9. LABORATORIJSKE PROCEDURE SPECIFINE ZA INFEKTOLOGIJU. UZIMANJE HEMOKULTURA, URINOKULTURA, KRVNIH RAZMAZA, STOLICA NA DES I CRIJEVNE PARAZITEProf. dr. Sead Ahmetagi

Hemokultura

Hemokultura je uzimanje i nasaivanje krvi na hranjivu podlogu, pri sumnji na bakterijemiju ili septikemiju.

Indikacije za hemokulturu su: - bakterijemija, - septikemija, - prijeoperativni, ili postoperativni ok, - neobjanjena stanja poviene temperature, - stanje febrilnosti i tresavice kod inficiranih opeklina, opsenih infekcija koe i sl.

Boce za hemokulturu Pravilno zasijavanje hemokulture

Priprema bolesnika:

Psihika priprema obuhvata pojanjavanje pretrage i naina izvoenja.Fizika piprema: bolesnik lei, ispod ruke stavimo kompresu s nepropusnim materijalom.

Priprema pribora: Na dezinficiranu gornju plohu stolia pripremimo:

- maske,- sterilne rukavice,- pribor za ienje i dezinfekciju koe: benzin, alkohol, sterilne tupfere, gaze i sterilna pinceta, ili pean,- pribor za vaenje krvi (sterilna prica, sterilne igle za intramuskularnu primjenu ili baby sistem sa adapterom za vakumsko vaenje sa mogunou za direktno unoenje krvi u hranilite,- pribor za dijagnostiku (podloge za hemokulturu: bujon za anaerobe i aerobe),- uputnice,- bubreasta zdjelica i kontejneri za otri otpad.

Priprema prostorije: tokom zahvata ne rade se drugi zahvati ni postupci ienja.

Izvoenje zahvata: zahvat se izvodi u aseptinim uslovima, i izvode ga dvije sestre.

Operu se ruke i stavi se maska. Jedna osoba asistira, a druga osoba izvodi zahvat. Dezinfekcija koe obavlja se krunim pokretima od centra prema periferiji, jer je kona flora est uzrok kontaminiranja hemokulture. Osoba koja izvodi venepunkciju u sterilnim rukavicama ulazi beby sistemom u venu i kada se pojavi krv u beby sistemu nastavi hranilite na eiri. Uzima se 5 ml krvi-na hranilitu oznaeno. Potom skidamo jedno i stavljamo drugo hranilite. Lagano protresemo, izvadimo i drugo hranilite. Pazimo da hemokultura ne povue zrak. Otpustimo gumicu za stazu i izvuemo beby sistem. Ubodno mjesto pritisnemo lopticom od vate, i pritisnuto drimo najmanje dvije minute, beby sistem odloimo u bubreastu posudu, a postoje i kontejneri za otri otpad. S boice hranilita skinemo ifru i zalijepimo je na stranju stranu uputnice.

Ukoliko nemamo takvih hranilita i pribor za vakumski sistem, postupak je slijedei: - Nakon dezinfekcije koe, ubodemo bolesnika iglom, ili beby sistemom nastavljenom na pricu i povuemo 10 ml krvi. Potrebno je znati i koliko je cm3 krvi potrebno za hranilite. Za hranilita koja se koriste na naim prostorima dovoljno je 5 cm3 za svako zasaivanje. Za novoroenad izvadimo 2 ml, a djeci od godinu dana 3-5 ml krvi.

Ako je iz nekih razloga prije uzeto dovoljno krvi, hemokultura se svejedno uzima i alje na obradu. Nakon vaenja krvi otpustimo gumicu za stazu i vadimo iglu. Mjesto uboda se pritisne, a krv se iz price prebacuje u hranilite.

Postupak je slijedei: skidamo iglu ili beby sistem sa price, stavljamo sterilnu novu iglu, dezinficiramo ep bujona, ubodemo iglom i utrcamo 5ml krvi. Vadimo iglu, stavljamo novu i ponovimo postupak za drugi bujon. Lagano protresemo, na njih upiemo podatke o bolesniku-ime i prezime, matini broj i datum uzimanja.

Dostava u laboratoriju: hemokultura se alje odmah u laboratorij, a ako laboratorij ne radi, ostavimo hemokulturu u termostat na 370 C.

Raspremimo pribor, jednokratni pribor se baca, kolica se dezinficiraju, a podaci se unose u knjigu za izvjetaj.

Vaenje krvi za hemokulturu iz cava endovenoznog katetera (CVK)

Postupak vaenja krvi za hemokulturu iz cava katetera je slian, i na isti nain se priprema pribor, prostor i bolesnik.

