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4 U M N O ALONSO ACUNA INOCENCIA 91333709 ’.,
TELEFONO 69 10294
. . . 4 i C E N C i A T U R A INGENIERIA BIOQUIMICA INDUSTRIAL
UNIDAD IZTAPALAPA
4 I vis I ON CIENCIAS BIOLOGICAS Y D E LA SALUD
T R I M E S T R E 97-P
HORAS A LA SEMANA 25 HORAS
E F E C T O D E LA SUPLEMENTACION CON Atrk lcx canesccns S O B R E LA CINETICA DE SOLIDOS EN E L RUMEN D E B O R R E G O S
DR. SERGIO HUERTA OCHOA P R O F E S O R E INVESTIGADOR TITULAR B
M.V.Z. LEONOR SANCINES GARCIA CED. PROF. No. 69581 1
_, 4 T U L O
A S E S O R INTERNO
ASESOR E X T E R N O
LUGAR DEPARTAMENTO DE NUTRICION ANIMAL INSTITUTO NACIONAL D E L A NUTIIICION
“SALVADOR ZUBIRAN”
INICIO 16 D E DICIEMBHE D E 1996
16 D E JUNIO D E 1 5 ~ - E R M I N A C ~ O N
CLAVE: 1131-007
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EFECTO DE LA SUPLEMENTACION CON
Atriplex canescens
SOBRE LA CINETICA DE SOLIDOS EN EL
RUMEN DEBORREGOS
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I N D I C E
I.- INTRODUCCION Digestibilidad
Digestibilidad in vitu Digestibilidad in uitm D'iestibiiidad in sitit
Factores que afectan la digestibilidad Marcadores
IJtiliracion de marcadores en la alirneriracii>n aninial Mariiidores infernos
Marcadores externe Oxido de cromo Parariietros de culrivo conrinuo Flujo de la digesta Deiiiiiciones Ciri;tica de oxido de cromo
11.- JUSTIFICACION
111.- OB]JZWOS General Especificof.
IV.- MATERIALES Y METODOLOGIA Material biokgico Material y equipo Metodologia Preparación de la solución digestora Preparaci6n de la c u m patrón Análisis de varianza
V.- RESULTADOS Y DISCUSIONES Digescihilidad de A canwen3 Analisis estadistico del porcentaje de digestihilidnd Cinéticas d~ óxido de cromo
Análisis estadkticos de Iw criterios cincticw
VI.- CONCIAJUSIONES
VIL RECOhlENDACIONES
4 5 5 6 7 7 0 0 9 IO 11 12 I ?
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\m.- AGRADECIMIENTOS
E.- BIBLIOGRARA
x.- ANEXOS Anexo 1
Anexo z Porcenrajes de digesribilidades de A canescm
Cinericas de l a concentraciiin de marcador
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L, ...
1.- INTRODUCCION
Los animales herhivoros, son incapaces de generar enrimas que puedan degradar la fibra. pero pueden hacer uso de varios tipos de microorganisnios, incluyendo bacterias y hongos anaerohios para este prophito. La estrategia utilizada por los rumiantes involucra el desarrollo de un conipuesto estomacal en el cual el alimento consumido puede ser fermentado por los microbios antes de estar sujetos a un ataque por las enrimas propias del aninial y. finalmente, hacia una segunda fernientacion en el intestino antes los residuos sin digerir son expul.dos en las heces. h a estrategia conlleva a que en los runiiantes domisticm se aplicaran dietas con un contenido moderado de fibra.
El analisis quimico proximal n w conduce al conwiiniento inicial de la roniposicibn quiniica de u n aliiiiento, a traves de los principios iiiitirdiatm, los cuales son Its pririieros en identiiicarss en los procesos de desintegracibn analitica en el laboratorio. y estos son :
Contenido de humedad Materia seca ( MS ) l.-Porción incombustible ( c e n i m ) 2.-Porción combustible ( proteina cruda. extracto etireo y fibra cruda) 3.-Hidratos de carbono ( extracto lihre de nitrógeno)
El analisis de la digestihilidad de un aliniento es muy importante ya que este es el que va a marcar la diferencia entre la alimentacibn cuantitativa de la cualitativa En las pruebas de digestihilidad o de balance, se cuantifican los nutrinientos que se ingieren y se absorben en el tubo digestivo y las cantidades que se eliminan en la heces. Para esto es necesario tanto conwer la cantidad de alimento ingerido conlo excretado, siendo la diferencia entre ambas cantidades la parte que se asume fue digerida y absorbida por el aniiiial, que al ser expresada corno porcentaje resulta ser el cwíiciente de digestibilidad aparente de la niateria seca o de cada u n o de Ins coniponentes de los alinieiitos.
En general. los valores de la digestibilidad obtenidos son aparentes, ya que noriiialinente no se hacen ni mediciones ni correcciones de Iw aportes riietablicos y endógenns (de origen corporal). tales coiiio enzinias, hormonas. riietabolittx y otras celulas , que se producen como consecuencia del proceso digestivo y que aparecen en las heces sin ser ui i residuo al iuppirio. Cuando diclios valores son corregidos se ohtieiie la digestihili<iad verdadera, que en forma i i i i s precisa refleja la ahsorci6n de los iiutriiiientos aportados por el aiiiiieiito.
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La forma de calcular la digestibilidad aparente de la materia seca (DMS) se hace de acuerdo con la siguiente ecuacion (Church, 1987 i Mapard, 1986 ; Shirnada. 1983).
C - E
C % OMS - x 100
C - consumo de rnateriaseca E - heces en hace seca
DIGESTIBILIDAD - Existen diferentes mitodos para determinar la digestibilidad de u n forraje o racibn, cntre ello: - se encuentran :
Digestibilidad in s i t a
Digestibilidad in S ~ N
digestibilidad in vitro
Digestibiiidad in vivo
Los nietodos para la medicion de la digestibilidad que implican el empleo de animales vivos ( in vivo ), resultan costaso en cuanto al tiempo, la rnano de obra calificada, las cantidades de aliniento y al numero de análisis quiniicm que se refiere, pero posee menos posibilidades de error.
AI aninial se le suministra la dieta a prohaae en las niknias cantidades diarias durante u n periodo preliniiiiar para que se liiiipie o evacue el tuho digestivo de cualquier material no digerible existente en el nikmo y que provenga del alimento consumido antes de iniciar la ingestidn constante del alimento en estudio y pan permitir que el aninial se adapte a la dieta de prueba, en aniniales rnonogistriios el periodo es de 1 a 3 dias. Despub de este periodo se inicia la recolección de heces ( las lieces deherin estar libres de containinacion urinaria ), posteriormente .se. hare u n anilisir <le esta*, ya que I<s cotiiponentes que se pierden r n lw nii.mias corresponden a la niayor pirdida individual de Iw nutrinientos ingeridos. en virtud (Ir que una w z que u n aliinrnto sufre lm procesos (le degradari«n gasrointestinal se expulsa el retiianente cn I= niistiiw.
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Para este tipo de estudio se recomienda utilizar jaulas medicas, en donde el a n i n d debe tener movimiento en particular para recostame O Ie%antarse ; el piso es una malla tambien de metal a través del cual pasan las heces y la orina, pero las heces san recolectadas en o m malla que se encuentra debajo. El comedero se encuentra al frente, construido y colocado de tal mcdo que mita derramar el aliniento ( Maynard, 1986).
