anormalidades cromosómicas clonales en enfermedades ... · leucemia promielocítica aguda se...

Invest Clin 39 (2) 85-96 1998

Anormalidades cromosoacutemicas clonales en enfermedades hematoloacutegicas malignas mediante FISH Marisol Soto-Quintrula Alicia Rojas-Atencio Huyo ChiJino Frrulcisco Alvarez-Nava Lennie Pineda-Del Villar Karelis Urdruleta Sruldra Gonzaacutelez-Ferrer y Richard Gonzaacutelez

Unidad de Geneacutetica Meacutedica Facultad de Medicina Universidad del Zulia Maracaibo Venezuela

Palabras clave Enfermedades hematoloacutegicas malignas hibrtdacion in situ fluorescente

Resumen La hibrtdacioacuten in situ fluorescente (FISH) es un meacutetodo raacuteshypido sensible y confiable que permite la identificacioacuten de cromosomas comshypletos o porciones de los mismos tanto en metafases corno en nuacutecleos en interfase En este trabajo se analizaron 32 muestras de meacutedula oacutesea de pashycientes con enfermedades hematoloacutegicas malignas 01 LMA 7 LLA 12 LMC y 2 LLC) Estas fueron refertdas a la Unidad de Geneacutetica Meacutedica de la Fashycultad de Medicina de La Universidad del Zulia Maracatbo Venezuela dushyrante los antildeos 1994- 1996 Todas las muestras se analizaron mediante teacutecshynicas citogeneacuteticas convencionales y moleculares (FISH) utilizando sondas de cromosomas totales a satelites y locus especiacuteficas En los pacientes con LMA y LLA la teacutecnica de FISH detectoacute anomaliacuteas cromosoacutemicas clonates no detectadas por la teacutecnica citogeneacutetica convencional Asiacute mismo se identiftcoacute el complejo PML-a RARA en las leucemias promielociticas agudas En el caso de la LMC se demostroacute la presencia del complejo molecular ABL-BCR En este trabajo se demuestra la utilidad del FISH en la deteccioacuten de anoshymaliacuteas cromosoacutemicas clonales las cuales son importantes en el manejo cliacuteshynico de pacientes con este tipo de patologiacuteas

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Clonal cmomosomal abnormalltiesln maJignant hematological disenes by FISH Invest Clin 1998 39(2) 85- 96

Rey words Malignant hematological diseases fluorescent in situ hybrtdization

Abstract Fluorescent in situ hybridization (FISH) Is a rapid sensitive and rel1able method for the identlfication of complete chromosomes or segshyments of them durtng metafase or nuclear interfase The present study shows the results of the analysis of 32 bone marrow aspirates from patients with malignant hematological diseases (11 AML 7 ALL 12 CML and 2 CLL) referred to the Medical Genetics Unit of the Faculty of Medicine Zulia Unishyversity Maracaibo Venezuela between 1994 and 1996 All samples were studied by conventional and molecular techniques (FISH) using probes of total chromosomes a-satelites and locus specific In patients with AML and ALL the FISH technique detected clonal chromosomal abnormalities that were not found by the conventional cytogenetic technique Furthermore the PML-a RARA complex was identified in the promyelocytlc acute leukeshymias The presence of the molecular complex ABL-BCR was also demonsshytrated in CML The present study demonstrates the usefulness of the FISH technique in the detection of clonal chromosomal abnormalities which are important when considertng the clinical care of patients with these patholoshygies

Recibido 27-6-97 Aceptado 1-4-98

INTRODUCCION

Las teacutecnicas convencionales para el anaacutelisis citogeneacutetico han sido extensamente utilizadas para el manejo cliacutenico de los pacientes con enfermedades hematoloacutegicas maligshynas el mismo permite la identificashycioacuten de anomalias cromosoacutemicas clonales las cuales proveen informashycioacuten que ayuda al diagnoacutestiCo proshynoacutestico y monitoreo del estado de remisioacuten de la enfermedad (1 2 3 4) Sin embargo en muchas ocasioshy

nes estas no aportan una informashycioacuten completa debido prtnctpalmenshyte a insuficiencia o ausencia de meshytafases analizables particularmente en neoplasias hematopoyeacuteticas con severa pancitopenia o despueacutes de la quimioterapia (4 5) Por otro lado dada su naturaleza no se puede aplicar en ceacutelulas en interfase en ceacutelulas completamente diferenciashydas como los neutroacutefilos y en ceacutelushylas con bajo iacutendice mitoacutetico como ocurre en los pacientes con Leuceshymia ltnfoide croacutenica (1) Por otra

