anexo 3 gema orquiideas-premio unilever
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IDENTIFICACIÓN
INSTITUCIÓN EDUCATIVA SOL DE ORIENTE
Sector: urbano de carácter oficial
Medellín
GRUPO DE ESTUDIO PARA EL
MEJORAMIENTO AMBIENTAL - GEMA
Dirigida a estudiantes de la institución, la
comunidad, la ciudad, el país y el mundo
Año de inicio 2005
ORIGEN DE LA EXPERIENCIA
La institución educativa atiende una población conformada a partir del desplazamiento y localizada en una zona de alto riesgo
Los comportamientos que asume esta población son generadores de problemas que afectan las condiciones naturales y sociales.
Exige respuestas urgentes de distintos ordenes.
Se pretende crear un espacio educativo
ambiental que desde la investigación y
seguimiento de los procesos se realicen
trabajos de concientización, capacitación y
aplicación que permitan construir futuro y
garantizar calidad de vida.
ENFOQUE TEORICO
Los estudiantes, docentes y comunidad
tienen un sin numero de conocimientos
previos, creencias, valores, costumbres,
cosmovisiones, normas, alegrías y tristezas.
En el espacio educativo se obvia esta rica y
diversa experiencia acumulada, así como el
proceso de vivencia en la escuela.
Se fundamenta en la relación participante (observador y observando).
Se tiene en cuenta la naturaleza cualitativa y cuantitativa de una investigación.
La clave es el desarrollo de competencias que permitan descubrir el entorno, entrar en contacto con la realidad y ser creativos en la búsqueda de soluciones.
CULTURA
BIOTICO ABIOTICO
SISTEMA NATURAL
INDIVIDUO SOCIEDAD
SISTEMA SOCIAL
CRISIS
GENERALIZADAS
ORIEGEN ACCIONES
REGIONAL NACIONAL MUNDIAL ?
IMPACTO
EDUCACIÓN AMBIENTAL
METODOLOGIA
Este modelo supone cuatro pasos
generales
1. Delimitación del problema
2. Determinación de las condiciones
3. Análisis de alternativas de solución
4. Planeación y desarrollo de propuestas
PRINCIPALES ACTIVIDADES
Realización de actividades lúdico-
educativas
Capacitación
Implementación de material didáctico
Capacitación para la elaboración de
proyectos.
Accesoria y apoyo a proyectos
LOGROS
Parte activa en la construcción de la I.E. Sol de Oriente , y en la solución de sus problemas.
Premio Nacional Unilever Andina con el proyecto “PROPAGACIÓN DE ORQUIDEAS EN VIA DE EXTINCIÓN PARA SU CONSERVACIÓN Y COMERCIALIZACIÓN
Reconocimiento programa ONDAS proyecto plantas medicinales, barrio Villatina.
Ganadores del 4to concurso Capital Semilla con la propuesta de capacitaciones ambientales.
“PROPAGACIÓN DE ORQUIDEAS EN
VIA DE EXTINCIÓN PARA SU
CONSERVACIÓN Y
COMERCIALIZACIÓN”
INTRODUCCIÓN
Este proyecto ha sido conformado con el
propósito de generar investigación en la
comunidad estudiantil, para recuperar
especies que están en vía de extinción
además de generar conciencia en el tema
ambiental. Partiendo de una idea
innovadora como lo es el cultivo in Vitro.
INTRODUCCIÓN
Colombia mega diversidad orquídeas
205 géneros 3500 especies 10%
Ampliamente distribuidas en todo el territorio
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
SISTEMA AMBIENTAL
RECUPERACIÓN EXTINCION DE ESPECIES
IMPACTO
OBJETIVO GENERAL
Propagar orquídeas en vía de extinción para
su conservación y comercialización en el
cerro “Pan de Azucar” y parque “Arví”.
OBJETIVOS ESPECIFICOS
Recolección plantas madres en el cerro Pan de Azúcar y parque Arví
Adecuar en el Aula Ambiental de la I.E. Sol de Oriente el laboratorio para el cultivo in Vitro de orquídeas.
Estandarizar protocolo para reproducción de orquídeas a partir de semillas y explantes
Propagar especies nativas en vía de extinción por cultivo in Vitro.
Construir un invernadero para el cultivo de orquídeas y especies nativas en vía de extinción.
Formar a los estudiantes en los principios fundamentales que intervienen en la propagación vegetal, así como con los métodos y las técnicas útiles a emplear en este campo.