Na oprane ruke navlaimo rukavice, alkoholom obriemo spojnice izmeu katetera i infuzionog sistema, a ispod spojnice stavimo tupfer od gaze. Iz katetera sterilnom pricom povuemo 2-3 ml krvi, skinemo pricu i odloimo u bubreastu posudu. Uzimamo drugu sterilnu pricu, i vadimo krv za hemokulturu. Nakon toga vadimo pricu, zatitimo je sterilnom iglom. CVK se ispere fiziolokom otopinom, da se ne zaepi i reguliemo protok otopine. Na uputnicu obavezno upisujemo odakle potie krv (iz CVK). Krv iz price ubrizgamo na hranilite istim postupkom.

Hemokultura se uzima kada je temperatura praena tresavicom, odnosno pola sata prije oekivanog porasta temperature, jer poviena temperatura moe unititi mikroorganizme. Dokazivanje uzronika je teko, pa je nekad potrebno uzeti i vie uzoraka krvi za hemokulturu. Nakon mikrobiolokih pretraga, dobivaju se biogram i antibiogram, prema kojima se odreuje antimikrobna terapija.

Urinokultura: s obzirom da pravilno uzimanje urina i stolice, pravilna dostava, ima veoma bitan znaaj u dijagnostici i terapiji mnogih infektivnih oboljenja, to je uloga medicinske sestre u uzimanju uzorka veoma vana. Urin se dostavlja jo topao i obino se uzima prvi jutarnji urin. Za novoprimljene bolesnike, medicinska sestra uzima urin bez obzira na doba dana. Poeljno je urin odmah dostaviti u laboratorij, jer urin ne smije stojati na sobnoj temperaturi, te ga staviti u friider na + 40 C. Tako moe stojati do 6 sati i onda se dostavlja u laboratorij. Pri sumnji na tuberkulozu (TBC) bubrega, uzorak se kultivie uzastopno 10 dana. Postupak uzimanja je isti.

Urinokultura

Sputum (iskaljaj)

Sputum se nakon uzimanja uzorka dostavlja odmah u laboratorij, zato to na sobnoj temperaturi raste saprofitna flora, a smanjuje se broj patogenih (mikroorganizama) bakterija. Ukoliko uzorak ne moemo poslati u laboratorij u roku od 2 sata, moe se sauvati u hladnjaku na + 4 0C do unutar 6 sati. Za pretragu sputuma na Mycobacterium tuberkuloze (MTBC), uzorak moe biti star i do 3 dana, ako stoji na sobnoj temperaturi, i u tamnom prostoru.

Mikrobioloka analiza stolice: kultura stolice radi se na bakterije, viruse i gljivice. Opta pravila za uzimanje stolice su: - bez urina, - proljevaste stolice uzimamo u koliini 5-10 ml, - stolica defecirana u toalet ne moe biti uzorak za analizu, - stolicu je potrebno dostaviti u laboratorij brzo, najkasnije u roku od nekoliko sati od uzimanja - kod sumnje na koleru stolica se uzima u alkalnu peptonsku vodu, - alkalna peptonska voda stoji u hladnjaku, pa se 10-15 minuta prije uzimanja stolice izvadi da stoji na sobnoj temperaturi.

Prije uzimanja uzorka, na epruvetu zalijepiti naljepnicu sa podacima i vremenom uzimanja. S obzirom da je stolica kod kolere vodenasta, uzorak se uzima standardnim brisom, tapi sa brisom umoi se u stolicu, uroni u peptonsku vodu i zatvori. Nakon uzimanja epruveta se omota gazom natopljenom Halamidom. Tako pripremljena nosi se u laboratorij, te se o daljnjem postupku brine laboratorijsko osoblje. Rukavice se bacaju, a ruke dobro operu i dezinficiraju .

Crijevne parazitoloke pretrage Mnoge infekcije mogu se otkriti rutinskim pregledom krvi i stolice i kada ne postoji sumnja na bolest. Paraziti se mogu otkriti i makroskopski (ako se radi o veim helmintima). Najvei se broj parazita identificira iz krvi ili stolice, ali mogu biti i drugdje, pa se kao uzorak moe iskoristiti urin, sputum, punktat i dr.

Pretrage stolice na parazite: uzorak stolice uzeti u 3 navrata. Nepouzdan uzorak stolice za dijagnozu protozoe je ukoliko je bolesnik na preparatima bizmuta, raena pretraga barijum kaom, pa ak ako je i uzimao antibiotik. Uz stolicu obino se uzima i analni otisak-celofan test.

