anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

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IDENTIFICACIÓN INSTITUCIÓN EDUCATIVA SOL DE ORIENTE Sector: urbano de carácter oficial Medellín GRUPO DE ESTUDIO PARA EL MEJORAMIENTO AMBIENTAL - GEMA Dirigida a estudiantes de la institución, la comunidad, la ciudad, el país y el mundo Año de inicio 2005

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Page 1: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

IDENTIFICACIÓN

INSTITUCIÓN EDUCATIVA SOL DE ORIENTE

Sector: urbano de carácter oficial

Medellín

GRUPO DE ESTUDIO PARA EL

MEJORAMIENTO AMBIENTAL - GEMA

Dirigida a estudiantes de la institución, la

comunidad, la ciudad, el país y el mundo

Año de inicio 2005

Page 2: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

ORIGEN DE LA EXPERIENCIA

La institución educativa atiende una población conformada a partir del desplazamiento y localizada en una zona de alto riesgo

Los comportamientos que asume esta población son generadores de problemas que afectan las condiciones naturales y sociales.

Exige respuestas urgentes de distintos ordenes.

Page 3: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

Se pretende crear un espacio educativo

ambiental que desde la investigación y

seguimiento de los procesos se realicen

trabajos de concientización, capacitación y

aplicación que permitan construir futuro y

garantizar calidad de vida.

Page 4: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

ENFOQUE TEORICO

Los estudiantes, docentes y comunidad

tienen un sin numero de conocimientos

previos, creencias, valores, costumbres,

cosmovisiones, normas, alegrías y tristezas.

En el espacio educativo se obvia esta rica y

diversa experiencia acumulada, así como el

proceso de vivencia en la escuela.

Page 5: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

Se fundamenta en la relación participante (observador y observando).

Se tiene en cuenta la naturaleza cualitativa y cuantitativa de una investigación.

La clave es el desarrollo de competencias que permitan descubrir el entorno, entrar en contacto con la realidad y ser creativos en la búsqueda de soluciones.

Page 6: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

CULTURA

BIOTICO ABIOTICO

SISTEMA NATURAL

INDIVIDUO SOCIEDAD

SISTEMA SOCIAL

CRISIS

GENERALIZADAS

ORIEGEN ACCIONES

REGIONAL NACIONAL MUNDIAL ?

IMPACTO

EDUCACIÓN AMBIENTAL

Page 7: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

METODOLOGIA

Este modelo supone cuatro pasos

generales

1. Delimitación del problema

2. Determinación de las condiciones

3. Análisis de alternativas de solución

4. Planeación y desarrollo de propuestas

Page 8: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever
Page 9: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

PRINCIPALES ACTIVIDADES

Realización de actividades lúdico-

educativas

Capacitación

Implementación de material didáctico

Capacitación para la elaboración de

proyectos.

Accesoria y apoyo a proyectos

Page 10: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

LOGROS

Parte activa en la construcción de la I.E. Sol de Oriente , y en la solución de sus problemas.

Premio Nacional Unilever Andina con el proyecto “PROPAGACIÓN DE ORQUIDEAS EN VIA DE EXTINCIÓN PARA SU CONSERVACIÓN Y COMERCIALIZACIÓN

Reconocimiento programa ONDAS proyecto plantas medicinales, barrio Villatina.

Ganadores del 4to concurso Capital Semilla con la propuesta de capacitaciones ambientales.

Page 11: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

“PROPAGACIÓN DE ORQUIDEAS EN

VIA DE EXTINCIÓN PARA SU

CONSERVACIÓN Y

COMERCIALIZACIÓN”

Page 12: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

INTRODUCCIÓN

Este proyecto ha sido conformado con el

propósito de generar investigación en la

comunidad estudiantil, para recuperar

especies que están en vía de extinción

además de generar conciencia en el tema

ambiental. Partiendo de una idea

innovadora como lo es el cultivo in Vitro.

Page 13: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

INTRODUCCIÓN

Colombia mega diversidad orquídeas

205 géneros 3500 especies 10%

Ampliamente distribuidas en todo el territorio

Page 14: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

SISTEMA AMBIENTAL

RECUPERACIÓN EXTINCION DE ESPECIES

IMPACTO

Page 15: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

OBJETIVO GENERAL

Propagar orquídeas en vía de extinción para

su conservación y comercialización en el

cerro “Pan de Azucar” y parque “Arví”.

Page 16: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Recolección plantas madres en el cerro Pan de Azúcar y parque Arví

Adecuar en el Aula Ambiental de la I.E. Sol de Oriente el laboratorio para el cultivo in Vitro de orquídeas.

Estandarizar protocolo para reproducción de orquídeas a partir de semillas y explantes

Propagar especies nativas en vía de extinción por cultivo in Vitro.