Tasa de digestión
Las tasas de digestion pueden ser cuantificadas por cinetics de primer orden donde la digestihilidad es proporcional a la concentracion de sustrato (iterrenc, 1977; iterteniy ~ b , 198:).
dddt- .KSS
donde:
ds/clt - velocidad a la que disniinuye la c.onccntracibn de sustrato s . - KI - constante de velocidad de la desaparicion de sustrato
Las tasa de digestion han sido dlicutids en t e r m i n a de tiempo "lap" (DUN, 1979). La fax "lag" de digestion es definida conwe1 periodo de ferinentacion inicial, cuando la digestion es constante o se presentan tasas niuy reducida. El efecto "lag" es mostrado coni0 una caracteristica no lineal. Esta f s e es debida a la adherencia o asociacion de las microorganismas con el sustrato antes de la digestion enzimática (~cnenr-. 1977; uAertchry ~ b , 1982).
Digestibiiidad in vitro
Los estudios in vino o en runien artificial se-han desarrollado en hasp a que las tknicas in
vivo requieren de bastante tiempo y son muy castasas ademis de utilizar grandes cantidade de alimento. En las condiciones de lahoratorio, se intenta simular los procesos digestivos en el runien. donde se lleva acabo una fermentación anaerobia, utiliAndase un sustrato en una solucibn ainortiguadora similar a la conipwici6n de la salha y en el liquido mriiinal filtrado, siendo todo el medio saturado de COL ya que 1- microorganisma ruminales requieren de condiciones anaerbhicas. Los productos finales de la fermentación son principaltnente Cot, CHI , AGV's y niasa niicrohiana ; la producción de gam o de AGV's pucden inhihir el proceso de íernientacion, por lo tanto dek mantenerse una rernperatura cowtante (39-40 "C) y aeitaci¿)n de tiv tuucstras de vez en cuando. El rli+twio mj,: usado es el desarrollado pur Tilley y Terry, cl cual involucra 48 Iiorac de ferinentacii>n con fluido ruiiiinal seguido de una dige~tión pCptica p o r 48 how í l ~ i l l cy , 1061) ,
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Digestibilidad in situ
La tknica de la bolsa de fibra artificial, ha sido utilizada durante varios años para proporcionar valores estimados de la tasa de desaparicion de las constituyentes alimenticias en el rumen (orrbv. 1980). Esta tknica tiene la ventaja de dar una estiniacion dpida de la tasa y el grado de degradaci6n de los alinientos en el rumen, sin necesidad de otro procediniiento complicado nias que simplemente pesar. Otra ventaja consiste en que el material alinienticio se encuentra suspendido en el rumen, estando este en intinio contacto con el ambiente ruminal ( temperatura, pH, buffer, enzinias. etc. ) .
Desventajas de esta técnica
a) AI ser la muestra confinada dentro de la bolsa, no esta expuesta a ninguna niasticacion
b) El alimento normalmente podria salir del rumen, una vez q u e tuviera el tamaño adecuado.
c) Los resultados dehen ser tratados con el debido cuidado y. en general ser utilizadas como indicadores cualitativos de las principio generales.
Ai inknio en la digestihilidad in situ hay que considerar la porosidad de las bolsas. el tamaño de las partículas, la cantidad de muestra, la dieta del animal, el tiempo de incubación y el numero de bolsas incubadas.
Factores que Afectan la Digestibilidad
Entre las factores que pueden afectar la digestibilidad de algunos forrajes o raciones en rumiantes destacan (Shiniada, 1983):
1. La cantidad de alimento consumido : ya que al aumentar , se reduce la digestibilidad en virtud de que el pasaje de la digesta se incrementa.
7. Cantidad de fibra y/o lignina en el alimento. Como regla general, la digestibilidad de los forrajes disminuye conloriiie el porcentaje de fihra aumenta.
3. Diferencia entre las especies : Los bovinos digieren los forrajes mejor que los ovinas, que a su vez digieren mejor los roncentrados que los primeros ; inclusive entre anitiialw de la ~ i ~ i s i i i a especie existen diferencia.
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Deficiencias nutricionales : Numerosos experimentoc; indican que la relatka o absoluta deficiencia de proteina resulta en una reducción de la energia digerible, tambibn e notorio que la deficiencia de algunos micro y macro nutrientes ( Mg, P, Fe, Co, Mn, Zn ) disminuyen la digestión ruminal.
4. Factores que afectan el apetito : Cualquier factor que afecte el apetito tiene efecto en la digestihilidad. estos incluyen tanto la naturaleza fsica de la ración como la ausencia o presencia de algirn nutrimento o factor que influya el apetito.
5. Frecuencia en la alimentación ya que al aumentarse esta, se tiende a incrementar la d igest ibil id ad.
6. Preparación del alimento : AI rolar u hojuelear lm granos. se aumenta la digestihilidad ; en este ruhro caben los trataiiiientuc que recitien lo.. esquiliiiw y pajas ( íisicm, quiniicos o hiol0gicm) -
7. Efecto asociativo del alimento : Se ha observado que una ronibinación de "pellet' de alfalfa y ensilado de niaiz tiene mayor digestihilidad que estando separados.
8. Adaptación a cambios de ración : Los niicroorganisnim ruininales requieren como iiiininio 10 dias de adaptación, de no ser as¡ la digestihilidad dki i i inuir i
MARCADORES
8 Utilización de Marcadores en la alimentación animal.
Un rnarcador es u n conipuesto de referencia usado para deterniinacionrs quiiiiicas (Iiidrólkis y sintesis) y aspectos fiiros de digestión (flujos). Lac inarcadores son usados frecuentemente para estiiiiar el flujo de la digesta y la salida de heces fecales de los ruiiiiantes, cuando se recuperan las Iieces el marcador es conocido, el consunio de aliciiento total puede ser calculado de lar Iieces totales colectadas. El flujo de la digesta puede medirse ron niarcadores externos adaptando al tract0 digestivo con chulas reentrantes (~ciiado. 191)1).
Auiiaclo a lo aiircrior. los inarcadores se Iian utilizado en diferentes estudi<x; nutririoiiales. roiiio cantidnd <IC aiiiiiciito o nutriiiiento especifico r0&iiii<io; gra<Io cie pwajr ; la tasa (ir ynsajc de In iiiSc2;tn a traves de tmto o una parte del tracto tligrstivo ; la digestiliiliJad de tcxio <i u i i n paric <lei : i i i i i w i i t o y cii la utiliznci<>ii de aliiiirnto en estudio de halanre iiictahóiico.
8
En cuanto a la forma tisica del marcador. los fluidos pasan a travQ del rumen más &pido que las particulas pequeñas, y estas son mts rápidas que las particulas grandes ; sin embargo. todas las velocidades de pasaje se modifican de acuerdo al incremento en el consumo del alimento ( especialniente forraje ), increnirntando protrina dietaria, y tanihikn a las etapas de gestac ion. Tanihien los marcadores han sido definidos como sustancias inertes, sin efectm toxica que no dehen absorberse ni metabolizarse. tienen que ser ingeridos y excretadm en su totalidad. si como niexlarse intiniamente con el alimento. Por otra parte al ser utilizados no debe ser afectado, n i afectarse el tract0 digestivo, y por ultimo que sean medibles cuantirarhaniente y de facil deterniinación en el lahoratorio. Sin rmhargo es mrnester mencionar que hasta la fecha nin@n iiiarcador dkponihle satisfaces todos estos requisitos.
Los tipos de niarcadores que han sido utilizados en rstudios nutricicinales se incluycn IM marcadores internos, los cuales son ni;rteriales indigerihles y son consuriiidm en forma natural y marcadores extrrnac, los cuales son sustanciw que son adGionadas o adniinistradas rn la dista en lornia oral o intrarruiiiinal.