Analni otisak se uzima ujutru prije toalete perigenitalne regije i prije defekacije. Ovim se testom obino dokazuje Enterobius vermicularis (konasta glista). Za uzimanje analnog otiska pripremimo selotejp traku, koju predhodno nalijepimo na predmetno stakalce, tako da se ostave presavinuti dijelovi trake izvan rubova stakalca. Odlijepimo traku, razdvoje se gluteusi i pritiskom trake na anus uzme se otisak. Traka se ponovo zalijepi na stakalce, stavi u malu papirnu vreicu i uz odgovarajuu uputnicu dostavi u laboratorij. Mikroskopom se vide jajaca uzronika. Analni otisak se najee uzima djeci, jer se kod njih mogu nai jajaca ispod noktiju prstiju ruke.

Pri sumnji na amebijazu koju uzrokuje Entamoeba histolytica za dijagnozu je potrebno pretraiti stolicu na ciste i vegetativne oblike histolitine amebe. Ciste se dokazuju parazitolokim pretragama guste stolice, tri puta. Stolica se uzima u hemijski istu posudu. Za dokazivanje vegetativnih formi izravno se mikroskopira svjea proljevasta stolica, a takav uzorak dobivamo pretragom koju nazivamo provokacijom na amebe. Pretraga se radi ambulantnim i hospitaliziranim bolesnicima.Cista Entamoebae histolyticae

Za psihiku pripremu potrebno je objasniti bolesniku razlog i tok pretrage.

Fizika priprema provokaciju izazivamo gorkom soli. Bolesnik popije dvije kaike gorke soli razmuene u 2 dcl mlake vode i nakon toga se eka da bolesnik dobije stolicu.

Uzorak stolice se uzima na sljedei nain:

Uzima se 5-6 uzoraka od triju razliitih stolica. Bolesnik defecira u nonu posudu, staklenim tapiem se uzima uzorak stolice, kapne na predmetno stakalce, pokrije pokrovnim stakalcem i stavi u termostat i jo svjee mikroskopiraju. Bolesnik se vraa na odjel, ili odlazi kui.

Kontraindikacije za provokaciju stolice na amebe su: trudnice, djeca mlaa od 5 g., kardioloki bolesnici zbog napora, bolesnici kojima je dijagnosticiran ulkus eluca, ili dvanaesterca zbog mogueg krvarenja. Zadatak medicinske sestre je prikupiti informacije o postojanju kontraindikacija.

Lavaa debelog crijeva: bolesniku se daje klizma za ienje. Obzirom da ovim nainom dobivamo uzorak stolice do stigme, ovaj dijagnostiki postupak je manje pouzdan.

Enterotest-duodenalna kapsula: ovaj test se izvodi za dokazivanje Lambliae (Gardiae) intestinalis, Strongiloides stercoralisa, Fasciole hepatice, Salmonelle typhi.

Nakon psihike pripreme, pretraga se izvodi u parazitolokom laboratoriju. Postupak je sljedei: Bolesnik je natate. Kapsula se stavi na korijen jezika uz uputu da se proguta. Kapsula, veliine priblino kao kapsula antibiotika se sastoji od elatinoznog vanjskog omotaa, u sebi sadri 140 cm (za odrasle) i 90 cm (za djecu) pamune niti. Na dnu ima metalnu olivu.

Neposredno prije nego to bolesnik proguta kapsulu, izvue se dio pamune niti koja viri da bi se kada bolesnik proguta kapsulu, nit mogla zalijepiti flasterom za obraz da se ne bi potpuno progutala, jer ju je kasnije potrebno izvaditi. Odraslima ne nudimo vodu, a djeci je dajemo s vodom. Nakon 4 sata, smatra se da je kapsula prola duodenum, nit se odlijepila od olive i sposobna je za izvlaenje. Oliva fecesom bude eliminirana iz organizma. Bolesniku se odlijepi vrh niti sa obraza. Glava se lagano zabaci unazad i nit se, drei je palcem i kaiprstom izvlai uz obavezno noenje rukavica.

Na krajnjem dijelu izvuene niti provjeravamo kiselost pomou ph indikatora. Ako je test uspio, nit je na sebe upila sadraj duodenuma, krajnji dio stisnemo prstima i kapnemo na predmetno stakalce i pokrijemo pokrovnim stakalcem. Zatim se uzorak mikroskopira u parazitolokom laboratoriju. Ako je bolesnik povraao, pregrizao nit, ili smo na niti pri vaenju nali tragove krvi od lokalne iritacije, test nije uspio, pa se dogovara ponavljanje pretrage.