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Sibele Borsuk [email protected] / [email protected]
Protozoários
Sarcodina Protozoa Mastigophora Ciliata Sporozoa
Trematoda Helminta Cestoda Nematoda
Artropoda Insecta
Classificação
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Protozoários
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
- Protos = antes; zoário = animal
- Organismos unicelulares, eucariontes e heterótrofos
- ~ 65.000 espécies são conhecidas
- ~ 10.000 espécies parasitam animais vertebrados ou
invertebrados
- Tamanho, de 1 a 150µm, apresentam alto índice de reprodução
- A classificação dos protozoários se dá pela forma e localização de
suas organelas especializadas
- Induzem boa resposta imune e também apresentam mecanismos
de escape longos períodos de parasitismo.
Morfologia
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
trofozoíto
gametas
cisto
Variada - fase do ciclo e meio
Formas típicas: trofozoíto, cisto e gametas
Morfologia
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
•Estrutura básica Membrana celular lipoproteica
Citoplasma aspecto mitocôndrias, ribossomas vacúolos reservas alimentares produtos metabólitos
Núcleo membrana nuclear, nucleoplasma e cromatina forma, posição tamanho, número
Morfologia
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Locomoção
Nutrição
Proteção
Sustentação
Relacionadas a:
•Organelas
Morfologia
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
•Organelas de locomoção
Flagelos Membrana ondulante
Cílios Mionemas
Pseudópodes
•Organelas de nutrição
Pseudópodes Vacúolos digestivos
Citóstoma
Morfologia
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
axóstilo
•Organelas de sustentação e fixação
Disco suctorial
Morfologia
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
•Assexuada
Biologia- Reprodução
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Fissão binária -Esquizogonia-Merogonia
longitudinal transversal
meronte merozoítos (célula mãe) (céls. filhas)
merogonia (produz merozoítos), gametogonia (produz microgametas) esporogonia (produz esporozoítos).
•Sexuada
Biologia- Reprodução
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
• Singamia • Gametogonia : Apicomplexa
isogametas ou fecundação zigoto heterogametas
• Conjugação: união temporária de dois indivíduos, com troca mútua de materiais nucleares- Ciliophora
Protozoários- Classificação
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Sarcodina
Classes Mastigophora
Ciliophara
Apicomplexa
Protozoários
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Protozoa Eucarioto Unicelular
Sarcomastigophora Locomoção
por pseudópodes e/ou flagelos
Apicomplexa Deslizamento
Ciclo Intracelular reprodução sexuada
e assexuada
Ciliophora Locomoção
por cílios
Microspora Reprodução
assexuada
Sarcodina Movimentos
amebóides por pseudópodes
Mastigophora Apresenta um
ou mais flagelos
Coccidia Parasita células
epiteliais reprodução sexuada
e assexuada
Pirosplamidia Parasita células
sanguíneas Vetor: carrapato
(reprodução sexuada)
Haemosporidia
Parasita células sanguíneas
Vetor: dípteros hematófagos
(reprodução sexuada
1908 – Brasil – Splendore, SP – coelhos de laboratório 1908 – Tunísia – Nicolle e Manceaux Ctenodactylus gondii
1909 – Nicolle e Manceaux - Toxoplasma gondii
toxon = arco plasma = forma
gondii = homenagem ao roedor
Década de 70 – HD, HI (Dubey)
1981 – Toxoplasma x AIDS
Apicomplexa- T. gondii
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Toxoplasmose
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
• zoonose mais difundida do mundo •25 a 60% da população humana mundial é soropositiva • pouca especificidade parasitária (mais de 200 espécies) • animais domésticos e silvestres • riscos da transmissão congênita • caráter oportunista em pacientes imunocomprometidos
Toxoplamose
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Zoonose mais difundida do mundo
• todas as fases são infectantes • pouca especificidade parasitária • grande poder de infecção do HD • várias vias de infecção
Filo Apicomplexa
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
mitocôndria
micronemas
conóide
extremidade apical roptrias
retículo endoplasmático
grânulos densos Golgi
• Morfologia
Toxoplasma gondii
Filamentos contráteis
Apicomplexa
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
• Morfologia
Complexo apical: •Anéis polares – são dois, permitem a passagem do conteúdo parasitário •Conóides – definem a extremidade apical e têm motilidade •micronemas – organelas secretoras, auxiliam na adesão e invasão celular •roptrias – organelas secretoras, auxiliam na invasão •grânulos densos – organelas secretoras, necessárias para multiplicação
Apicomplexa
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
• Morfologia
Toxoplasma gondii
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Oocistos
Eliminado pelos felideos
Toxoplasma gondii
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Taquizoitos
Fase aguda-móvel de multiplicação rápida
Toxoplasma gondii
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Bradizoitos
TODAS AS FASES SÃO INFECTANTES
A TODOS OS HOSPEDEIROS
Fase crônica -brady-lento - Vacúolo parasitoforo
Toxoplasma gondii
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Hospedeiros
Toxoplasma gondii
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Ciclo
Vacúolo parasitóforo
Toxoplasma gondii
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
•Processo ativo que envolve reconhecimento de receptores conservados de
membrana: laminina, integrina, glicosamino glicans, proteoglicans – são receptores para MIC2 e molécula P30.