Investigacioacuten Cliacutenica 39(2) 1998

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parte presenta otras limitaciones tales como la imposibilidad de vishysualizar microdeleciones translocashyciones criacutepticas asi como la identifishycacioacuten de cromosomas derivados y marcadores (6)

Todas estas limitaciones se sushyperaron a raiacutez del advenimiento de la teacutecnica de Hibridacioacuten in situ Fluorescente (FISH) Esta se fundashymenta en el mismo principio del anaacutelisis del Southern blot con la dishyferencia que se realiza sobre una laacuteshymina de vidrio El ADN nuclear a analizar es desnaturalizado y posteshyriormente hibridado con una sonda especifica marcada con biotina o dishygoxigenina y posteriormente se reashyliza la deteccioacuten con un colorante fluorescente conjugado con avidina o anticuerpos anti-digoxigenina seshyguacuten sea el caso (5 7 8)

El objetivo de este trabajo es demostrar la utilidad que tiene la teacutecnica de FISH en la deteccioacuten de anomaliacuteas cromosoacutemicas clonales en pacientes con enfermedades heshymatoloacutegicas malignas

MATERIALES Y MEacuteTODOS

Se analizaron 32 muestras de meacutedula oacutesea de pacientes con enfershymedades hematoloacutegtcas malignas (11 LMA 7 LLA 12 LMC 2 LLC) Estas fueron referidas a la Unidad de Geshyneacutetica Meacutedica de la Facultad de Meshydicina de la Universidad del Zulla durante los antildeos 1994-1996 El grushypo de Ieucemias agudas se clasificoacute de acuerdo al grupo FAB (9)

Las muestras se cultivaron seshyguacuten la teacutecnica descrita por Yunis en

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1981 (10) Los cromosomas obtenishydos se caracterizaron por el meacutetodo de bandeo G previa utilizacioacuten de tripsina y los cariotipos descritos de acuerdo al sistema internacional de nomenclatura citogeneacutetica (ISCN) 1985 (11)

El anaacutelisis mediante la teacutecnica FISH se realizoacute utilizando el protocoshylo y las sondas sumirlistradas por Oncor Inc (Gaithersburg MD) Se utilizaron varios tipos de sondas de cromosomas totales para los croshymosomas 3 y 8 marcadas con biotishyna y para los cromosomas 6 7 Y X marcadas con digoxigenina Alfa sashytelites para los centroacutemeros de los cromosomas 1 11 12 1321 Y Y marcadas con biotina La deteccioacuten de todas estas sondas se realizoacute con fluoresceina Locus-especificas para observar los complejos moleculares ABL-BCR y PML-a RARA producto de la t(922) y t(15 17)

Sondas para los genes ABL y PML fueron marcadas con biotina y detectadas con fluoresceina (sentildeal verde-amarilla) la de los genes BCR y aRARA marcadas con digoxigenina y detectadas con rodamina (sentildeal roja) La contratincioacuten se realizoacute con DAPI (azul)

El criteriacuteo para la seleccioacuten de las sondas centromeacutericas se realizoacute en base a las anomaliacuteas cromosoacutemishycas (trisomiacuteas y monosomiacuteas) yen el caso de las sondas para cromososhymas totales estas se utilizaron para corroborar anomaliacuteas cromosoacutemicas estructurales ambas reportadas maacutes frecuentemente en las enfermeshydades hematoloacutegicas malignas


Se estudiaron de 100-300 nuacuteshycleos en interfaSe para cada sonda exceptuando la de cromosomas totashyles en las cuales se analizaron de 10-20 metafases por laacutemina se fotoshygrafiaron al menos 3 campos por paciente utilizando peliacutecula Kodak color de 35mm

En el estudio convencional la calJftcacioacuten de clonalidad cromosoacuteshymica se realizoacute dependiendo si se trataba de una anomaliacutea estructural o numeacuterica Esto es cuando se reshypetiacutea dos veces la misma alteracioacuten si era una anomaliacutea de tipo estrucshytural o nuacutemerica del tipo hiperdishyploidiexcla o trisomiacutea y tres veces si se trataba de hipodiploidiacuteas o ceacutelulas monosoacutemicas (4 12 131bull

