decision limit & detection capability
DESCRIPTION
Decision Limit & Detection Capability. CC a & CC b. Negative. Positive. Non-Compliant Compliant. Banned substances. Zero tolerance Not detectable Detection Limits ขึ้นอยู่กับวิธีทดสอบที่ใช้ ซึ่งแตกต่างกันในแต่ละห้องปฏิบัติการ - PowerPoint PPT PresentationTRANSCRIPT
1
Decision Limit
&
Detection Capability
2
CC
&
CC
3
Non-Compliant <----> Compliant
Positive Negative
4
• Zero tolerance
• Not detectable
• Detection Limits ขึ้��นอยู่��กับวิ ธี�ทดสอบท��ใช้�
ซึ่��งแตกัต�างกันในแต�ละห้�องปฏิ บต กัาร
• จึ�งมี�กัารกั%าห้นดมีาตรฐานเป(นค่�า Minimum
Required Performance Limit = MRPL
• Zero tolerance
• Not detectable
• Detection Limits ขึ้��นอยู่��กับวิ ธี�ทดสอบท��ใช้�
ซึ่��งแตกัต�างกันในแต�ละห้�องปฏิ บต กัาร
• จึ�งมี�กัารกั%าห้นดมีาตรฐานเป(นค่�า Minimum
Required Performance Limit = MRPL
Banned substancesBanned substances
5
Banned substancesBanned substances
• วิ ธี�ทดสอบขึ้องห้�องปฏิ บต กัารจึะต�องสามีารถทดสอบท��ระดบ MRPL ได�
• ตดส นวิ�าผล ตภัณฑ์0 Non-compliant เมี1�อค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นขึ้องสารในตวิอยู่�าง > CC
• ท��ระดบค่วิามีเช้1�อมี�น 99 % • ท��ระดบค่วิามีเช้1�อมี�น 99 %
6
New analytical limits:New analytical limits:
Limit of detection
Limit of quantification
CC - Decision Limit
CC - Detection Capability
XX
7
CC และ CCCC และ CC
• CC มีาจึากั critical concentration
• มีาจึากั alpha error
เป(นค่วิามีผ ดพลาดเน1�องจึากัตรวิจึพบ banned drug ในตวิอยู่�าง ท�งท��จึร งๆแล�วิไมี�มี� banned drug ในตวิอยู่�าง
False positive result
8
CC และ CCCC และ CC
• มีาจึากั beta error
เป(นค่วิามีผ ดพลาดเน1�องจึากัตรวิจึไมี�พบ banned drug ในตวิอยู่�าง ท�งท��จึร งๆแล�วิมี� banned drug ในตวิอยู่�าง
False negative result
9
CC และ CCCC และ CC
• น%ามีาใช้�ในกัารตดส นตวิอยู่�างวิ�าผ�านมีาตรฐานห้ร1อไมี� โดยู่
ประเมี นค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��ตรวิจึพบในตวิอยู่�างเท�ยู่บกับ CC
และ CC
10
- and ß-errors for banned compounds- and ß-errors for banned compounds
-error = 1 %
-error = 5 %
-error = 1 %
-error = 5 %
11
CCCC
ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��ท%าให้�เกั ดค่วิามีผ ดพลาดเท�ากับ ในกัารตรวิจึพบสารในตวิอยู่�าง
ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��ท%าให้�เกั ดค่วิามีผ ดพลาดเท�ากับ ในกัารตรวิจึพบสารในตวิอยู่�าง
12
Fre
qu
en
cy
ทดสอบ blank ห้ลายู่ๆ ซึ่%�าได�ค่�า responses ต�างๆ
Signal
13
Fre
qu
en
cy
XB
ค่�าเฉล��ยู่ขึ้อง response Normal distribution
Signal
14
Fre
qu
en
cy
XB
ค่�าเฉล��ยู่ + 2.33 SD
Signal
= 1 %
CC
15
Fre
qu
en
cy
XB CC
blank samples จึ%านวิน1% ท��ให้�ผลทดสอบมี�ค่�า > CC
Signal
16
Fre
qu
en
cy
XB CC
ซึ่��งเป(น false positive results (> Zero)
-Error = 1%
Signal
17
Decision Limit - banned substancesDecision Limit - banned substances
CC มี�ค่�ามีากักัวิ�า 0 และน�อยู่กัวิ�า MRPL
18
Fre
qu
en
cy
XB CC
Signal
19
Fre
qu
en
cy
CC
ตวิอยู่�างท��มี�ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นเฉล��ยู่ = CC
Signal
20
Fre
qu
en
cy
CC
50 % ตรวิจึไมี�พบสาร50 % ตรวิจึไมี�พบสาร
Signal
21
Fre
qu
en
cy
CC
50 % ตรวิจึพบสาร50 % ตรวิจึพบสาร
Signal
22
Banned substancesBanned substances
ท��ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น CC
False negative rate = 50%
23
ท��ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นขึ้อง banned drug เท�าไรท��มี�นใจึได� 95% วิ�าผลทดสอบตวิอยู่�างไมี�ผ�านมีาตรฐาน
ท��ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นขึ้อง banned drug เท�าไรท��มี�นใจึได� 95% วิ�าผลทดสอบตวิอยู่�างไมี�ผ�านมีาตรฐาน
ถามี:ถามี:
ตอบ:ตอบ:
ท��ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น Detection Capability (CC)
ท��ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น Detection Capability (CC)
24
CC-banned substanceCC-banned substance
ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��วิ ธี�ทดสอบสามีารถตรวิจึพบ banned drug ได�อยู่�างแท�จึร ง โดยู่มี�ค่วิามีมี�นใจึ 95%
ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��วิ ธี�ทดสอบสามีารถตรวิจึพบ banned drug ได�อยู่�างแท�จึร ง โดยู่มี�ค่วิามีมี�นใจึ 95%
25
Fre
qu
en
cy
CC
Signal
26
Fre
qu
en
cy
CC
< 50 % ตรวิจึไมี�พบสาร< 50 % ตรวิจึไมี�พบสาร
Signal
27
Fre
qu
en
cy
CC
<< 50 % ตรวิจึไมี�พบสาร<< 50 % ตรวิจึไมี�พบสาร
Signal
28
Fre
qu
en
cy
CCCC
Signal
5 % ตรวิจึไมี�พบสาร = false negative results
5 % ตรวิจึไมี�พบสาร = false negative results
29
Banned substancesBanned substances
ท��ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น CC
False positive rate = น�อยู่มีากัๆ
False negative rate = 5%
(และ CC จึะต�อง < MRPL)
30
กัารห้าค่�า CCและ CC-banned drugกัารห้าค่�า CCและ CC-banned drug
• สามีารถท%าได� 2 วิ ธี�
1. ทดสอบ fortified sample blank 3
ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น ห้ร1อ
2. ทดสอบ sample blank
31
กัารห้าค่�า CC- วิ ธี�ท�� 1กัารห้าค่�า CC- วิ ธี�ท�� 1
• Fortify negative matrix ท��ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น
1.0, 1.5 และ 2 เท�าขึ้อง MRPL
• ทดสอบแต�ละค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น 7 ซึ่%�า
• ทดสอบเช้�นน��อ�กั 2 ค่ร�ง ในวินท��แตกัต�างกัน
• เขึ้�ยู่นกัราฟระห้วิ�าง signal (แกัน Y) กับค่วิามี
เขึ้�มีขึ้�นท�� fortify (แกัน X)
32
Calibration line
1.0 x MRPL 2.0 x MRPL1.5 x MRPL
Sig
nal
S.D. of the within-laboratory
reproducibility
331.0 x MRPL
Calibration line
2.0 x MRPL1.5 x MRPL
ค่%านวิณ SE ขึ้อง intercept
Sig
nal
341.0 x MRPL
Calibration line
2.0 x MRPL1.5 x MRPL
ค่�ณ SE ด�วิยู่ 2.33 (1%, one sided)
Sig
nal
351.0 x MRPL
Calibration line
2.0 x MRPL1.5 x MRPL
CC ค่1อค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��ได�จึากั signal ท��มี�ค่�าเท�ากับ(Intercept) + (2.33 x SE of the within laboratory reproducibility of the intercept)
CC ค่1อค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��ได�จึากั signal ท��มี�ค่�าเท�ากับ(Intercept) + (2.33 x SE of the within laboratory reproducibility of the intercept)
Intercept +(2.33 x SEInt)
CC
Sig
nal
CC = ( 2.33SEintercept ) / slope
CC = ( 2.33SEintercept ) / slope
36
กัารห้าค่�า CC – วิ ธี�ท�� 1กัารห้าค่�า CC – วิ ธี�ท�� 1
• Fortify negative matrix ท��ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นน�อยู่
กัวิ�าและเท�ากับ MRPL โดยู่แบ�งช้�วิงห้�างเท�าๆ กัน
• เขึ้�ยู่นกัราฟระห้วิ�าง signal (แกัน Y) กับค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น
ท�� fortify (แกัน X)
• CC = ( 2.33SEintercept + 1.64SECC ) /
slope
370.33 x MRPL
Calibration line
1.00 x MRPL0.66 x MRPL
CC ค่1อค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��ได�จึากั Signal ท��มี�ค่�าเท�ากับ (signalขึ้อง CC) + (1.64 x SE ขึ้อง W/L reproducibility at CC)
CC ค่1อค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��ได�จึากั Signal ท��มี�ค่�าเท�ากับ (signalขึ้อง CC) + (1.64 x SE ขึ้อง W/L reproducibility at CC)
CC
Signal at CC +1.64 x SE ขึ้อง W/L reproducibility at CC
CC
Sig
nal
38
• ทดสอบ sample blank 20 ซึ่%�า
• ค่%านวิณ S : N ratio
• CC เท�ากับ 3 เท�าขึ้อง S : N ratio
กัารห้าค่�า CC- วิ ธี�ท�� 2กัารห้าค่�า CC- วิ ธี�ท�� 2
39
• ทดสอบ fortified sample blank ท��ค่วิามี
เขึ้�มีขึ้�นเท�ากับ CC 20 ซึ่%�า
• CC= CC + 1.64 S.D.
กัารห้าค่�า CC – วิ ธี�ท�� 2กัารห้าค่�า CC – วิ ธี�ท�� 2
40
• ทดสอบ sample blank 20 ซึ่%�า ค่%านวิณค่�าเฉล��ยู่ขึ้อง response ( n) และ SDขึ้อง response (SDn)
• ทดสอบ fortified sample blank 21 ซึ่%�า
ค่%านวิณ RSD ขึ้อง response (RSDs)
• slope จึากั calibration curve = a
กัารห้าค่�า CC และ CC – วิ ธี�ท�� 3กัารห้าค่�า CC และ CC – วิ ธี�ท�� 3
41
• CC = 2.33 (SDn) / a
• CC = 2.33 (SDn) + 1.64 (n)
(RSDs)
a [ 1 – 1.64 (RSDs) ]
กัารห้าค่�า CC และ CC – วิ ธี�ท�� 3กัารห้าค่�า CC และ CC – วิ ธี�ท�� 3
42
ตรวิจึสอบวิ ธี�ทดสอบท��ใช้�วิ�าสามีารถทดสอบท��ระดบ MRPL (ห้ร1อต%�ากัวิ�า) ได�ห้ร1อไมี�ตรวิจึสอบวิ ธี�ทดสอบท��ใช้�วิ�าสามีารถทดสอบท��ระดบ MRPL (ห้ร1อต%�ากัวิ�า) ได�ห้ร1อไมี�
Chloramphenicol (MRPL = 0.3
µg/kg)
• ทดสอบ sample blank และ fortified sample blank ท��ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นต�างๆ ดงน�� 0.10, 0.20, 0.30,
0.45, 0.60 µg/kg }
> MRPL
}< MRPL
43
ตรวิจึสอบวิ ธี�ทดสอบท��ใช้�วิ�าสามีารถทดสอบท��ระดบ MRPL (ห้ร1อต%�ากัวิ�า) ได�ห้ร1อไมี�ตรวิจึสอบวิ ธี�ทดสอบท��ใช้�วิ�าสามีารถทดสอบท��ระดบ MRPL (ห้ร1อต%�ากัวิ�า) ได�ห้ร1อไมี�
• ทดสอบแต�ละค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น 7 ซึ่%�า
• ทดสอบเช้�นน��อ�กั 2 ค่ร�ง ในวินท��แตกัต�างกัน
• ตรวิจึสอบ accuracy และ precision
44
ผลกัรณ�ท�� 1ผลกัรณ�ท�� 1
Content (µg/kg)
Number confirmed (out of 21)
0.10 210.20 210.30 210.45 210.60 21
Q. What is CCß?
A. < 0.1 µg/kg
45
Content (µg/kg)
Number confirmed (out of 21)
0.10 210.20 210.30 210.45 210.60 21
Q. Is method fit-for-purpose?
A. Yes. CC is less than MRPL.
ผลกัรณ�ท�� 1ผลกัรณ�ท�� 1
46
Q. What is CCß?
A. ~0.20 µg/kg
Content (µg/kg)
Number confirmed (out of 21)
0.10 140.20 200.30 210.45 210.60 21
ผลกัรณ�ท�� 2ผลกัรณ�ท�� 2
47
Content (µg/kg)
Number confirmed (out of 21)
0.10 140.20 200.30 210.45 210.60 21
Q. Is method fit-for-purpose?
A. Yes. CC is less than MRPL.
ผลกัรณ�ท�� 2ผลกัรณ�ท�� 2
48
Content (µg/kg)
Number confirmed (out of 21)
0.10 80.20 120.30 170.45 210.60 21
Q. What is CCß?
A. 0.30 - 0.45 µg/kg
ผลกัรณ�ท�� 3ผลกัรณ�ท�� 3
49
Content (µg/kg)
Number confirmed (out of 21)
