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Controle biológico com uso do baculovirus: segurança e futuro dos bioinseticidas
Dr. Fernando Hercos Valicente
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Embrapa Milho e Sorgo
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Controle Biológico com Baculovirus
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Segurança
• De acordo com OECD (2002) Organization for Economic Cooperation and Development:
• Baculoviruses são vírus específicos de artrópodes, não causam dano e, são incapazes de replicar em microrganismos, culturas de células de não insetos invertebrados, cultura de células de vertebrados e plantas (foram testados em pardais, ratos e organismos não alvo – e.g. insetos predadores)
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De 1985 a 1989 – Amostragem no estado de Minas Gerais – mais de 14.000 lagartas
Parasitoides e vários isolados de baculovirus
De 1993 a 1995 – Amostragem no Oeste do Paraná - vários isolados de baculovirus
Histórico
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NPV Baculovirus – Spodoptera frugiperda
S. eridania e S. cosmioides
Chrysodeixis includens – falsa medideira
Helicovera armigera
H. zea
Diatraea saccharalis
Heliothis virescens
Coleção de Baculovirus
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Pragas milho, soja, algodão etc Sistema produtivo
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Patógenos Vírus, bactérias, fungos
etc
Parasitoides
Predadores Posicionamento
Controle Biológico
Uso de inimigos naturais no controle de pragas, sem o uso de defensivos químicos.
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Manejo Helicoverpa
armigera
Soja
Milho
Transgênicos
Ex. Soja Intacta
Algodão
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Lagarta do
cartucho
Plantio direto
Ponte verde
Tratamento de
sementes
safrinha
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Produtos Biológicos
• Metodologia de trabalho: deve ser definida para cada agente biológico.
– Ex: Baculovirus – quando se fizer coleta no campo, individualizar lagartas. Isolados de baculovirus podem ter características diferentes e, devem ser testados isoladamente.
• Indústria quando iniciar um trabalhar com um agente biológico – ajustar metodologia de avaliação em laboratório e em campo.
– EX: se repassar para outra empresa testar para fins de registros– ajustar metodologia antes.
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• Baculovirus: aplicar o produto e coletar lagartas 24, 48 e 72h após a aplicação, trazer para laboratório – observar até 15 dias após a coleta
• Usam metodologia de avaliação de inseticidas químicos
Ex: 7, 14 e 21 dias após a aplicação = ERRADO
• “Respeitar” o agente com o qual se trabalha
– Vírus # Fungos # Bactérias # inoculantes etc...
Produtos Biológicos
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- No caso de mistura de agentes biológicos:
E.g. se forem 2 baculovirus – multiplicar separadamente
e depois misturar o produto final. NUNCA misturar antes e
multiplicar na lagarta – um isolado se desenvolve mais rápido
- No produto final – testar as várias proporções – NÃO
colocar dose cheia de cada produto – parte será desperdiçada.
Produtos Biológicos
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• Relatórios de empresas que fazem testes sem saber como avaliar:
– E.g. Se não houve diferença significativa entre tratamentos.... NÃO houve diferença.
Produtos Biológicos
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Perda de apetite
• Podem reduzir a alimentação em 93%
Redução na mobilidade
• Corpo flácido e aparência oleosa
Descoloração do corpo
• Morrem dependuradas pelas patas abdominais
Sintomas causados por baculovirus
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Baculovirus – Chrysodeixis includens – falsa medideira
ISOLADO 15
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0
20
40
60
80
100
120
15
D 1
0^6
25
°C
16
D 1
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25
C°
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25
°C
18
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19
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0^6
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28
C°
16
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C°
17
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28
C°
18
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0^6
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C°
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D 1
0^6
28
C°
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D 1
0^7
25
C°
16
D 1
0^7
25
C°
17
D 1
0^7
25
C°
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D 1
0^7
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C°
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25
C°
15
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0^7
28
C°
16
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C°
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28
C°
18
D 1
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28
C°
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D 1
0^7
28
C°
Mo
rtal
idad
e(%
) Mortalidade da falsa medideira com isolado 15
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Baculovirus – Helicoverpa armigera
• Praga importante de algodão, soja, milho e olerícolas
• Pode ser produzido em laboratório
• Tese de mestrado – Identificação e
sequenciamento de baculovirus de H. armigera
H. zea
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Isolate Number
of larvae
Slope ± SE X² CL50 Limites = P0 P G
Gemstar 192 1.3984 ± 0.2988 8.6068 7.2 x 104 2.1 x 104 – 2.0 x 105 <0.001 4
BR1 192 1.2791 ± 0.1818 4.5663 8.0 x 104 4.8 x 104 – 1.2 x 105 <0.001 4
BR2 192 0.9123 ± 0.1386 4.0808 4.1 x 104 1.9 x 104 – 7.5 x 104 <0.001 4
BR3 192 0.9754 ± 0.1769 8.5379 3.5 x 105 1.0 x 105 – 1.3 x 106 <0.001 4
BR4 192 0.9373 ± 0.1606 8.1627 5.0 x 105 1.4 x 105 – 1.8 x 106 <0.001 4
Response Concentration and Mortality of Third Instar Helicoverpa armigera (Lepidoptera: Noctuidae) Larvae with Nucleopolyhedrovirus Isolates
Slope ± SE, standard error
X², chi-square
LC50, average lethal concentration (concentration of polyhedra accounting for 50% mortality of the insects tested)
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Baculovirus spodoptera
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Produção “on farm”
Legal Risco
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Produção de Baculovirus “on farm”
• Infeliz ideia de vender facilidade
• Laboratório completo
• Multiplicação em folhas – problemas com fungos - umidade
• Higienização e não contaminação das matrizes sadias
• Pode “queimar” o uso dos produtos biológicos
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Produção em larga escala de Baculovirus
Salas com controle de temperatura, umidade, períodos de luz e escuro
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Criação artificial
Fotos: Victor Hugo Duarte da Costa
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Diferentes formulações
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Baculovirus – isolado 6 e isolado 19
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Peso Equivalente
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Lagarta Equivalente
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Avaliação do baculovirus para Spodoptera frugiperda (LAB)
Avaliação com folha Avaliação com dieta Usar espalhante
adesivo
Dieta sem formol e sem Nipagin
Avaliação direta
Lagartas devem ser mantidas separadamente para avaliação Todas lagartas quando contaminadas com baculovirus – tendências ao canibalismo
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92,5
67,5
35,9
54,8
100,0
92,3
77,8
68,4
Mortalidade (%)
Spodoptera frugiperda
T1: Algodão Convencional 10^8 com tampão T2: Algodão Convencional 10^8 sem tampão
T3:Algodão Convencional 10^6 com tampão T4:Algodão Convencional 10^6 sem tampão
T5: Algodão Transgênico 10^8 com tampão T6: Algodão Transgênico 10^8 sem tampão
T7:Algodão Transgênico 10^6 com tampão T8: Algodão Transgêncio 10^6 sem tampão
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Experimentos de campo
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Equipamentos para aplicação
• Sucesso de um biopesticida depende de vários fatores. Fatores NÃO controláveis:
– E.g. temperatura, umidade, luminosidade, pluviosidade etc
• Controláveis: concentração do produto, volume de calda, pureza, formulação, época e horas de aplicação, equipamento etc
• Mas... Basicamente equipamentos são os mesmos dos produtos químicos
• Resultados negativos podem ser devidos a uma aplicação mal planejada – uso de equipamento não adequado
– Ex: velocidade do trator, volume de calda etc
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Productos registrados – Baculovirus
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Obrigado!!! [email protected]