Para el estudio de F1SH el criteshyrio para considerar un clon anormal se establecioacute en nuestro laboratorio tomando en cuenta los criterios reshyportados por Anastasi y cols (1) meshydiante el anaacutelisis de 300 nuacutecleos como miacutenimo por sonda provenienshytes de 6 individuos sin enfermedad hematoloacutegica maligna aparente La decisioacuten de la presencia de un clon monosoacutemico se consideroacute cuando maacutes del 10 (X + 20S) de los nuacuteshycleos de las muestras controles mostraban una sola sentildeal de hibrida cioacuten un clon trisoacutemico cuando maacutes del 200 (X + 20S) de los nuacutecleos mostraban tres sentildeales de hibridashycioacuten La foacutermula X + 20S indica el umbral a partir del cual se consideshyra la presencia de trisomiacutea o monoshysomiacutea (6) Los complejos ABL-BCR y PML- aRARA positivos cuando se observoacute una sentildeal de fusioacuten

rojaverde o algunas ocasiones una sentildeal amarilla

RESULTADOS

La Tabla 1 muestra los datos cliacutenicos y resultados citogeneacuteticos y moleculares de 11 pacientes diagshynosticados con LMA Se observa que en los casos 1 4-8 Y 11 la teacutecnica de FISH confirma los resultados obshytenidos por la teacutecnica citogeneacutetica convencional y en los casos 2 y 3 que corresponden a pacientes con leucemia promielociacutetica aguda se confirma molecularmente la presenshycia del complejo PML-a RARA Adeshymaacutes la teacutecnica molecular detecta anomaliacuteas cromosoacutemicas clonales no detectadas por la teacutecnica de citoshygeneacutetica convencional los cuales coshyrresponden a los casos No 9 y 10

En los pacientes con LLA preshysentados en la Tabla 11 se observa que en el caso No 1 cuyo cariotipo presentaba liacuteneas celulares hipodishyploides la uacutenica anomaliacutea cromosoacuteshymica clonal detectada fue la monoshysomiacutea del cromosoma 7 (Figl) Asiacute mismo en los casos 4 y 5 no fue poshysible obtener metafases analizables Sin embargo al analizar los nuacutecleos en interfase mediante la teacutecnica de F1SH utilizando sondas a-sateacutelites para los cromosomas l 11 12 Y 1321 se pudo demostrar clonalidad para las trisomiacuteas 11 y 21 en el caso No 4 y 11 12 Y 21 en el caso No 5

En el caso No 7 se observoacute en el cariotipo un cromosoma 12 extra el cual estaba constituido solo por el centroacutemero y el brazo largo Se utilishyzoacute una sonda asateacutelite para el mis-


89 Anonnalidades cromosoacutemicas en enfennedades hematoloacutegicas malignas

TABLA 1 DATOS CLINICOS CITOGENETICOS y MOLECULARES DE PACIENTES

CON LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA

CASO SEXO EDAD LMA CARIOTlPO FISH

1 M 43 M4 45XY-7 M 7 70

2 M 25 M3 46XYt(l5q17q) C PRo 76

3 F 7 M3 46XYt(l5q 17q) C PRo 58

4 M 8 M2 45XY-8 M B 32

5 M 21 M2 45XY-11 M11 47

6 F 27 M2 46XX47XXX T X 24

7 M 65 M6 46XXHIPERDIP T 11 18 T 12 7 T 21 12

8 M 33 M2 45X46XY M y 34

9 F 42 M2 46XX T 21 6

10 F 27 M5 46XX M11 11

11 M 13 M4 45XY-3 M 3 29

C PR Complejo PML-a RARA

TABLA U DATOS CLINICOS CITOGENETICOS y MOLECULARES DE PACIENTES CON

LEUCEMIA LINFOIDE AGUDA

CASO SEXO EDAD LIA CARIOTIPO FISH

1 F 15 L1 46XXHIPODIP M 7 70

2 M 10 L1 47XY+2148XY+8+21 T8 12 T 21 88

3 M 6 L2 46XY PSEUDOP M 11 10 M12 9 T 2130

4 F 8 Ll T1120 T 12 2 T2140

5 M 10 L2 T11 15 T 12 6 T2130

6 F 10 L2 47XX+21del(3q)(4q) T2198 D3q 60

7 F 12 L3 47xx+12q T 1280

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Ftg 1 Muestra una metafase donde se observa una monosomia del cromosoma 7 Se observa mediante FISH 1 sola sentildeal fluorescente que corresponde al croshymosoma 7

mo confirmando tal trisomiacutea en el 80 de los nuacutecleos interfaacutesicos anashyizados En el resto de los casos el FISH confirmoacute los resultados de la teacutecnica citogeneacutetica convencional (Tabla 1I)

