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CLONACION DE TEJDOS Y DE EMBRIONES HUMANOS CLONACION 1. La clonación. 1.1. ¿Qué es la clonación? La clonación es la acción de reproducir a un ser de manera perfecta en el aspecto fisiológico y bioquímico de una célula originaria, esta definición quiere decir que a partir de una célula de un individuo se crea otro exactamente igual al anterior, ya que los caracteres que puede mostrar un ser humano se deben a los genes que ha heredado de los progenitores. Mediante la clonación se obtiene que el individuo tenga los mismos genes que el padre o la madre, la reproducción sexual se sustituye por la reproducción artificial, pero los genes los aporta una única persona, el individuo tendrá los mismos genes, pero está demostrado científicamente, que es posible que sus rasgos puedan oscilar. 1.2. Antecedentes Hace más de veinte años los científicos estudiaban sobre la clonación. En 1938 Los primeros experimentos con huevos fecundados de salamandra, fueron realizados por el zoólogo alemán Hans Spemann, luego tuvieron éxito los biólogos americanos Robert Briggs y Thomas King que clonaron por primera vez una rana en 1952. Unos años más tarde, en febrero de 1997, un grupo de genetistas anunciaron que habían clonado una oveja llamada Dolly, que era exactamente igual a su madre. Esta oveja que nació el cinco de Julio de 1996, se convirtió en el primer mamífero clonado. 1.3. Cronología.

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CLONACION DE TEJDOS Y DE EMBRIONES HUMANOS

CLONACION

1. La clonación.

1.1. ¿Qué es la clonación?

La clonación es la acción de reproducir a un ser de manera perfecta en el aspecto fisiológico y bioquímico de una célula originaria, esta definición quiere decir que a partir de una célula de un individuo se crea otro exactamente igual al anterior, ya que los caracteres que puede mostrar un ser humano se deben a los genes que ha heredado de los progenitores. Mediante la clonación se obtiene que el individuo tenga los mismos genes que el padre o la madre, la reproducción sexual se sustituye por la reproducción artificial, pero los genes los aporta una única persona, el individuo tendrá los mismos genes, pero está demostrado científicamente, que es posible que sus rasgos puedan oscilar.

1.2. Antecedentes

Hace más de veinte años los científicos estudiaban sobre la clonación. En 1938 Los primeros experimentos con huevos fecundados de salamandra, fueron realizados por el

zoólogo alemán Hans Spemann, luego tuvieron éxito los biólogos americanos Robert Briggs y Thomas King que clonaron por primera vez una rana en 1952. Unos años más tarde, en febrero de 1997, un grupo de genetistas anunciaron que habían clonado una oveja llamada Dolly, que era exactamente igual a su madre. Esta oveja que nació el cinco de Julio de 1996, se convirtió en el primer mamífero clonado.

1.3. Cronología.

CRONOLOGIA DE LA CLONACION

En 1938 Los primeros experimentos con huevos fecundados de salamandra, fueron realizados por el zoólogo alemán Hans Spemann. (Gurdon, 1997). En el experimento ató con un pelo fino un huevo recién fertilizado creando un lóbulo de citoplasma. En el estadio de ocho células de división, aflojó el filamento y permitió que un núcleo pasara al lóbulo, donde dirigió la formación de un organismo completo. Estos experimentos se diseñaron para demostrar que los núcleos de las células (blastómeros) de una mórula mantienen la capacidad de dirigir la formación de un organismo completo, conocido como totipotencia.

En 1952 Los primeros animales clonados se obtuvieron por Briggs y King, que emplearon ovocitos de rana. Se eligió esta especie como modelo por presentar óvulos muy grandes (tres a cinco mm), visibles a simple vista y muy fáciles de obtener, ya que la ovulación en la rana es fácilmente inducida. Estos investigadores lograron eliminar el núcleo de varios óvulos, aislaron el núcleo de células embrionarias y los transfirieron a los óvulos. Es importante mencionar que para tener éxito hicieron cientos de intentos.

