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Caracterización del comportamiento reproductivo de nuevos cultivares cítricos
Proyecto ANII FMV-6997
Facultad de Agronomía-INIA
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Contexto internacional
• Variedades patentadas
• Consorcios comercializadores
• Restricciones de superficie, plantas o exportación
• Requerimiento específico de calidad: semillas
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Situación nacional
Plan estratégico de la Citricultura
Recambio varietal
• Introducción de variedades
• Prospección de materiales locales
• Programa de Mejoramiento genético (INIA-Facultad de Agronomía)
Ingreso Mercado Estados Unidos
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Objetivos
• Determinar el tipo de compatibilidad de nuevos cultivares de cítricos
• Analizar características reproductivas:
- capacidad germinativa del polen
- viabilidad de polen y óvulos
- presencia de semillas en condiciones de polinización abierta y dirigida
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Materiales en estudio
• Introducido
Mandarina Tango
• Prospección nacional
a) Naranjas Valencia
Victoria Late
Paylate
b) Limón INIA-Ana Claudia
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• Programa de Mejoramiento genético
a) Híbridos Ellendale x Satsuma
M9 (seedling)
B30
b) Híbridos Ellendale x Page
F2P4
F6P8
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Métodos
• Aislamiento de ramas o árboles con mallas anti-abejas
• Ramas similares o árboles en polinización abierta
• Conteo de flores y frutos cuajados con y sin malla
• Análisis de germinación de polen in vitro e in vivo
• Análisis de viabilidad de polen y óvulos
• Cuantificación de semillas en frutos cosechados
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Métodos
• Germinación de polen in vitro: colecta estambres, 24 horas en silica gel, siembra en medio Brewbakery Kwack, 25°C, 5 repeticiones, 48-72 horas
• Viabilidad de polen: test de tetrazolio, 3 repeticiones, promedio de granos contados por cultivar: 3000
• Germinación in vivo: marcado y embolsado de flores en estado 59 (Escala BBCH). Cada 3 días, colecta y preparación de flores para análisis de germinación en estigma, en microscopio de fluorescencia
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Métodos
• Polinizaciones manuales con variedades comerciales, autopolinización, emasculación
• Evaluación de presencia de semillas
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Limón INIA-Ana Claudia, Azucitrus
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Valencia Paylate, Sandupay
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Victoria Late, INIA SG
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F2P4, San Antonio FAGRO
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Mandarina Tango, INIA SG
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Resultados
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Mandarina Tango
Frutos sin
semilla (%)
Frutos con
semilla (%)
1 semilla
(%)
2 semillas
(%)
3-5
semillas
( %)
Testigo
polinización
abierta
88 12 9,5 2,2 0,3
Enmallado 100 0 - - -
Germinación de polen in vitro: 0,18%
Germinación de polen in vivo: 0%
Viabilidad de óvulos (9 DPA): 97%
Semillas/fruto: 0,15
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Mandarina M9
Frutos sin
semilla (%)
Frutos con
semilla (%)
1 semilla
(%)
2 semillas
(%)
>3 semillas
( %)
Testigo
polinización
abierta
80,4 19,6 8,9 5,4 5,3
Enmallado 98 2 0 2 0
Germinación de polen in vitro: 4,2%
Germinación de polen in vivo: 5,6% (15 DPA)
Viabilidad de óvulos (12 DPA): 23%
Semillas/fruto: 0,57 PA – 0,04 Malla
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Test de viabilidad de polen en M9
Viabilidad: 38%
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Frutos de M9 en condiciones de polinización abierta
M 9 Testigo
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Frutos de M9 en condiciones de autopolinización
M 9 MallaA1R1
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Mandarina híbrida B30
Germinación de polen in vitro: 0,4%
Germinación de polen in vivo: 0
Viabilidad de óvulos (12 DPA): 34%
Semillas /fruto: 6,4 PA
Frutos sin
semilla (%)
Frutos con
semilla (%)
1 semilla
(%)
2 semillas
(%)
3-5
semillas
( %)
≥ 6
semillas
(%)
Testigo
polinización
abierta
16 84 4 12 32 36
Enmallado 100 0 - - - -
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Frutos de B30 en condiciones de autopolinización