En los 14 pacientes diagnostishycados como leucemias croacutenicas el 857 (1214) corresponden a LMC y 143 (214) a LLC Los pacienshytes con LLC resultaron cariotipicashymente normales se utilizoacute la sonda asatel1te para el cromosoma 12 obshyservaacutendose dos sentildeales En los pashycientes con LMC el 834 (1012) mostraron en el cariotipo la transloshycacioacuten claacutesica 922 (Ph claacuteSico) 83 (112) translocacioacuten 1622 (Ph variante tipo simple) y 83 (112) la translocacioacuten 821 En todos se comproboacute la presencia del complejo ABIrBeR (Tabla lll)

DISCUSION

Por maacutes de 20 antildeos los estushydios citogeneacuteticos convencionales han sido utilizados para estudiar las anomaliacuteas cromosoacutemicas en pacienshytes con enfermedades hematoloacutegicas malignas En muchos paiacuteses estos estudios se consideran como indisshypensables para el manejo cliacutenico de este tipo de trastornos (13)

La hibridacioacuten in situ Fluoresshycente (FISH) es una teacutecnica que surshyge con la finalidad de superar algushynas limitaciones del estudio citogeshyneacutetico convencional y de alta resolushycioacuten cromosoacutemica Esta teacutecnica deshysarrollada por Rudkin y Stollar y posteriormente empleada en ceacutelulas en interfase por Cremer y col (8 14) ha tenido gran impacto en corto tiempo tanto en los laboratorios de citogeneacutetica como de patologiexcla debi-


91 Anormalidades cromosoacutemicas en enfermedades hematoloacutegicas malignas

TABLA m DATOS CITOGENETICOS y MOLECULARES DE PACIENTES

CON LEUCEMIAS CRONICAS

CARIOTIPO TIPOS DE SONDAS

a-SAT12 ABL-BCR

TIPO NORMAL t(922) t(8 21) t(16 22) T N P A LLC 2 o 2

T Trisomiacutea N Normal P Presencia A Ausencia (del Compleo ABL-BCR) a-SAT12 Sonda a satelite para cromosoma 12

do prinCipalmente a que es una teacutecshynica raacutepida es muy alta su eficienshycia de hibridacioacuten deteccioacuten sensishybilidad y especificidad Asiacute mismo permite analizar un gran nuacutemero de ceacutelulas en poco tiempo y se pueden obtener resultados citogeneacuteticos en ceacutelulas en interfase totalmente difeshyrenciadas en muestras que contieshynen pocas ceacutelulas inclusive metafashyses no adecuadas para estudios cishytogeneacuteticos de rutina (Fig 2) tales como muestras de pacientes desshypueacutes de haber recibido quimioterashypia o transplante de meacutedula oacutesea (2 5) Sin embargo a pesar de las venshytajas y del impacto que ha tenido la aplicacioacuten del FlSH en el manejo cliacuteshynico de pacientes con enfermedades hematoloacutegicas malignas muy pocos estudios han comparado el anaacutelisis citogeneacutetico de interfase (FISH) con los estudios citogeneacuteticos convencioshynales

Larson y col investigaron el vashylor predictivo de los datos citogeneacutetishycos en 148 adultos con LMA de novo Sus resultados demuestran que aquellos pacientes con cariotipo normal presentan mejor pronoacutestico

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que aquellos que no lo tienen Posteshyriormente Hein y Mitelman corroboshyran estos hallazgos (15) Y aclaran que exlste un grupo de pacientes con cario tipo anormal que presenshytan buen pronoacutestico por ejemplo pacientes con invdel (16) t(821) t(15 17) t(l6pI6)