Page 17: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

Construir un invernadero para el cultivo de orquídeas y especies nativas en vía de extinción.

Formar a los estudiantes en los principios fundamentales que intervienen en la propagación vegetal, así como con los métodos y las técnicas útiles a emplear en este campo.

Generar cultura ambiental.

Page 18: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

METODOLOGÍA

El cultivo in vitro se define como el cultivo

en un medio nutritivo, en condiciones

estériles, de plantas, semillas, órganos,

explantos, tejidos, células y protoplastos de

plantas superiores.

Page 19: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

CULTIVO DE TEJIDOS

Técnicas mediante las cuales un explante se cultiva asépticamente

en un medio de composición química

definida y se incuba en condiciones ambientales controladas.

- Estudios básicos de fisiología, genética y bioquímica.

- Bioconversión y producción de compuestos.

- Incremento en la variabilidad genética.

- Obtención de plantas libres de patógenos.

- Propagación de plantas.

- Conservación e intercambio de germoplasma.

Page 20: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

FASES DE LA PROPAGACIÓN

ESTABLECIMIENTO

DEL CULTIVO

ASEPTICO

Fase 0 o Preparativa

Fase I o

Establecimiento o de

Iniciación

Selección de la

planta donadora

Asepsia y viabilidad

de los cultivos

Page 21: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

CRECIMIENTO DEL INOCULO

Fase II o

Multiplicación

Organogénesis y

embriogénesis

Miles de plantas en

corto tiempo

Page 22: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

5.65.55.55.7-5.85.5pH

-20-30--Sacarosa (g/L)

0.01-0.5---Biotina

100.0100.0100.0100.0100.0-Mioinositol

--0.5---Acido Fólico

1.010.00.50.1-0.1Tiamina - ClH

1.01.00.50.5-0.1Piridoxina HCl

1.01.00.50.5-0.5Ac. nicotínico

--2.02.0-3.0Glicina

COMPUESTOS ORGANICOS

----1.0-Fe3Cl

3· 6 H

2O

-----2.5Fe2(SO

4)3

--27.827.8--FeSO4

· 7 H2O

--37.337.3--Na2EDTA · 2H

2O

FE – EDTA

----0.03-NiCL2

· 6 H2O

----0.03-AlCL3

0.0250.025-0.025--CoCl2

· 6 H2O

0.0250.0250.0250.0250.03-CuSO4

· 5 H2O

-0.0250.25---CuSO4

0.250.250.250.25--Na2MoO

4· 2 H

2O

0.750.75-0.830.010.75KI

3.03.010.06.21.01.5H3BO

3

2.02.010.08.61.03.0ZnSO4

· 7 H2O

10.010.0----MnSO4

· H2O

--25.022.30.17.0MnSO4

· 4 H2O

MICRONUTRIENTES

-150--12519NaH2PO

4· H

2O

-----200Na2SO

4

300---75065KCl

170-68170--KH2PO

4

300250185370250720MgSO4

· 7 H2O

--166---CaCL2

600150-44075-CaCL2

· 2 H2O

190025009501900-80KNO3

-134----(NH4)2SO

4

600-7201650--NH4NO

3

----600-NaNO3

-----300Ca(NO3)2

· 4 H2O

MACRONUTRIENTES

KMB5NITSCHMSHELLERWHITE

MEDIOSCOMPONENTES

5.65.55.55.7-5.85.5pH

-20-30--Sacarosa (g/L)

0.01-0.5---Biotina

100.0100.0100.0100.0100.0-Mioinositol

--0.5---Acido Fólico

1.010.00.50.1-0.1Tiamina - ClH

1.01.00.50.5-0.1Piridoxina HCl

1.01.00.50.5-0.5Ac. nicotínico

--2.02.0-3.0Glicina

COMPUESTOS ORGANICOS

----1.0-Fe3Cl

3· 6 H

2O

-----2.5Fe2(SO

4)3

--27.827.8--FeSO4

· 7 H2O

--37.337.3--Na2EDTA · 2H

2O

FE – EDTA

----0.03-NiCL2

· 6 H2O

----0.03-AlCL3

0.0250.025-0.025--CoCl2

· 6 H2O

0.0250.0250.0250.0250.03-CuSO4

· 5 H2O

-0.0250.25---CuSO4

0.250.250.250.25--Na2MoO

4· 2 H

2O

0.750.75-0.830.010.75KI

3.03.010.06.21.01.5H3BO

3

2.02.010.08.61.03.0ZnSO4

· 7 H2O

10.010.0----MnSO4

· H2O

--25.022.30.17.0MnSO4

· 4 H2O

MICRONUTRIENTES

-150--12519NaH2PO

4· H

2O

-----200Na2SO

4

300---75065KCl

170-68170--KH2PO

4

300250185370250720MgSO4

· 7 H2O

--166---CaCL2

600150-44075-CaCL2

· 2 H2O

190025009501900-80KNO3

-134----(NH4)2SO

4

600-7201650--NH4NO

3

----600-NaNO3

-----300Ca(NO3)2

· 4 H2O

MACRONUTRIENTES

KMB5NITSCHMSHELLERWHITE

MEDIOSCOMPONENTES

Page 23: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

Hacer las soluciones

macro y micro

Vitaminas, Hormonas

y Azúcar

Page 24: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

Adición del agente

gelificante (Si lo

requiere) y

calentamiento

Page 25: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

Ajuste del volumen

final.

Page 26: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

Medición del pH

Page 27: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

Servida y tapado del

medio, empaque en

los frascos con medio

para ser esterilizados.

Page 28: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

ORGANOGENESIS

Proceso de iniciación y

desarrollo de una

estructura que muestra

la forma y/o función

del órgano natural:

Citoquininas

Auxinas

Yemas

(Caulogénesis)

Raices

(Rizogénesis)

Callos

Explantes

Page 29: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

ENRAIZAMIENTO

Fase III o

Enraizamiento

preparar al material

vegetal para su

reacondicionamiento

en campo

sistema radical

Page 30: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

ACLIMATACIÓN

Fase IV o Aclimatación

o Endurecimiento

Condiciones para el

transplante definitivo a

campos comerciales o

de producción.

Page 31: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

ETAPA I

MONTAJE DE LABORATORIO

CONSECUCIÓN DE RECURSOS-PROYECTO UNILEVER

ADECUACIÓN DE ESPACIO

Page 32: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

ETAPA II

PROPAGACIÓN ORQUIDEAS

RECOLECCIÓN PLANTAS MADRES EN EL CERRO PAN DE AZUCAR Y PARQUE ARVÍ.

ESTANDARIZACIÓN PROTOCOLOS PARA SEMILLA

ESTANDARIZACIÓN PROTOCOLO PARA ESPLANTES

Page 33: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

ETAPA II

PROPAGACIÓN ORQUIDEAS

RECOLECCIÓN PLANTAS MADRES EN EL CERRO PAN DE AZUCAR Y PARQUE ARVÍ.

ESTANDARIZACIÓN PROTOCOLOS PARA SEMILLA

ESTANDARIZACIÓN PROTOCOLO PARA Ex PLANTES

Page 34: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

ETAPA III

PROCESO EX-VITRO

PRODUCCIÓN

SUSTRATO PARA

SIEMBRA EX-VITRO.

ACLIMATACIÓN EN

BANDEJAS

PRODUCCIÓN EN

INVERNADERO

Page 35: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

Aclimatación:

- Extraer la plántula del tubo y lavar las raíces para eliminar los restos del medio de cultivo, seccionar según el número de esquejes posibles de obtener.

- Aparte agujerear la tapa de las cajas rectangulares de plástico (18 cm largo x 12 cm ancho x 7 cm profundidad) y colocar sustrato orgánico comercial. Con una varilla marcar sobre el sustrato los lugares donde se colocarán los esquejes (aproximadamente 20 esquejes/caja), plantarlos y regar con agua destilada.

- Llevar las cajas a cámara de cultivo a 20ºC, fotoperíodo 16 hs de luz y 8 hs oscuridad, intensidad lumínica de 3000 lux.

- Una vez enraizados los esquejes, llevar las cajas al invernáculo y se colocarlas bajo mesada por una o dos semanas hasta su plantación final en macetas.

Page 36: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

RESULTADOS

Page 37: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

Etapa I

Equipos y reactivos

Cámara de asepsia

pHmetro

Lámpara Ultravioleta

Estantería para crecimiento

Lámparas de neón

Reactivos para protocolo casero y protocolo

M.S.

Page 38: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

Plantas madre

Se recolectaron 42

individuos de los

géneros

masdevallia y

cattleya

Se recolectaron 2

capsulas verdes de

cattleya

Page 39: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

Áreas del laboratorio PREPARACION

TRANSFERENCIA

LAVADO

ESTERILIZACION

Incubación in vitro

Crecimiento in vivo Crecimiento in vivo

Observación

Terapia y Control

ALMACEN

Page 40: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

ETAPA II

Page 41: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

Protocolo para semilla

Medio de cultivo Extracto de banano: una papilla de

banano, se adiciona agua destilada

y abono que posea nitrógeno,

fosforo y potasio) vitamina, acido

micotinico, piroxidina, glicina y

mioinositol.

con extracto de banano ya listo y

para dar consistencia se utiliza

agar y como medio energético

sacarosa. para un litro de medio, 3

gr de agar y 30 gr/L de extracto de

banano.

Page 42: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

Protocolo para semilla

siembra Se remueve la flor con bisturí.

Se limpia con solución jabonosa

Se enjuaga con agua destilada.

Se introduce en solución de

hipoclorito al1% durante 10

minútos.

Se sumergen en alcohol industrial y

se flamea.

Se hace corte de la capsula, y se

extraen las semillas llevándolas al

medio.

Se añade agua destilada sobre

cada frasco para su distribución.

Page 43: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

RESULTADOS

Se realizaron 5 siembras de

20 frascos cada una, con

un intervalo de 30 días.

Page 44: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

contaminación en

las siembras

50% siembrascontaminadas

50% siembras sincontaminar

germinación

5% de germinación

95% sin germinar

Page 45: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

TAMAÑO DEL EXPLANTE

Grande → Posibilidad de formar callos

Heterogeneidad y contaminación con

microorganismos

Muy pequeño → No hay formación de callos

Page 46: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

Protocolo Murashige Skoog

Page 47: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

SOLUCIÓN MADRE CONCENTRACIÓN GRAMOS (500 mL)

A. Na2EDTA (EDTA Sal de sodio) 37,3 mg/L 0.01865

FeSO47H2O (Sulfato Ferroso) 27,8 mg/L 0.0139

B NH4NO3 (Nitrato de amonio) 1,65 g/L 0.825

KNO3 (Nitrato Potásico) 1,9 g/L 0.95

C H3BO3 (Ácido bórico) 0,62 g/L 0.31

KH2PO4 (Fosfato de potasio) 170 mg/L 0.085

KI (Iodo de Potasio) 83 g/L 0.0415

Na2MO4.2H2O (Molibdato de sodio) 25 mg/L 0.0125

CoCL2.5H2O (Dicloruro de cobalto) 2,5 mg/L 0.00125

D MgSO47H2O (Sulfato de magnesio) 370 mg/L 0.185

MnSO4$H2O (Sulfato de manganeso) 1,69 g/L

0.845

ZnSO4 (Sulfato de Zinc) 0,86 g/L 0.43

CuSO5H2O (Sulfato de cobre ) 2,5 mg/L 0.00125

E CaCl2.2H2O (Cloruro de calcio) 440 mg/L 0.22

Vitaminas

H Mioinositol 10 g/L 0.005

F Tiamina 10 mg/L 0.005

I Ác. Nicotínico 50 mg/L 0.025

J Piridoxina 50 mg/L 0.025

K Glicina 0,2 g/L 0.1

sacarosa 30 g/ l 15

pH 5,7

Page 48: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever
Page 49: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

Contaminación

Se realizaron 6 siembras para un total de

135 frascos sembrados con ex plantes

En las cuatros primeras siembras dieron

como resultado un 83.7% de frascos

contaminados.

La quinta y sexta siembra dieron como

resultado un 65% de muestras

contaminadas .

Page 50: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

Producción de callo

97,8% de explantessin callo

2,2% de explantescon callo

Page 51: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

ANALISIS Y

RECOMENDACIONES

Page 52: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

FACTORES QUE AFECTAN

En la planta donadora tener en cuenta su estado fisiológico de desarrollo y fitosanitario además de su genotipo y especie en los que en ocasiones pueden ofrecer diferentes respuestas.

En el explante la edad fisiológica, la ubicación en la planta madre y el tamaño, un explante muy grande puede contaminarse fácilmente y muy pequeño puede no responder al cultivo.

Los factores físicos y químicos como luz temperatura y pH pueden ser cruciales, algunos explantes responden mejor a condiciones de baja temperatura que otros, o de acidez.

En cuanto al medio de cultivo es pertinente realizar una revisión bibliográfica para tratar de aproximarnos al medio de cultivo más adecuado para la planta, además la consistencia del medio también puede afectar la respuesta.

Page 53: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

MEDIO DE CULTIVO

Murashige o sus modificaciones.

Benéficas para el desarrollo de callos

embriogénicos.

Sacarosa → 12% Eleva el potencial.

Carbón Activado → Evita la oxidación

Page 54: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

LIMITACIONES DEL CULTIVO DE

TEJIDOS

La planta madre como material de partida debe ser cuidadosamente seleccionado

Conocimiento de las técnicas para elegir la más adecuada a las necesidades.

Page 55: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

ETAPA IV

GENERAR CULTURA AMBIENTAL

DAR A CONOCER EL PROYECTO

CAPACITACIÓN EN BIOTECNOLOGIA VEGETAL-FORMACIÓN SEMILLERO

EDUCACIÓN AMBIENTAL A LA COMUNIDAD

GENERAR EMPRESA

Page 56: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever
Page 57: Anexo 3 gema orquiideas-premio unilever

HACIA DONDE NOS

DIRIGIMOS