85

Ekstraksi dan Karakterisasi Kolagen Larut Asam dari Kulit Ikan Nila (Oreochromis niloticus) (Nurhayati et al.)

KOMUNIKASI RINGKAS

EKSTRAKSI DAN KARAKTERISASI KOLAGEN LARUT ASAM DARIKULIT IKAN NILA (Oreochromis niloticus)

Extraction and Characterization of Acid-Soluble Collagen fromNile Tilapia (Oreochromis niloticus) Fish Skin

Nurhayati1*, Tazwir1, dan Murniyati11 Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Pengolahan Produk dan Bioteknologi Kelautan dan Perikanan, KKP.

Jl. K.S. Tubun Petamburan VI, Jakarta Pusat 10260* Korespondensi Penulis: n_hay04@yahoo.com

Diterima: 5 November 2012, Disetujui: 29 Mei 2013

ABSTRAK

Kulit ikan nila dapat diolah menjadi kolagen yang dapat meningkatkan nilai tambah kulit ikan.Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh perbedaan konsentrasi asam terhadapkarakteristik kolagen yang dihasilkan. Ekstraksi kolagen dilakukan melalui perendaman dalamasam asetat dengan dua variasi konsentrasi yaitu 0,5 dan 1,5 M. Parameter yang diamati yaitugugus fungsi, komposisi asam amino, suhu denaturasi, dan kemampuan mengembang kolagen.Hasil penelitian menunjukkan bahwa perlakuan asam asetat 0,5 M memiliki komposisi asamamino dan suhu denaturasi yang lebih tinggi dibandingkan perlakuan asam asetat 1,5 M. Namundemikian, kolagen pada perlakuan asam asetat 1,5 M ternyata memiliki kemampuan mengembanglebih cepat (15 menit) dibandingkan perlakuan asam asetat 0,5 M (60 menit). Sementara itu,spektra FTIR menunjukkan kolagen yang diperoleh dari kedua perlakuan memiliki karakteristikyang sama. Berdasarkan karakteristik kolagen yang diperoleh dengan dua perlakuan ekstraksi,perlakuan asam asetat 0,5 M menunjukkan hasil yang lebih baik dibanding 1,5 M.

KATA KUNCI: kulit ikan nila, kolagen, ekstraksi, karakterisasi

ABSTRACT

Fish skin of nile tilapia can be improved its added value by processing to be collagen. Thisresearch aims to know the effect of different acid concentration on collagen characteristics produced.Collagen extraction was conducted by soaking in acetic acid with two concentration of 0.5 and 1.5M. Parameters observed were functional groups, amino acid composition, denaturationtemperatures, and swelling. The results showed that the treatment of 0.5 M acetic acid had aminoacid compositions and denaturation temperatures higher than that of 1.5 M acetic acid. However,collagen with 1.5 M acetic acid had faster swelling (15 minutes) compared to 0.5 M acetic acid (60minutes). Meanwhile, the FTIR spectra showed that collagen obtained from both treatments hadthe same characteristics. Based on the collagen characteristics produced 0.5 M acetic acid wasbetter than 1.5 M for collagen extraction.

KEYWORDS: fish skin of nile tilapia, collagen, extraction, characterization

PENDAHULUAN

Ikan nila (Oreochromis niloticus) merupakan salahsatu produk perikanan budidaya yang mengalamikenaikan volume produksi setiap tahunnya dengankenaikan rata-rata sebesar 24,76% dari tahun 20072011 (KKP, 2011). Ikan nila kini banyak diolah menjadifilet ikan yang merupakan bahan baku industripengolahan produk perikanan. Pengolahan filet ikan

nila menghasilkan hasil samping berupa kulit ikandengan rendemen sebesar 8,7% dari berat total ikan(Peranginangin et al., 2006). Dengan nilai rendementersebut, produksi ikan nila pada tahun 2011 sebesar481.440 ton diperkirakan akan menghasilkan 41.885ton kulit ikan nila. Pada umumnya kulit ikan nila inidiekspor ke beberapa negara ataupun dipasarkan lokalsebagai kerupuk kulit. Beberapa pemanfaatan kulitikan nila diantaranya sebagai kulit tersamak untuk

JPB Kelautan dan Perikanan Vol. 8 No. 1 Tahun 2013: 8592

86

bahan kerajinan seperti sepatu, sandal, dan dompet(Murniyati et al., 2012), pembuatan gelatin sebagaibahan pangan dan farmasi (Peranginangin, 2007).Lebih dari itu, kulit ikan nila juga dapat diolah menjadikolagen yang dapat meningkatkan nilai tambah kulitikan.