Rowley y col (16) indican que el beneficio praacutectico maacutes importante del anaacutelisis citogeneacutetico en pacienshytes con LMA es que ayuda a detershyminar tanto el diagnoacuteStico como el pronoacutestico Sin embargo es necesashyrio mencionar que en ocasiones el anaacutelisis citogeneacutetico convencional puede indicar un pronoacutestico errado o inadecuado debido generalmente a la poca cantidad de metafases estushydiables El anaacutelisis citogeneacutetico meshydiante la utilizacioacuten de FISH ha conshytribuiexcldo a esclarecer estos casos Un ejemplo de ello lo constituyen los dos pacientes con LMA donde debishydo al insuficiente numero de metashyfases analizadas se reporta como cashyriotipo normal teniendo seguacuten el anaacutelisis cttogeneacutetico convencional buen pronoacutestico pero al realizar la teacutecnica de FISH se logroacute demostrar


Ftg 2 Muestra una metafase inadecuada para estudio citogeneacutetico convencional Se observa mediante FISH 2 sentildeales fluorescentes que corresponden a los dos cromosomas 7

la presencia de anomaliacuteas cromosoacuteshymicas clonales (trisomia 21 y monoshysomiacutea 11) indicativas de mal proshynoacutestico

En el 50 de pacientes con LMA sub-tipo FAB M3 se encontroacute la translocacioacuten 15 17 la cual es pashytognomoacutenica de este tipo de leuceshymia

La translocacioacuten 15 17 es la evidencia citogeneacutetica de un rearreshyglo molecular que involucra el gen a-RARA sobre el cromosoma 17 que codifica el receptor para el aacutecido reshytinoico y el gen llamado PML (leuceshymia promielociacutetica) sobre el cromoshysoma 15 Este complejo comprende la porcioacuten 5 del gen PML el exoacuten 3 y la porcioacuten remanente 3 del gen a-RARA (17 18)

Este hallazgo es particularmenshyte importante ya que este tipo de pashycientes son susceptibles de ser trashytados con derivados del aacutecido retishynoico (17 18) En este sentido la teacutecnica puede ser empleada no solo con fines diagnoacutesticos sino tambieacuten pronoacutesticos y terapeacuteuticos En este estudio los dos pacientes analizashydos presentaron tanto la evidencia citogeneacutetica como molecular de este complejo

La LLC es la leucemia maacutes coshymuacuten en los Estados Unidos y Euroshypa comprendiendo cerca del 30 de todas las leucemias En 1984 Han y col estudiaron 21 pacientes con esta enfermedad y sentildealaron que el 62 presentaban trisomiacutea del croshymosoma 12 como uacutenica anomaliacutea o en combinacioacuten con otras anormali-



dades por lo tanto consideraron que la trisomiacutea 12 era el cambio maacutes imshyportante en la LLC (19) Sin embarshygo Kwong y col estudiaron 19 pashycientes chinos con esa misma enfershymedad utilizando FISH y encontrashyron solo 219 (10) (20)

En este estudio en los dos pashycientes analizados no se encontroacute tal alteracioacuten probablemente debido al pequentildeo numero de casos estushydiados o a diferencias bioloacutegicas enshytre poblaciones Por lo tanto se reshyquiere de otros estudios con un mashyyor nuacutemero de casos para confirmar la incidencia real de trisomiacutea 12 en nuestra poblacioacuten

La LMC se caracteriza citogeneacuteshyticamente por la presencia del croshymosoma Ph1ladelphia (Ph) producto de la t(922) (q34ql12) Y molecushylarmente por la formacioacuten del comshyplejo ABL-BCR originado de la fushysioacuten del proto-oncogen Abelson (ABL) ubicado en la regioacuten 9q34 con el gen BCR ubicado en la regioacuten 22ql12 (16 21-26)

Han sido reportados diferentes tipos de translocaciones en este trastorno las cuales incluyen el croshymosoma Ph claacutesico el cual aparece en el 90 de todos los casos de LMC El cromosoma Ph variante que explica aproximadamente el 5 de los casos Este uacuteltimo citogeneacutetishycamente puede ser de 2 tipos vashyriante Ph simple cuando la transloshycacioacuten involucra al cromosoma 9 o al 22 con otro cromosoma Variante Ph compleja cuando involucra a los cromosomas 9 y 22 con otro(s) croshymosomas Esto es involucra tres o maacutes cromosomas pero ellos inclu-

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yen ruptura y puntos de fusioacuten en 9q34 y 22ql12 Y el llamado Ph oculto donde no se observa la anoshymaliacutea cromosoacutemica pero tienen el complejo molecular (22 27 28) Esto ocurre en el 5 de los casos de LMC y corresponden a translocacioshynes sub-microscoacutepicas o a un bajo nivel de mosaicismo (2223)