Marcadores Internos
Se consideran niarcadore internos (tabla 1) aquellos que forman parte natural dr la dieta como por ejeiiiplo la lignina que es considerada como una sustancia indigestible y ha sido usada muy extensainente como u n marcador en estudios de digestidn ; sin eiiibargo la literatura indica que hay problemas significative con este marcador porque hay una recupencibn incompleta en las heces fecales y esto ocasiona una estiniacicin nienor de la digestihilidad. por lo que su uso puede ser limitado (Church, 1988).
TABLA 1. Marcadores internos que w n consumidos en la dieta natural y aigtmas de sus características.
CW - pared celular ; G - gaiinietria ; US - Espurroforomerria de niasas ; i (MMcllado.1991)
detergente
ninguna ninguna
no no I I I
. - croniarqrafia de gazes
Marcadores Externos
Un iiiarcador externo (Tabla 2) es aquel q u e se adiciona a la raciOn y se consuiiie por via oral. Estos marcadores son de gran utilidad para la identilicaci6n de particulas especificas durante el pasaje del fracto intestinal y adenik puede ser usado coino niarrador indeleble en diferentes forrajes en una dieta iiiezclada. Ejemplo son el Oxido de croino, el uso de cromo inordantado. coiiipurstos quelatados, entre otros (Church. 1988).
TABLA 2. Ejemplos de marcadores externos qne han sido utilizados en la aiimentación animal como una herramienta para la evaluación de la digestibiüdad.
Concepto Osidos de Policrilenglicoi Esferas de Compuestos Fibras Compuestos
ninguna conipleja compleja Preparación simple ninguna simple
flujodigesm si si si s i si si
mctaks plástico Quelatados mordrntados
-
.AT = .Abworción aroniica ; N.A - .Anal¡+ dr artivaiión de netiftoner. (Mellado.lW91)
Oxido de Cromo
Este marcador es un polvo verde y prácticainente insoluble en agua, alcohol o acetona pero ligeramente soluhle en $cidos y alcalis de un peso niolrcular de 151.99 (Merck,1968), cabe mencionar que este es uno de la iiiis utilizados coiiio iiiarcador externo en la. pruebas de digestibilidad.
Ewe marcador puede adininktnrse coiitinuainente a una tasa constante, o hirn en una sola dosis. ya sea por inedio del aliinento o por infusi6n ruininal. En el muestre0 se deben toiiiar pequeñas iiiumtw de la digesta en tieinpos sucesivos.
El eiiipleo de 6xido de cromo iinprrgnado en papel y suiiiinistndo dw veces al dia. al inuestrrar peridicaiiiente se obtuvieron recupcracionn del 98 . 99.3 'XI LAxuilera. 1988). En el estudio realizado W'ilkinwn, 1970) PC citaii reciiperncioncs (!e 6xiclo dc rrot1w en Iicies tiel .i;,, 85 al 91 96 . Por otro lado, ( i i twzm. 1966 1 niencionn haber obtenido Iinsra un 8: O/u de recuperacibn. Lm bajos porcentajes pueden estar awcintlos ron el iiit't<xto <le suininistro tlrl iiiarcador y del itiuestreo. Sin ciiilinrcc>. .se i i n d w n - n i i ~ i iinn vnriaciim d i u r i i n e11 In rxcrecii>n
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de 6xido de cronio, tenihdase una concentraci6n mis baja durante la noche, lo cual altera los resultados de recuperacion (Ellis. 1979).
Ademis el 6xido de cromo puede suniinktrarse con otras vehiculas conlo son la pulpa de papel, aliniento peletirado, chpsulas de gelatina y el alimento mordantado.
Otra forma de clasificarlas es coni0 iiiarcadores ahsorhihles y no ahsorhihles o niarcadores fecales. Las primeras son aquellas que se absorben junto con el alimento y son recuperadas en la orina, mientras que en las no ahsorhihles son sustancias que no se absorben en el tract0 digestivo y se recuperan en las heces.
Parámetros del Cultivo Continuo
Grar is al uso de iiiarcadores. se p u d e calcular una serir de pathirtrm d e sunia iiiiportancia en el skteina de cultivo continuo, conio :
1)Volumen ruminal
- V @) - g de ninrrador infur-ioiiadw
antilogaririiio natural h
?)Tiempo medio ti/: (h) - !EL k
3)Flujo ruminal F @/ Ii ) - U u n i e n ruiiiiiial g
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D ( h-' 6 'K> 11'' ) - Fluio ruminal í eL / h) 4) Tasa de dilución
( Maynard. 1986; Menens. 1977 y Wilkinan, 1970) Voluiiien runiinal ( /Ii)
5 )Tiempo de retención Tr ( h ) - Volunien ruminal en g (Diill. l Y 7 Y ) Consunio de aliiiieiito
Flujo de la Digesta
A travks del uso de iiiarcadorw indinerihles coino las niencio~iadw anterioriiiente, la velocidad a In cual el inaterial si)lido aln i idot ia el rumen puede ser ruantificacto , se ha iiii*;trad« que la veloci<lníl de rerainhio sblido del riinirn puede usar.sr para rstiiiiar l a rantidad de proteiiia iiiicrohiana que tia sido sintctizxla. x i conio taiiihicii para wtiiilar ia
cantidad de protrina y carh«lii(lratos $in t l r y r a h r .
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En relaci6n a los rumiantes se puede decir que la eficiencia del crecimiento bacteriano esta directamente relacionado con la tasa de diluci6n de las bacterias y/o del contenido ruminal, pero las bacterias en el rumen estan parcialiiiente asociadas con lac solidos y con la pared ruminal LwiIcra. 1988). lo cual se explica porque solamente en cultivac continuos de estado estable, la tasa de creciniienro especifico ( 11 ) de los niicroorgankmos es igual a la tasa de dilucion (D) de cultivo (krgen, 1979).
Fermentación Ruminal como Cultivo Continuo
El sktenia de cultivo continuo referido 'quiiiiiartato". ha sido enipleado por los nutriólcgac para hi esrudio de los aspectos 1vkIcw de la fernienraci6n ruiiiinal. Este sictenia de cultivo controla el creciiniento celular por inedio de la tasa de adicion de sustrato y de la tasa de dilucion en un volunien fijo.
Obviaiiirnre, el runien no es una replica exacta de este nidelo , sin embargo. su siiiiilitud en algunm puntos es suíicieiite para aplicar la teoria de alinientaci6n coiitinua. puis aiiibos siguen cinctiras de priiiier orden (Bergen, 1979).
Un sktema de fernientacibn continuo esta descrito por la tasa de dilucioii o d e recaiiihio (D), el volunien (V), la tasa de flujo (F) y el tiempo de rerencih (Tr)
&
Definiciones
Desde el punto de vista nutricional el tiempo de tcinsito es u n factor iiiiponanre que determina la eficiencia de utilizaci¿m de una cantidad dada de aliniento. Hay diferentes thti inos que se utilizan para describir el paso de niaterial ingerido a rravis del tract0 digestivo, como son:
I ) TASA DE DlLUCiON : E< la cantidad de digesta (coiiio peso o proporciOii del voluinen ruminal) que sale del runien en un tienipo dado, In cual se expresa en li' en otras palabras la tasa de dilución representa la tasa d e ilujo (F) por unidad de volunien (V)
7 ) TiEMPO MEDIO DE RETENCION: EI el tieiiipo en que se retiene la iiiitad de la digesta en la primera porcidn del fracto gastrointestinal, o bien el tieiiipo que tarda en salir el 50% del iiiarcador í Vaii Soc.ir, 1983 1.