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Frutos de B30 en condiciones de polinización abierta
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Victoria Late
Frutos sin
semilla (%)
Frutos con
semilla (%)
1 semilla
(%)
2
semillas
(%)
3-5 semillas
( %)
Testigo
polinización
abierta
96 4 4 0 0
Enmallado 100 0 - - -
Germinación de polen in vitro: 0,01%
Germinación de polen in vivo: 0 %
Viabilidad de óvulos (12 DPA): 77%
Semillas/fruto: 0,04
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Test de viabilidad de polen en naranja Victoria
% de viabilidad: 0
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Crecimiento del tubo polínico en estigma de flores de M9
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Valencia Paylate
Frutos sin
semilla (%)
Frutos con
semilla (%)
1 semilla
(%)
2 semillas
(%)
3-8 semillas
( %)
Testigo
polinización
abierta
77 23 4 4 15
Enmallado 100 0 - - -
Germinación de polen in vitro: 0,5%
Germinación de polen in vivo: 0 %
Viabilidad de óvulos (12 DPA): 59%
Semillas/fruto: 1
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Limón INIA-Ana Claudia
Frutos sin
semilla (%)
Cosecha Junio
Frutos con
semilla (%)
1 semilla
(%)
2 semillas
(%)
>3 semillas
( %)
Testigo
polinización
abierta
63 37 22,6 11,3 3,1
Enmallado 76 24 16,1 2,5 5,4
Germinación de polen in vitro: 1,9%
Germinación de polen in vivo (3 DPA): 23 %
Viabilidad de óvulos (12 DPA): 35%
Semillas/fruto: 0,4 PA - 0,5 Malla
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Limón INIA-Ana Claudia
Germinación de polen in vivo (3 DPA): 23 %
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Cultivar Cuajado (%)
M9 AutopolinizaciónPolinización abierta
3,83,0
B30 Autopolinización Polinización abierta
2,73,5
Victoria AutopolinizaciónPolinización abierta
3,32,8
PaylateAutopolinizaciónPolinización abierta
1,31,6
Cuajado de frutos en condiciones de autopolinización y polinización abierta
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Número promedio de frutos por planta en autopolinización y polinización abierta (mandarina Tango y limón Ana Claudia)
Cultivar N° de frutos por planta
Tango
Autopolinización
Polinización abierta
652
676
Ana Claudia
Autopolinización
Polinización abierta
61
97
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Capacidad polinizadora, expresada como porcentaje de frutos cosechados con semillas
Variedad/polinizador Afourer Limón
Criollo
Valencia
CV 64
Autopolinizado
Tango 10 24 31 0
M9 33 - 0 0
B30 100 67 100 0
Victoria 62,5 - 0 0
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Conclusiones
• M9, B30, Paylate y Victoria, son autoincompatibles, mientras que Inia-Ana Claudia, es autocompatible
• Tango es autoincompatible, pero no presenta esterilidad absoluta, alcanzando 12% de frutos con semillas en libre polinización
• En similares condiciones, M9 y Victoria presentan un muy bajo número de frutos con semillas, similar al de Tango, siendo las más promisorias en ese aspecto
• Tango, B30, Victoria y Paylate presentaron mínima capacidad de germinación de polen in vitro y nula in vivo
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Conclusiones
• Tango, M9 y Victoria, presentan alta habilidad partenocárpica, cuajando en forma similar en condiciones de autopolinización que en polinización abierta
• B30 resultó la variedad con mayor presencia de semillas en polinización abierta y manual
• Las tres variedades polinizadoras utilizadas indujeron la formación de semillas en la mayoría de las situaciones estudiadas
• Tango presentó semillas con los tres polinizadores utilizados
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Agradecimientos
Carlo Roggero (Caputto)
Pablo Rodríguez (Azucitrus)
Personal de campo INIA-SG
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Equipo de Trabajo
Facultad de Agronomía
Ing.Agr. (Dra.) Giuliana Gambetta
Ing.Agr. Ana Paula Mautone
Ing.Agr. Beatriz Vignale (asesora en selección de materiales a evaluar)
Ing.Agr. Florencia Rey
Ing.Agr. Carolina Fasiolo
Ing.Agr. Virginia Pereira das Neves
Bach. Natalia Guimaraes
INIA
Ing.Agr. (Dr.) Fernando Rivas (asesor en selección de materiales a evaluar)
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Capacidad polinizadora, expresada como porcentaje de frutos cosechados con semillas
Viabilidad polen /Polinizador Afourer Limón Valencia
Porcentaje 8 18 11
Viabilidad polen/Polinizador M9 B30 Tango Victoria
Porcentaje 38 19 0 0