En este estudio se demostroacute la presencia del complejo molecular ABL-BCR mediante la teacutecnica de FISH en todos los pacientes con LMC Es importante destacar que en los casos donde se observoacute la trasloshycacioacuten 821 y 1622 (Tabla I1I) la presencia del complejo molecular ABL-BCR sugirioacute que la t 821 era una anomaliacutea adicional al cromososhyma Ph oculto La t 1622 resultoacute una variante Ph tipo simple producto de una traslocacioacuten compleja criacuteptica que involucraba a los cromosomas 9 y 22 con otro cromosoma

Con los meacutetodos citogeneacuteticos convencionales la observacioacuten de un cromosoma Ph puede ser evidenshycia de LMC pero no es evidencia dishyrecta de la fusioacuten ABL-BCR (23) y en estos casos es donde la aplicashycioacuten del FISH es relevante

Nuestros resultados demuesshytran la utilidad de la teacutecnica de FISH para el anaacutelisis citogeneacutetico ya que es una teacutecnica raacutepida sencishylla confiable y de muy alta resolushycioacuten Permite la deteccioacuten de seshycuencias de ADN de intereacutes tanto en metafases como en nuacutecleos en interfase la demostracioacuten de clonashylidad de tipo nuacutemerico la visualizashycioacuten de los complejos ABL-BCR y PML-a RARA no detectados por teacutecshy


nicas convencionales Por 10 tanto su uso conjuntamente con el anaacuteli shysis citogeneacutetico convencional resulta indispensable para el adecuado mashynejo cliacutenico de pacientes con enfershymedades hematoloacutegicas malignas

AGRADECIMIENTO

Nuestro agradecimiento al Conshysejo de Desarrollo Cientifico y Hushymaniacutestico (CONDES) de La Universishydad del Zulia por el fmanciamiento de este trabajo (No 0609-94)

A la Dra Maria Diez de Ewald por la traduccioacuten del resumen en inshygleacutes

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28 HURET L Complex translocashytlons simple varlant translocashytlons and Ph-negative cases in chronic myelogenous leukaeshymiacute~ Hum Genet 1990 85565-568

Investigacioacuten Clinica 39(2) 1998


Clonal cmomosomal abnormalltiesln maJignant hematological disenes by FISH Invest Clin 1998 39(2) 85- 96

Rey words Malignant hematological diseases fluorescent in situ hybrtdization

Abstract Fluorescent in situ hybridization (FISH) Is a rapid sensitive and rel1able method for the identlfication of complete chromosomes or segshyments of them durtng metafase or nuclear interfase The present study shows the results of the analysis of 32 bone marrow aspirates from patients with malignant hematological diseases (11 AML 7 ALL 12 CML and 2 CLL) referred to the Medical Genetics Unit of the Faculty of Medicine Zulia Unishyversity Maracaibo Venezuela between 1994 and 1996 All samples were studied by conventional and molecular techniques (FISH) using probes of total chromosomes a-satelites and locus specific In patients with AML and ALL the FISH technique detected clonal chromosomal abnormalities that were not found by the conventional cytogenetic technique Furthermore the PML-a RARA complex was identified in the promyelocytlc acute leukeshymias The presence of the molecular complex ABL-BCR was also demonsshytrated in CML The present study demonstrates the usefulness of the FISH technique in the detection of clonal chromosomal abnormalities which are important when considertng the clinical care of patients with these patholoshygies

Recibido 27-6-97 Aceptado 1-4-98

INTRODUCCION

Las teacutecnicas convencionales para el anaacutelisis citogeneacutetico han sido extensamente utilizadas para el manejo cliacutenico de los pacientes con enfermedades hematoloacutegicas maligshynas el mismo permite la identificashycioacuten de anomalias cromosoacutemicas clonales las cuales proveen informashycioacuten que ayuda al diagnoacutestiCo proshynoacutestico y monitoreo del estado de remisioacuten de la enfermedad (1 2 3 4) Sin embargo en muchas ocasioshy

nes estas no aportan una informashycioacuten completa debido prtnctpalmenshyte a insuficiencia o ausencia de meshytafases analizables particularmente en neoplasias hematopoyeacuteticas con severa pancitopenia o despueacutes de la quimioterapia (4 5) Por otro lado dada su naturaleza no se puede aplicar en ceacutelulas en interfase en ceacutelulas completamente diferenciashydas como los neutroacutefilos y en ceacutelushylas con bajo iacutendice mitoacutetico como ocurre en los pacientes con Leuceshymia ltnfoide croacutenica (1) Por otra