3 ) TIEMPO DE RETENCION: Tieiiipo rlrlurrido para cniiihiar una rantidad (V) de digesta ¡,qual a la presentada en el ruiiieii o hieii es el tictiipo proiiicdio que pcriiiaiiecen las panidas en el ruiiien (i.iiinyiirt.. 1966).
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través del fracto digestivo o por ai& scgniento d t éste. La forma de calcular el tiempo de tdnsito es comiderando la primera aparición del marcador en las heces (Kotb, 1972).
5) TIEMPO PROMEDIO DE RETENCION: Tiempo que toma para pasar todo el marcador a travh del tracto gastrointestinal (Van h s t , 1983 1.
6) TASA DE DIGESTION: Sc refiere a la cantidad de alimento que se puede digerir por unidad de tiempo y es esencialmente una función de la dieta.
7) DIGESTA : Aiimento ingerido sujeto a digestion dentro del tracto digestivo. ticnicaniente tarirbih incluye secreciones y excreciones de ICM órganos digestivos (&:orb, 1972).
Cinética del Oxido de Cromo
Para determinar el volumen, se asunit que las condiciones de voluiiizn de agua iñ el rumen permanecen constantes durante el experiiiiento, y la tasa de ílujo de agua dentro y iuera del rumen es continua y pernianece constante en el experiiiiento. En esta ticnica una cantidad conocida de niarcador se administra directamente dentro del ruinen y se tornan niuestras del contenido ruiiiinal a dilerentes intervalos de tienipo. Asumiendo una condicioii de equilibrio y una rápida Iiomogeneización del niarcador con el alimento. o b t e n i d o s e una relación exponencial (~ihcwis. 1979 y Van %a. 1903) entre In concentracibn del marcador y el tiempo, que puede expresarse en la e x a h de logaritnio natural y graficarse coino una linea recta (Kotb. 1972 y Van Soen. 1983). Cuando esta linea se extrapola con el tiempo cero, se puede estimar la concentración del iiiarcador a l tiempo de la dwiíicacion (Kotb, 1973).
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11.- JUSTIFICACION
Las zonas áridas y semiarid= representan en Mexico areas con diversas recursas naturales. las cuales han sido utilizadas fundamentalmente para el desarrollo de una agricultura de riego de corte moderno ahi donde lm condiciones topográficas e hidrolbcas lo permiten; para una agricultura de temporal de mucho riesgo dada la incertidumbre climatica que prnalecen en estas zonas; para el aprovechamiento de especies vegetales, foretales, industriales , medicinales. y sobre todo para la ganaderia extensiva, la cual representa la forma predominante de production de alimentos en tales áreas (Toledo, 1985).
Las Iial6fitas son plantas nativas de cc*t;u, estuarios. pantanos y desiertos. son tolerantes a diferentes rangos de teiiiperatura (Hod:iri. 1980). Sus mecankmos fuiol6gicos les permite aliiiacenar o excretar las sales y sobrevivir a salinidndes mayores a las del mar de 30 a 40,000 ppni y varian desde pequenos pastos hasta grandes irboles (Goodin, 1979).
Se ha investigado sobre Iial6fitas de la fniiiilia Qwnopalinseri.r, y plantas del ginero AtripGx Iian sido estudiadas con el objeto de establecerlas como especies forrajeras rrsisentcs a las sequiw en zonas iridas (Forti. 1971; Forti y [.e\-¡, 1977; Glcnn, 1982 y N.a, 1975), estos arhustw del ginero Anipkx son costrwas y con veilwidad blanquecina ; hojas alternadas y opuestas. coiiiplrtas o quebradas ; sus llores son unkrxuales v sus írutos encerrados por bricteas. Plantas representati\% de este genero son encontradas en Mtxico. como por ejemplo Atriplrx canexens.
-
En la Republica Mexicana el estudiar estas plantas tiene un inter& especial ya que mis del 40% del territorio nacional presenta caracteristicas áridas y seniiárids (kídidonado, 1976). Se tia reportado que AtripGI cunrszew. tariihic'n conocida como costilla de vaca, rubre cerca de 15 millones de hectáreas en el pais (Gutiirrcz , 1982). con u n rendimiento de 6.2 toneladas de forraje disponible por hectareas en base seca (Maldonado y kguirrc, 1979).
Por otra parte evaluaciones de campo Iieclias en Mexico, han corroborado que durante la tpoca de seca dicha especie llega ha constituir hasta el 84% de la dieta de hovinos en pastoreo. Atripla canawns es una planta inuy apreciada por los ganaderos debido a que pernianece verde durante el invierno a d c i n ~ de periodos criticas de sequia cuando otra tipos forrajes escasean (Giitii.rrer, 1982).
Sin embargo, algunos autores Iian cuestionaclo que este íornje sea consumido de loriiin silvestre debido a los altos niveles de sal presentes en las Iiojz, sobre todo cuando la planta rrctr en suelo.. salinos íGoh1, 19E. Coodin, 1979; 14ai:c5,i980 y N . G , 1975)
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111.- OBJETIVOS
General
Evaluar la cinitica de solidas en rumen de ovinos alimentados con dietas que contengan diferentes niveles de hojas de Ampla rnnwms , al inicio de la floraciSn y adenib deterniinar la digestihilidad de materia seca
Específicos
Determinar el porcentaje de digatihilidad de Inateria seca i n vk~o
Deterniinar la cantidad de oxido de cromo (niarcador) en las heces fecales de horregas a las O . 3, 6, 9.1 2. 24, 36 y 48 hrs para obtener la cinitica de sblidw.
Con estas cineticas de sólidas determinar lw parimerras de sistema de cultivo continuo.
Con la ayuda de la cinitica de liquidas , drterniinar el nivel Sptiiiio de inclusion de A. canCÍtrw en la dieta para borrega.
IV.- MATERIALES Y METODOLOGÍA
Material Biológico
El material vegetativo se colecto en {orina nianual de un rnatorrai natural del Municipio de Concepción del Oro Zacatecas y fue secado a temperatura anihiente.
Se elaboró una dieta testigo con heno de avena y alfalfa y tres experinientales en la que se incluyci 10, 20, y 30 % de hojas isocalbricas e isoproteicas de A r'anaens .
Se eiiipiearon 4 borregm I'istulados ruininalniente y desparasitados tanto interna coino externaniente. La distribución de lai diem a los animales se aplico al azar si,guiendo un diseno seudoaleatorio ron estructura de cuadrado latino 4 X 4.
o Material y Equipo
hpectrofotóiiietro Cent ri fuga Digestor de Micro Kjelali l Matraces volunietricos de 100 iiiL
Matraz Erleniiieyer de 125 iiiL
Pipetas de 5 iiiL
Reactivos
Acido sullurico concentrado Acido perclorico al 6@ 06 Molibdato s&iico Oxido croiiiico
Metodología
A las iiiuestms de conteniclo ruininal se les deterinin6 el pH al nioniento de ser colectadas ( Bateinan. 1970 ) y se les centri¡ug¿) a 3ooO rpiii dunnte 15 iiiin para separar la fase s¿)lida de la liquida. La fase sdicla la iiiettdologia (Figura 1) dg Cxrniwki ( 1965 ).
El inarcador se adiiiinisrr¿) cn toiiiaroii prqiizñas iiiuestra.< (le In diqe.qta <:ii tiriiipw sucesivo<.
se utilizci para la detrriiiinacióii de oxido de croino s&n
., '1'
una sola dosis, por infusiim ruiiiinal. En el iiiuestreo se
17
Sc deterniino la cinetica ruminal de sdidas nieddiante el marcador oxido de cromo y se tomaron niuestm a las 0, 3,6,9, 17, 74, 36, y 48 hn.