•Uma vez aderido, o conóide é projetado e os micronemas descarregam seu conteúdo – MIC2 e outras proteínas •A membrana plasmática da célula hospedeira realiza um movimento de englobamento do parasita a partir do sítio de adesão para formar o vacúolo parasitóforo
•O conteúdo das roptrias é lançado e suas proteínas incorporam-se aos componentes de membrana do recém criado vacúolo parasitóforo
•Dentro do vacúolo parasitóforo os grânulos densos despejam seu conteúdo modificando o ambiente do vacúolo parasitóforo, impedindo a acidificação e facilitando a replicação do parasita. Não há fusão de lisossomos.
Toxoplasma gondii
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Ciclo
heteroxeno facultativo
Sexuada e Assexuada
Toxoplasma gondii
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
CICLO BIOLÓGICO
infectante por 12 a 18 meses
Toxoplasma gondii
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Terço
inicial
Terço médio
Terço final
15%
Graves,
aborto
25 – 55%
Em 15 a 30%, graves
com natimortos ou
Tétrade de Sabin
65%
Subclínico
(leve deficit inte-
lectual, retinoco-
roidite bilateral)
Infecção dos
fetos
Consequências
Fase
gestacional
Toxoplasma gondii
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Tétrade de Sabin
- macro ou microcefalia - retinocoroidites - calcificações cerebrais - retardo mental
Toxoplasma gondii
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Oocisto esporulado
• água • saladas cruas • frutas • contaminação de mãos na terra (jardinagem, hortas)
• hospedeiros de transporte • rações, pastos, grãos
INGESTÃO • Formas de infecção
Toxoplasma gondii
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Bradizoitos
• predação • carnes cruas ou mal cozidas • órgãos transplantados
INGESTÃO TRANSPLANTES
• Formas de infecção
Toxoplasma gondii
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
• manipulação de carnes • transfusão de sangue • predação • leite in natura • transplacentária
Taquizoítos
INGESTÃO CONTATO
TRANSFUSÃO
• Formas de infecção
Toxoplasma gondii - Controle
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
• Evitar a infecção humana com cistos e taquizoítos
• não ingerir carnes/embutidos crus ou mal cozidos
• congelar (freezer) as carnes antes do consumo
• lavar bem as mãos após manusear carnes cruas
• não provar tempero de carne crua
• rigorosa higiene dos utensílios de cozinha (água quente)
• controle rigoroso de doadores de sangue
Toxoplasma gondii - Diagnóstico
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Diretos (parasito)
- Oocistos - fezes de gatos - concentração (Sheather)
confirmação - inoculação em camundongos
- Taquizoítos - líquidos teciduais – fase aguda
- Cistos teciduais microscopia: histopatologia, imunohistoquímica
- PCR - líquido amniótico* - humor vítreo e aquoso - líquido cérebro-espinhal - urina e sangue (generalizada)
Toxoplasma gondii - Diagnóstico
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Exames indiretos (anticorpos)
- RIFI
- ELISA
Toxoplasma gondii - Diagnóstico
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Exames indiretos (anticorpos)
-Títulos crescentes de IgG OU elevados títulos de IgM
Toxoplasma gondii -Diagnóstico e Controle
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Toxoplasma gondii -Diagnóstico e Controle
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Toxoplasma gondii -Diagnóstico Molecular
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
•PCR- gene b1(rRNA)
Spalding et al.2002./J. Bras. Patol. Med. Lab. 38:05-110.
Toxoplasma gondii –Caracterização Molecular
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos
Toxoplasma gondii - Caracterização Molecular
Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos