Caracterización isoenzimática de Caracterización isoenzimática de Leishmania sppLeishmania spp aisladas en zonas aisladas en zonas

endémicas de leishmaniasis cutánea endémicas de leishmaniasis cutánea en El Salvadoren El Salvador

Proyecto 02.30 CIC-UESProyecto 02.30 CIC-UES

M.Sc. Miguel Angel Minero Lacayo (director)M.Sc. Miguel Angel Minero Lacayo (director)

M.Sc. Rafael Oswaldo Angel BellosoM.Sc. Rafael Oswaldo Angel Belloso

Dr. Carlos Alexander OrtegaDr. Carlos Alexander Ortega

DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIADEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA

Ciclo vitalCiclo vital

Diferentes manifestaciones clínicasDiferentes manifestaciones clínicas

Diferentes patrones epidemiológicosDiferentes patrones epidemiológicos

Diferentes criterios taxonómicosDiferentes criterios taxonómicos Tipo de síndrome clínico:Tipo de síndrome clínico: Leishmania mexicana Área geográfica:Área geográfica:

L. mexicana amazonensis, L.mexicana guyanensis, L. mexicana panamensis

Herramientas bioquímicas (zimodemos):Herramientas bioquímicas (zimodemos): L. (Leishmania) mexicana ; L. (Viannia) panamensis Métodos serológicos:Métodos serológicos:

L. mexicana BEL21; L. panamensis LS94 Herramientas moleculares (PCR):Herramientas moleculares (PCR):

Leishmaniasis en las AméricasLeishmaniasis en las Américas

Categoría ICategoría I Notificación obligatoria, existen programas Notificación obligatoria, existen programas

permanentes de investigación y control no limitados permanentes de investigación y control no limitados a la detección de casos y tratamiento.a la detección de casos y tratamiento.

Categoría IICategoría II Notificación obligatoria; programas interrumpidos o Notificación obligatoria; programas interrumpidos o

sólo en focos endémicos.sólo en focos endémicos. Categoría IIICategoría III Notificación no es obligatoria, no información Notificación no es obligatoria, no información

epidemiológica detallada, aumento notorio de casos epidemiológica detallada, aumento notorio de casos sin programas de control.sin programas de control.

Según OPS/OMS, 1998Según OPS/OMS, 1998

Leishmaniasis en El SalvadorLeishmaniasis en El Salvador 1950: primer caso de LV y LC1950: primer caso de LV y LC 1992: 1992: 27 casos de LV en Cabañas, La 27 casos de LV en Cabañas, La

Unión y Santa Ana; 15 de LC En Unión y Santa Ana; 15 de LC En

Santa Clara (SV) y Nueva Granada (Us) Santa Clara (SV) y Nueva Granada (Us) 1993: 1993: 54 LC nuevos en Santa Clara y 54 LC nuevos en Santa Clara y

San Ildefonso (SV)San Ildefonso (SV) 1999-2001: 1999-2001: 44 LC (71% en zona Norte de 44 LC (71% en zona Norte de

SV) y 4 LV en Santa Ana y Sonsonate.SV) y 4 LV en Santa Ana y Sonsonate.

Fuente: MSPASFuente: MSPAS

ObjetivosObjetivos GeneralGeneralCaracterizar taxonómicamente a través de la Caracterizar taxonómicamente a través de la

determinación de zimodemos a las cepas de determinación de zimodemos a las cepas de LeishmaniaLeishmania circulantes en el país. circulantes en el país.

EspecíficosEspecíficosAislar cepas circulantes en Santa Clara y San Aislar cepas circulantes en Santa Clara y San

Ildefonso (San Vicente) y caracterizar el respectivo Ildefonso (San Vicente) y caracterizar el respectivo patrón isoenzimáticopatrón isoenzimático

Iniciar una base de datos formal de las especies Iniciar una base de datos formal de las especies presentes en los focos endémicospresentes en los focos endémicos

Montar un laboratorio de investigación en esa línea Montar un laboratorio de investigación en esa línea con aspiración a convertirse en un referente con aspiración a convertirse en un referente nacional.nacional.

Fortalecer la cooperación interinstitucional UES/ Fortalecer la cooperación interinstitucional UES/ MSPAS/ FIOCRUZMSPAS/ FIOCRUZ

Diseño MetodológicoDiseño Metodológico Tipo de estudio: descriptivo, prospectivo Tipo de estudio: descriptivo, prospectivo

longitudinallongitudinal

Ubicación espacial: zona norte de San Ubicación espacial: zona norte de San VicenteVicente

Universo: todos los casos sospechosos que Universo: todos los casos sospechosos que consulten en las unidades de saludconsulten en las unidades de salud

Muestra: todos los aislamientos positivos.Muestra: todos los aislamientos positivos.