Preparación de la solución digestora
Disolver 70 g de niolihdato sidico en 300 niL de H:0 destilada. Afiadir lentamente y con mucho cuidado 3 0 mL de H: SO, concentndo. Enfriar la niezcla y agregar 400 niL de HCIO, al 60%.
Preparación de la curva patrón
- Dado que el H:SO+ dkiuinuye la densidad 6ptica de la% extractos de Cr:0, es necesario la elahorac¡<jn de una ruma estandar pan tener un patron de referencia y poder determinar la cantidad de ¿)xido de cromo presente en la; niuestr;LI.
Prepancion : Se pesa 0.1 g (le Cr:O> y digerir. Dejar enfriar y posterioriiirnte aforar en un matraz volunit'trico de ioC, niL con agua dcionizada. Hacer mrim dilucionm a 1 / 1 0 , 7 / 1 0 , 3/iclo. 4/1ocI, 5/1M, 6/100. 7 / 1 0 y leer en el espectrolotoriietro a 350 nni.
Digestibilidad
Se detemino la Iiuiiiedad de las Iieces fecales y con ello se conocio el porcentaje de niateria seca y Iiacieiido uso del consutiio se logro conocer el porcentaje de digestibilidnd aparente in two de la materia sera de cada hrrego, de cada dieta.
Análisis de Varianza
En este estudio lw resultados se analizaron mediante el paquete rstadistico S.A.S. , para un niidkiz: de varianza con un tiisciio seudoalratorio con estrurtun de cuadrado latino 4 X 4 ( t i i l l , 1978; S r d & Timic. 1080). La difrr&ia entre niedim se analizi) empleando la prueba de Tukey coli u n nivel de sigiiilicancia de 0.05.
1.
c: r - L .I
r- II
c
El modelo para el diserio referido es:
Y,, - P + &+ P, + 6,
Donde: Y,, - Son las diferentes variables de respuesta como:
Tasa de dilución. Volumen, Flujo, Tr. y Tiempo de recambio p - Efecto de la media general 7 , - Efectode la i&iina hilera (animal) p, - Efecto dc la j&nia columna (periodo) E,, - Error aleatorio
i..
P
4.”
r“
’ / 1’
Pesar por duplicado lg de digata ruminal de las 0.3,6.9.12,24,36 y 48 hn. Colocar
en un matraz Erienmever de 125 mL
I Agregar 15 nil. de la soluci6n digestora' I If.
las parrillas del digestur
la reniperacura (digestidin)
microkjeldahl ), calentar hasta que ocurra iin cambio del color obscuro a verde d ~ o
Meirlnr l a solución y evitar que no se pegue en las paredes del inatrai
I reposar 17 hrs I
I &far a ebuiiición hasta que el color vire de verde a amarillo ( 15 a 30 m i n )
.1 Dejar que la digestión continue 15 min m i s
para asegurar un miximo desarrollo del color
!I üejar entriar la so ucibn y posteriorniente
transferirla a un matraz voliimétrico de io0 InL y aiorar con agua destilada
\L
h e r en el espmroforómetro a 350 nm y comparar con una cum eirindar de C r 2 0 3
Figura 1 . Diagrama de flujo que represha el procedimiento para la determinación de Óxido de cromo en las heces fecales.
._*
c
c r- L".
c-
I-
C
....
r-
e...
V.- RESULTADOS Y DISCUSIONES
Digestibilidad de A. canescens
Se determino el porcentaje de Iiuniedad de las Iieces ferales de cada borrego para conwer el porcentaje de niateria seca de cada muestra y con estos datm v el conrunio del alimento se conocio la digestihilidad. De acuerdo a lo que propone (Piigp, 1981) donde menciona que la eztiniacihn de las heces son usados en conjuncion con los datas d d consumo del alimento para calcular la digestihilidad.
Los resultado:: de los porrcntajrs de Iiuiridad, niateria sera y cowuiiio para olxrner rl coeficiente de dipstihilidad (11 t i t o de las diferentes dietas de A. imwwm analizada en este
estudio anexo 1.
En hase a eatcw resultados se realizh un proniedio de digestihilidad para cada borrego correspondiente a su dieta y se obtu ierun los datos que aparecen en la Tabla 3. -
TABLA 3. Porcentaje de digestibüidad de A. canescens de las 4 dietas aquí analizadas.
2 3 4
1 7 3 4
1 2 3 4
1
3 -1
1 -
2 4 3
7 1 3 4
3 4 1 7
4 3 2 1
1 1 1
I 2 7 2
3 3 3 3
4 4 4 4
81.33 78.56 87.89
80.7 1 80.89
78.17
m.75 17.50
76.15
83.50 82.88 78.92 81 71
81.29
a m
21
Cahe mencionar que los valores de la digetibilidad in titso de A. cana-ms,ohtenidos en este trabajo son altm en coniparacion a los reportados en la literatura ( de77 a 73.5 % ) para las tres dieta-: (S\vingle.1996). Sin embargo hay que considerar que el reporte de dicho autor corresponde a horregos que consumieron mác del 110% del forraje de A. c n n a a u y aden& ni& de 50% de agua por kg de materia seca consumidas ; mientras que en las iiiuestw aqui analizadas consitio en un consumo restringido, es decir no sobrepmaha el 100% del aliniento consumido. Por lo que pudo haher u n iiiayor aprovechaniiento del aliniento y con ello una niayor dipestihilidad. Por su pane con respecto a la dieta testigo compuesta de heno de alfalla y avena re comparo con estudios del porcentaje de iiiatrria seca aparente de alfalfa (Teerzr,I993), en la cud nos indica que el porrrntaje (ir ctigesrihilidad de iiiateria seca e.< del 83%. niientra que en el análisk de *te estudio se ohtuvo aprosiiiiadaiiientc un 81% por lo que los resultados son m u y seiiiejantes.
A t e n i & se ohtu\-ieron altos valores <Ir tliqrstihilidad porque el A. innesims es u n Corraje que no contiene dentro de su coiiipuqiri<iii quiiiiira lignina por lo tanto es iiiuclio niayor su d igestihilidad.
Análisis estadístico del porcentaje de digestibilidad
Posteriorniente se efxtuo su andisis cstadistico tabla 4 y se verifir6 que no hubo variaciones signilicatiwu entre iiiedia analizada con la prueba de Tukry con u n nivel de significancia de ( P< 0.05).
TABLA 4 . Análisis Estadístico del porcentaje de digestibiüdad avarente in vivo de A. canesceni.
-
I Digestihilidad (1.68) (1.44) (3.07) (7.045) I
I I ' e s l a Media Niirneros encerrados cn pari.nrcsis is &xiñcióii osriiidar
Lzr B 5
P c :a
__1_p__________
:D Cinéticas de Óxido de cromo
Todas las calculos que se realizaron para obtener las cineticas del inarcador oxido de cromo para cada borrego. periodo y dieta respectivamente (anexo 2) y de esta fornia se evaluaron los paraiiietrm de cultivo continuo.
r", 13 L-.. - D En el análisk rnateiiiitico de las c u n w que relacionan la concsntracion del marcador en las
heces contra e1 tieriipo de postdosificación incluyen un tieiiipo de retraso antes de la primera aparicibn &I niarcador en Is Iieres. h t e es interpretado ronio el tieiiipo de transito de las particulas aliiiienriciai al pwar por todo el tract0 gaitrointestinal (Chiirch.1988). Pan un reactor real de ilujo nietclado (quiniiostato) cuando se inyecta un inarcador en alta cuncentraci(>n se tiene una salida conlo lo iiiue1;tra la f i r a 2.
