a szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · aclc prosztatarák >70 >40...
TRANSCRIPT
![Page 1: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/1.jpg)
A szteroid receptorok és
tirozinkinázok kimutatásának
patológiai vonatkozásai
Tímár József
Semmelweis Egyetem
2.sz. Patológiai Intézete, Budapest
![Page 2: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/2.jpg)
Tirozinkinázok genetikája emberi
daganatokban
HER2 mutáció amplifikáció
• DIC EC-delp95 +
• gyomorrák +
• Ovariális rák +
• Endometriális rák +
![Page 3: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/3.jpg)
HER2 expressziója emlőrákban
3+ CB11
Amp HER2/CEP17
![Page 4: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/4.jpg)
EGFR2/HER2 jelátviteli pálya (fiziológiás körülmények között)
Herceptin
![Page 5: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/5.jpg)
HER2 státusz és Herceptin
érzékenység
Svéd ajánlás közgazdasági elemzés alapján:
IHC2+/3+ emlőrákokon költséghatékony elvégezni a FISH-ta Herceptin kezelésre történő szelekció érdekében
NSABP,B31 újra-elemzése:
A HER2 státusz újra-elemzése sok Her2- beteg bevonására vetett fényt
Herceptin RR nem tért el a Her2+ és Her2- (de Herceptin kezelt betegeken)
Magyarázatok1./ chr17 polysomia (alacsony)2./ HER2 amp heterogenitása (un. minor populáció!!!!)
![Page 6: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/6.jpg)
HER2+/ER+ emlőrák
ER/PgR expresszió HER2 expresszió
Anti-E terápia HER2 expresszió nő
Anti-HER2 terápia ER expresszió nő (ER-….ER+)
Következtetés: Antiösztrogén/Herceptin kezelés után progrediált betegek esetében aHER2 és ER/PgR státusz újradefineálása kívánatos volna
pERcytoMAPK
CK Orsborne, GSK sym, ASCO2007
![Page 7: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/7.jpg)
HER2 rezisztencia okai
1./ PTEN szuppresszor gén vesztés (lsd KRAS/EGFR)
2./ p95HER2 (nincsen extracelluláris szakasz) 30-50%HERCEPTIN?
3./ HER2-TK mutáció (ritka)Herceptin és esetleges TK gátló rezisztencia
HER2 aktivitás markere: pHER3 IHC
C. Artega, GSK Sym, ASCO2007
![Page 8: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/8.jpg)
Az invazív ductalis carcinoma
genetikai altípusai
• Normál emlő-szerű
• Luminális (A/B) ER+
• Bazális típus ER-/PgR-/HER2-
„Triple negatív” DE EGFR+
• Her2+ (amplifikált) emlőrák
EGFR+
![Page 9: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/9.jpg)
Tirozinkinázok genetikája emberi
daganatokban
EGFR mutáció amplifikáció
• GBM vIII/EC-del +
• AC-tüdő TKex19-21 +
• HNSC EC-del +
• CRC EC-del +
• melanóma EC-del +(NM)
![Page 10: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/10.jpg)
EGFR(1)
AKT
![Page 11: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/11.jpg)
Laphámrák
EGFR
EGFR ampl
![Page 12: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/12.jpg)
NSCLC: adenokarcinóma
Bronchoalveoláris adenocarcinoma
EGFR
![Page 13: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/13.jpg)
EGF
STAT3
MAPK
AKT
Extracelluláris domén
Transzmembrán régió
Intracelluláris domén
Receptor L domén
Furin-likedomén
Receptor L domén
Katalitikuskinázdomén
Tirozin fosz-forilációs
hely(Y1068)
G719C
delE746-A750
del747-T751insS
del747-P753insS
L858R
L861Q
EXON18 CTTGTGGAGCCTCTTACACCCAGTGGAGAAGCTCCCAACCAAGCTCTCTTGAGGATCTTG
123bp AAGGAAACTGAATTCAAAAAGATCAAAGTGCTGGGCTCCGGTGCGTTCGGCACGGTGTAT
AAG G719C
EXON19 GGACTCTGGATCCCAGAAGGTGAGAAAGTTAAAATTCCCGTCGCTATCAAGGAATTAAGA
99bp GAAGCAACATCTCCGAAAGCCAACAAGGAAATCCTCGAT del 746-753
EXON20 GAAGCCTACGTGATGGCCAGCGTGGACAACCCCCACGTGTGCCGCCTGCTGGGCATCTGC
186bp CTCACCTCCACCGTGCAGCTCATCACGCAGCTCATGCCCTTCGGCTGCCTCCTGGACTAT
GTCCGGGAACACAAAGACAATATTGGCTCCCAGTACCTGCTCAACTGGTGTGTGCAGATC
GCAAAG
EXON21 GGCATGAACTACTTGGAGGACCGTCGCTTGGTGCACCGCGACCTGGCAGCCAGGAACGTA
156bp CTGGTGAAAACACCGCAGCATGTCAAGATCACAGATTTTGGGCTGGCCAAACTGCTGGGT
GCGGAAGAGAAAGAATACCATGCAGAAGGAGGCAAA L858R L861Q
EXON22 GTGCCTATCAAGTGGATGGCATTGGAATCAATTTTACACAGAATCTATACCCACCAGAGT
76bp GATGTCTGGAGCTACG
EXON23 GGGTGACTGTTTGGGAGTTGATGACCTTTGGATCCAAGCCATATGACGGAATCCCTGCCA
147bp GCGAGATCTCCTCCATCCTGGAGAAAGGAGAACGCCTCCCTCAGCCACCCATATGTACCA
TCGATGTCTACATGATCATGGTCAAGT
PRIMER-PÁR1
PRIMER-PÁR2
790M
e19
e20
e21
EGFR
![Page 14: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/14.jpg)
Copyright ©2006 American Association for Cancer Research
Riely, G. J. et al. Clin Cancer Res 2006;12:839-844
AC/BAC outcome treated with Gefitinib/erlotinib
![Page 15: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/15.jpg)
p1173
EGFR aktiváció adenokarcinómában: p1173 preferencia
p1068/1086 negatív
![Page 16: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/16.jpg)
EGFR-elleni terápia
problémái NSCLC-ben
• EGFR rezisztencia mutáció
790M
• K-RAS mutáció
• C-MET amplifikáció
• EGFR negativitás (fehérje
szinten?)
![Page 17: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/17.jpg)
EGFR expresszió vastagbélrák
májáttéteiben
májszövet
EGFR: 1+/2+, 30% EGFR: 1+<10%
Pozitiv kontroll
![Page 18: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/18.jpg)
Anti-EGFR antitestterápia prediktív
patológiájának problémái
• 1% daganatsejtpozitivitás az indikáció
immunhisztokémia segítségével
• EGFR pozitivitás mértéke nem függ össze
a klinikai hatékonysággal
• EGFR gén kópiaszáma jobb korellációt
mutat
• EGFR protein negatív daganatok
esetében is hatékony a kezelés
![Page 19: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/19.jpg)
A RAS onkogén mutációjának
gyakorisága emberi daganatokban
Ras típus Daganat %
K-RAS Pancreasrák
Vastagbélrák
Húgyhólyagrák
ACLC
Prosztatarák
>70
>40
20
>30
>10
N-Ras Emlőrák <10
melanóma <30
![Page 20: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/20.jpg)
![Page 21: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/21.jpg)
Genomikai sajátosságokon alapuló
felosztás (Ogino, Goel, AJP2007)
• MSI-low/MSS-CIMP0-CIN+ 40%KRAS/BRAFwt, distalis colon (CRC6)
• MSS---CIMPlow-----CIN- 35%
Ffi, KRAS mutáns (CRC5)
• MSI-high—CIMP-high—CIN- 10%
nő, proximális, BRAFm, MLH1-
• MSI-high—CIMP-low/0—CIN- 5% (HNPCC-Lynch is)
proximális, nyáktermelő, TIL+, KRASm
• MSI-low/MSS—CIMP-high—CIN- 5%
idős nő, jobb colon, signet-ring, BRAFm
• MSI-low—CIMP-low 5%
KRASm, MGMT-
CIN: kromoszóma instabilitás, DNS-PLOIDIA
MSI: mikroszatellita instabilitás (MSS): DNS repair (MSH2/MLH1)
CIMP: CpG sziget metiláció (epigenetika)
![Page 22: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/22.jpg)
KRAS mutáció prediktív szerepe
Pao et al. PLOS Med 2005
Gumerlock et al. JCO2005
Han et al. Clin Cancer Res 2006
1. KRAS mutáns daganat kissé rezisztensebb a kemoterápiára
2. KRAS mutáns daganat rezisztens EGFR-TKI terápiára
![Page 23: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/23.jpg)
Extracelluláris
domén
Intracelluláris domén
Tirozin-kináz domén
Autofoszforilációs domén
Ligand-kötő domén-1
CRD
Ligand-kötő domén-2
CRD
T845
T974
T992
SRC-
AP2-------
MAPK/ERK-PKC-PLCg----
T1045-Cbl---- proteoszomális degradáció
T1068-Grb2---RAS-MAPK-ERK
T1086-Gab1--PI3K-AKT
T1101-SRC
T1148-SHC---RAS-MAPK/ERK
T1173-SHP1--PLCg-PKC-MAPK/ERK
plazmamembrán
Az EGFR jelátviteli aktivitása kinázmutáció esetében
![Page 24: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/24.jpg)
EGFR-RAS paradoxon• vadEGFR--------------vadRAS (EGFR lehet
amplifikált)
CRC, NSCLC, HNSC
• vadEGFR---------mutánsRAS (EGFR lehet
amplifikált)
CRC, NSCLC, pancreasrák
• mutánsEGFR---------vadRAS (EGFR lehet
amplifikált)
NSCLC
• mutánsEGFR----mutánsRAS…igen ritka
konstelláció
![Page 25: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/25.jpg)
Molekuláris genetikai szelekció:
adenocarcinoma K-RAS
mutáció
+ -
relatív
rezisztencia
génamplifikáció
+ -
(Fokozott
érzékenység)
EGFR-790
mutáció
+ - - +
rezisztencia rezisztencia
EGFR
exon19/21
mutáció
+ -
Fokozott
érzékenység
(EGFRwt)
EGFR-TKI rez (gyakoriság?)
Nem-e19 mutációk
Jelentősége?
Tímár et al. LAM,2007
![Page 26: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/26.jpg)
![Page 27: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/27.jpg)
B-RAF aktiváló mutáció (V600E)
emberi daganatokban
• Cután melanóma 70%
• Pajzsmirigyrák (pap) 50%
• Ováriumrák (low grade, serosus) 30%
• Vastag-végbélrák 5-10%
Nincs
• Hepatocelluláris rák
• Gyomorrák
• endometriumrák
![Page 28: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/28.jpg)
RAS- BRAF paradoxon
• K-RAS- B-RAF mutáció kizárja egymást
(NSCLC, CRC)
• N-RAS- B-RAF mutáció kizárja egymást
(kután melanóma)
![Page 29: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/29.jpg)
Tirozinkinázok genetikája emberi
daganatokban
KIT mutáció amplifikáció
• GIST jm, TK -
• nonUV melanoma TK -
PDGFR
• GIST EC-del, TK -
• DFSP fúziós gén (coll) -
ABL
• CML fúziós gén (BCR) -
![Page 30: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/30.jpg)
![Page 31: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/31.jpg)
Gastrointestinalis Stromalis Tumor (GIST)
CD117/KIT
Gleevec
![Page 32: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/32.jpg)
C-KIT mutációk GIST-ben
• Exon 11 (juxtamembrán): EC domén
delécióEC
TK-domén Citoplazmatikus KIT-IHC
•Exon 9, 13,17 mutációk ritkábbak (9-EC, 13,17 TK)
•Ex 17-mut: GLEEVEC RES
•KLASSZIKUS MORFOLÓGIA:::::::::::::::::::::::::::::::::
Cod557,558: ROSSZ PROGNÓZIS!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
NINCS GÉNAMPLIFIKÁCIÓ (FISH nem szükséges)
Tabone et al BBA 1741:165,2005
![Page 33: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/33.jpg)
![Page 34: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/34.jpg)
A PDGF receptor mutációk GIST-
ben• Exon 12 (deléció vagy missense) EC domén vesztő
• Exon 18 (deléció vagy missense) GLEEVEC-RES
• Exon 14 pontmutáció) EC domén
• Kizárja a párhuzamos c-kit mutációt!!!!!!!!
• Morfológia: pleiomorf, óriássejtes
• Lokalizáció: gyomor (ex14/cod2125) epitheloid
• PDGFR: citoplazmatikus (dot)
Lasota et al. Lab Invest 86:94,2006 Martin et al. JCO 23:6190,2005
![Page 35: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/35.jpg)
KIT/PDGFR mutációk
KIT-mut, gyenge vagy nincs PDGFR protein
PDGFR-mut, gyenge vagy negatív a KIT protein
Ez elsősorban az EC-domén-vesztő génhibák
esetében jellemző
![Page 36: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/36.jpg)
KIT-ex 17/ PDGFR-ex18 mutációs
GIST
• Gleevec rezisztens
• Más TK gátlóra van szükség……..
• Pl.: SUTENT
![Page 37: A szteroid receptorok és tirozinkinázok kimutatásának ... · ACLC Prosztatarák >70 >40 20 >30 >10 N -Ras (PO UiN](https://reader034.vdocuments.site/reader034/viewer/2022052008/601c8703cb50c061e91eb5fd/html5/thumbnails/37.jpg)