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Con estos experimentos pudieron demostrar que los núcleos de cualquier célula embrionaria, al ser introducidos al citoplasma del óvulo, podían dirigir el desarrollo hasta formar renacuajos. Cuando se emplearon células de renacuajos como donadoras de núcleos, ninguna fue capaz de desarrollar un nuevo organismo. Estos experimentos mostraron que las células en apariencia pierden la capacidad de inducir el desarrollo completo a medida que se vuelven más diferenciadas.

Los resultados obtenidos en diversas especies de anfibios muestran que existen diferencias básicas en la fisiología del desarrollo de cada organismo, por lo que los resultados obtenidos en una especie en particular difícilmente pueden ser extrapolados a otras especies, aun cuando éstas se encuentren emparentadas filogenéticamente.

En 1958, Gurdon et al. experimentaron con la rana sudafricana Xenopus laevis, logrando obtener con el transplante nuclear de embriones, ranas adultas.

En 1960, este equipo realizó la trasferencia de núcleos de células en el estadio de yema caudal logrando obtener renacuajos (Gurdon, 1997). En 1966, Gurdon obtuvo ranas adultas clonadas de células de intestino de renacuajo, demostrando que una célula puede especializarse y aún permanecer Totipotente. En 1975, este investigador, utilizando la técnica de clonación por trasferencia de núcleos de células obtenidas de las membranas de las patas de ranas adultas, logró renacuajos que no alcanzaron a sobrevivir hasta la etapa adulta (Gurdon, 1966).

1978 - Nace en Gran Bretaña el primer bebé probeta, engendrado mediante fertilización artificial o "in vitro".

1990 - Se inicia oficialmente el Proyecto Genoma Humano (PGH), con financiación estatal, destinado a descifrar el código genético humano.

El 24 de febrero de 1997, el Instituto Roslin, de Escocia, anuncia la reproducción de una oveja de siete meses, a la que bautizan Dolly. En este experimento, los científicos combinaron un óvulo de una oveja adulta, al que le extrajeron el núcleo, y la célula de la glándula mamaria de otra oveja. Se trata del primer mamífero producido por clonación, a partir de una célula adulta.

En julio de 1997, los mismos científicos que habían clonado a Dolly clonaron al cordero Polly, que porta genes humanos.

En mayo de 1999, la compañía estadounidense de biotecnología Geron adquiere al Instituto Roslin, precursor de la clonación compleja. Poco después, Japón, India y la mayoría de los países europeos adoptan leyes que prohíben la clonación humana

En julno de 1999, un equipo de la universidad de haway anuncia un nuevo clon el raton fibro, primer animal macho creado con éxito apartir de células procedentes de la cola de ratones machos.

17 de junio de 1999, varios científicos de la empresa advansed cell technology, en Massachusetts crean un embrión humano utilizando la técnica de dolly.

En marzo de 2000 En marzo de este año el diario sensacionalista británico Sunday Times revelaba que la bióloga belga Martine Nijs había creado por accidente (al frotar un cigoto congelado) el primer clónico humano en el

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laboratorio del Hospital Van Helmont. El niño clónico tendría ya cuatro años. Esa noticia fue desmentida inmediatamente por responsables del hospital belga.

22 de junio de 1999, china afirma haber producido un embrión de panda, introduciendo el embrión en un ovulo de conejo y dejándolo crecer durante 10 meses.

13 de enero del 2000, un equipo de investigadores del centro de Beaverston anuncio haber clonado un mono del tipo Rhesus, una hembra bautizada tetra.

En el 2000 - Craig Venter informa en abril que su empresa Celera ha descifrado el 90 por ciento del código genético humano. Meses después, bajo presión política, Venter y el PGH se unen, y anuncian el 26 de junio que han logrado el mapa del 97 por ciento del genoma y la secuencia exacta del 85 por ciento de las bases del ADN.

En el verano de 2001, el ginecólogo italiano Severino Antinori, famoso por lograr embarazos en mujeres de más de 60 años, el andrólogo y especialista en técnicas de fertilidad Panos Zavos y la bióloga canadiense Brigitte Boiselier, vinculada a la secta de los raelianos, anuncian su intención de clonar un ser humano. La comunidad internacional muestra su total rechazo a la iniciativa.