0.10 80.20 120.30 170.45 210.60 21
Q. Is method fit-for-purpose?
A. No. CC is greater than MRPL.
ผลกัรณ�ท�� 3ผลกัรณ�ท�� 3
50
Licensed substancesLicensed substances
• กั%าห้นดมีาตรฐานเป(นปร มีาณตกัค่�างส�งส8ดใน
ผล ตภัณฑ์0 ( Maximum Residue Limit = MRL
)
• วิ ธี�ทดสอบขึ้องห้�องปฏิ บต กัารจึะต�องสามีารถทดสอบ
ท��ปร มีาณ MRL ได�• ตดส นวิ�าผล ตภัณฑ์0 Non-compliant เมี1�อค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นขึ้องสารในตวิอยู่�าง > CC
• ท��ระดบค่วิามีเช้1�อมี�น 95 % • ท��ระดบค่วิามีเช้1�อมี�น 95 %
51
- and ß-errors for licensed compounds- and ß-errors for licensed compounds
-error = 5 %
-error = 5 %
-error = 5 %
-error = 5 %
52
Fre
qu
en
cy
XB
CC
Signal
XPL XS
SPL 1.64SS
CCPL
53
กัารห้าค่�า CCและ CC-licensed drugกัารห้าค่�า CCและ CC-licensed drug
• สามีารถท%าได� 2 วิ ธี�
1. ทดสอบ fortified sample blank 3
ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น ห้ร1อ
2. ทดสอบ fortified sample blank เพ�ยู่ง
ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นเด�ยู่วิ
54
กัารห้าค่�า CC- วิ ธี�ท�� 1กัารห้าค่�า CC- วิ ธี�ท�� 1
• Fortify negative matrix ท��ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น
ใกัล�เค่�ยู่งกับ PL โดยู่แบ�งช้�วิงห้�างเท�าๆ กัน
• ทดสอบแต�ละค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น 7 ซึ่%�า
• ทดสอบเช้�นน��อ�กั 2 ค่ร�ง ในวินท��แตกัต�างกัน
• เขึ้�ยู่นกัราฟระห้วิ�าง signal (แกัน Y) กับค่วิามี
เขึ้�มีขึ้�นท�� fortify (แกัน X)
55
กัารห้าค่�า CC- วิ ธี�ท�� 1กัารห้าค่�า CC- วิ ธี�ท�� 1
CC ค่1อค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��ได�จึากั Signal ท��มี�ค่�าเท�ากับ
(signal ขึ้อง PL) + (1.64 x SE ขึ้อง W/L
reproducibility)
CC ค่1อค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��ได�จึากั Signal ท��มี�ค่�าเท�ากับ
(signal ขึ้อง PL) + (1.64 x SE ขึ้อง W/L
reproducibility)
56
กัารห้าค่�า CC – วิ ธี�ท�� 1กัารห้าค่�า CC – วิ ธี�ท�� 1
• Fortify negative matrix ท��ค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น
ใกัล�เค่�ยู่งกับ PL โดยู่แบ�งช้�วิงห้�างเท�าๆ กัน
• ทดสอบแต�ละค่วิามีเขึ้�มีขึ้�น 7 ซึ่%�า
• ทดสอบเช้�นน��อ�กั 2 ค่ร�ง ในวินท��แตกัต�างกัน
• เขึ้�ยู่นกัราฟระห้วิ�าง signal (แกัน Y) กับค่วิามี
เขึ้�มีขึ้�นท�� fortify (แกัน X)
57
กัารห้าค่�า CC – วิ ธี�ท�� 1กัารห้าค่�า CC – วิ ธี�ท�� 1
CC ค่1อค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��ได�จึากั Signal ท��มี�ค่�าเท�ากับ
(signalขึ้อง CC) + (1.64 x SE ขึ้อง W/L
reproducibility at CC)
CC ค่1อค่วิามีเขึ้�มีขึ้�นท��ได�จึากั Signal ท��มี�ค่�าเท�ากับ
(signalขึ้อง CC) + (1.64 x SE ขึ้อง W/L
reproducibility at CC)
58
• ทดสอบ fortified sample blank 20 ซึ่%�า
• CC = MRL + 1.64SD
กัารห้าค่�า CC- วิ ธี�ท�� 2กัารห้าค่�า CC- วิ ธี�ท�� 2
59
• ทดสอบ fortified sample blank ท��ค่วิามี
เขึ้�มีขึ้�นเท�ากับ CC 20 ซึ่%�า
• CC= CC + 1.64 S.D.
กัารห้าค่�า CC – วิ ธี�ท�� 2กัารห้าค่�า CC – วิ ธี�ท�� 2