Tiempo: máximo 10 años de antigüedad (se consideran válidas los artículos

publicados entre el 2008 y el 2018).

− Geografía: artículos técnicos publicados en cualquier revista, búsqueda global.

− Keywords: electrospinning, electrospun, nanofiber, guided tissue regeneration.

01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12

F0. Gestión 01/01/2018 31/12/2018

F1. Preparación técnica del proyecto 01/01/2018 31/12/2018

F2. Obtención de muestras y prototipos 01/03/2018 31/12/2018

F3. Caracterización de muestras y prototipos 01/03/2018 31/12/2018

F4. Validación de la biocompatibilidad y la funcionalidad de muestras y prototipos 01/05/2018 31/12/2018

F5. Análisis de los resultados y conclusiones 01/09/2018 31/12/2018

F6. Difusión del proyecto 01/01/2018 31/12/2018



12 | P á g i n a

El estudio se acompaña con gráficos para ilustrar de forma visual la evolución de los

artículos científicos publicados según los últimos años.

Figura 1. Número de publicaciones de artículos relacionados con la tecnología de

electrospinning relacionado con la regeneración tisular guiada.

Podemos observar que la tendencia es ascendente, es decir, que el número de artículos

publicados aumenta año tras año. Aunque los datos del 2018 no están actualizados.

Tras el estudio de su evolución, podemos deducir que seguirá aumentando su tendencia

en los próximos años, aunque poco a poco ya que es un tema relativamente nuevo que

empieza a despuntar.

Patentes.

El estudio de patentes incluye una tabla con las patentes y la información más importante

de cada una de ellas, acompañada de una imagen de la primera página de cada patente

de interés hallada, en la que se pueda observar el título, el tipo de patente, el año de

publicación y el resumen del contenido técnico (abstract). Los resultados se han ordenado

según el interés de los trabajos a desarrollar en el proyecto.

Los criterios para buscar, comprobar y seleccionar patentes han sido los siguientes:

0

5

10

15

20

25

30

35

40

2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 2015 2016 2017 2018

Electrospinning en Regeneración Tisular Guiada



13 | P á g i n a

− Tiempo: máximo 10 años de antigüedad (se consideran válidas las patentes

publicadas entre el 2008 y el 2018).

− Geografía: nacionales, europeas y también norteamericanas y mundiales

(WCT/WO).

− Keywords: electrospinning or electrospun or nanofiber and guided tissue

regeneration or guided bone regeneration.

Figura 2. Evolución del número de patentes basadas en el electrospinning (en general).

Figura 3. Patentes sobre el uso del electrospinning para la regeneración guiada de tejidos.



14 | P á g i n a

Los datos del 2018 no están actualizados; por lo que es un valor que no tendremos en

cuenta a la hora de determinar la tendencia. Podemos ver que el tema de electrospinning

en general es un tema que sigue creando patentes y cuya ascendencia se debe a la

multitud de aplicaciones que posee. En el campo del uso del electrospinning aplicado a la

regeneración de tejidos podemos ver cómo se mantiene relativamente estable.

Figura 4. Número de patentes por países sobre electrospinning para la regeneración

guiada de tejidos.

Se han utilizado herramientas de búsqueda de artículos y bases de datos como

pubmed.gov; así como herramientas de búsqueda y gestión de patentes como Google

Patents y Patent Inspiration.

Productos relacionados.

Se ha realizado un estudio sobre la recapitulación de productos existentes en el mercado

relacionados con la materia.

La búsqueda se refiere a membranas para el tratamiento de la enfermedad periodontal

basados en nanofibras y a membranas de origen animal. En dicho proceso se ha recopilado



15 | P á g i n a

la información existente y posteriormente se han valorado los pros y los contras de cada

producto.

El producto más destacado entre los diferentes productos analizados es la membrana

Activioss™ (Noraker).

Activioss™ es una membrana constituida por polímeros biorreabsorbibles sintetizados a

partir de ácido poliláctico y poliglicólico y presenta una estructura en doble capa. Esta

membrana posee doble capa para el tratamiento diferenciado de cada zona afectada pero

no contiene ningún fármaco para la diferenciación celular de osteoblastos y

cementoblastos.

Figura 5. Imagen de la membrana reabsorbible Activioss.



16 | P á g i n a

T1.2. Preparación de disoluciones poliméricas precursoras y protocolo de obtención.