Pada umumnya, kolagen berasal dari bahan bakutulang dan kulit mamalia seperti sapi dan babi (Santoset al., 2013). Bahan baku dari babi tidak dibenarkanbagi pemeluk Agama Islam dan Yahudi, sementarapenggunaan tulang dan kulit sapi menjadi persoalantersendiri bagi pemeluk Agama Hindu sertamenimbulkan kekhawatiran karena adanya isupenyakit sapi gila atau mad cow disease(Jongjareonrak et al., 2005; Kasankala et al., 2007).Oleh sebab itu, pengolahan kolagen dari kulit ikansangatlah berguna untuk mengatasi permasalahantersebut (Kittiphattanabawon et al., 2005).

Kolagen merupakan komponen struktural utamajaringan ikat putih (white connective tissue) yangmeliputi hampir 30% total protein pada tubuh. Hinggakini terdapat sekitar 25 tipe kolagen yang telahdiidentifikasi, yaitu tipe I sampai XXV (Olsen et al.,2003). Tipe kolagen yang teridentifikasi pada ikanhanya tipe I dan V. Kolagen tipe I terdapat pada kulit,tulang, dan sisik ikan (Nagai & Suzuki, 2000),sementara kolagen tipe V terdapat pada jaringan ikatdalam kulit, tendon dan otot ikan yang jugamengandung kolagen tipe I (Sato et al., 1989). Kolagendapat diaplikasikan pada industri makanan, kosmetik,biomedis dan industri farmasi. Pada kosmetik, kolagendigunakan untuk mengurangi keriput pada wajah ataudapat disuntikkan ke dalam kulit untuk menggantikanjaringan kulit yang telah hilang. Pada biomedis,kolagen digunakan sebagai sponges untuk luka bakar,benang bedah, agen hemostatik, penggantian atausubstitusi pada pembuluh darah dan katup jantungtiruan. Pada industri farmasi kolagen digunakansebagai drug carrier yaitu : mini-pellet dan tablet untukpenghantaran protein, formulasi gel pada kombinasidengan liposom untuk sistem penghantaran terkontrol,bahan pengkontrol untuk penghantaran transdermal,dan nanopartikel untuk penghantaran gen (Lee et al.,2001).

Beberapa penelitian kolagen hasil samping olahanikan telah banyak dilakukan. Kulit ikan dilaporkanmengandung kolagen dengan nilai rendemen yangbervariasi antara 1163% tergantung dari jenis ikan,bahan pengekstrak, dan teknik ekstraksi kolagen(Nagai & Suzuki, 2000). Di Indonesia, terdapatbeberapa penelitian mengenai kolagen dari ikan,diantaranya Ali et al. (2011) yang telah melakukanekstraksi kolagen dari sisik ikan kakap merah, danPeranginangin et al. (2008) yang juga telah melakukanekstraksi kolagen dari kulit ikan kerapu. Sementara

itu, pada penelitian ini digunakan kulit ikan nila sebagaibahan baku kolagen dengan perlakuan perbedaankonsentrasi asam pada tahap ekstraksinya. Penelitianini bertujuan untuk mengetahui pengaruh konsentrasiasam yang berbeda terhadap karakteristik kolagenyang dihasilkan.

BAHAN DAN METODE

Bahan

Bahan utama penelitian ini adalah hasil sampingperikanan berupa kulit ikan nila (Oreochromisniloticus) yang diperoleh dari daerah Semarang, JawaTengah. Kulit ikan selanjutnya dibawa ke Balai BesarPenelitian dan Pengembangan Pengolahan Produkdan Bioteknologi Kelautan dan Perikanan dengan caramenempatkannya dalam coolbox dan diberi serpihanes. Kulit ikan dicuci dengan air dingin (5C) selama10 menit, kemudian dipotong-potong ukuran 25 cmdengan menggunakan gunting. Kulit yang telah bersihdisimpan dalam cold storage sampai tahap ekstraksidilakukan. Penghilangan protein non kolagen dilakukandengan perendaman kulit dalam larutan 0,8 M NaCl1:5 (b/v) selama 3 hari, diikuti pencucian dengan airmengalir.

Metode

Ekstraksi kolagen

Ekstraksi kolagen dilakukan dengan perendamandalam asam asetat mengacu pada Muyonga et al.(2004a) yang dimodifikasi. Kolagen diekstrakmenggunakan asam asetat dengan konsentrasi 0,5dan 1,5 M (1:10 b/v) pada suhu 4C selama 3 haridisertai dengan pengadukan secara berkala. Ekstraksidiulang dengan pereaksi dan kondisi yang sama,kemudian filtrat yang diperoleh disentrifus dengankecepatan 10.000 rpm selama 30 menit. Presipitasikolagen dilakukan dengan penambahan NaCl kedalam supernatan hingga konsentrasi 0,9 M, laludisentrifus kembali. Pemurnian kolagen dilakukanmelalui pelarutan kembali dengan asam asetat laludipresipitasi kembali seperti diatas. Kolagen basahdikeringkan dengan freeze drier sehingga diperolehkolagen kering. Penelitian dilakukan dengan 3 kaliulangan.

Fourier Transform Infra-Red

Karakterisasi gugus fungsi kolagen dilakukanmenggunakan FTIR (Fourier Transform Infra-Red)Perkin Elmer Spectrum One. Gugus-gugus fungsiyang diperlihatkan pada spektrum kolagen digunakanuntuk menentukan pola ikatan silang (cross-linking)

87

Ekstraksi dan Karakterisasi Kolagen Larut Asam dari Kulit Ikan Nila (Oreochromis niloticus) (Nurhayati et al.)

yang terjadi sehingga perubahan pada stuktursekunder kolagen dapat dipelajari (Muyonga et al.,2004b). Sebanyak 2 mg Kolagen dan 200 mg KBrdigerus hingga homogen dan diletakkan padaalat pencetak disk, kemudian divakum untukmenghilangkan udara pada disk. Disk yang telahdicetak dimasukkan kedalam alat FTIR kemudiandiukur pada panjang gelombang 400 cm-1 sampai4.000 cm-1, kemudian spektrum IR akan muncul.

Analisis Asam Amino

Karakterisasi jenis asam amino dilakukan untukmengetahui jenis asam amino yang terdapatpada kolagen (Dunn, 2006). Instrumentasi yangdigunakan yaitu HPLC (High Performance LiquidChromatography) Waters 1525 dengan kolom WatersBondapak NH2 3,9 mm x 300 mm dan fasa gerakyaitu asetonitril : air (60:40). Standar asam amino yangdigunakan pada analisis ini terdiri dari 15 jenis asamamino. Sejumlah 100 mg sampel kolagen ditimbangdan dimasukkan ke dalam tabung ulir danditambahkan 10 ml HCl 6 N. Sampel dialiri gas N2lalu dimasukkan ke dalam oven 110C selama 22 jamlalu diangkat, disaring, dan diencerkan dalam labutakar 50 ml. Ambil 5 ml larutan sampel pada labu dandiuapkan 50C selama 15 menit, dan diencerkan dalamlabu 25 ml. Selanjutnya dilakukan derivatisasi, yaitusampel sebanyak 10 l ditambahkan 70 l AccQ-FluorBorate Buffer dan 20 l AccQ Fluor, vortex, biarkan 1 menit pada suhu kamar, lalu di masukkan dalamoven 55C selama 10 menit.

Suhu Denaturasi

Penentuan suhu denaturasi kolagen dilakukansesuai metode Kittiphattanabawon et al. (2005)dengan sedikit modifikasi. Pengukuran dilakukandengan viskometer Brookfield LVF 88883menggunakan spindel (No. 1) pada kecepatan 60 rpm.

kurva suhu denaturasi diperoleh dengan mengukurviskositas larutan pada beberapa temperatur dari 25Csampai 45C. Temperatur dinaikkan secara bertahap.Temperatur denaturasi ditentukan sebagai temperaturdimana nilai viskositas berubah menjadi setengahnya.

Fraksi viskositas =viskositas yang diukur - viskositas minimumviskositas maksimum viskositas minimum

Kemampuan Mengembang (Swelling)

Uji kemampuan mengembang dilakukan denganmerendam kolagen kering ke dalam buffer fosfat pH5,8 (British Standard 757, 1975). Penimbangandilakukan terhadap kolagen sebelum dan sesudahperendaman pada interval waktu 15 menit. Indeksswelling diukur dengan rumus:

Indeks Swelling = (W2 W1) W1Keterangan: W1 = Berat kolagen awal

W2 = Berat kolagen setelah direndamdalam buffer

HASIL DAN BAHASAN

Gugus Fungsi Kolagen

Kolagen kulit nila dianalisis gugus fungsinya untukmelihat pengaruh konsentrasi asam terhadapkarakteristik kolagen (Tabel 1). Spektra yang diperolehdapat dilihat pada Gambar 1.

Berdasarkan spektrum kolagen yang diperoleh,kedua kolagen mempunyai karakteristik spektra yangsama. Tabel 1 menunjukkan bahwa kolagen dari kulitikan nila memiliki 5 daerah amida, yaitu amida A, B,

Tabel 1. Posisi puncak spektra FTIR kolagenTable 1. FTIR Spectra of collagen peak position

0.5 M 1.5 M 0.5 M 1.5 M

Amida A 3279 3283 59.35 58.42 -NH perenggangan

Amida B 2928 2932 64.38 65.81 -CH2- perenggangan asimetrik

Amida I 1659 1659 52.43 50.23 -C=O perenggangan

Amida II 1535 1532 55.63 53.90 Ikatan NH

Amida III 1242 1242 60.19 59.97 Ikatan NH

Daerah/Range Gugus Fungsi/Functional Groups

Bilangan gelombang/Wave Number (cm- 1 )

Transmitans/Transmitans (%)

JPB Kelautan dan Perikanan Vol. 8 No. 1 Tahun 2013: 8592

88

Gambar 1. Spektum inframerah kolagen kulit ikan nila.Figure 1. Infrared spectrum of nile tilapia skin collagen.

Tabel 2. Komposisi asam amino kolagen kulit ikan nilaTable 2. Amino acid composition of nile tilapia skin collagen

I, II, dan III sama halnya dengan penelitian Liu et al.(2007) pada ikan lele. Spektrum kolagen yangdihasilkan dapat dilihat pada Gambar 1. Daerah amidaA menunjukkan adanya gugus NH serta menunjukkanadanya ikatan hidrogen. Daerah amida B menunjukkanadanya gugus CH. Daerah amida I menunjukkanadanya gugus C=O yang merupakan struktur

sekunder protein (Muyonga et al., 2004a; Muyonga etal., 2004b). Daerah amida II menunjukkan adanyaikatan NH dan daerah amida III menunjukkan adanyaikatan N-H yang memperlihatkan adanya strukturheliks (Muyonga et al., 2004a; Muyonga et al., 2004b).Berdasarkan hasil tersebut dapat diketahui bahwaspektrum infrared mengidentifikasikan struktur-

Perlakuan Asam Asetat 0,5 M/0.5 M Acetic Acid Treatment

Perlakuan Asam Asetat 1,5 M/1.5 M Acetic Acid Treatment

Asam aspartat/Aspartic acid 1.55 0.77Asam glutamat/Glutamic acid 2.77 1.38Serin/Serine 0.92 0.47Histidin/Histidine 0.24 0.12Glisin/Glycine 5.32 2.66Treonin/Threonine 0.65 0.32Arginin/Arginine 2.46 1.21Alanin/Alanine 2.79 1.37Tirosin/Tyrocine 0.18 0.08Metionin/Methionine 0.40 0.20Valin/Valine 0.60 0.30Fenilalanin/Phenylalanine 0.51 0.27I-leusin/I-leucine 0.42 0.27Leusin/Leucine 1.09 0.76Lisin/Lycine 0.98 0.87

Kandungan/Amount (%w/w) Jenis Asam Amino/Type of Amino Acid

89

Ekstraksi dan Karakterisasi Kolagen Larut Asam dari Kulit Ikan Nila (Oreochromis niloticus) (Nurhayati et al.)

struktur pada protein kolagen. Struktur sekunderkolagen adalah struktur protein tiga dimensi yangmenggambarkan hubungan antar atom yangdipengaruhi ikatan nonkovalen seperti ikatan hidrogen.

