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化学系 5 班

单可隆抗体的免疫分析

抗体

抗体是蛋白质的一种，一般称为免疫球蛋白（ immunoglobulins, Ig ） ,其中大部分抗体是IgG （ 70% ）。 IgG 是一种有两个特征性重 - 轻链杂二聚体，通过双硫键形成的 Y 型蛋白，其中有由于Fab 区轻重链球形变化形成的两个结合位点，其特异性由结合识别区的氨基酸决定。

单克隆抗体抗体由 B 淋巴细胞产生，每一个 B 细胞在其表面只有一种特异性。外来抗原只能与那些具有专一性结合位点的细胞结合。这些结合刺激细胞分裂，形成大量具有相同特异性的抗体。它们纯合性很高，只存在单一的结合位点，因此叫做单克隆抗体。

抗原

抗原不一定是蛋白质，只要是能诱导免疫响应，从而形成相应抗体的大分子即可。

平衡常数

Ab-Ag 为抗体 - 抗原复合物

]][[

][

AgAb

AgAbKeq

AgAbAbAb t

AgAbKeqAbKeqAbKeqAg

AgAbt

在 Scratchard 图中，以比值对作图，图中斜率为，与 x 轴截距为。单克隆抗体的 Scratchard 图是一条直线。

结合率结合率

AgAbAgAg t

AbKeqAg

AgAb

t /11

1

Keq

AgAgAb

AgAgAb

Ag

AgAb

t /1

/

在指定抗体浓度下，抗原浓度只在某个特定的范围内与结合率有关，在此范围以下，结合率为一常数，改变抗原浓度不会导致结合率发生变化。

通过改变抗体浓度可以使最大变化区间向较高抗原浓度的范围变化。

在抗体浓度很低时（ <0.01/Keq ），抗体已结合的位点数可以反映出待测物浓度与抗体浓度无关。

标记标记用放射性同位素 I 和 H 跟踪蛋白质（抗原）。

用荧光试剂标记，用分光光度法分析。

用生物酶标记，间接测量酶底物的消耗、产物的产量来分析。

参考文献1 Kellner.R. 李克安，金钦汉等译，分析化

学 / 奥地利 . 北京：北京大学出版社， 2001 ， 7 ： 351—372

2 John A. Dean 常文保等校译，分析化学手册 / 美国 . 北京：科学出版社， 2003 ， 18

3 倪永年，化学计量学在分析化学中的应用 . 2004 ， 8 ： 274

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