En febrero de 2002, un equipo investigador que había clonado una docena de ratones informó de que todos los animales murieron. En la Universidad "A and M" de Texas, un equipo de científicos dijo que había clonado un gato doméstico y presenta un cachorro de dos meses al que llamaron "CC", siglas de "copia al carbón".

El 10 de abril de 2002, el presidente de EEUU, George W. Bush, pide la prohibición total de todas las formas de clonación humana, no sólo con fines reproductivos, sino también la que busca obtener células madre para encontrar curas para enfermedades graves.

En noviembre de 2002, el experto italiano en fertilidad Severino Antinori dice que espera que una paciente dé a luz un bebé clonado en enero siguiente, y que otras dos mujeres tienen en sus vientres embriones clonados. Más tarde, lo desmintió.

El 27 de diciembre de 2002, los raelianos anuncian que han clonado una niña, la primera humana supuestamente nacida por ese método. Los científicos de todo el mundo se muestran escépticos ante la noticia.

El 4 de enero de 2003, el presidente de la secta de los raelianos en Holanda, Bart Overvliet, informa del nacimiento el día anterior en "un país europeo" de un segundo bebé clonado: otra niña, hija de una madre lesbiana holandesa. Como el anterior caso, no pudo ser confirmado científicamente.

El 14 de febrero de 2003, la oveja Dolly es sacrificada debido a una grave enfermedad pulmonar progresiva y se reabre el debate sobre los peligros de la clonación.

El 8 de abril de 2003, científicos estadounidenses hacen público el nacimiento de dos ejemplares de "banteng", un bóvido asiático, clonados de células de un macho que había muerto en 1980 en un zoológico de San Diego (California). Al día siguiente, uno de

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estos animales tuvo que ser sacrificado.

El primero de julio de 2003, el creador de la oveja Dolly, Ian Wilmut, defiende la necesidad de que exista una legislación internacional que prohíba la clonación humana.

El 6 de agosto de 2003, un grupo de científicos italianos comunica el nacimiento del primer caballo clonado del mundo, una yegua bautizada como Prometea, cuyo embrión se obtuvo a partir de células extraídas a su propia madre.

El 14 de agosto de 2003, biólogos chinos crean con éxito embriones híbridos de humanos y conejos para obtener células madre de potencial terapéutico contra graves enfermedades humanas.

El 30 de septiembre de 2003, España considera que la clonación humana debe ser prohibida a nivel internacional en todas sus variantes, tanto si es para fines reproductivos como terapéuticos o de investigación, según asegura el embajador ante la ONU, Inocencio Arias.

El 6 de noviembre de 2003, en una de las votaciones más apretadas de su historia (80 votos a favor, 79 en contra y 15 abstenciones), los miembros de la ONU pospusieron por dos años cualquier decisión sobre una futura convención internacional que prohíba la clonación humana con fines reproductivos.

El 16 de diciembre de 2003, investigadores de la firma Advanced Cell Technology (ACT) anuncian que han conseguido cultivar un embrión humano clonado hasta la fase de 16 células.

El 17 de enero de 2004, un polémico experto estadounidense en técnicas de fertilidad, Panos Zavos, aseguró en Londres que había implantado dos semanas antes un embrión humano clonado (utilizando el "método Dolly") en el útero de una mujer de 35 años

1.4. Importancia.

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Hay dos aspectos importantes en este trabajo el cual queremos dar a conocer y es la

importancia que tiene la clonación en el aspecto terapéutico la cual tiene por objeto garantizar la ausencia de rechazo en la producción de tejidos y órganos para trasplantes. La clonación de seres humanos con fines reproductivos que es motivo de importantes discusiones; aunque algunos reconocen investigar con este objetivo. También se ha empleado la clonación para intentar recuperar especies desaparecidas, como por ejemplo el bucardo (Capra pyre- naica pyrenaica), o en peligro de extinción. Por otro lado, la obtención y mantenimiento de animales mejorados para una determinada producción (carne, lana, leche enriquecida, hormonas humanas como la insulina, etc.) sería de gran importancia social y económica

1.5. Fines de la clonación

Los fines que persigue la clonación se orientan en el campo de la investigación,

tratamiento y aplicación. El aporte de estos estudios hace que la ciencia se desarrolle y proyecte

sus expectativas, como es el caso de la clonación reproductiva la cual consta de crear seres

clónicos genéticamente iguales y la clonación no reproductiva o también llamada terapéutica la

cual tiene como finalidad investigar y dar con respuestas a las diversas enfermedades que aun

no tienen cura o aquellas las cuales el tratamiento no existe.