En este apartado se han realizado dos líneas de investigación:

− Descripción de un protocolo de obtención (mediante las instrucciones pertinentes

para la preparación de disoluciones precursoras y soportes, descripción y

preparación de los equipos y sus operaciones, post-tratamientos, caracterización y

envasado)

− Cálculos, dosis y procesos necesarios para obtener las disoluciones poliméricas de

DL-PLG, con y sin aditivos (HIDROXIAPATITA o factor de crecimiento BMP-7);

necesarias para la producción de los velos de nanofibras que serán destinados a

cada cara del prototipo final mediante la tecnología de Electrospinning.

El polímero DL-PLG (50:50 Poly (DL-lactide-co-glycolide)) se trata de un copolímero de

ácido láctico y ácido glicólico terminado en un grupo éster. Es de base biológica y

biodegradable. Se utiliza en aplicaciones biomédicas. Los polímeros de PLG son

biodegradables, biocompatibles, no inmunogénicos y con perfiles de liberación

controlables que van desde varias semanas a meses.

La Hidroxiapatita es adecuadas para la fabricación de injertos óseos tales como sustitutos

óseos inyectables. Debido a su alta similitud con el mineral óseo, es altamente

osteostimulante, promoviendo la adhesión de las células óseas y la formación rápida de

hueso nuevo. Los dispositivos médicos fabricados hidroxiapatita permiten una

regeneración ósea rápida, segura y son altamente biocompatibles. El uso de estos

materiales no han desarrollado reacciones adversas. En aplicaciones periodontales y

maxilofaciales se utiliza para: relleno de defectos periodontales, relleno óseo alveolar,

aumento y elevación de la base sinusal, reconstrucción de los defectos del quiste

mandibular y huecos después de las extracciones de dientes

La Proteína Morfogenética Ósea 7 (BMP-7) es un potente modulador de la osteogénesis y

tiene propiedades osteoinductivas. Se encuentra en los tejidos óseos humanos. Una de las

principales metas de la terapia génica con BMP es la regeneración periodontal. Para la

diferenciación, la BMP-7 se une a receptores específicos de las células indiferenciadas y se

transmite la señal para la formación de hueso a través de las proteínas

Se han realizado distintas disoluciones. En primer lugar, se han probado distintas

configuraciones polímero-disolventes para seleccionar las candidatas a constituir cada cara

destinada a diferentes zonas periodontales y a albergar los aditivos propuestos. Una vez

definidos los polímeros óptimos a utilizar para cada cara, se ha procedido a electrohilar

una capa sobre otra para crear el velo de 2 caras obteniendo muestras sin aditivos

(control) y otras con los diferentes aditivos (Hidroxiapatita o BMP-7).



17 | P á g i n a

La finalidad de las mismas era aportar unas concentraciones determinadas de cada aditivo

a cada velo que compone el prototipo. Dichas concentraciones han sido determinadas por

profesores del Departamento de Patología de la Universitat de València Estudi General y

técnicos especializados de la Asociación de Investigación de la Industria Textil (AITEX).



18 | P á g i n a

II. OBTENCIÓN DE MUESTRAS Y PROTOTIPOS. OPTIMIZACIÓN

Los objetivos de este paquete de trabajo eran:

− Encontrar polímeros óptimos para el tratamiento de cada zona de la enfermedad

periodontal.

− Aditivar los velos de nanofibras con sales inorgánicas de calcio como la

Hidroxiapatita y con factores de crecimiento como la proteína BMP-7.

− Conseguir electrohilar velos de nanofibras compuesto por 2 capas aditivadas

distintas.

En primer lugar, se realiza una batería de muestras preliminares de velos de nanofibras

de una única capa a partir de diferentes disoluciones poliméricas. Se realizan muestras sin

fármaco y se caracterizan mediante microscopía electrónica de barrido (SEM). Tras la

caracterización de las muestras obtenidas, se seleccionan los mejores candidatos para

cada una de las caras y se realizan nuevas muestras para estudio de viabilidad celular.

Figura 6. Detalle del proceso de electrospinning.

Una vez definidas las disoluciones de las que se obtienen las muestras óptimas para utilizar

en cada cara del prototipo, se realizan pruebas de electrospinning para obtener velos de

nanofibras a 2 caras.



19 | P á g i n a

Posteriormente se realizan nuevas disoluciones, a partir de las seleccionadas como

óptimas para cada cara y se les añaden sus correspondientes aditivos para el tratamiento

de cada zona periodontal; produciéndose así nuevas muestras por cada cara por separado.

A dichas muestras se les realizan, de nuevo, estudios de Bioburden y Citotoxicidad.

El proceso se finaliza con la obtención de muestras o prototipos de velos de nanofibras a

2 caras, aditivados por principios activos distintos en cada una de ellas.