[=D
Tiempo posldosificacion
L Amricidn del marcador
Dosis
Figura 2. Curva tipica que relaciona la concentración de un marcador en las heces a un tiempo de postdosificación.
Adeniis (kenspicl, 1995)
Las cineticas oirteniclai i i i < w t r ; i r < > i i en ceneral una Ioriiin (Ir raiiipana siiiiilar al <IC la íimra anterior en donde claraiiicnte ?e olvcrva q u e en Is priiiicrn.q liorai no Iiav una cuaiitiíiracion de ¿'xido de rrorlio ronsidernlilc y es 1:) rn:i>ii por In c l u r pnrn olnwer estos rilculos se tonib
23
entre inis lorma de raiiipana presente nienos coniportaiiiiento ideal tendra
'I"'
en cuenta hasta las primeras 17 horas, f4Fim 3 ; por lo que estas tienen un comportamiento de reactor real de flujo mezclado. Esto ocurre porque el marcador al principio de la inyección no se encuentra totalmente homogeneo porque en los sólidas es niás lento SU
mezclado, debido a la menor rapidez de transferencia de maca presentada en esta fase.
Coincidiendo con (Lan.land:, 1975). que ohsemó que hay variaciones en la excreción de óxido de cromo debido a que hay un mezclado incompleto entre la digesta y el indicador en el tract0 gastrointestinal.
O 10 x) 3J 40 50 TlEMW
Figura 3. Cinética general de la salida del marcador de las muestras de A. canescens analizadas en este trabajo.
De estas cineticas (anexo 3) se considero el punto nxiximo de concentración que fue a las 12 h y a partir de esta comenzó a descender Iiasta las 48 h y se torno esta parte de la griliia para sacarle el logaritnio natural obtener la pendiente y la ordenada al origen. datos que posteriormente sirvieron para calcular una serie de parjnietros de suma importancia en el sistema de cultivo continuo aplicado a el rumen de borregos.
Los valores de los parametros cineticos (tabla 5) íueron calculados a traves de la pendiente y la ordenada al origen del anilisk de cada grifiro del horrego, pericxlo y dieta respectivamente. Despues &tos valores fueron aplicados en las fdrniuls de volumen ruiiiiiial 0, tiempo iiitdio de retencih (t $5) , flujo runiinal (F), Tasas de diluci6n (D) y tienipo medio de retención (Tr).
-i
TABLA 5. Parámetror cinéticos de cultivo continuo caicdado a través 4-
de ia pendiente y ia ordenada al origen de cada borrego, periodo y
7
, ”,.,..
dieta.
2 2 1 1736 16.8 51.7 0.03 115 1506 3 4 1 1743 17.5 49.7 0.03 132 1318 4 3 1 1744 18.0 48.4 0.03 137 1318
1 2 7 1137 27.6 75.7 0.02 118 966 2 1 2 1135 71.9 26.0 0.02 81 1399 3 3 2 1141 70.7 77.5 @.O? 86 1375 4 4 7 1140 71.7 76.7 0.07 86 1325..
1 3 3 1681 70.1 41.8 0.02 167 1040 7 4 3 1683 19.1 43.9 0.03 127 1323 3 1 3 1683 20.8 40.5 0.07 177 1373 4 Z 3 1685 70.5 41.1 0.02 148 1139
1 4 4 1484 76.6 77.9 0.02 175 1186 2 3 4 1483 25.7 28.9 0.02 98 1512 3 2 4 1480 76.4 28.1 0.02 112 1323 4 1 4 1478 76.8 27.6 0.02 117 1373
Jjo ruminal, Des la dilucion , C cs el corisunio
Análisis Estadístico de los criterios cinéticos
Gracia< al uso de este niarcador se pudo calcular una serie de paritiietros de suma
iiiiponancia y adeniis con ayuda del paquete rstndistico SASS se obtuvo la coriipararii>n entre dietas que es el íundariirnto de esre trahajo y verificar 1% variaciones sigiiifirativs entre iiirdias con la Prueba dr Tukey con un nivel de signilicnncia de (P c 0.05).
TABLA 6. Análisis estadístico de los parámetroo cinéticos para
1742.8A (5.14)
17.19' (0.7144)
50.76,' (Z.13)
0.03' O
1 2 76.5 .' (225.29)
140A
1138D (2.6)
21.73' (0.7576)
16.71 (0.964)
O.?. ' 0
1753.98.' (194.65)
92.73'
1628.87' (1.75)
20.12* (0.7)
41.85' (1.4136)
0.012 O
1306.27' (140.87)
140.99 A
1481.17 (2.74)
26.34 A (0.489)
L8.17' ( 0.55)
0.02 - 0
1335.7' (133.91)
111.71'
.* Media resultados con paréntesis es la den-iacioii cztaiidar
Keiiiltador con diferentcs letras superscriptas Lon rrtadisticanicntc signifirativas (P 5 0.05)
Si coiiipaniiios el volumen ruiiiinal de cada dieta, claraniente ohsc~anios que todas son signiíicativariiente dilerentes debido a..., pero tornando en considitncibn la dieta testigo, el valor ni& cercano a este es la dieta 3.
En cuanto al ticiiipo niedio de reteiici6n es de 72.7 h en diet= conipurstas de avena. 18.54 Ii pan cronio quclado con EDTA y 25 Ii para croiiio iiiordaiitado se@n los estudios reportados por (Nñiicíra, 993 ; I-'aichnc?., 1%: y !&nre,i<>91) reqxctivaiiiente. ron lo cual considero que los valores ohtenidm para las dietas en wtudiw se riicurntran en este inten.alo. Haciendo una coiiiparaciih entre Ins dirtas 2 , 3 y la testigo aunque si Iiay una diferencia significativa, de cualquier fciriiia estw son las ni& parecidas con respecto a la testifp.
Tciiriraiiirntc I;LI n trav+s de la perdida de sustrato no fernicntado, In cual coiidiire a una redurcii>n cti In dieestihili<lnd y una coiiiprtrncia entre l a dilurii)ii y el tiempo tlr jxneracii>ii cclular ( . i w i i t , r , i , IW,Y %ern, I 9 7 9
d e diluci¿>ii iiiuy alta.. . piirdcn Causar tiehirnrins
26
Cabe mencionar que con respecto a este criterio el valor obtenido para la dieta testigo es bajo en comparacion con el reportado en bibliografía ; puesto que en este estudio se obtuvo una dilución de 0.07 kt y fleeter, 1983) reporta que para una dieta de alfalfa obtuvo una dilucion de 0.06 . &to puede ser debido a que la dieta está conipuesta solo de alfalfa y no contiene avena. En un reporte de (Luginbuhl, 1994) menciona que la dilución de cromo fue de 0.0201 a 0.0247 y esta bxriacion se debió por el nivel de consumo.
Comparando la dilucion de las diferentes dietas aqui analizadas. la que tiene una dilución iiiayor es la dieta 1, lo que significa que tiene una menor digestibilidad que puede ser por la perdida de sustrato no fermentado o porque es ink dificil degradarlo. Y en las diluciones de las die ts 2 Y 3 son nienores y no hay varianza significativa, e s o quiere decir que tienen una iiiayor digestihilidad porque es ni& íicil degradarlo ; con lo cual podeiiios obsenmios que la die ts 7 y 3 pueden ser las adecuadas para consumo de rumiantes.