2. Tipos de clonación.

2.1. Clonación reproductiva

La clonación reproductiva tiene como fin la obtención de individuos adultos. La clonación de seres humanos, de hecho, ha existido desde tiempos inmemoriales nos refrimos a la clonación por GEMELACION natural, y que da lugar a dos individuos genéticos, inmunológicos e incluso externamente iguales: son los gemelos monocigóticos. Los gemelos monocigóticos surgen de la división del embrión en sus estadios iniciales, cuando todavía las células de ese embrión son Totipotenciales. Del embrión fruto de la fecundación del óvulo por el espermatozoide, se escinde en algún momento de su desarrollo más temprano, alguna o algunas células que darán lugar al embrión gemelo. Ambos embriones, ambos recién nacidos son clones.

2.2. Clonación no reproductiva.

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También llamada la clonación de investigación, terapéutica, utiliza los procedimientos de clonación para producir un embrión clonado, pero en lugar de ser implantado en un útero y llevado a término es utilizado para generar células madre con propósitos de investigación y de aplicación.

3. Técnicas de la clonación.

3.1. Separación y cultivo de blastómeros aislados

En algunas especies, como los equinos, se ha utilizado la separación de blastómeros de embriones previos a su implantación para efectuar estudios de diagnóstico de enfermedades genéticas. En ellos se ha determinado la viabilidad de los embriones analizados después de su transferencia en hembras receptoras, encontrándose tasas de gestación de 21%.

En humanos la separación y cultivo de blastómeros aislados también han sido utilizados en estudios de biopsias de embriones en diferentes etapas de segmentación con la finalidad de dar alternativas a los estudios de diagnóstico prenatal, evaluando a su vez el desarrollo embrionario in vitro con el propósito de que se seleccionen los mejores embriones capaces de desarrollarse en blastocistos y congelarlos mientras se evalúan sus blastómeros aislados.La técnica de separación de los blastómeros implica la remoción de la zona pelúcida, ya sea por métodos químicos, mecánicos o enzimáticos, para posteriormente obtener los blastómeros mediante aspiración, extrusión o disminución de sus interacciones en soluciones libres de Ca2+ y Mg2+.

Los blastómeros de rata aislados en la etapa de dos células, son capaces de formar embriones completos. En el ratón se han obtenido gemelos idénticos removiendo la zona pelúcida de embriones de dos células y cultivándolos separadamente previo a su transferencia. En otras especies, el éxito del experimento se ha determinado como dependiente de diversos factores. Así, por ejemplo, en porcinos y ovinos la baja eficiencia en la obtención de fetos se debe a la baja sobrevivencia in vivo de embriones libres de zona pelúcida en fases previas a la compactación. Esta tasa de nacimientos puede aumentarse si se utilizan embriones encapsulados en gel de agarosa. De manera que algunas estrategias para suplir a la zona pelúcida son el empleo de capsulas artificiales de agarosa o de alginato de sodio o matrices extracelulares como la fibronectina y laminina.

EI número de células que forman al embrión separado constituye otro factor importante en la probabilidad de éxito.