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RESULTADOS









1 M 43 M4 45XY-7 M 7 70

2 M 25 M3 46XYt(l5q17q) C PRo 76

3 F 7 M3 46XYt(l5q 17q) C PRo 58

4 M 8 M2 45XY-8 M B 32

5 M 21 M2 45XY-11 M11 47

6 F 27 M2 46XX47XXX T X 24


8 M 33 M2 45X46XY M y 34

9 F 42 M2 46XX T 21 6

10 F 27 M5 46XX M11 11

11 M 13 M4 45XY-3 M 3 29






2 M 10 L1 47XY+2148XY+8+21 T8 12 T 21 88

3 M 6 L2 46XY PSEUDOP M 11 10 M12 9 T 2130

4 F 8 Ll T1120 T 12 2 T2140

5 M 10 L2 T11 15 T 12 6 T2130

6 F 10 L2 47XX+21del(3q)(4q) T2198 D3q 60

7 F 12 L3 47xx+12q T 1280

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DISCUSION








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AGRADECIMIENTO

























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RESULTADOS









1 M 43 M4 45XY-7 M 7 70

2 M 25 M3 46XYt(l5q17q) C PRo 76

3 F 7 M3 46XYt(l5q 17q) C PRo 58

4 M 8 M2 45XY-8 M B 32

5 M 21 M2 45XY-11 M11 47

6 F 27 M2 46XX47XXX T X 24


8 M 33 M2 45X46XY M y 34

9 F 42 M2 46XX T 21 6

10 F 27 M5 46XX M11 11

11 M 13 M4 45XY-3 M 3 29






2 M 10 L1 47XY+2148XY+8+21 T8 12 T 21 88

3 M 6 L2 46XY PSEUDOP M 11 10 M12 9 T 2130

4 F 8 Ll T1120 T 12 2 T2140

5 M 10 L2 T11 15 T 12 6 T2130

6 F 10 L2 47XX+21del(3q)(4q) T2198 D3q 60

7 F 12 L3 47xx+12q T 1280

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AGRADECIMIENTO

























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RESULTADOS









1 M 43 M4 45XY-7 M 7 70

2 M 25 M3 46XYt(l5q17q) C PRo 76

3 F 7 M3 46XYt(l5q 17q) C PRo 58

4 M 8 M2 45XY-8 M B 32

5 M 21 M2 45XY-11 M11 47

6 F 27 M2 46XX47XXX T X 24


8 M 33 M2 45X46XY M y 34

9 F 42 M2 46XX T 21 6

10 F 27 M5 46XX M11 11

11 M 13 M4 45XY-3 M 3 29






2 M 10 L1 47XY+2148XY+8+21 T8 12 T 21 88

3 M 6 L2 46XY PSEUDOP M 11 10 M12 9 T 2130

4 F 8 Ll T1120 T 12 2 T2140

5 M 10 L2 T11 15 T 12 6 T2130

6 F 10 L2 47XX+21del(3q)(4q) T2198 D3q 60

7 F 12 L3 47xx+12q T 1280

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AGRADECIMIENTO

























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1 M 43 M4 45XY-7 M 7 70

2 M 25 M3 46XYt(l5q17q) C PRo 76

3 F 7 M3 46XYt(l5q 17q) C PRo 58

4 M 8 M2 45XY-8 M B 32

5 M 21 M2 45XY-11 M11 47

6 F 27 M2 46XX47XXX T X 24


8 M 33 M2 45X46XY M y 34

9 F 42 M2 46XX T 21 6

10 F 27 M5 46XX M11 11

11 M 13 M4 45XY-3 M 3 29






2 M 10 L1 47XY+2148XY+8+21 T8 12 T 21 88

3 M 6 L2 46XY PSEUDOP M 11 10 M12 9 T 2130

4 F 8 Ll T1120 T 12 2 T2140

5 M 10 L2 T11 15 T 12 6 T2130

6 F 10 L2 47XX+21del(3q)(4q) T2198 D3q 60

7 F 12 L3 47xx+12q T 1280

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anormalidades cromosómicas clonales en enfermedades ... · leucemia promielocítica aguda se...

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