Lámina de corcho

Cara A (velo de

nanofibras de DL-PLG

con HA)

Cara B (velo de


con BMP-7)

Lámina de corcho

Figura 7. Esquema de prototipo formado por 2 velos de nanofibras aditivados. Imagen

SEM a 600x.

Cara A (velo de


con HA)

Zona de intersección

entre caras

Cara B (velo de


con BMP-7)

Figura 8. Esquema de prototipo formado por 2 velos de nanofibras aditivados. Imagen

SEM a 3000x.



20 | P á g i n a

III. CARACTERIZACIÓN DE MUESTRAS Y PROTOTIPOS.

Se realiza un estudio morfológico de cada muestra obtenida mediante la visualización a

través de un microscopio electrónico de barrido (SEM).

Figura 9. Detalle de las diferentes caras del prototipo formado por 2 velos de nanofibras

aditivados. Imágenes SEM a 3000x. Imagen Izquierda: Cara A (DL-PLG + HA) Imagen

derecha: Cara B (DL-PLG + BMP-7)

Por medio de un software de análisis de diámetros de nanofibras, se obtienen los

histogramas. Con ellos se determina que las nanofibras pertenecientes al prototipo final,

poseen un rango aproximado de diámetros (en ambas caras) entre los 500-950

nanómetros.

Ensayos BIOBURDEN

El ensayo se basa en las normas UNE-EN ISO 11737-1: 2007 + UNE-EN 11737-1:

2007/AC:2009 o en la Farmacopea Española o Europea.

El objetivo de este ensayo es determinar el número de microorganismos viables en el

producto, o crecimiento total de microorganismos, (recuento total de gérmenes aerobios

y de mohos y levaduras). Se evalúa de este modo la calidad sanitaria de los productos



21 | P á g i n a

analizados, además de las condiciones higiénicas de la materia prima y de la manipulación

del mismo previa a la esterilización.

En todas las muestras estudiadas los resultados están muy por debajo del nivel máximo

del requisito, por lo que cualquier muestra, con o sin acabado, de los velos de nanofibras

obtenidos cumplirían la norma UNE-EN 13795:2011+A1:2013.

Ensayos citotoxicidad

Se realiza según la norma UNE-EN ISO 10993-5:2009. Este ensayo evalúa el potencial

citotóxico de los productos. Este método ‘in vitro’ especifica la incubación de células de

cultivo en contacto con un producto y/o extractos de un producto durante un período de

tiempo, tras el cual se valora cuantitativa y cualitativamente la respuesta biológica de las

células.

Todas las muestras estudiadas cumplen exitosamente la norma UNE-EN ISO 10993-

5:2009 de citotoxicidad.



22 | P á g i n a

IV. VALIDACIÓN DE PROTOTIPOS.

Se han validado la citotoxicidad, biocompatibilidad y la funcionalidad de muestras y

prototipos mediante cultivos celulares in vitro.

Los estudios se han llevado a cabo con la colaboración entre el Departamento de Patología

de la Universitat de València y Aitex.

En este estudio se han empleado dos tipos celulares, ambos de origen humano:

• Células madre de pulpa dental humana (hDPSC).

• Células madre de ligamento periodontal (hPDLSC).

• Velos de DL-PLG con Hidroxiapatita (PLG-HA) sobre hDPSC:

Adhesión y morfología

Figura 10. Adhesión y crecimiento de células hDPSC sobre velos PLG-HA.

El crecimiento y la morfología de las células fueron normales durante los periodos de

cultivo empleados y, con las técnicas utilizadas, no se apreciaron alteraciones nucleares

ni citoplasmáticas. Como se observa, los resultados obtenidos fueron muy similares en

todas las réplicas del velo PLG‐HAp. Las células se adhirieron sobre los velos a las 4 horas

de la siembra. A partir de las 24 h se aprecia que adquieren una morfología elongada,

fibroblástica, por lo general más alargada que la de las células crecidas directamente sobre

el soporte de vidrio. La distribución de las células sobre la superficie de los velos no fue

homogénea, ya que se observaron frecuentemente zonas en que había una mayor

concentración de ellas, disponiéndose en cúmulos redondeados.



23 | P á g i n a

Proliferación

Figura 11. Proliferación de células hDPSC sobre velos PLG-HA.

Se observa una gran dispersión en los valores del número de células crecidas sobre los

velos. Una posible causa de los resultados observados podría ser el que las nano partículas

de hidroxiapatita interfiriesen en la proliferación celular, disminuyéndola. Si fuese así,

quizás este hecho está indicando que, positivamente, las células hDPSC están empezando

a entrar en la vía de diferenciación hacia osteoblastos, lo que podría ralentizar su velocidad

de proliferación y modificar su tamaño.

