segundo informe biotec2
Post on 12-Jul-2015
127 Views
Preview:
TRANSCRIPT
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 1/31
0
“MUESTREO, AISLAMIENTO, SELECCIÓN, DE MICROORGANISMOS
CON ACTIVIDAD LIPASICA ”
CURSO : BIOTECNOLOGIA DE LOS ALIMENTOS
DOCENTE : Dr. MSc. Ingº PELAEZ SANCHEZ, Pedro
INTEGRANTES : TRUJILLO GARIBAY, Luís
VARGAS MADERA, Sharon
TINGO MARÍA – PERÚ
2011
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 2/31
1
I. INTRODUCCIÓN
Existen una gran diversidad de microorganismos en la amazonia, los
cuales se presentan como potenciales en la producción de enzimas, sin
embargo, estos aun no han sido estudiados, en nuestro caso la investigación
se orienta a la búsqueda de microorganismos productores de lipasas, los
cuales podrían ser utilizados en la industria alimentaria; básicamente en la
modificación estructural del aceite de palma, aperturandose la posibilidad de
producción de lipasas a nivel piloto y posterior producción industrial. De ahí del
interés por la búsqueda de microorganismos productores de lipasas con alta
actividad catalítica para la industria alimentaria.
Objetivo:
Seleccionar cepas de microorganismos desconocidos que sean
productores de lipasas.
Determinar la cinética microbiana de los microorganismos productores
de lipasas.
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 3/31
2
II. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
2.1. Consideraciones para selección de muestras
1. Tomar una muestra representativa del lote del alimento a ser analizado.
2. La porción de muestra pesada debe ser una muestra exacta.
Actualmente existe micro métodos donde la muestra es muy pequeña,
los resultados serán de poco valor a menos que la porción usada
representa la composición promedio del alimento.
3. Los alimentos y productos alimenticios son de composición variable,
siendo los de origen vegetal más que los de origen animal. Existen
cambios fisiológicos en los vegetales frescos, más que en los cereales,
legumbres de baja humedad. El cuidado que se deberá tener en el
muestreo depende del grado y el rango de variación natural en
composición del alimento fresco
4. Deberá tomarse suficiente material durante el muestreo para
compensar la variabilidad en la composición de los alimentos y
productos alimenticios
5. La cantidad de material seleccionada para el análisis puede ser
estimado por análisis estadísticos.
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 4/31
3
2.2 Aislamiento y selección de microorganismos productores de lipasas.
Para seleccionar los microorganismos productores de lipasas las
cepas aisladas se cultivan en medios (sólidos y líquidos) adecuados a los que
se adiciona triglicéridos (aceite de oliva) como inductor, además una fuente de
carbono (KOJIMA et al., 1199 y TORTORA, 1993); y luego de un periodo de
incubación, las colonias productoras de lipasa presentan a su alrededor halos
transparentes producidos por la hidrólisis de los triglicéridos presentes en el
medio de cultivo.
Muchas bacterias, levaduras, mohos y actinomicetos son
conocidas por secretar lipasa entre ellas tenemos los géneros Geotrichum,
Penicillium, Aspergillius, Rhizomucor, Saccharomyces y Candida (LOTTI et al ,
1993; STOCKLEIN et al ., 1993; TOMIZUKA et al., 1996; MIURA et al., 1997;
HABA et al ., 2000 y COCA et al ., 2001).
2.3 Lipasas.
Según FRIEDRICH (1994) las lipasas (tricylglicerol) son enzimas
que hidrolizas triglicéridos a ácidos grasos y glicerol; y que tienen la capacidad
de trabajar en presencia de moderadas o elevadas cantidades de disolventes
orgánicos, realizando reacciones de síntesis de esteres bien por reacción de
alcoholes y ácidos o vía transesterificacion por reacción de un ester con un
acido o con un alcohol (PROYECTO Lipasa 1997).
2.3.1 Producción de lipasas
La mayoría de las lipasas son producidas por procesos de
fermentación en cultivos sumergidos, entendiendo por estos aquellos en que
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 5/31
4
los nutrientes y microorganismos se encuentran en la fase acuosa con
diferentes procesos entre los que se incluyen batch, fed - batch y procesos en
continuo.
La fermentación según QUINTEROS (1993), es el
aprovechamiento bajo condiciones controladas de materiales biológicos tales
como microorganismos, tejido celular, animal, productos microbianos y
enzimas. Es decir, fermentación comprende microorganismos, anhídrido
carbónico y productos intra y extracelulares.