Willadsen demostró que la tasa de gestación en ovinos y bovinos se reducía conforme se hacían grupos de células de números menores. La mayor tasa de gestación que obtuvo este autor fue del 66% al utilizar embriones de dos células o dos grupos de células provenientes de embriones de hasta ocho células. Cuando utilizó embriones de cuatro células o pares de células de embriones de ocho células, la tasa de gestación se redujo a 50%. Cuando se utilizaron los blastómeros individuales provenientes de embriones de ocho células, la tasa de gestación fue de sólo 5%. En todos los casos en

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los que se separaron las células embrionarias, el número de células formando el blastocito se reducía linealmente con el número de "divisiones" a la que era sometido el embrión. Un dato importante de este estudio es que cuando se utilizaron las células individuales de los embriones de ocho células, el desarrollo de la MCI se veía fuertemente comprometido al extremo de formarse sólo vesículas sin la presencia de este grupo de células. Aparentemente, en los blastómeros aislados se promueve más fácilmente la apoptosis y se afecta preferentemente a las células de la MCI. Este proceso contribuye a la incidencia de abortos debido a que la poca cantidad de células de la MCI reduce la viabilidad fetal.En monos esta misma técnica ha sido aplicada a partir de embriones de ocho células, en la que se separan los blastómeros mientras son mantenidos en medio libre de2+ 2+ Ca y Mg, y luego se reagrupan por pares que se introducen en zonas pelúcidas para que puedan desarrollarse hasta la fase de compactación y así transferirlos a hembras receptoras. El 8% de los embriones tratados brindaron crías vivas.

3.2. Transferencia nuclear (TN)

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TRANFERENCIA NUCLEAR

Esta técnica consiste principalmente en tomar el material genético de una célula de un paciente para después fusionarlo con un óvulo enucleizado, (este ovulo puede proceder de alguna donante, o también de los remanentes de la fecundación in vitro). De allí se obtiene un embrión llamado “sintético” o “somático”, para diferenciarlo del embrión fruto de la fusión de los gametos, del cual se extraen las células madre mediante una reprogramación genética, reiniciándolo de una manera, de forma que la célula nueva resultante será capaz de dar lugar a cualquier otro tipo celular.Existen dos tipos de transferencia la nuclear y la citoplasmática

Esta transferencia selectiva puede ser

nuclear  

consiste en transferir el material del núcleo (incluyendo el ADNnuclear)  de una célula del individuo originante

citoplamática

consiste en extraer ADNmitocondrial de una célula proveniente de una donante fértil para introducirla en el gameto de una mujer con problemas de fertilidad por problemas mitocondriales, a fin de que pueda concebir.

Fases del proceso de clonación por transferencia nuclear

1. Toma de la muestra

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Se toma una muestra de tejido normal del paciente.

2. Crecimiento de las células Las células obtenidas son crecidas en el laboratorio.

3. Enucleación Los núcleos de dichas células que contienen toda la información genética del paciente, son introducidos en  células germinales, que han sido enucleadas; es decir, debe eliminarse el material genético del oocito receptor. Puede realizarse mediante micro manipulación o por métodos químicos. (Estas células germinales pueden ser de células in vitro o de células germinantes donadas).

4. Transferencia del núcleo Generalmente se realiza mediante fusión del curiosona (núcleo celular envuelto por una pequeña porción de citoplasma) con el citoplasma del oocito, por electrofusión o con algún fusogénico (virus Sendai). Como alternativa se puede realizar por microinyección, como si se tratase de un procedimiento de inyección intracitoplásmatica de esperma.

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5. Activación del oocitoDebe inducirse la activación una vez realizada la transferencia del núcleo mediante algún estímulo químico (etanol o estroncio), o bien combinando ambos. Los núcleos celulares del paciente sufren una reprogramación completa, lo que transforma la información de células adultas que tenía el paciente, en células embrionarias, con total potencial de crecimiento y diferenciación.

6. Cultivo de células Las células son cultivadas para que se dividan y  proliferen.

7. Transplante de células madre De ese modo, una vez obtenida una cantidad suficiente, el paciente es sometido al transplante de esas células, que tienen su propia carga genética, y que reparará sus tejidos dañados.

Limitaciones en la aplicación de la técnica

ELECTROFUSOR

Se realiza el cultivo

embrionario y se

transcurren 7 días

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La mayoría de las limitaciones se deben a las incompatibilidades entre el estadio del núcleo y el citoplasma recipiente.

Los núcleos en fase S o G2 en el citoplasma receptor se duplican otra vez y eso provoca aneuploidias y otras aberraciones cromosómicas que provocan la muerte del embrión.