Generar cultura ambiental.
METODOLOGÍA
El cultivo in vitro se define como el cultivo
en un medio nutritivo, en condiciones
estériles, de plantas, semillas, órganos,
explantos, tejidos, células y protoplastos de
plantas superiores.
CULTIVO DE TEJIDOS
Técnicas mediante las cuales un explante se cultiva asépticamente
en un medio de composición química
definida y se incuba en condiciones ambientales controladas.
- Estudios básicos de fisiología, genética y bioquímica.
- Bioconversión y producción de compuestos.
- Incremento en la variabilidad genética.
- Obtención de plantas libres de patógenos.
- Propagación de plantas.
- Conservación e intercambio de germoplasma.
FASES DE LA PROPAGACIÓN
ESTABLECIMIENTO
DEL CULTIVO
ASEPTICO
Fase 0 o Preparativa
Fase I o
Establecimiento o de
Iniciación
Selección de la
planta donadora
Asepsia y viabilidad
de los cultivos
CRECIMIENTO DEL INOCULO
Fase II o
Multiplicación
↓
Organogénesis y
embriogénesis
↓
Miles de plantas en
corto tiempo
5.65.55.55.7-5.85.5pH
-20-30--Sacarosa (g/L)
0.01-0.5---Biotina
100.0100.0100.0100.0100.0-Mioinositol
--0.5---Acido Fólico
1.010.00.50.1-0.1Tiamina - ClH
1.01.00.50.5-0.1Piridoxina HCl
1.01.00.50.5-0.5Ac. nicotínico
--2.02.0-3.0Glicina
COMPUESTOS ORGANICOS
----1.0-Fe3Cl
3· 6 H
2O
-----2.5Fe2(SO
4)3
--27.827.8--FeSO4
· 7 H2O
--37.337.3--Na2EDTA · 2H
2O
FE – EDTA
----0.03-NiCL2
· 6 H2O
----0.03-AlCL3
0.0250.025-0.025--CoCl2
· 6 H2O
0.0250.0250.0250.0250.03-CuSO4
· 5 H2O
-0.0250.25---CuSO4
0.250.250.250.25--Na2MoO
4· 2 H
2O
0.750.75-0.830.010.75KI
3.03.010.06.21.01.5H3BO
3
2.02.010.08.61.03.0ZnSO4
· 7 H2O
10.010.0----MnSO4
· H2O
--25.022.30.17.0MnSO4
· 4 H2O
MICRONUTRIENTES
-150--12519NaH2PO
4· H
2O
-----200Na2SO
4
300---75065KCl
170-68170--KH2PO
4
300250185370250720MgSO4
· 7 H2O
--166---CaCL2
600150-44075-CaCL2
· 2 H2O
190025009501900-80KNO3
-134----(NH4)2SO
4
600-7201650--NH4NO
3
----600-NaNO3
-----300Ca(NO3)2
· 4 H2O
MACRONUTRIENTES
KMB5NITSCHMSHELLERWHITE
MEDIOSCOMPONENTES
5.65.55.55.7-5.85.5pH
-20-30--Sacarosa (g/L)
0.01-0.5---Biotina
100.0100.0100.0100.0100.0-Mioinositol
--0.5---Acido Fólico
1.010.00.50.1-0.1Tiamina - ClH
1.01.00.50.5-0.1Piridoxina HCl
1.01.00.50.5-0.5Ac. nicotínico
--2.02.0-3.0Glicina
COMPUESTOS ORGANICOS
----1.0-Fe3Cl
3· 6 H
2O
-----2.5Fe2(SO
4)3
--27.827.8--FeSO4
· 7 H2O
--37.337.3--Na2EDTA · 2H
2O
FE – EDTA
----0.03-NiCL2
· 6 H2O
----0.03-AlCL3
0.0250.025-0.025--CoCl2
· 6 H2O
0.0250.0250.0250.0250.03-CuSO4
· 5 H2O
-0.0250.25---CuSO4
0.250.250.250.25--Na2MoO
4· 2 H
2O
0.750.75-0.830.010.75KI
3.03.010.06.21.01.5H3BO
3
2.02.010.08.61.03.0ZnSO4
· 7 H2O
10.010.0----MnSO4
· H2O
--25.022.30.17.0MnSO4
· 4 H2O
MICRONUTRIENTES
-150--12519NaH2PO
4· H
2O
-----200Na2SO
4
300---75065KCl
170-68170--KH2PO
4
300250185370250720MgSO4
· 7 H2O
--166---CaCL2
600150-44075-CaCL2
· 2 H2O
190025009501900-80KNO3
-134----(NH4)2SO
4
600-7201650--NH4NO
3
----600-NaNO3
-----300Ca(NO3)2
· 4 H2O
MACRONUTRIENTES
KMB5NITSCHMSHELLERWHITE
MEDIOSCOMPONENTES
Hacer las soluciones
macro y micro
Vitaminas, Hormonas
y Azúcar
Adición del agente
gelificante (Si lo
requiere) y
calentamiento
Ajuste del volumen
final.