• Velos de DL-PLG con BMP-7 (PLG-BMP) sobre hPDLSC:

Adhesión y morfología.



24 | P á g i n a

Figura 12. Adhesión y crecimiento de células hPDLSC sobre velos PLG-BMP.

El crecimiento y la morfología de las células fueron normales durante los periodos de

cultivo empleados y, con las técnicas utilizadas, no se apreciaron alteraciones nucleares

ni citoplasmáticas. Las células se adhirieron sobre los velos a las 4 horas de la siembra. A

partir de las 24 h se aprecian adheridas tanto células pequeñas que mantienen una

morfología redondeada, poligonal, como células que se extienden sobre la superficie y

adquieren una morfología más fibroblástica. Es el velo PLG-BMP el que induce esta

morfología más extendida de las células hPDLSC, ya que las células que se cultivaron

durante 24 h sobre vidrio mantuvieron un aspecto homogéneo, siendo la morfología de

todas ellas redondeada, poligonal. Las células se distribuyen de forma homogénea por

toda la superficie del velo, sin que se observe ningún patrón determinado, por lo que se

supone que el BMP-7 quedaría distribuido homogéneamente a lo largo del velo de

nanofibras.

Proliferación

Figura 13. Proliferación de células hPDLSC sobre velos PLG-BMP.

Los resultados obtenidos fueron los esperados para el crecimiento de las células sobre un

soporte aditivado con BMP-7 y que no tiene efectos negativos sobre la proliferación celular.

Como se observa, la proliferación celular empezó a frenarse antes del último punto

experimental analizado (día 7 de cultivo), como cabía esperar, ya que las células presentan

inhibición por contacto y cada vez queda menos superficie libre del velo a la que puedan

adherirse las nuevas células generadas por división.



25 | P á g i n a

5.RESULTADOS OBTENIDOS



26 | P á g i n a

Se han obtenido los siguientes resultados:

• Tras numerosas pruebas con diferentes polímeros capaces de albergar fármacos

específicos en su interior y liberarlos controladamente, se ha escogido el DL-PLG

como óptimo para la producción y caracterización de los prototipos propuestos.

Figura 14. Adhesión y crecimiento de células hDPSC sobre velos PLG.

• Se han producido y validado, velos de nanofibras de DL-PLG con hidroxiapatita

(HA) en su interior, destinados a la regeneración ósea en la enfermedad

periodontal.

• Paralelamente se han producido y validado, velos de nanofibras de DL-PLG

aditivados con factores de crecimiento (BMP7) para regeneración del ligamento

periodontal y el cemento de la raíz dental.

• Tras caracterizaciones mediante ensayos BIO-BURDEN y de CITOTOXICIDAD, se

ha determinado que, tanto en el prototipo final como en cada uno de sus

componentes por separado, el producto tiene una viabilidad del 100% a nivel

celular y no presenta carga bacteriológica.

• Una vez optimizados los resultados de cada velo destinado a cada una de las caras

del prototipo final y conjugando ambos procesos, se ha logrado generar un

prototipo de velo de nanofibras a dos caras.

• Se ha evaluado, mediante ensayos in vitro, el efecto de los velos de electrospinning

en el tratamiento de la regeneración periodontal en términos de cultivos celulares.

Obteniendo velos de nanofibras aditivados no tóxicos, con viabilidad, adhesión

proliferación y diferenciación celular.



27 | P á g i n a

Figura 15. Velo de nanofibras aditivado a 2 caras (Imagen izq: vista macroscópica

superior, Imagen der: vista SEM 3000x de la sección transversal)



28 | P á g i n a

6.TRANSFERENCIA A EMPRESAS



29 | P á g i n a

En cuanto a la transferencia y promoción de resultados, se ha realizado una colaboración

con la empresa BioInica, S.L. con sede en la Comunidad Valenciana y perteneciente al

sector de los servicios técnicos de ingeniería. Está especializada en la ingeniería

biotecnológica dedicada al desarrollo, fabricación y comercialización de maquinaria y

servicios en el ámbito del procesado electro-hidrodinámico y/o aero-hidrodinámico, así

como la fabricación de producto farmacéutico, sanitario, biomédico, productos destinados

a alimentación y otros productos.

Participando en la siguiente fase del proyecto:

FASE 1: Preparación técnica del proyecto:

- Tarea 1.1. Actualización de conocimientos relacionados con la materia.

Revisión, validación y ampliación de la información generada en esta tarea mediante un

asesoramiento técnico sobre el proceso de producción. Para ello se han realizado

revisiones y actualizaciones en las formulaciones necesarias para poder aditivar las

disoluciones precursoras con adición de Hidroxiapatita o del factor de crecimiento BMP-7.