2.3.2 Temperatura y pH
Como en casi la totalidad de los procesos de fermentación
industrial, la temperatura es regulada a lo largo de la fermentación. La mayoría
de las lipasas trabajan a temperatura entre 30 a 40 ºC; pero algunos son
activos a temperaturas tan bajas como – 29 ºC (LÓPEZ, 2001).
Generalmente la temperatura y el pH de óptimo crecimiento del
microorganismo productor de enzimas coinciden con las condiciones de
máxima producción de la enzima. La mayoría de las lipasas presentan su pH
optimo entre 8 y 9+, también se ha reportado lipasa con pH optimo en el lado
acido (LOPEZ, 2001)
Aireación
La velocidad de aireación, según CRUEGER (1993), se ajusta a la
cantidad de oxigeno que se requiere, puede ser entre 0,25 – 1,0 v/vm (volumen
de aire / volumen de liquido por minuto).
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 6/31
5
2.4 Aceite de palma
El aceite de palma se obtiene del mesocarpio carnoso del fruto de
palma de aceite (elaeis guineensis). Tiene alto contenido de triglicéridos
sólidos; la relación es 1:1 entre ácidos grasos saturados e insaturados, lo cual
le da la consistencia deseada sin necesidad de hidrogenación. Además
contiene antioxidantes naturales como los tocoferoles.
Los subproductos de la palma aceitera son:
El aceite de palmiste, se obtiene de la almendra del fruto de la
palma de aceite (Elaeis guineensis )
El aceite refinado, blanqueado y desodorizado (RBD) así obtenido,
es un producto semisólido que requiere ser sometido a un proceso de
fraccionamiento a través del cual, mediante cambios de temperatura, se separa
la fracción liquida (oleína) de la fracción solida (estearina).
La oleína de palma es la fracción liquida obtenida del
fraccionamiento del aceite de palma (descrito anteriormente).
La estearina de palma es la fracción con punto de fusión elevado
obtenida del fraccionamiento del aceite de palma (descrito anteriormente). La
súper oleína de palma es la fracción liquida obtenida del fraccionamiento del
aceite de palma (descrito anteriormente) producido por un proceso de
cristalización controlado específicamente para obtener un índice de yodo de 60
o mas.
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 7/31
6
III. MATERIALES Y MÉTODOS
3.1 Materiales:
Algodón
Asa de siembra
Autoclave
Modelo: AUT - 35
Serie: 0100 - 06
Voltaje: 220 VAC - 60 Hz
Potencia: 1550 Watts
Balanza analítica
Modelo: Electronic balance
Precisión + 0.001g
Voltaje: 220 v
Beaker (125ml, 250ml)
Cocina eléctrica
Cubetas
Espatula
Espectrofotómetro
Marca: Génesis
Modelo: 6
Hilo pavilo
Incubadora
Matraces Erlenmeyer ( 50ml, 250ml,1000ml)
Micro tubos
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 8/31
7
Mechero
Mortero y pilón
Papel krap
Placas Petri
Pipetas y Micropipeta (10000uL)
Probeta ( 50ml, 100ml, 500ml, 1000ml)
Varilla de vidrio.
3.2 Reactivos
Agar
Agua destilada
Alcohol
Glucosa
Extracto de carne
Peptona
NaCl
Agar rosa de bengala
K2HPO4
Glicerol NH4Cl
KH2PO4
KCl
Mg, SO47H2O.
CaCl2
FeSO4; H2O
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 9/31
8
Extracto de levadura
Aceite de palma
3.3 Métodología
Recolección de muestra:
La muestra fue recolectada del distrito de Boqueron, provincia de Padre Abad,
departamento de Ucayali.
Fig. 1
Acondicionamiento de la muestra
Se pesó 10g de muestra y se trituró en un mortero y diluyo en 100 ml de
agua destilada.
Fig2. Fig3 fig4
SIEMBRA EN MEDIO YED Y LB.
Preparación de medio YED y LB
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 10/31
9
La preparación de medio YED y LB se ve en el cuadro 1 el cual son
las formulaciones para los medios a utilizar.
Cuadro Nº1
Medio Composición (% v/p)
Utilizado para
aislar
YED Glucosa, 2%; extracto de carne, 1%; agar, 1,5% Levaduras
LB Agar rosa de bengala, 3 % Hongos
BYPO Peptona, 1 %; extracto de carne, 0.8% NaCl,
0.5%; K2HPO4, 0.7%; agar, 1.5%
Colonias puras
Fuente: HOLMES Y CUNDLIFE,(1991) y FRENKEN et al., (1992).