Selain gugus fungsi, komposisi asam amino jugamenentukan karakteristik kolagen. Kolagenmerupakan protein fibrin (protein berbentuk serabut)yang tersusun atas beberapa asam amino. Padaumumnya glisin menjadi asam amino penyusunkolagen terbanyak (Hwang et al., 2005;Kittiphattanabawon et al., 2005; dan Muyonga et al.,2004a). Hal ini sesuai dengan hasil penelitian dimanaasam amino glisin mempunyai nilai yang dominan baikpada kolagen dengan perlakuan 0,5 M dan 1,5 M yaituberturut-turut sebesar 5,32 dan 2,66 %w/w dari totalasam amino. Tingginya konsentrasi asam asetat yangdigunakan saat ekstraksi ternyata berpengaruhterhadap proporsi asam amino. Asam amino padakolagen dengan perlakuan asam 1,5 M memilikiproporsi yang lebih rendah dibanding 0,5 M. Hal ituterjadi karena penggunaan asam dengan konsentrasiyang lebih tinggi dapat memicu terjadinya subtitusiion negatif pada garam dengan ion positif pada asamlebih cepat, sehingga dapat memutuskan strukturprotein.

Suhu Denaturasi

Denaturasi adalah hilangnya struktur tersier dansekunder dari protein dengan penerapan beberapatekanan eksternal atau senyawa, seperti asam kuat,basa, pelarut organik (alkohol atau kloroform), danpanas.

Pada Gambar 2 dapat dilihat bahwa viskositasrelatif kolagen terus menurun seiring denganmeningkatnya suhu. Pada perlakuan asam asetat 0,5M, penurunan viskositas relatif paling signifikan terjadiantara suhu 2729oC, sedangkan pada perlakuanasam asetat 1,5 M penurunan suhu yang signifikanterjadi antara suhu 2527oC. Hasil penelitianmenunjukkan bahwa pada kolagen dengan perlakuanasam asetat 0,5 M memiliki suhu denaturasi sebesar28oC, lebih tinggi bila dengan perlakuan asam asetat1,5 M sebesar 26oC. Nilai suhu denaturasi ini lebihrendah bila dibandingkan dengan penelitian Muyongaet al. (2004a) pada kulit ikan nile perch. Tinggirendahnya suhu denaturasi kolagen disebabkan dariperbedaan habitat tempat ikan berasal dan tingginyakandungan asam amino kolagen (Kittiphattanabawonet al., 2005; Noitup & Morrisey, 2005). Berdasarkannilai suhu denaturasi yang diperoleh, pemanfaatankolagen kulit ikan nila sebaiknya lebih diarahkan untuksediaan-sediaan farmasi yang dalam pembuatannyatidak memerlukan suhu tinggi, karena dapatmenyebabkan kolagen kehilangan sifat fisika, kimia,dan fungsionalnya.

Kemampuan Mengembang

Kemampuan mengembang atau swelling adalahsuatu peristiwa mengembangnya suatu bahan.Kemampuan suatu bahan untuk mengembangdipengaruhi oleh sifat hidrofilisitas bahan tersebutyang ditentukan oleh gugus-gugus hidrofil pada rantaipolimernya. Pada swelling test, berat kolagen setelahperendaman dengan buffer fosfat pH 5,8 meningkat

Gambar 2. Suhu denaturasi kolagen pada perlakuan asam asetat. Figure 2. Denaturation temperature of collagen in acetic acid treatment.

Suhu/Temperature (C)