La evolución está ligada a la variabilidad genética mientras que la clonación tiende a la homogeneidad.

Expectativas de vida menores y envejecimiento prematuro de los individuos clónicos que también podrían tener una fertilidad reducida.

La implicación ética de la obtención de los óvulos, para la transferencia del núcleo del paciente. Ya que en la realización de la clonación se necesitan una gran cantidad de óvulos porque aun se carece de la técnica adecuada. Las maneras de conseguir estos óvulos se da de manera aberrante cuando se desean obtener de fetos de niñas muertos, de animales, de estimulación de mujeres para que produzcan más óvulos de los q produce normalmente.

4. Células madre

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4.1. ¿Qué es una célula madre?

Las células madre, son células inmaduras, indiferenciadas que se caracterizan porque tienen la posibilidad de desarrollarse, de diferenciarse y especializarse en cualquier variedad de células de los 210 tipos de células diferentes que forman nuestro cuerpo también pueden formar un individuo nuevo, todo esto dependiendo del tipo de célula madre q sea en este caso pueden ser de tres tipos. Células madre Totipotenciales, Pluripotenciales y Multipotenciales.

Una célula madre es una célula que tiene capacidad de autor renovarse mediante divisiones mitóticas o bien de continuar la vía de diferenciación para la que está programada y, por lo tanto, producir células de uno o más tejidos maduros, funcionales y plenamente diferenciados en función de su grado de multipotencialidad.

Las células madre tienen dos características importantes que las distinguen de otros tipos de células. La primera de ellas es que son células no especializadas que se renuevan ilimitadamente. La segunda es que bajo ciertas condiciones fisiológicas o experimentales, se las puede inducir a que se conviertan en células con funciones especiales tales como células musculares cardíacas o células de páncreas que produzcan insulina.

Los científicos trabajan sobre todo con dos clases de células madre de animales y de seres humanos: células madre embrionarias y células madre adultas, que poseen diversas funciones y características que serán explicadas en este documento. Los científicos descubrieron diversas maneras de obtener o aislar las células madre de embriones tempranos del ratón hace más de 20 años. Muchos años de estudio detallado de la biología de las células madre del ratón condujeron al descubrimiento, en 1998, de cómo aislar las células madre de embriones humanos y hacerlas crecer en el laboratorio.

Éstas se denominan células madre embrionarias humanas. Los embriones usados en estos estudios fueron creados con el propósito de tratar la infertilidad mediante procedimientos de fertilización in Vitro y cuando ya no fueron necesarios para ello, fueron donados para la investigación con el consentimiento informado del donante.

Las células madre son importantes para los organismos vivos por muchas razones. En algunos tejidos adultos, tales como la médula ósea, músculo, y cerebro, pequeñas poblaciones definidas de células madre adultas pueden migrar y reemplazar a las células que se pierden en diferentes órganos como resultado de un desgaste normal, por lesiones o enfermedades.

4.2. Clases de células madre.

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4.2.1. Células madre embrionarias

Las células madre embrionarias, como su nombre lo indica, derivan de embriones. Específicamente, las células madre embrionarias provienen de los embriones que se obtienen de los huevos que han sido fertilizados in Vitro— en una clínica de fertilización in Vitro- y después donados para propósitos de investigación con el consentimiento informado de los donantes. No derivan de los huevos fertilizados en el cuerpo de una mujer. Los embriones de los cuales derivan las células madre embrionarias humanas

4.2.2. Células madre adultas

Una célula madre adulta es una célula indiferenciada encontrada entre células diferenciadas en un tejido o en un órgano. Puede auto renovarse, y puede diferenciarse para producir los principales tipos especializados de célula del tejido o del órgano. El papel principal de las células madre adultas en un organismo vivo consiste en mantener y reparar el tejido en el cual se encuentran. Actualmente algunos científicos utilizan el término célula madre somática en vez de célula madre adulta. A diferencia de las células madre embrionarias, que son definidas por su origen (la masa interna de la célula del blastocisto), el origen de las células madre adultas en tejidos maduros es desconocido.