Procedimientos técnicosProcedimientos técnicos

Toma de muestra consentidaToma de muestra consentida Cultivo Cultivo in vitroin vitro Expansión en medio de SchneiderExpansión en medio de Schneider Preparación de muestras en Preparación de muestras en

amortiguador de fosfatos y el amortiguador de fosfatos y el correspondiente buffer membranacorrespondiente buffer membrana

Corrida electroforética en Corrida electroforética en membrana de acetato de celulosamembrana de acetato de celulosa

Sustrato de tinciónSustrato de tinción Medición en papel milimetradoMedición en papel milimetrado Comparación con cepas OPS/OMS Comparación con cepas OPS/OMS

Centro Montpellier, FranciaCentro Montpellier, Francia

Marcadores enzimáticosMarcadores enzimáticos 6-fosfogluconato deshidrogenasa 6-fosfogluconato deshidrogenasa

(E.C.1.1.1.44) 6PGDH(E.C.1.1.1.44) 6PGDH Glucosa fosfato deshidrogenasa (E.C. Glucosa fosfato deshidrogenasa (E.C.

1.1.1.49) G6PDH1.1.1.49) G6PDH Fosfoglucomutasa (E.C. 2.7.5.1.) PGMFosfoglucomutasa (E.C. 2.7.5.1.) PGM Manosafosfato isomerasa (E.C. 5.3.1.8) MPIManosafosfato isomerasa (E.C. 5.3.1.8) MPI Alaninaminotransferasa (E.C.2.6.1.2) ALATAlaninaminotransferasa (E.C.2.6.1.2) ALAT Aspartatoaminotransferasa (E.C.2.6.1.1.1)Aspartatoaminotransferasa (E.C.2.6.1.1.1) Aminopeptidasa (E.C.3.4.11.1) PEPAminopeptidasa (E.C.3.4.11.1) PEP Prolinaiminopeptidasa (E.C. 3.4.11.5) PEP-DProlinaiminopeptidasa (E.C. 3.4.11.5) PEP-D

InterpretaciónInterpretación

AvancesAvances Compra de equiposCompra de equipos: cámara de flujo laminar, plato : cámara de flujo laminar, plato

de calentamiento, microscopio invertido, cámara de de calentamiento, microscopio invertido, cámara de electroforesis, micropipetas, balanza analítica, electroforesis, micropipetas, balanza analítica, computadora, refrigeradora y potenciómetro. computadora, refrigeradora y potenciómetro.

Compra de accsesoriosCompra de accsesorios: filtros de membrana, : filtros de membrana, tanque de nitrógeno, frascos lavadores, puntas de tanque de nitrógeno, frascos lavadores, puntas de pipeta, viales criogénicos, tubos de centrífuga, etc.pipeta, viales criogénicos, tubos de centrífuga, etc.

Establecimiento de contactosEstablecimiento de contactos::

Licda. Patricia Mira, Subjefa Lab. Central, MSPASLicda. Patricia Mira, Subjefa Lab. Central, MSPAS

Dra. Claudia Armida Flores, U.S. San Ildefonso.Dra. Claudia Armida Flores, U.S. San Ildefonso.

Dra. Rhina Campos Gómez, Jefa UMP, Hosp. MilitarDra. Rhina Campos Gómez, Jefa UMP, Hosp. Militar

Dra. Flora E. Arana, MERTU/CDC, UVA, GuatemalaDra. Flora E. Arana, MERTU/CDC, UVA, Guatemala

Dr. Armando Bañuelos, OPS/OMSDr. Armando Bañuelos, OPS/OMS

ProblemasProblemas Desinterés ante el proyecto por parte de las Desinterés ante el proyecto por parte de las

autoridades de Control y Vigilancia Epidemiológica autoridades de Control y Vigilancia Epidemiológica (MSPAS)(MSPAS)

Nula comunicación con FIOCRUZNula comunicación con FIOCRUZ Retraso en la compra de reactivos (UACI-UES)Retraso en la compra de reactivos (UACI-UES)

VII Congreso Centroamericano y del Caribe de VII Congreso Centroamericano y del Caribe de Parasitología y Medicina TropicalParasitología y Medicina Tropical

III Congreso Nacional de Microbiología/ Expolab III Congreso Nacional de Microbiología/ Expolab 20052005

Hotel San Salvador PresidenteUniversidad de El Salvador

18 al 22 de Octubre de 2005

www.geocities.com/congresodeparasitologiacongresodeparasitologia@yahoo.com

Gracias