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Instituto de Assistência Médica ao Servidor Público Estadual

IAMSPE

São Paulo2010

IV Congresso de Iniciação Científica

do IAMSPE

IV Congresso de Iniciação Científica

do IAMSPE

Orientador: Prof.Dr.Jaques WaisbergOrientanda: Acadêmica Mariane Martins Manso

Níveis séricos e imunoexpressão tecidual do marcador CA19-9 no carcinoma colorretal e

comprometimento linfonodal

(Marcador tumoral CA 19-9 e comprometimento linfonodal no carcinoma colorretal)

Introdução

Introdução

— O carcinoma colorretal está apresentando aumento da incidência no mundo

Jantscheff P, et al. J Clin Oncol. 2003; 21(19):3638-46.

— No Brasil, é o 3º tumor mais frequenteInca, 2007.

Introdução

— Estadiamento de Dukes: fator prognóstico mais importante

Wiggers T, et al. Dis Colon Rectum. 1988; 31(1): 33-41.Ponz de Leon M. et al. Cancer. 1992; 69(3): 626-35.

— Marcadores tumorais: indicadores de prognóstico, monitorização de tratamento e recidiva

Coelho, 2005.

Introdução

CA19-9 – antígeno carboidratado

— Antígeno carboidratado de superfície celular expressado no grupo sanguíneo Lewisª

Magnani J, et al. J Biol Chem. 1982; 257: 14365-9.

— Tempero e col.: pacientes Lewisª‾ com níveis normais de CA 19-9

Tempero M, et al. Cancer Res. 1987; 47: 5501-3.

Introdução

CA19-9 – antígeno carboidratado

— Valor de referência: até 31 - 60 UI /ml

— Metástases de câncer de pulmão, urotelial e melanoma

Rottenberg Y, et al. Isr Med Assoc J. 2009; 11: 116-7.

Introdução

— Imunoexpressão do CA19-9 tecidual: relação com neoplasias gastrointestinais

Nakagoe T, et al. J Clin Gastroenterol. 2002; 34(4):408-15.

— Associação com aspectos morfológicos do carcinoma colorretal

Nakayama T, et al. . J Surg Oncol. 1997; 66(4): 238-43.Matsui T. Jpn J Clin Oncol. 2004; 34(10): 588-93.

Objetivo

Objetivo

Analisar a relação entre os níveis séricos pré-operatórios do CA19-9 e sua imunoexpresãotecidual com o comprometimento linfonodal e com a invasão linfática no carcinoma colorretal.

Método

Método

— Projeto de pesquisa aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa (CEP) - Hospital do Servidor Público Estadual (São Paulo-SP) “Francisco Morato de Oliveira” e registrado sob o nº 028/06

— Estudo realizado de acordo com os padrões éticos aceitos pela Declaração de Helsinki da Associação Médica Mundial, adotado em 1964 e emendado em 1996

Método

Casuística

ž 45 doentes com carcinoma colorretal operados com intenção curativa ou paliativa entre outubro/2006 e janeiro/2008 no Serviço de Gastrocirurgia do HSPE.

ž Incluídos apenas doentes com confirmação histopatológica e excluídos menores de 18 anos

Método

ž Estadiamento: determinação sérica do CEA e do CA19-9, colonoscopia com biópsia, enemaopaco, raio X de tórax, TC abdome total e USG abdome

ž Estadiamento clínico-patológico: TNMTNM Classification of Malignant Tumours - 6th ed. Edited by L.H. Sobin and Ch. Wittekind.

John Wiley & Sons, INC., Publication – 2002.

ž Nível de corte (cut-off): CA19-9 ≥ 37UI/ml

Método

Estudo histológico

— Espécimes cirúrgicos: fixados em solução de formol a 10% e incluídos em blocos de parafina e corados pela técnica de hematoxilina-eosina para diagnóstico anatomopatológico

— Linfonodos: hematoxilina-eosina

Método

Estudo imuno-histoquímico

— As lâminas foram coradas com anticorpo monoclonal anti-CA19-9.

— Foi utilizado o complexo estreptavidina-biotina-peroxidase (ABC), anticorpo específico anti-CA19-9 (GI-MA®, clone L2KGI2, Siemens Healthcare DiagnosticsProducts Ltd., United Kingdom) em albumina bovina (®Sigma) e incubadas com anticorpo secundário biotinilado(anti-IG) (®Dako) em albumina bovina.

Método

Análise histopatológica das lâminas imunocoradas

— Microscópio óptico comum com lente de 100x e magnificação final de 200x

— Reação positiva: expressão de modo difuso, distribuição homogênea

— Intensidade semi-quantificada: leve (+/+++), moderada (++/+++), intensa (+++/+++) e ausente (0)

— Figura 1 (Imuno-histoquímica CA 19.9, 400x): Imunoexpressão positiva representada pelo

colorido acastanhado no citoplasma das células neoplásicas do carcinoma colo-retal.

Figura 2 (Imuno-histoquímica CA 19.9, 400x): Transição carcinoma-mucosa adjacente . Imunoexpressãofortemente positiva no citoplasma das células neoplásicas do carcinoma colo-retal e fracamente positiva na mucosa adjacente.

Método

Análise estatística

ž O nível de significância adotado foi de 5% (p ≤ 0,05). Foram realizados cálculos paramétricos e não paramétricos, de acordo com a natureza das variáveis e o N de cada grupo estudado.

ž Os modelos estatísticos foram: média aritmética e respectivo desvio padrão, porcentuais, teste t de Student, teste de Mann-Whitney, teste exato de Fisher, análise de variância (Anova). O programa estatístico utilizado foi: SPSS for Windows 16.0 (SPSS Inc., USA).

Resultados

Resultados

Níveis séricos do CA19-9

— CA19-9:Ø Valor sérico médio: 120,5±440,6UI/mlØ ≥ 37UI/ml: 22,2% do doentes

Resultados

Relações entre os marcadores séricos e a imunoexpressão do CA19-9 no tecido neoplásico

— Imunoexpressão do CA19-9:Ø Ausente: 11,1%Ø Leve: 26,7%Ø Moderada: 37,8%Ø Intensa: 24,4%

— CA19-9 sérico → imunoexpressãotecidual do CA19-9 (p=0,06)

P=0,06

250

200

150

100

50

0

Ca 19-9 sérico(média em ng/ml)

Ausente Leve Moderada Intensa

Resultados

Localização da lesão

— 29 doentes: cólon

— 16 doentes: reto

— CA19-9 sérico → neoplasias de reto (p=0,05)

Resultados

Diâmetro da lesão colorretal

— < 5,0cm: 28 (62,2%) doentes

Ø CA19-9 elevado: 6Ø CA19-9 tecidual: 0/+: 11 e

++/+++: 17

— ≥ 5,0cm: 17 (37,8%) doentes

Ø CA19-9 elevado: 4Ø CA19-9 tecidual: 0/+: 6 e

++/+++: 11

Resultados

Acometimento de linfonodos

— Média de linfonodosressecados: 17±11

— Linfonodos +: 22 (48,9%) doentes

Ø CA19-9 elevado: 6Ø CA19-9 tecidual: 0/+: 11 e

++/+++: 11

— Linfonodos -: 23 (51,1%) doentes

Ø CA19-9 elevado: 4Ø CA19-9 tecidual: 0/+: 6 e ++/+++:

17

Resultados

Invasão vascular linfática

— Presente: 16 (35,5%) doentes

Ø CA19-9 elevado: 5Ø CA19-9 tecicual: 0/+: 7 e ++/+++:

9

— Ausente: 29 (64,4%) doentes

Ø CA19-9 elevado: 5Ø CA19-9 tecidual: 0/+: 10 e

++/+++: 19

Resultados

CA19-9<37UI/mlN=35

CA19-9≥37UI/mlN=10

P=

Idade (anos) 68,77±13,05 72,20±9,68 0,44

Sexo M: 19 F: 16 M: 4 F: 6 0,49

Local Cólon:23 Reto: 12 Cólon:6 Reto: 4 0,72

Diâmetro (cm) <5,0: 22 ≥5,0: 13 <5,0: 6 ≥5,0: 4 0,99

Linfonodosacometidos

-: 19 +: 16 -: 4 +: 6 0,49

Inv. vasc. linfática -: 24 +: 11 -: 5 +: 5 0,45

Imunoexpressão

do CA 19-9

0/+=16

(45,7%

)

++/+++

=19

(54,3%

)

0/+=1

(10,0%)

++/+++

=9

(90,0%

)

0,06

ResultadosCA19-9 tecidual 0/+

N=17

CA19-9 tecidual ++/+++

N=28

P=

Idade (anos) 69,71±11,90 69,43±12,45 0,94

Sexo M: 9 F: 8 M: 14 F: 14 0,99

Local Cólon:11 Reto: 6 Cólon:18 Reto:10 0,99

Diâmetro (cm) <5,0: 11 ≥5,0: 6 <5,0: 17 ≥5,0: 11 0,99

Linfonodosacometidos

-: 6 +: 11 -: 17 +: 11 0,12

Inv. vasc. linfática -: 10 +: 7 -: 19 +: 9 0,74

CA 19-9 sérico

(UI/ml)

<37 N=16

(94,1%)

>37 N=1

(5,9%)

<37 N=19

(67,9%)

>37 N=9

(32,1%)0,06 (NS)

Conclusões

Conclusões1. Os níveis séricos do marcador CA19-9 não

mostraram relação com sua imunoexpressãotecidual.

2. Os níveis séricos pré-operatórios do CA19-9 e o grau de imunoexpressão tecidual do CA19-9 não mostraram relação com os aspectos morfológicos.

3. Os níveis séricos pré-operatórios e a imunoexpressão tecidual do marcador CA19-9 no carcinoma colorretal não mostraram relação com o comprometimento linfonodal e com a invasão linfática.