clase 2 tecnicas ppt
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METODOS EN PATOLOGIAMETODOS EN PATOLOGIA
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HEMATOXILINA EOSINAHEMATOXILINA EOSINA
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Microscopia de luz polarizadaMicroscopia de luz polarizada
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ROJO CONGO PARA ROJO CONGO PARA DETECTAR AMILODEDETECTAR AMILODE
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Rojo congo Rojo congo + luz Rojo congo Rojo congo + luz polarizada polarizada
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HISTOQUIMICAHISTOQUIMICA
CIENCIA QUE COMBINA HISTOLOGIA Y BIOQUIMICACIENCIA QUE COMBINA HISTOLOGIA Y BIOQUIMICA IDENTIFICA SUSTANCIAS QUIMICAS Y DETERMINAR IDENTIFICA SUSTANCIAS QUIMICAS Y DETERMINAR
SU SIGNIFICADO EN CELULAS Y TEJIDOS.SU SIGNIFICADO EN CELULAS Y TEJIDOS. IDENTIFICA UNA ENZIMA UTILIZANDO IDENTIFICA UNA ENZIMA UTILIZANDO
CROMOGENOS (SUSTANCIAS COLOREADAS POR LA CROMOGENOS (SUSTANCIAS COLOREADAS POR LA ACCION ENZIMATICAS)ACCION ENZIMATICAS)
UTIL EN ESTUDIO DE MUSCULO ESQUELETICO, UTIL EN ESTUDIO DE MUSCULO ESQUELETICO, SISTEMA NERVIOSO, CELULAS HEMATOPOYETICAS. SISTEMA NERVIOSO, CELULAS HEMATOPOYETICAS.
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METODOS INMUNOHISTOQUIMICOS:- COMPRENDEN LAS TECNICAS PARA DETECCION DE ANTIGENOS CELULARES O TISULARES BASANDOSE EN REACCIONES ANTIGENO-ANTICUERPO.- LA VISUALIZACION REQUIERE DE UN TRAZADOR O MARCADOR.- COMO MARCADOR SE UTILIZA: FLUOROCROMOS (INMUNO-FLUORESCENCIA), ENZIMAS (TECNICAS INMUNOENZIMATICAS), IONES METALICOS EN FORMA COLOIDAL (TECNICA DE INMUNO-ORO) O ISOTOPOS RADIOACTIVOS.
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MARCAJE DIRECTO O INDIRECTO
FLUORESCENCIA:SEGÚN EL ORIGEN DE LA FLUORESCENCIA:
• PRIMARIA: (LAMINA ELASTICA DE ARTERIA, COLAGENO, LIPIDOS, LIPOFUXINA Y TETRACICLINA).
• SECUNDARIA:FLUOROCLOMOS (V-A-R) O UNIENDO FLUOROCROMOS A ANTICUERPOS DIRIGIDOS A ANTIGENOS CELULARES (INMUNOFLUORESCENCIA). EJEMPLO: FLUORESCEINA. REQUIERE DE MICROSCOPIO CON LUZ ULTRAVIOLETA.
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INMUNOFLUORESCENCIA POSITIVA-IgG INMUNOFLUORESCENCIA POSITIVA-IgG EN CAPILAR GLOMERULAREN CAPILAR GLOMERULAR
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INMUNOHISTOQUIMICA: - TECNICAS PARA VISUALIZAR REACCION ANTIGENO-ANTICUERPO TRAVES DE LA ADICION ENTRE UNA ENZIMA SUSTRATO Y EL CROMOGENO.
- TRAZADORES: ENZIMAS (PEROXIDASA Y FOSFATASA ALCALINA).
- TIPOS DE ANTIGENOS: POLICLONALES Y MONOCLONALES.
- ANTICUERPOS MONOCLONALES (1975).
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CROMOGRANINA EN UN ISLOTE CROMOGRANINA EN UN ISLOTE DE LANGERHANSDE LANGERHANS
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CITOMETRIA Y CITOFLUOROMETRIA
CITOMETRIA Y CITOFLUOROMETRIA: REQUIEREN DE ANALIZADORES DE IMÁGENES BASADOS EN PARAMETROS MORFOMETRICOS OBJETIVOS.
- LA CITOMETRIA PUEDE SEPARASE EN CITOMETRIA ESTATICA (MICROSCOPIA DIGITAL) PARA EL ANALISIS DE IMÁGENES Y EN LA MICROFLUORIMETRIA DE FLUJO (CITOMETRIA DE FLUJO).
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ASPECTOS BASICOS DE CITOMETRIA DE FLUJO:
- ANALISIS RAPIDO DE CELULAS Y PARTICULAS BIOLOGICAS EN SUSPENSION DENTRO DE UN SISTEMA DE FLUJO LAMINAR SOBRE EL QUE INCIDE UN HAZ DE LUZ, PROPORCIONAN DATOS SOBRE SUS CARACTERISTICAS FISICOQUIMICAS.- CITOMETRO DE FLUJO SE COMPONE DE UN SISTEMA DE INYECCION Y MANEJO DE LA MUESTRA, DETECTOR FISICO Y OPTICO DE PARAMETROS CITOLOGICOS A MEDIR Y SISTEMA DIGITALIZADO PARA EL PROCESO DE LOS DATOS.
- METODO DE TINCION SE USA FLUOROCROMOS.
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- APLICACIONES:
1) ANALISIS FENOTIPICOS DE CELULAS SANGUINEAS.2) IDENTIFICACION DE ANTIGENOS INTRACELULARES.3) CUANTIFICACION DE ADN Y DETERMINACION DE CICLO CELULAR4) DETERMINACION DE LA VIABILIDAD Y GRADO DE ACTIVACION DE CELULAS EN CULTIVO.5) ANALISIS DE RATICULACION CIRCULANTES EN SANGRE.6) DETECCION DE ANTICUERPOS EN SUERO.7) CUANTIFICACION DE POTENCIAL Y MEMBRANA.8) MEDIDA DEL CALCIO INTRACELULAR.9) PH INTRACELULAR.
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