La investigación sobre las células madre adultas ha generado mucho entusiasmo. Los científicos han encontrado células madre adultas en muchos más tejidos de los que pensaban. Esto ha conducido a los científicos a preguntarse si las células madre adultas podrían ser utilizadas para trasplantes. De hecho, la sangre adulta que forma las células madre de la médula ósea se han utilizado exitosamente en trasplantes durante 30 años. Bajo condiciones apropiadas, ciertas clases de células madre adultas parecen tener la capacidad de diferenciarse entre diversos tipos de células. Si esta diferenciación de células madre adultas pudiera ser controlada en el laboratorio, estas células podrían convertirse en la base de las terapias para la cura de enfermedades.

4.3. Tipos de células madre.

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4.3.1. Totipotente

Estas células tiene la capacidad de originar cualquier tipo celular e individuos completos. La primera célula totipotencial es el cigoto y también son las células que se subdividen a su continuación que son de cuatro a ocho células, estas tienen que ser desde el primer al cuarto día.

Desde este punto de vista se puede clonar individuos si apartamos una célula que este en las primeras estepas de su división totipotente. Hay estudios para poder mantener la totipotencia de las células embrionarias. Estos estudios nos hablan del gen llamado Oct – 4. La expresión de Oct-4 tiene relación con el mantenimiento de la totipotencia de las células de los primeros estadios del desarrollo embrionario regulando la determinación temprana del embrión preimplantatorio.

La clonación se da de manera natural en el caso de los gemelos, q sucede por alguna razón dándose la división del cigoto y produciendo dos individuos con cargas genéticas completamente iguales.

De manera artificial también se puede realizar mediante clonación in vitro, teniendo un cigoto podríamos apartar las células que queramos en el caso de tener ocho células, apartamos estas y las cultivamos obteniendo así ocho individuos de igual carga genética y pueden dar origen a embriones. (Este método ha presentado fallas en la experimentación por alguna razón, la gemelacion artificial o inducida no ha dado resultado, está por verse - pedrucci)

4.3.2. Pluripotentes

Estas células tienen la capacidad de dar origen a cualquier tipo de célula pero no puede originar un individuo completo. Estas células se obtienen de la masa de células internas en el momento que han pasado de cinco a seis días en la etapa de blástula.Estas células son las que se utilizan para la clonación terapéutica, porque pueden regenerar tejidos y ayudar el tratamiento de enfermedades degenerativas donde sean implantadas. Se realizan mediante la transferencia nuclear.

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4.3.3. Multipotentes

Son conocidas como células madre adultasEstas células son aquellas que sólo pueden generar células de su misma capa o linaje embrionario de origen (por ejemplo: una célula madre mesenquimal de médula ósea, al tener naturaleza mesodérmica, dará origen a células de esa capa como miocitos, adipocitos u osteocitos, entre otras).Un ejemplo de ello son las celulas que se encuentran en la medula ósea, estas son las que origina las células sanguíneas como los glóbulos rojos, glóbulos blancos , plaquetas, estas pueden ser tratadas para poder recuperar su pluripotencia y así usarlas para tratar enfermedades como una célula pluripotentes, así no habría cuestiones éticas ya que la misma persona podría decidir utilizar sus células madre para la regeneración de alguna enfermedad neurodegenerativa tratándolas y trasnplantándolas.Las células madre también se pueden obtener de origen fetal. Los órganos de los fetos, tales como el hígado, pulmón tienen células madre y estas tienen capacidad de diferenciarse como el caso de las células Oseas pero tienen mayor capacidad de expansión y diferenciación.

4.4. Métodos de obtención de células madre para la clonación.

4.4.1. Remanentes de fecundación in vitro

4.4.2. Embriones crio conservados

4.4.3. Por la técnica de separación de blastómeros

4.4.4. Por la técnica de transferencia nuclear.

5. Aplicaciones de la clonación

5.1. Clonación reproductiva

5.2. Clonación no reproductiva.

5.2.1. En el tratamiento de enfermedades.

5.2.2. Cura de enfermedades.

6. Bioética de la clonación.