Medición del pH
Servida y tapado del
medio, empaque en
los frascos con medio
para ser esterilizados.
ORGANOGENESIS
Proceso de iniciación y
desarrollo de una
estructura que muestra
la forma y/o función
del órgano natural:
Citoquininas
Auxinas
Yemas
(Caulogénesis)
Raices
(Rizogénesis)
Callos
Explantes
ENRAIZAMIENTO
Fase III o
Enraizamiento
↓
preparar al material
vegetal para su
reacondicionamiento
en campo
↓
sistema radical
ACLIMATACIÓN
Fase IV o Aclimatación
o Endurecimiento
↓
Condiciones para el
transplante definitivo a
campos comerciales o
de producción.
ETAPA I
MONTAJE DE LABORATORIO
CONSECUCIÓN DE RECURSOS-PROYECTO UNILEVER
ADECUACIÓN DE ESPACIO
ETAPA II
PROPAGACIÓN ORQUIDEAS
RECOLECCIÓN PLANTAS MADRES EN EL CERRO PAN DE AZUCAR Y PARQUE ARVÍ.
ESTANDARIZACIÓN PROTOCOLOS PARA SEMILLA
ESTANDARIZACIÓN PROTOCOLO PARA ESPLANTES
ETAPA II
PROPAGACIÓN ORQUIDEAS
RECOLECCIÓN PLANTAS MADRES EN EL CERRO PAN DE AZUCAR Y PARQUE ARVÍ.
ESTANDARIZACIÓN PROTOCOLOS PARA SEMILLA
ESTANDARIZACIÓN PROTOCOLO PARA Ex PLANTES
ETAPA III
PROCESO EX-VITRO
PRODUCCIÓN
SUSTRATO PARA
SIEMBRA EX-VITRO.
ACLIMATACIÓN EN
BANDEJAS
PRODUCCIÓN EN
INVERNADERO
Aclimatación:
- Extraer la plántula del tubo y lavar las raíces para eliminar los restos del medio de cultivo, seccionar según el número de esquejes posibles de obtener.
- Aparte agujerear la tapa de las cajas rectangulares de plástico (18 cm largo x 12 cm ancho x 7 cm profundidad) y colocar sustrato orgánico comercial. Con una varilla marcar sobre el sustrato los lugares donde se colocarán los esquejes (aproximadamente 20 esquejes/caja), plantarlos y regar con agua destilada.
- Llevar las cajas a cámara de cultivo a 20ºC, fotoperíodo 16 hs de luz y 8 hs oscuridad, intensidad lumínica de 3000 lux.
- Una vez enraizados los esquejes, llevar las cajas al invernáculo y se colocarlas bajo mesada por una o dos semanas hasta su plantación final en macetas.
RESULTADOS
Etapa I
Equipos y reactivos
Cámara de asepsia
pHmetro
Lámpara Ultravioleta
Estantería para crecimiento
Lámparas de neón
Reactivos para protocolo casero y protocolo
M.S.
Plantas madre
Se recolectaron 42
individuos de los
géneros
masdevallia y
cattleya
Se recolectaron 2
capsulas verdes de
cattleya
Áreas del laboratorio PREPARACION
TRANSFERENCIA
LAVADO
ESTERILIZACION
Incubación in vitro
Crecimiento in vivo Crecimiento in vivo
Observación
Terapia y Control
ALMACEN
ETAPA II
Protocolo para semilla
Medio de cultivo Extracto de banano: una papilla de
banano, se adiciona agua destilada
y abono que posea nitrógeno,
fosforo y potasio) vitamina, acido
micotinico, piroxidina, glicina y
mioinositol.
con extracto de banano ya listo y
para dar consistencia se utiliza
agar y como medio energético
sacarosa. para un litro de medio, 3
gr de agar y 30 gr/L de extracto de
banano.
