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© J. L. Sánchez Guillén
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I) Técnicas para el estudio fisicoquímico: sirven para conocer la
composición y relacionar esta composición con las estructuras
celulares. Estos métodos son:
a) Destilación
b) Filtración
c) Decantación
d) Centrifugación
e) Cromatografía
f) Electroforesis
II) Técnicas para el estudio morfológico de la célula. Nos permiten
conocer cómo es su forma, su tamaño y su estructura. Son,
fundamentalmente:
a) Microscopía óptica
b) Microscopía electrónica
1) Microscopio electrónico de Trasmisión (MET)
2) Microscopio electrónico de barrido (MEB)
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Destilación: Sirve para separar por evaporación y conden-
sación posterior, dos liquidos miscibles.
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Decantación: Sirve para separar, por ejemplo, mezclas de
líquidos no solubles de densidad diferente.
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FILTRACIÓN: Separa la fase líquida de la parte sólida.
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Homogeneizador
Se trata de un aparato que sirve
para triturar y disgregar el material
biológico, rompiendo las
membranas celulares para dejar
libres los orgánulos y el resto del
contenido celular para posteriores
tratamientos.
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Centrifugación: Los materiales biológicos sometidos a fuertes
aceleraciones se desplazan hacia el fondo de los recipientes que los
contienen con velocidades que dependen de su masa, de su forma y
volumen, y de la naturaleza del medio en el que se realice la
centrifugación.
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Cromatografía sobre papel
Cromatografía sobre papel
Cromatografía sobre papel
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Cromatografía de gases
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ELECTROFORESIS
En este método, la mezcla a separar se deposita en una cubeta sobre un
soporte de tipo poroso (acetato de celulosa o también gel de almidón). A
continuación se establece una diferencia de potencial entre los extremos del
soporte. Las sustancias que componen la mezcla se desplazarán en función
de su carga eléctrica.
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Cultivos in vitro:
Bacterias en cápsulas de Petri
Frascos para cultivos celulares
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El microscopio
electrónico,
desarrollado a
mediados del siglo
XX, permite más de
100 000 aumentos
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luz
c
objeto
b
imagen
o
interruptor
Cañón de electrones
c
objeto
b
imagen
o
Microscopio electrónico Microscopio óptico
Fundamento del microscopio óptico y del microscopio electrónico
c) condensador; b) objetivo; o) ocular.
electrones
visor
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Diferencias entre el microscopio óptico y del microscopio electrónico
Microscopio óptico Microscopio electrónico
Fuente de iluminación: La luz Fuente de iluminación: electrones
Se pueden ver seres vivos No se pueden ver los seres vivos
Poco aumento (X1000) Mucho aumento (X300 000)
Se observa la estructura Se observa la ultraestructura
Preparaciones sencillas Preparaciones complejas
Aparato relativamente barato Instrumento muy caro
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Unidades de medida en microscopía
1 micrometro*= 1 µm = 0,001 mm (milésima de milímetro)
1 nanometro = 1 nm = 0,000 001 mm (millonésima de milímetro)
1 amstrong = 1 Å = 0,1 nm (diez millonésima de milímetro)
* También se llama micra
Tamaños usuales en microscopía
átomo = 1 Å
virus = 25 nm a 300 nm
bacteria =1 µ
Célula = 10 µm a 100 µm
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