Ahora bien, si compararnos el porcentaje de digestihilidad aparente con la dilución del marcador nos danios cuenta que las dietas tienen un coiiiportaiiiiento adecuado. es decir que a una iiienor dilución se presentó una iiiayor digestihilidad ; con lo que se conohora la relación de ariihm datos.
Los distinta eleiiienta< del fluido al seguir diferentes camina.. a lo largo del reactor tardaran tieiiipw diferentes en pasar a su travh. La distribución de estw tiriiipos en la corriente de fluido que sale del recipiente se dcnoiiiina distribución de la edad a la salida, o distribución del tiempo de residencia RTD del fluido (El t6riiiino edad de u n elemento en la corriente de salida se refiere al tienipo que dicho elemento pernianeció en el recipiente (kvenspiei. 1995).
Los datos reportadm en bibliografia con base a lm valores de tieiiipo de retención son de 80 a 104 h y KI disminuyendo el tiempo conforme el porcentaje de consumo va aunientando (Luginbuhl,I994) ; esto quiere decir que entre niás se consunia alimento nienos tiempo de retención hay y esto puede ser porque el alimento al ser en una cantidad mayor pa: ,a niuy rápido por el tract0 digestivo y no se digiere bien. Con respecto a los datos obtenidos ( de 34 a 52 Ii ) no coinciden con las de la literaiura y esto puede ser porque se obtuvo valores altos de la digrstibilidad y adeiiik el consuiiio estuvo restringido y eso prriiiitió que todo lo que se consumió fuen digestible.
En cuanto a I<w valores ohtenidos en este análisis. Iias diferencia significativa entre la dieta testigo y lw diet= en estudio. Sin eiirhnrgo las diet= que nib parccidns son ron la dieta testigo son ia I v la 3 .
i r
II P
i
I
.... I c
I-
r-
r: rl
F I; - B
VI.- CONCLUSIONES
Se pudo determinar saticlactorianiente el % de digestibilidad aparente in t w o niediantc el consunio. excrecion y el porcentaje de materia seca de cada uno de los borregos que conforniaron las 4 dietas.
Se logro llevar a cabo los ensayas para ohtener las cineticas de la fase súlida runiinal de lac
diierentes borregos si conio tanihit'n la cuantificaciún del marcador (oxido de cromo) en el iiitewalo de O a 4s lirs ,
En hase a los valores encontrados coni0 el porcentaje de digestihili<ía~i aparente in w o , el volunien ruiiiind. rl flujo runiinal. la diluci¿h , tieiiipo iiicrdio y tienipo de retenciún en 1% diferentes dietz de A. canescm aiializn<is representan un forraje con p<?tciiZal yarn la alinientaciún de riiiiiiantes en las zonas irid%< y seiiiiiritlas de Xlixico. Sieiiipre y cuando se IC incluya a la dieta de estos aniniales en una concentracion del 20 30 40 de A. cmesceris porque e s t a íiieron las dietas sefialnda con los datm analizados anteriorniente coino las iiirjorc, ya que no hay ilit'erencia si,miiicativa entre lm pariiiietros cinitiros de lac dietas 7 y 3 para la tt'cnica aqui analizada.
C o n ayuda de la ticnica de deterniinacion de Polierilenglicol (PEG) en la fase liquida (que es una tknica ni& sensible por In niayor rapidez de transferencia de n i a s (lieriiindc;l~r)7) , la dieta que es iiiejor nsitiiilada por 10s horregos es la dieta 7 que tuvo un nivel de inrlusiún del 70 % de A. ('nnescens.
c Por lo tanto hajo esta concentraciún, esta planta puede ser utilizada para el consunio de runiiantes en sustitucidn de otros forrajes que no resultm viables cultivarlos o que las condiciones geográficw no lo perinitan.
&,.
b -8.
-1
; i.., ! L
i Pi,. 1 u-
NOTA : Para el desarrollo de e%te proyecto y llegar 3 una conclusidn se necesita de Ins resuitadas de wriw tknicas anaiiticas. para fines pricticos la conc~usioii a la que se IlegÚ es flexihle debido a la falta de otros resultados que ya n o estan al alcance de este trabajo y solo se coiitd con la ayuda de los resu~tadw de la ticnica de drteriiiinaciRn de Poiietiienniicoi.
.-
* / I
L...
1
i
i
VIL- RECOMENDACIONES AI hacer la c u n x patron se dehe diluir con H: SO, y no con agua, si conio tariihicn las diluciones.
La curva patron se realizari junto con una niuestra al azar para determinar que las ahsorhancias de la muestra entraran en el intendo de la curva estándar, adeniis se liaran varins repeticiones hwta que haya una ertandarizacion porque de ello depende los resultados de I= iiiueztra de interis.
La digestión de 1% inuestrw dehe efectuarse generalmente por el canihio de color y no por el tiempo, porque no es tan exacto.
..
Pan acortar el tiempo del andisis, en vez de esperar a que Ocurra una sediiiientacion se puede centrifugar y se ohtienen resultados siiiiiiares.
El tainaño de particuia de la niuetra dehe ser honiogeneo porque de lo contrario hay iariacion considerahie en Ins lecturas.
’ / ,
c
.-..
[E
r'; I3
VII1.- AGRADECIMIENTOS i
J Al Dr. Sergio Huerta Ochoa por su apoyo y por creer en mi honestidad. justo en el instante cuando todo parcia perdido.
No puedo dejar desapercibido a alguien muy e3pecial que sin conoceriiie crrvo en ni¡ y me proporrionó su apoyo iiiconriicional al revisar este trabajo. alhwirn que riie lia dejado u n grato recuerdo. Graciw Or. Ernesto Favela.
.-
e A todos aquellos que intewiiiieron en la clahoraci6n de este trahajo. graciw por ronocerloi: y enseñariiie lo que no se dehe ser y Iiarer
1..
IX.- BIBLIOGRAFIA
Aguilera B. A. 1988 ; Evaluación del efecto de la suplernentación de rastrojo amoniatizado sohre la cinktica ruminal y digestibilidad en homes pelihuey . Tesis de rnaestria. FESC. U.N.A.M., Mlixico. D.F. Bateman J. V. 1970 ; Nutriciiin aninial. Manual de mitoda' analiticm. Ed. Herrero Hndz. Hnos. S. A. , Mexico. Bergen W. G. 1979 ; Factors affecting growth yields of microorganisms in the runien . Trop. Anini. Prod. 4: 13-20. Bull L. S. , Runipler W. V. , Sweeney T.F. and Zinn R.A. 1979 ; Influence oí runiinal turnover on site and extent of digestion . Fed. Proc. 3 8 : 27 13-27 19. Czamorki j. 1961 ; The determination of chromic oxide in samples of' feed and excreta hy arid diqestion and spectropliotometn. Can. J. Anini . Sci. 41 : 167-169. Faicliney G. J. 1992 ; Aplicarion of the double marker method for riieuurine digesta kinetirs to runien saiiipling in slieep iollo\ving a dose of die markers or tliexnd oi tlieir continuos infusion. Australian Journal of Agricultural Researcli. 43(7) : 277.784. Forti M. 1971 ; Grazing trials on selected forlder sliurbs A report of tlie Negev Institure for Arid Zone Researrh. Beer Slieva, Israel. Forti M. y Levi Y. 1977 ; Introduction of drought resistant fodder plants. A report of tlie BenGurion Univcrsiw of tlie Negev. Applied Research Instirute, Israel. Cliurcli, C. D. and Pond, G. W. 1'987 ;Fundamenta de nutricicin y alinicntacii>n de aniinales. Ed. Liniusa. S. A de C.V. Cliurcli, C. D. 1988 ; The ruminant aninial digestive physiology and iiutrition. Glenn E. P. 1981 ; Nutritional value of Iialopliytes grown on hypersaline water. A repor of the environniental research lahoratory. University of arizona. Tucson. Arizona. Gohl B. 1987 ; Piensos Tropicales. Colwción FAO. Producción y sanidad aniiiial No 11. FAO. Roiiia. Gooding J. R. 1979 ; Atriplex u a forage crop for arid land. American Association of Agricultural Science. Gutihrez C. J., Cantlelario R. M. , Perez R. L. 1987 ; Ecologia y utililaci¿)n <le la cmtilln de vaca ( A. canesrens) en el norte de Mexico. Reuniiin Nacional de Investigadores en Zmteciiin. Chihuahua, Cliili. Hemindez G. J. 1997 ; Servicio Social. Efecto de la suplenientaci<jn con A. CnnrSCm
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> I
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i 2
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1 F. 1:’ 17-78.
