validation de méthode de mesure du cvm et incertitude de ... · l’incetitude de mesure basée...

5èmes Rencontres de la Vilaine

Validation de méthode de mesure du CVM et incertitude de mesure

Delphine PELLE

Usine de Férel

18 septembre 2014

2

Le LERES

Laboratoire d’analyse • Accréditation Cofrac (eau, air et poussières sédimentées) • Agréments santé et environnement

Laboratoire de recherche

• Développements d’outils adaptés (prélèvement, analyse…) pour évaluer la contamination des milieux (eaux et environnements intérieurs) dans une perspective d’évaluation de l'exposition des populations

Plate-forme de l’irset (UMR Inserm 1085) • Un des plus grands pôles nationaux de recherche interdisciplinaire sur les

risques liés à l’environnement et au travail d’ambition internationale • Objectif : mieux comprendre les effets des facteurs environnementaux

chimiques, biologiques et physiques sur la santé humaine

3

Le CHLORURE de VINYL

Composé chimique de synthèse hautement volatil

Forme liquide ou gazeuse (inodore et incolore)

Fabrication de plastique (PVC)

Exposition professionnelle (PVC, aérosol) et environnementale (rejets industriels): voie respiratoire et eaux de distribution

Cancérogène avéré : groupe 1 (cancers du foie)

4

Validation d’une nouvelle méthode

1 • Opportunité/demande

2 • Evaluation des moyens nécessaires

3 • Caractérisation de la méthode

4 • Développement analytique

5 • Evaluation des performances

6 • Mise en routine

7 • Accréditation Cofrac

8 • Agréments santé et environnement

5

Opportunité/demande

Origine de la demande : • Besoin client • Exigence réglementaire (décret, arrêté…) • Evolution normative • Travaux de recherche

Nature de la demande :

• Nouvelle méthode ou modification d’une méthode existante • Nature des paramètres et de la matrice • Principe analytique envisagé • Type de méthode envisagée (méthode reconnue, méthode

interne selon méthode reconnue ou méthode interne) • Nombre d’échantillons • Performances attendues (limites de quantification) • Evaluation des performances?

6

Evaluation des moyens nécessaires

Evaluation des moyens nécessaires : • Moyens matériels (investissement?) • Moyens humains (revue bibliographique, optimisation de la méthode…) • Consommables

Coût du développement Désignation de la personne en charge du développement :

• Personne hautement qualifiée habilitée au développement (habilitation analytique adaptée, exercice de la fonction d’analyse et expérience sur la matrice concernée)

• Stagiaires ou doctorants encadrés par le responsable d’unité ou le responsable R&D

Planification du développement

Décision du directeur et du responsable de l’unité

7

Caractérisation de la méthode

Veille normative, scientifique et technique :

Paramètres

Matrice

Principe analytique

8

Choix de la technique

• Chromatographie en phase gazeuse (GC) : substances volatils et semi-volatiles de polarité faible à moyenne

• Chromatographie en phase liquide (LC) : spectre plus large de polarité

Séparation chromatographique

• Pas d’extraction

• Extraction sur phase solide (SPE)

• Extraction liquide/liquide (L/L)

• Espace de tête statique (HS)

Extraction

• DAD, FID, ECD, NPD, FLD

• Spectromètres de masse (MS) : simple quadripôle, triple quadripôle et hybride (quadripôle/temps de vol)

Détection

9

Développement analytique

1 • Optimisation de la détection

2

• Optimisation de l’injection et de la séparation chromatographique

3 • Optimisation de la méthode d’acquisition

4 • Optimisation de l’étape d’extraction

5

• Pré-évaluation de la méthode (rendements, limites de quantification, exactitude…)

6 • Validation du développement

10

Evaluation des performances et des incertitudes

Modalités • NF T 90-210 (mai 2009) : Qualité de l’eau - protocole d’évaluation initiale

des performances d’une méthode dans un laboratoire (fonction d’étalonnage, limite de quantification, exactitude…)

• NF ISO 11352 (février 2013) : Qualité de l’eau - estimation de l’incertitude de mesure basée sur des données de validation et de contrôle qualité

Incertitude de mesure : paramètre associé au résultat d’une mesure caractérisant la dispersion de la valeur qui peut raisonnablement être attribuée à la mesure.