Los medios YED y LB se colocaron en un matraz de 500ml, el cuál fue
llevado al autoclave por 30 min de tiempo, esperamos que baje su temperatura
hasta aproximadamente 40ºC para poder plaquear, en placas previamente
esterilizadas como muestra la figura:
Fig.5 MEDIO ( YED O LB) Fig.6 AUTOCLAVE ( MEDIO Y PLACAS) Fig.7 PLAQUEADO
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 11/31
10
Fig.8 SIEMBRA DE UNA ASADA DE LA MUESTRA
Este procedimiento se trata de realizar asépticamente, el ambiente fue
expuesto a luz ultravioleta por 24h previas al análisis para obtener el ambiente
adecuadamente aséptico.
INCUBACION
Se realizo la incubación a un rango de 28 a 29 ºC de temperatura, el medio
YED y LB con 3 repeticiones cada una por un tiempo de 24h a 48h con
placas invertidas.
Fig. 9
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 12/31
11
RESIEMBRA MEDIO YED Y LB
La resiembra o también llamado repique de se hace de las placas que
tuvieron crecimiento para seguir seleccionando una cepa de
microorganismo, el cual se sembró por el método de estrías.
Fig. 10. Colonias de m.o. fig.11 resiembra
SIEMBRA EN MEDIO BYPO SOLIDO
Se preparó el medio bypo sólido siguiendo la formulación descrita en el
cuadro 1, se realiza con el fin de adaptarlos al medio de selección, para lo
cual se pesaron los reactivos Peptona; extracto de carne, NaCl, K2HPO4,
agar, en base a 250ml de muestra, siguiendo con el método se selecciona
una colonia de cada placa que haya presencia de microorganismos, y con el
asa de siembra se procede a sembrar por el método de estrías, y se pone a
la incubadora en forma invertida de 28 a 29 ºC. por 24 a 48h
Fig. 12 crecimiento
en bypo solido
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 13/31
12
SIEMBRA EN MEDIO BYPO LIQUIDO
Las colonias que crecieron en medio bypo solido son transferidas a bypo
liquido, la preparación para este medio es descrito en el cuadro 1, solo que
no se adiciona agar, por que queremos en estado liquido. Con la ayuda de
una cocina eléctrica se diluye todos los reactivos y se trasladan la cantidad
de 50ml a matraces de 250ml, se coge una asada de las placas de medio
bypo solido que hayan crecido.
Fig. 13, preparación de bypo liquido Fig. 14 distribución en matraces
CONSERVACION EN GLICEROL
Los matraces que hayan presentado turbidez se guardan en microtuboscon glicerol en proporción 1/1 , las cuales se guardan 3 repeticiones de cada
matraz para poder tener mas posibilidades de conservarlas.
Fig. 15. conservación
En glicerol
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 14/31
13
IV. RESULTADOS Y DISCUSIONES:
Preparación de la muestra:
10g de fruto de palma se diluyo en 100 ml de agua destilada .
CUADRO Nº2 PREPARACION DE MEDIO YED
REACTIVOS Porcentaje(%) Peso en gramos (g)glucosa 2 5
extracto de carne 1 2,5agar 1,5 3,75Agua 100 250
CUADRO Nº3 SIEMBRA DE LA MUESTRA DILUIDA 1/10(10g en 100ml)
Se sembró una asada por el Método en estrías
MEDIO NUMERO COLONIASYEDy-1 1y-2 0y-3 0LBLB1 2LB2 2LB3 1
CUADRO Nº 4 RESIEMBRASe hizo el repique de las colonias encontradas en la siembra, el
cuál fue sembrado por el Método en estrías.
MEDIO NUMERO DE COLONIASYEDy-1 1LB
LB1 2LB2 2
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 15/31
14
LB3 1TOTAL 6
CUADRO Nº5 PREPARACION DE MEDIO BYPO SOLIDO
REACTIVOS Porcentaje (%) Peso en gramos (g)peptona 1 2,5
extracto de carne 0,8 2NaCl 0,5 1,25
K2HPO4 0,7 1,75
agar 1,5 3,75Agua 100 250
CUADRO Nº6 CRECIEMIENTO EN MEDIO BYPO SOLIDO
Se sembró por el Método en estrías
CODIGO CRECIMIENTO ( SI / NO)Y- 1 SILB1 SI
LB1 - R1 SILB1 - R2 SI
LB2 SILB2 - R1 SILB2 - R2 SI
LB3 SI
CUADRO Nº 7 PREPARACION DE MEDIO BYPOLIQUIDO
REACTIVOS Porcentaje (%) Peso en gramos (g)peptona 1 2,5
extracto de carne 0,8 2NaCl 0,5 1,25
K2HPO4 0,7 1,75
Agua 100 250
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 16/31
15
CUADRO Nº8 CRECIMIENTO EN MEDIO BYPO LIQUIDO
CODIGO TURBIDEZ (presencia / ausencia)Y- 1 PresenciaLB1
LB1 - R1 PresenciaLB1 - R2 Presencia
LB2LB2 - R1 PresenciaLB2 - R2 Presencia
LB3 Presencia
Seguidamente de cada matraz con presencia de turbidez se guardo por
triplicado en glicerol en proporción de 500uL de medio y 500uL de
glicerol, obteniéndose 18 microtubos, el cual se guardó en refrigeración
a 4ºC.
Se reanimaron en medio BYPO LIQUIDO y después se midio en el
espectrofotómetro a una lectura de 660nm en el cual se utilizo como
blanco agua desionizada, las primeras lecturas se realizaron cada 2
horas después de dos lecturas se realizaron cada 1h durante 24h
aproximadamente, o en tal caso de acuerdo a la curva de crecimiento
que se graficaron en el programa Sigma plot. Las lecturas de los
diferentes microorganismos se muestran acontinuación
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 17/31
16
CUADRO Nº9 LECTURA DE ESPECTROFOTOMETRO A 660 nm
PARA LB1
LB1TIEMPO ABSORBANCIA
0 0,0962 0,4764 0,1986 0,2067 0,2668 0,402
9 0,95810 1,63812 2,1313 2,2215 2,51417 2,87418 3,18419 3,27220 3,24821 3,36822 3,632
El cual muestra una curva de tendencia:
Fig. 16
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 18/31
17
0
100000000
200000000
300000000
400000000
500000000
600000000
700000000
800000000
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17
Pero solo esta medida nos muestra la absorbancia, entonces necesitamos
saber el número de células existentes en nuestro medio para lo cual se obtuvo:
CUADRO Nº10 NÚMERO DE CELULAS LB1:
LB1TIEMPO # DE CELULAS
0 192000002 952000004 396000006 412000007 532000008 804000009 19160000010 32760000012 42600000013 44400000015 50280000017 57480000018 63680000019 654400000
20 64960000021 67360000022 726400000
Y la gráfica es la siguiente:
FIG 17
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 19/31
18
CUADRO Nº11 LECTURA DE ESPECTROFOTOMETRO A 660 nm
PARA LB2
LB2TIEMPO ABSORBANCIA
0 0,1882 0,1314 0,1586 0,2297 0,5758 0,8479 1,316
10 1,74211 1,95212 1,791
Fig. 18
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 20/31
19
CUADRO Nº12 NUMERO DE CELULAS LB2
LB2TIEMPO # DE CELULAS
0 376000002 262000004 316000006 458000007 1150000008 169400000
9 26320000010 34840000011 39040000012 358200000
Fig. 19
0
50000000
100000000
150000000
200000000
250000000
300000000
350000000
400000000
450000000
0 2 4 6 8 10 12 14
# DE CELULAS VS TIEMPO (horas)
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 21/31
20
CUADRO Nº13 LECTURA DE ESPECTROFOTOMETRO A 660 nm
PARA LB3
LB3TIEMPO ABSORBANCIA
0 0,164 0,4446 0,3497 0,3758 0,4959 0,956
10 1,48412 2,07913 2,2215 2,43317 2,52
Fig. 20
TIEMPO VS ABSORBANCIA
TIEMPO (HORAS)
0 5 10 15 20 25
A B S O R B A N C I A
0,0
0,5
1,0
1,5
2,0
2,5
3,0
3,5
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 22/31
21
CUADRO Nº14 NUMERO DE CELULAS LB3
LB3
TIEMPO # DE CELULAS0 320000004 888000006 698000007 750000008 990000009 19120000010 29680000012 415800000
13 44400000015 48660000017 504000000
Fig. 21
0
100000000
200000000
300000000
400000000
500000000
600000000
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 23/31
22
CUADRO Nº15 NUMERO DE CELULAS LB4
LB4
TIEMPO ABSORBANCIA0 0,1022 0,1584 0,1826 0,2637 0,2518 0,2699 0,36810 0,57
11 0,76912 1,40413 1,69415 1,99517 1,96818 2,2219 2,22320 2,38823 2,412
Fig. 22
TIEMPO VS ABOSRBANCIA LB4
TIEMPO (horas)
0 5 10 15 20 25
A b
s o r b a n
c i a
0,0
0,5
1,0
1,5
2,0
2,5
3,0
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 24/31
23
CUADRO Nº16 NUMERO DE CELULAS LB4
LB4
TIEMPO # DE CELULAS0 204000002 316000004 364000006 526000007 502000008 538000009 7360000010 114000000
11 15380000012 28080000013 33880000015 39900000017 39360000018 44400000019 44460000020 47760000023 482400000
Fig. 23
0
100000000
200000000
300000000
400000000
500000000
600000000
0 2 4 6 7 8 9 10 11 12 13 15 17 18 19 20 23
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 25/31
24
CUADRO Nº17 NUMERO DE CELULAS Y5
Fig. 24
Y5TIEMPO ABSORBANCIA0 0.1132 0.1464 0.26 0.2267 0.2668 0.4769 0.87510 1.09411 1.2412 1.67413 1.84815 2.0717 2.01918 2.29219 2.36723 2.526
TIEMPO VS ABSORBANCIA
TIEMPO (horas)
0 5 10 15 20 25
A B S O
R B A N C I A
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 26/31
25
CUADRO Nº18 NUMERO DE CELULAS Y5
Y5TIEMPO # DE CELULAS
0 10481818.182 13481818.184 18390909.096 20754545.457 24390909.09
8 43481818.189 79754545.4510 99663636.3611 112936363.612 152390909.113 168209090.915 188390909.117 183754545.518 208572727.3
19 215390909.123 229845454.5
Fig. 25
0
50000000
100000000
150000000
200000000
250000000
1 3 5 7 9 11 13 15
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 27/31
26
CUADRO Nº19 NUMERO DE CELULAS LB0
Fig. 26
LB0TIEMPO ABSORBANCIA
0 0.1822 0.1824 0.2096 0.3147 0.3578 0.3699 0.57710 0.866
11 1.1812 1.31413 1.515 1.55417 1.82718 2.00119 2.05220 2.27421 2.34
22 2.45723 2.124
TIEMPO VS ABOSRBANCIA
TIEMPO
0 5 10 15 20 25
A B S O R B A N C
I A
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 28/31
27
CUADRO Nº19 NUMERO DE CELULAS LB0
Fig. 27
0
1000000
2000000
3000000
4000000
5000000
6000000
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19
LB0TIEMPO # DE CELULAS
0 3640002 3640004 4180006 6280007 7140008 738000
9 115400010 173200011 236000012 262800013 300000015 310800017 365400018 400200019 4104000
20 454800021 468000022 491400023 4248000
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 29/31
28
CUADRO Nº20 CINETICA MICROBIANA
MUESTRA r2 LN Ln No t u (hr-1) Td (Hr) LB1 0.9752 2.2278 0.9605 4 0.2103 3.30
LB2 0.9810 1.3495 0.5203 2 0.4765 1.45
LB3 0.9560 2.0876 1.0326 4 0.1760 3.94
LB4 0.9781 1.4868 0.9339 2 0.2325 2.98
Y5 0.9793 1.7394 0.7958 4 0.1955 3.55
LB0 0.9818 1.6803 0.8360 5 0.1396 4.96
5/11/2018 segundo informe biotec2 - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/segundo-informe-biotec2 30/31
29
V. CONCLUSIONES
En la primera parte de este informe se logró conservar cepas de
microorganismos que posiblemente sean capaces de producir lipasas.
Se determinó la cinética microbiana de los microorganismos productores
de lipasas.
VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
CÁRDENAS, F. 1999. Búsqueda, selección y caracterización de nuevas lipasas
de origen microbiano. Tesis doctoral. Facultad de Farmacia, Universidad
Complutense de Madrid.
COCA, J., HERNANDEZ, O., BERRIO, R., MARTINEZ, S., DIAZ, E. y DUSTET,
J. 2001. Producción y caracterización de las lipasas de aspergillius Níger
y A. fumigatus . Biotecnología aplicada. La Habana – Cuba, 18:216-220.
JAY.J.M. 1981. Microbiología moderna de los alimentos. 2da ed. Edit. Acribia.
España. pp. 441.
TORTORA, J. 1993. Introducción a la Microbiología. 3 ed. Zaragoza, España.
Acribia s.a. p. 289.
top related