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Criopreservação do sêmen canino
Criopreservação do sêmen canino
UENFProfª Isabel Candia Nunes da Cunha
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Inseminação ArtificialInseminação Artificial
Refrigeração e Congelamento de SêmenRefrigeração e Congelamento de Sêmen
Obtenção dos Oócitos, MIV, FIV e CIVObtenção dos Oócitos, MIV, FIV e CIV
Criopreservação de oócitos e embriõesCriopreservação de oócitos e embriões
Injeção Intracitoplasmática de Espermatozóides Injeção Intracitoplasmática de Espermatozóides
Conservação dos ováriosConservação dos ovários
Biotecnologias que podem ser aplicadas à reprodução caninaBiotecnologias que podem ser aplicadas à reprodução canina
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Inseminação artificialé a biotécnica mais
procurada por
proprietários de cães
Inseminação artificialé a biotécnica mais
procurada por
proprietários de cães
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Possibilita reprodução entre animais com alterações de comportamento
Supera particularidades raciais que possam dificultar a monta
Possibilita a utilização de técnicas de reprodução assistida
Favorece o melhoramento genético rápido e eficiente
Proporcionar acasalamentos genéticos dirigidos
VantagensVantagensda IA em da IA em
cãescães
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Controle de doenças
Prevenção de acidentes que podem ocorrer com a fêmea quando o macho é muito pesado ou agressivo
Uso de machos com problemas adquiridos e impossibilitados de efetuarem a monta
Possibilita acasalamento entre animais que vivem em regiões distantes
Aumento do número de descendentes de um cão
Uso de machos após a morte
VantagensVantagensda IA em da IA em
cãescães
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Sucesso em uma IASucesso em uma IA
Óvulo
EspermatozóideEspermatozóide
Encontro dos gametas
Fertilização
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Fases do Ciclo EstralFases do Ciclo Estral
Proestro
Estro
Diestro
Anestro
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Ciclo Estral nas CadelasCiclo Estral nas Cadelasespermatozóides são capazes de fertilizar por mais de 4 - 6 dias
proestroproestro estro (dias)estro (dias) diestrodiestro0 \ 1 \ 2 \ 3 \ 4 \ 5 \ 6 \ 7 \ 8
proge
steron
a
estrógeno
pico LH
2 diasOvulações ocorrem durante 24 - 96 h
Ovócitos primários levam de 24 - 48 h para se capacitar
Cada óvulo é fertilizável por um período de 12 a 24h
Adaptado de Nelson e Feldman (1996)
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Métodos de Detecção da ovulação
Métodos de Detecção da ovulação
Comportamento
Citologia Vaginal
Vaginoscopia
Dosagem de progesterona
Ultra-sonografia
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Inseminação Artificial em Cães
Inseminação Artificial em Cães
É a deposição do sêmen no interior do É a deposição do sêmen no interior do trato reprodutivo da fêmeatrato reprodutivo da fêmea
sêmen fresco
sêmen refrigerado
sêmen congelado
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Inseminação Artificial com Sêmen à Fresco
Inseminação Artificial com Sêmen à Fresco
Sêmen não diluídoforma mais comumtaxa de concepção de 75 a 80%
Sêmen diluídoenriquecimento do sêmen para prolongar a sua viabilidade para 12 a 48hAumenta o volume do ejaculado
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Protocolo para IA com sêmen à fresco
Protocolo Protocolo para IA com sêmen à frescopara IA com sêmen à fresco
detecção do momento da ovulaçãodetecção do momento da ovulação•inseminar no pico céls. Superficiais•repetir a cada 48h
•avaliação• volume de 5 a 10 ml •dose inseminante de 150 milhões de sptz. viáveis
coleta e avaliação do sêmen coleta e avaliação do sêmen
•posteriores da fêmea elevados durante 15 minutos
inseminação no fundo de vagina inseminação no fundo de vagina
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Inseminação Artificial em Cães
Inseminação Artificial em Cães
É a deposição do sêmen no interior do É a deposição do sêmen no interior do trato reprodutivo da fêmeatrato reprodutivo da fêmea
sêmen fresco
sêmen refrigerado
sêmen congelado
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Finalidades da criopreservaçãoFinalidades da criopreservação
Baixa metabolismo espermático
Aumenta sobrevida do sêmen
Utilização do sêmen no momento desejado
Refrigerado ou CongeladoRefrigerado ou Congelado
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Utilidade do sêmen criopreservado
Utilidade do sêmen criopreservado
Mercado PET
Animais que vivem em locais distantes
Utilização de material genético de alto valor zootécnico
Reserva biológica de machos melhoradores
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Utilidade do sêmen criopreservado
Utilidade do sêmen criopreservado
Preservação animal
Reserva biológica do país
FrozenZoo
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Refrigeração do sêmen de cãoRefrigeração do sêmen de cão
Menores danos à integridade da célula
Sêmen de cão reaquecidoSêmen de cão reaquecido
Alta fertilidadeAlta fertilidadeCurto tempo de preservação!Curto tempo de preservação!