Protocolo para semilla
siembra Se remueve la flor con bisturí.
Se limpia con solución jabonosa
Se enjuaga con agua destilada.
Se introduce en solución de
hipoclorito al1% durante 10
minútos.
Se sumergen en alcohol industrial y
se flamea.
Se hace corte de la capsula, y se
extraen las semillas llevándolas al
medio.
Se añade agua destilada sobre
cada frasco para su distribución.
RESULTADOS
Se realizaron 5 siembras de
20 frascos cada una, con
un intervalo de 30 días.
contaminación en
las siembras
50% siembrascontaminadas
50% siembras sincontaminar
germinación
5% de germinación
95% sin germinar
TAMAÑO DEL EXPLANTE
Grande → Posibilidad de formar callos
Heterogeneidad y contaminación con
microorganismos
Muy pequeño → No hay formación de callos
Protocolo Murashige Skoog
SOLUCIÓN MADRE CONCENTRACIÓN GRAMOS (500 mL)
A. Na2EDTA (EDTA Sal de sodio) 37,3 mg/L 0.01865
FeSO47H2O (Sulfato Ferroso) 27,8 mg/L 0.0139
B NH4NO3 (Nitrato de amonio) 1,65 g/L 0.825
KNO3 (Nitrato Potásico) 1,9 g/L 0.95
C H3BO3 (Ácido bórico) 0,62 g/L 0.31
KH2PO4 (Fosfato de potasio) 170 mg/L 0.085
KI (Iodo de Potasio) 83 g/L 0.0415
Na2MO4.2H2O (Molibdato de sodio) 25 mg/L 0.0125
CoCL2.5H2O (Dicloruro de cobalto) 2,5 mg/L 0.00125
D MgSO47H2O (Sulfato de magnesio) 370 mg/L 0.185
MnSO4$H2O (Sulfato de manganeso) 1,69 g/L
0.845
ZnSO4 (Sulfato de Zinc) 0,86 g/L 0.43
CuSO5H2O (Sulfato de cobre ) 2,5 mg/L 0.00125
E CaCl2.2H2O (Cloruro de calcio) 440 mg/L 0.22
Vitaminas
H Mioinositol 10 g/L 0.005
F Tiamina 10 mg/L 0.005
I Ác. Nicotínico 50 mg/L 0.025
J Piridoxina 50 mg/L 0.025
K Glicina 0,2 g/L 0.1
sacarosa 30 g/ l 15
pH 5,7
Contaminación
Se realizaron 6 siembras para un total de
135 frascos sembrados con ex plantes
En las cuatros primeras siembras dieron
como resultado un 83.7% de frascos
contaminados.
La quinta y sexta siembra dieron como
resultado un 65% de muestras
contaminadas .
Producción de callo
97,8% de explantessin callo
2,2% de explantescon callo
ANALISIS Y
RECOMENDACIONES
FACTORES QUE AFECTAN
En la planta donadora tener en cuenta su estado fisiológico de desarrollo y fitosanitario además de su genotipo y especie en los que en ocasiones pueden ofrecer diferentes respuestas.
En el explante la edad fisiológica, la ubicación en la planta madre y el tamaño, un explante muy grande puede contaminarse fácilmente y muy pequeño puede no responder al cultivo.
Los factores físicos y químicos como luz temperatura y pH pueden ser cruciales, algunos explantes responden mejor a condiciones de baja temperatura que otros, o de acidez.
En cuanto al medio de cultivo es pertinente realizar una revisión bibliográfica para tratar de aproximarnos al medio de cultivo más adecuado para la planta, además la consistencia del medio también puede afectar la respuesta.
MEDIO DE CULTIVO
Murashige o sus modificaciones.
↓
Benéficas para el desarrollo de callos
embriogénicos.
Sacarosa → 12% Eleva el potencial.
Carbón Activado → Evita la oxidación
LIMITACIONES DEL CULTIVO DE
TEJIDOS
La planta madre como material de partida debe ser cuidadosamente seleccionado
Conocimiento de las técnicas para elegir la más adecuada a las necesidades.
ETAPA IV
GENERAR CULTURA AMBIENTAL
DAR A CONOCER EL PROYECTO
CAPACITACIÓN EN BIOTECNOLOGIA VEGETAL-FORMACIÓN SEMILLERO
EDUCACIÓN AMBIENTAL A LA COMUNIDAD
GENERAR EMPRESA
HACIA DONDE NOS
DIRIGIMOS