11

Evaluation des performances et des incertitudes

Modalités 3 sources pour évaluer l’incertitude:

-Evaluation de performance (NF T 90-210)

Les essais d’exactitude permettent d’évaluer les données de performance initiales de la méthode, soit le biais et l’écart-type de fidélité intermédiaire.

-Essais inter-laboratoires

Les résultats de ces essais permettent d’évaluer, le cas échéant, le biais et l’écart-type interlaboratoire

-Cartes de contrôle internes

L’analyse d’échantillon de contrôle permet d’évaluer les données de performance en continue de la méthode, soit le biais et l’écart-type inter-séries.

12

Evaluation des performances et des incertitudes

Objectifs de performances (accréditation et agréments) • Arrêté du 17 septembre 2003 relatif aux méthodes d'analyse des

échantillons d'eau et à leurs caractéristiques de performance • Arrêté du 27 octobre 2011 portant modalités d’agrément des

laboratoires effectuant des analyses dans le domaine de l’eau et des milieux aquatiques au titre du code de l’environnement

• Objectifs de performances fixés par le laboratoire (EMA)

Validation de l’évaluation des performances

13

Mise en routine et accréditation/agrément

Mise en routine : • Finalisation et mise à jour des protocoles d’analyse, des modes

opératoires et des enregistrements de traçabilité associés • Paramétrage informatique (LIMS) et proposition au catalogue

Accréditation Cofrac :

• Inscription sur la portée fixe (A1) ou flexible (A2, A3 ou B) • Evaluation sur site par le Cofrac dans le cadre de la portée fixe • Mise à jour de la portée d’accréditation et de l’annexe technique

Agréments :

• Saisie annuelle sur une plateforme dédiée (Agrelab) • Information à la DGS

14

Mise en œuvre des méthodes

Habilitation du personnel : • Personnel hautement qualifié et expérimenté • Formation qualité, technique et « analytique » (protocole) • Maintien des compétences (réhabilitation)

Contrôles internes :

• Blancs d’analyse, points de contrôle • Cartes de contrôle

Contrôles externes (essais inter-laboratoires) :

• Deux réseaux AGLAE et BIPEA (large panel de paramètres et de types d’eau)

• + autres circuits concernant les substances émergentes (résidus de médicaments, substances perfluorées)

15

Qualité des résultats d’analyse

Validation des

méthodes

• Développement analytique

• Evaluation des performances

• Accréditation Cofrac

• Agréments

Mise en œuvre des méthodes

• Habilitation du personnel

• Contrôles internes

• Contrôles externes

Contrôle des

résultats

• Contrôles automatiques

• Confirmation des résultats

• Double validation des résultats

Qualité des

résultats

Résultats pour le CVM

Methode normalisée : NF EN ISO 10301 de juillet 1997 Dosage des hydrocarbures halogénés hautement volatils- Méthode par chromatographie gazeuse paramètre accrédité et agréer depuis 2009

Technique analytique : Espace de tête (HS) statique couplé à la

chromatographie liquide et spectrométrie de masse Domaine d’application: eaux douces

Gamme d’étalonnage de 0,5 à 50 µg/L

Réglementairement : Annexe I de l’Arrêté du 11/01/2007 fixe une limite

de qualité à 0,5 µg/L

16

Résultats pour le CVM

Incertitudes:

17

CVM Concentration

µg/L

Essais Evaluation De performance

Essais Inter-laboratoires

Cartes de contrôle internes

0,5 27 % A compléter 25%

5 15%

18 Comité de thèse - 16 novembre 2010 - Rennes

19

Merci de votre attention

Delphine.pelle@ehesp.fr