Frak

si V

isko

sita

s/V

isco

sity

Fra

ctio

n

JPB Kelautan dan Perikanan Vol. 8 No. 1 Tahun 2013: 8592

90

dengan bertambahnya waktu (Gambar 3). Kolagendengan 0,5 M asam asetat menghasilkan penyerapanair yang signifikan pada menit ke-15, namunpenyerapan tertinggi terjadi pada menit ke-60. Hal inidisebabkan pada menit ke-15 gugus hidrofil padakolagen menyerap air dalam jumlah yang besar. Padamenit selanjutnya penyerapan air masih tetapberlanjut. Proses tersebut disebabkan kolagen dalamkondisi hampir jenuh sehingga penyerapan air padamenit ke-120 tidak optimal. Lain halnya dengankolagen hasil ekstraksi 1,5 M asam asetat yangmenunjukkan penyerapan air tertinggi pada menit ke-15, dan mengalami penurunan pada menitselanjutnya. Hal ini dikarenakan penyerapan air terjadisecara cepat sehingga cepat pula terjadi kejenuhanpenyerapan. Kemampuan mengembang kolagendisebabkan karena banyaknya komposisi aminoyang bersifat polar dalam kolagen yaitu glisin, serin,treonin, dan tirosin, yang memiliki gugus fungsi polarsehingga dapat membentuk ikatan dengan air(Kittiphattanabawon et al., 2005). Proses swelling jugadapat cepat terjadi karena pengaruh permukaanpartikel kolagen yang tidak rata. Luas permukaan yangtidak rata dan bergelombang dapat memperluaspermukaan kontak dengan air dan memungkinkanterjadinya hidrasi dengan segera. Kolagen denganperlakuan konsentrasi asam 1,5 M memilikipermukaan yang bergelombang sehingga lebih mudahmengembang.

Pengolahan kulit ikan nila menjadi kolagenmerupakan langkah tepat dalam mengatasi lonjakanhasil samping industri pengolahan perikanan sehinggadapat meningkatkan nilai tambah kulit ikan. Kolagenkulit ikan diharapkan dapat mensubstitusi kolagen

Waktu (menit)/Time (minute)

Inde

ks P

enge

mba

ngan

/Sw

ellin

g In

dex

Gambar 3. Kemampuan pengembangan kolagen.Figure 3. The swelling of collagen.

sapi dan babi yang banyak digunakan dalam industrimakanan, kosmetik, biomedis dan farmasi. Ekstraksikolagen merupakan tahapan penting dalammemperoleh kolagen dengan karakteristik yang sesuaidengan spesifikasi industri. Tinggi rendahnyakonsentrasi asam asetat tidak mempengaruhi gugusfungsi dan jenis asam amino kolagen, namunberpengaruh terhadap proporsi jenis asam amino.Kolagen dengan perlakuan asam 0,5 M memilikiproporsi asam amino yang lebih tinggi dibandingperlakuan 1,5 M. Penggunaan konsentrasi asam yanglebih tinggi ternyata menghasilkan kolagen dengansuhu denaturasi yang lebih rendah, namun mempunyaikemampuan mengembang yang lebih cepat.

KESIMPULAN

Pada perlakuan asam asetat 0,5 M, kolagenmemiliki proporsi asam amino dan suhu denaturasiyang lebih tinggi dibandingkan perlakuan asam asetat1,5 M, meskipun kemampuan mengembangnyamembutuhkan waktu yang lebih lama. Berdasarkankarakteristik kolagen dapat disimpulkan bahwapenggunaan 0,5 M asam asetat pada ekstraksikolagen memberikan hasil yang lebih baikdibandingkan 1,5 M asam asetat.

DAFTAR PUSTAKA

Ali, M., Noor, N.M., dan Leksono, Y.S. 2010. Ekstraksikolagen dari sisik ikan kakap merah (Lutjanus sp.).Prosiding Seminar Balai Besar Penelitian danPengembangan Pengolahan Produk danBioteknologi Kelautan dan Perikanan.

British Standard 757. 1975. Sampling and Test of Gelatin

91

Ekstraksi dan Karakterisasi Kolagen Larut Asam dari Kulit Ikan Nila (Oreochromis niloticus) (Nurhayati et al.)

Dunn, B. 2006. Quantitative amino acid analysis. In:Colligan, J.E. et al. (eds.). Current Protocols inProtein. John Wiley and Sons, New York.

Hwang, J.H., Mizuta, S., Yokoyama, Y., and Yoshinaka, R.2005. Purification of molecular species of collagenin the skin of skate (Raja kenojei). Food Chem. 100:921925

Jongjareonrak, A., Benjakul, S., Visessanguan, W., Nagai,T., and Tanaka, M. 2005. Isolation and characterizationof acid and pepsin-solubilised collagens from theskin of Brownstripe red snapper (Lutjanus vitta). FoodChemistry. (93): 475484.