Se han mostrado nuevas configuraciones del equipo para obtener mayores producciones

de muestras en menor tiempo, mediante la instalación de cabezales multiaguja y la

recogida de los velos de nanofibras mediante un sistema de recolección a la continua.

Tras todo ello se ha realizado una puesta en marcha del equipo y una instrucción.

La empresa ha participado en la optimización del producto desde un punto de vista

productivo, teniendo presente la posibilidad de una futura producción y explotación del

producto.

La empresa ha ampliado su conocimiento respecto a la aplicación que puedan tener sus

equipos en el desarrollo de productos biomédicos para tratamientos de enfermedades

periodontales con aditivación de principios activos como la Hidroxiapatita y la proteína

BMP-7, además de nuevas configuraciones del equipo para optimizar el sistema de

producción de velos con varias capas. La empresa ha participado en la optimización del

producto desde un punto de vista productivo, teniendo presente la posible futura

producción y explotación del producto.



30 | P á g i n a

Figura 16. Vista general del útil multiaguja para el proceso de electrospinning.



31 | P á g i n a

7.COLABORADORES EXTERNOS

DESTACADOS



32 | P á g i n a

I. DEPARTAMENTO DE PATOLOGÍA DE LA UNIVERSITAT DE VALÈNCIA

El trabajo realizado por el Servicio Externo del Departamento de Patología de la Universtiat

de Velència (UV) ha sido la validación de las muestras y prototipos in vitro, que se

encuadra dentro de la FASE 4. “Validación de la biocompatibilidad y la funcionalidad de

muestras y prototipos”.

Dividiendo su trabajo en las siguientes tareas:

T.1. Estudio mediante cultivo celular in vitro de muestras sin aditivos y depositadas sobre

papel, tratadas y sin tratar con plasma. Se estudiarán 2 tipos de velos de nanofibras por

separado; uno para el tratamiento del hueso alveolar y otro para el de la zona del

ligamento periodontal y raíz dental. Se realizarán pruebas con células madre de pulpa

dental (hDPSC) y células de ligamento periodontal (hPLSC).

Velo

SALES

INORGÁNICAS

/ FACTOR DE

CRECIMIENTO

POLÍMERO CULTIVO

CELULAR MUESTRAS TOTAL

Muestra A No 1 hDPSC x 4

16 1’ hDPSC x 4

Muestra B No 2 hPLSC x 4

2’ hPLSC x 4

Cada muestra se ha ensayado por cuadruplicado (4 ensayos diferentes x 4 muestras = 16

muestras)

T.2. Estudio de los cultivos celulares para muestras optimizadas con aditivos añadidos.

Sobre la base de muestras seleccionada en el estudio anterior (tratamiento con plasma

según cultivo celular) se añaden fármacos para modificar el crecimiento celular y se

realizan nuevos ensayos.

Velo

SALES INORGÁNICAS / FACTOR DE

CRECIMIENTO

DISOLUCIÓN POLIMÉRICA

CULTIVO CELULAR

MUESTRAS TOTAL

Muestra A Sí 1 ó 1’ + HA hDPSC x 4

16 1 ó 1’ + TCP hDPSC x 4



33 | P á g i n a

Muestra B Sí

2 ó 2’ + FC hPLSC x 4

2 ó 2’ + FC + HA/TCP

hPLSC x 4

Siendo: HA (hidroxiapatita), TCP (sales de fosfato cálcico) y FC (factor de crecimiento).


muestras)

T.3. Estudio mediante cultivo celular in vitro de prototipos con aditivos y depositados sobre

papel, tratados con plasma. Se estudiarán los 2 tipos de velos de nanofibras en conjunto;

una cara para el tratamiento del hueso alveolar y la otra cara para el de la zona del

ligamento periodontal y raíz dental. Se realizarán pruebas con células madre de pulpa

dental (hDPSC) y células de ligamento periodontal (hPLSC) sobre el prototipo conjunto.

Velo

SALES INORGÁNICAS / FACTOR DE

CRECIMIENTO

DISOLUCIÓN POLIMÉRICA

CULTIVO CELULAR

MUESTRAS TOTAL

Prototipo Sí

(1 ó 1’ + HA) ó (1 ó 1’ + TCP)

hDPSC x 4

8 (2 ó 2’ + FC) ó (2 ó 2’ + FC +

HA/TCP) hPLSC x 4


muestras)

dentaltex - home - aitex...t1.1. actualización de conocimientos relacionados con la materia. los...

Documents