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Congelação do sêmen de cãoCongelação do sêmen de cão
Longo período de conservação
Maiores danos à integridade da célula
Sêmen de cão descongeladoSêmen de cão descongelado
Baixa fertilidadeBaixa fertilidadeCurto tempo de utilização!Curto tempo de utilização!
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Refrigeração do sêmen de cãoRefrigeração do sêmen de cãoManutenção do sêmen a uma temperatura de 5ºC por no máximo 72h
Ideal para o transporte de sêmen
Menores danos à integridade da célula
Taxas de concepção de aproximadamente 80%
Manejo do ciclo estral e técnica de inseminação mais fáceis e baratos
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Inseminação Artificial com Sêmen Congelado
Inseminação Artificial com Sêmen Congelado
Manutenção do sêmen a temperatura de -196ºC por período de tempo indefinido
Baixas % de motilidade ao descongelamento
Diluídor adequado que deve conter crioprotetor
Dose inseminante de 150 milhões de sptz. viáveis
Sobrevida de 18 a 24 horas após o descongelamento
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Técnicas de deposição do Sêmen no Trato Reprodutivo da cadela
Técnicas de deposição do Sêmen no Trato Reprodutivo da cadela
Fundo de Vagina- com pipeta plástica rígida e seringa plástica *
Transcervical – catéter Norueguês *
Endoscopia - utilizado para a cateterização cervical*
Intra uterina - laparoscopia ou laparotomia*
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Taxas de concepção com sêmen congelado
Taxas de concepção com sêmen congelado
IA intra vaginal - 0 a 60%
IA intrauterina - 46 a 83%
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Preparo do sêmen canino para o transporte
Preparo do sêmen canino Preparo do sêmen canino para o transportepara o transporte
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Transporte do sêmen refrigeradoTransporte do sêmen refrigeradoSoluciona problemas de distância entre a Matriz e o Reprodutor
Possibilita várias inseminações em um mesmo ciclo com uma coleta de sêmen
Mais de uma cadela pode ser inseminada com uma mesma remessa de sêmen
Amplia a diversidade racial e familiar em uma região longínqua do país
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Transporte do sêmen refrigeradoTransporte do sêmen refrigerado
Evita a quarentena e diminui o contágio de doenças
Possibilita o transporte de sêmen de animais de cativeiro entre zoológicos.
Possibilita remessa de sêmen para análise em centros distantes de onde se encontra o macho
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Diluidores para transporte de sêmen canino
Diluidores para transporte Diluidores para transporte de sêmen caninode sêmen canino
TRIS sem glicerol
Glicina Gema sem Glicerol
Meio á base de leite desnatado e glicose
(Cunha, 1997; Rota, 1997)
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Diluidor á base de leite desnatado e glicose (Kenney, 1975)
Diluidor á base de leite desnatado e glicose Diluidor á base de leite desnatado e glicose (Kenney, 1975)(Kenney, 1975)
Glicose..........................................................4,9gLeite Molico...................................................2,4gBicarbonato de sódio (solução a 7,5%).........2mlSulfato de gentamicina (50mg/ml).................2mlÁgua destilada..............................................92ml
Osmolaridade = 375 ± 2pH= 6,99 ± 0,02
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Cuidados com o equipamento para o transporte sêmen
Cuidados com o equipamento para o transporte Cuidados com o equipamento para o transporte sêmensêmen
O sêmen deve ser acondicionado em recipientes resistentes.
A temperatura do equipamento de transporte não pode ser NUNCA inferior a zero.
Deve haver um sistema de refrigeração para manter e a temperatura entre (0 a 18ºC).
O equipamento de transporte deve indicar o seu conteúdo diminuindo o risco de que este seja violado.
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Transporte de sêmen
refrigerado
Transporte de Transporte de sêmen sêmen
refrigeradorefrigerado
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Transporte de sêmen refrigerado
Transporte de sêmen Transporte de sêmen refrigeradorefrigerado
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Os tubos de transporte devem ser devidamente
marcados com:
Doador (nome do certificado)
Raça
Diluidor utilizado
Data e hora da coleta
Local da coleta
Veterinário responsável
Identificação do sêmen para o transporte sêmen
Identificação do sêmen para o Identificação do sêmen para o transporte sêmentransporte sêmen
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O Veterinário responsável pela O Veterinário responsável pela
refrigeração deverá expedir um relatório refrigeração deverá expedir um relatório
detalhado do processo de refrigeração, detalhado do processo de refrigeração,
facilitando, desta forma, a correta facilitando, desta forma, a correta
utilização do sêmen pelo Veterinário que utilização do sêmen pelo Veterinário que
realizará as IAs.realizará as IAs.
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O doador de sêmen e a matriz deverão atender as
exigências genéticas, zootécnicas, sanitárias
(Brucelose e Leptospirose com validade de 30 dias) ,
andrológicas e de identificação segundo o CBKC.
O doador e a matriz devem ter certificado de DNA
expedido por laboratório credenciado pelo CBKC.
Exigências do CBKC para o transporte sêmen
Exigências do CBKC para o Exigências do CBKC para o transporte sêmentransporte sêmen
CBKC – Confederação Brasileira de Cinofilia
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LaparotomiaLaparotomiaLaparotomia
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LaparoscopiaLaparoscopiaLaparoscopia
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