Kasankala, L.M., Xue, Y., Weilong, Y., Hong, S.D., and He,Q. 2007. Optimization of gelatine extraction from grasscarp (Catenopharyngodon idella) fish skin byresponse surface methodology. BioresourceTechnology. 98(17): 33383343.

Kementerian Kelautan dan Perikanan (KKP). 2011.Kelautan dan Perikanan dalam Angka 2011. Pusatdata statistik dan informasi Sekretariat JenderalKementerian Kelautan dan Perikanan, Jakarta.

Kittiphattanabawon, P., Benjakul, S., Visessaguan, W.,Nagai, T., and Tanaka, M. 2005. Characterization ofacid-soluble collagen from skin and bone of bigeyesnapper (Priacanthus tayenus). Food Chemistry.(221): 363372.

Lee, C.H., Singla, A., and Lee, Y. 2001. Review: BiomedicalApplication of Collagen. International Journal ofPharmacy. (221): 122

Liu, H.Y., Li, D., and Guo, S.H. 2007. Studies on collagenfrom the skin of channel catfish (Ictaurus punctatus).Food Chemistry. (101): 621625

Murniyati, Peranginangin, R., Tazwir, Hak, N., Nurhayati,dan Dewi, F.R. 2012. Penelitian pemanfaatan limbahhasil perikanan pada Produk Pangan dan NonPangan. Laporan Teknis Penelitian pengolahanProduk. Balai Besar Penelitian dan PengembanganPengolahan Produk dan Bioteknologi Kelautan danPerikanan.

Muyonga, J.H., Cole, C.G.B., and Duodu, K.G. 2004a.Characterisation of acid soluble collagen from skinsof young and adult nile perch (Lates niloticus). FoodChemistry. (85): 8189.

Muyonga, J.H., Cole, C.G.B., and Duodu, K.G. 2004b.Fourier Transform infrared (FTIR) spectroscopic studyof acid soluble collagen and gelatin from skins andbones of young and adult nile perch (Lates niloticus).Food Chemistry. (86): 325332.

Nagai, T. and Suzuki, N. 2000. Isolation of collagen fromfish waste material-skin, bone, and fins. FoodChemistry. (68): 277281.

Noitup, P., Garnjanagoonchorn, W., and Morrisey, M.T.2005. Fish skin type I collagen: characteristiccomparison of albacore tuna (Thunnus alalunga) andsilver-line grunt (Pomadasys kaakan). Journal ofAquatic Food Product Technology. (14): 1727.

Olsen, D., Yang, C., Bodo, M., Chang, R., Leigh, S., andBaez, J. 2003. Recombinant collagen and gelatin fordrug delivery. Advanced Drug Delivery Reviews. (55):15471567.

Peranginangin R., Tazwir, Hak, N., Suryanti, Ayudiarti, D.L.,dan Haryanto. 2006. Riset optimasi pemanfaatanlimbah perikanan tulang dan kulit ikan. LaporanTeknis Penelitian pengolahan Produk. Balai BesarRiset Pengolahan Produk dan Bioteknologi Kelautandan Perikanan.

Peranginangin, R. 2007. Teknologi ekstraksi gelatinsecara asam dari kulit ikan sebagai bahan pangandan farmasi. Prosiding Simposium Nasional HasilRiset Kelautan dan Perikanan. p. 377392.

Peranginangin, R., Kusumawati, R., dan Apriantoro, E.W.2008. Isolasi dan Karakterisasi Kolagen yangDiekstraksi dari Kulit Ikan Kerapu (EpinephelusTauvina). Prosiding Seminar Nasional Tahunan VHasil Penelitian Perikanan dan Kelautan JurusanPerikanan Fakultas Pertanian Universitas GadjahMada.

Santos, M.H., Silva, R.M., Dumont, V.C., Neves, J.S.,Mansur, H.S., and Heneine, L.G.D. 2013. Extractionand characterization of highly purified collagen frombovine pericardium for potential bioengineeringapplications. Materials Science and Enginering C.33: 790800.

Sato, K., Yoshinaka, V., Itoh, Y., and Sato, M. 1989.Molecular species of collagen in the intramuscularconnective tissue of fish. Food Chemistry. (92): 8791.