B
A ,
’f- F
i
‘ I 1
i
D 33
X.- ANEXOS
ANEXO 1 Porcentajes de digestibiiidades de A. canescens
TABLA 7.- Resaltados de lor porcentajes de humedad, materia seca y consumo para obtener el caficiente de digestibiüdad in vivo de 1.s 4 dietas anahadas
3 65.94 34.M 3 64.70 35.30
B 'Yo H % m.s. hecesb.h. heasb.a. cQnsumo 'Y'digestibiiidad 2 68.17 34.43 1 69.87 30.13 3 67.74 37.26 1 69.42 30.58
B 'Yo H % m.8. hear b.h. heas b.s. consumo %digestibUdad 3 70.84 29.16 2 65.22 34.78 1 67.82 32.18 7 62.65 37.35
4 59.39 40.61 3 66.78 33.77
1'
-3 4
ANEXO 2 Cinéticas de la concentmción de marcador (Óxido de cromo).
TABLA 8. Concentración de Óxido de m m o en la dieta aue contiene 10 % de
Peziodo 1 Borrego 1
I muestra(a Abs Conc(g/mL) Cone (lg) Ln conc I 1.00 0.0696 0.0002663 0.0002661 -8.2313739 1 1.09 0.0707 00002718 0.0002715 -8.2112711
1.00 0.1172 0.00050l6 0.0005015 -7.5978459 I .00 O. 1903 O.MMRd? 0.0006&4 -7.0580031 I .co 0.PW 0.0003494 O.wO3.192 -7.9596590
0.035 0.0001991 0.0001902 -8.5211532 1 .m 0.0546 0 . ~ 1 9 2 2 O.MXiI9l7 -8.5595065
I
I
1 1 0.90
- IPeriodo 2 Borrego 2 muestra (g) Abs Conc(g/mL) Cone (ig) Ln conc
1 .w 0.066 0.000?49 0.000249 -8.2963312 1 .00 0.07 0.000283 0.000283 -8.169504 0.90 0.115 0.000495 O.WGt9 -7.6099363 l.m 0.189 0.000857 0.000857 -7.0618505 1 .o0 0.08 0.00034 0.000340 -7.9845458 I .m 0.057 O.wO204 0.000204 -8.494723 1 0.055 0.000194 0.000l94 -8.5452087
I
i I
lo 3 Borrego4 muestra (g) Abs Conc(g/mL) Cone (ig) Ln conc
1 .MI 4.521 Q.0026554 Q.00?6509 I .00 0.1 IO 0.0004665 0.0004657 -7.6718622 I .o0 0.149 O.ooo66 17 0.0006599 -7.3233078 1.00 0.153 0.0006790 0.0006765 -7.2985015 I .co 0.127 0.0005515 0.MX)SIIS -7.5027836 I .m 0.068 0.0002599 0.0002592 -8.2576849 I .00 0.058 0.0001105 O.oW1oy9 -8.4685468
El Periodo 4 Borrego 3 muestra (g) Abs Conc(g/mL) Conc (id Ln cone
1 .00 o. 105 0.0001413 0.00044 I Z -7.7259629 0.99 0.136 0.00059 0.000598 -7.4214140 0.99 0 . 2 2 0.0010205 0.00010?09 -6.8870042 1 .o0 0.71 I 0.KKN666 0.000<)64Z -6.94412985 0.99 0.107 0.000L)179 0.0009497 -6.960351 16 0.w 0.125 0.005431 0.005i3 -7.51803386
1 .t
1 4
1.2
1
!I 18
0.6
0.4
0.2
O
R' = 0.9982
OCUi OCCS 6wf O032 O W 3 O 0 4 O o 001 CONCENTRACION IaMI
Gráfico 1.- Curva patrón utilizada para determinar la concentración del marcador en las heces fecales de los borregos en estudio
-36
rl 5 E!
c b
r)
'1 P *
I... 1 "I
TABLA 9. Concentración de óxido de ummo en k dbti que w n k e a0 % de indiulón de A. me- aplicado los 4 bow- de labomtorlo, en sus 4
TABU 10. Canantrad6n de óxido de cromo en i8 diet8 que contiene 30 $6 de hdu8ión de A. cunescem 8piiado a 108 4 bo- de t.bontorio. en sus 4
periodo 1 borrego 3 muestra (g) Abs Conc(g/mL) Conc llrd Ln conc
1.0013 0.2891 ü.00150638 4 1.0002 0.056 o . 0 0 0 1 ~ 1 7 o.oooiwi3 a s m s 3 ? 4 Loo06 0.1647 0.000736384 0.000735943 -7.21435824 1.001 0.1779 0.000801621 0.000800021 -7.13087259
I 0.1265 0.000547593 0.000547593 -7.50997796 1.002 1 0.0729 0.000282692 0.0002821 8.17324863
1 0.0626 0.000231788 0.000231788 4.36968705
periodo 3 borrego 1 muestra (9) Abs Conc (g/mL) Conc (lg) Ln conc - 1.0037 0.0026 4.4743E4.05 6.4504E45
1.0035 4.2913 4.00151725 4.00151346 1.0044 0.0654 0.000245626 0.00024455 4.31609014 I .O046 0.1944 0.000883167 0.000879123 -7.03658576
1.001 I 0.0771 0.00030345 0.000303116 8.10139429 1.0045 . 0.0714 0.000275?79 0.000274046 8.20121449
1.0013 0.1119 0.000475437 0.00047482 -7.65?57453
periodo 4 borrego 2 mueswa (9) Abs Conc (g/mL) Conc (id Ln conc
1.0017 0.02% 4.89275E-05 4.88445E-05 *9.92686853 0.9993 0.129 0.000559949 0,000560341 ,7.48696532 1.0028 0.1666 0.000745714 0.000743692 -7.20388345
I 0 .317 0.000919?45 0.000919245 6.99195806 1 0.1366 0.000597509 0.000597509 -7.41?74091
0.9987 . 0.0829 0.000332114 0.000332547 4.00873064 I 0.1064 0.000448255 O.ooo448255 -7.71014737
periodo 2 borrego4 muestra (g) Abs Conc(g/mL) Conc (id Ln conc
0.9994 0.0874 0.000354354 0.000354567 -7.9446138 0.9997 O. 1073 0.000452703 O.OM)t52839 -7.69997341
0.9992 0.1721 0.000772956 0.000773575 -7.16448758
I M I 0.0749 0.000292577 0.000?92285 4.13778169
0.9996 0.1367 0.000598003 0.000598243 -7.4?lSl4l
1.0019 0.1224 0.00052733 0.00052633 -7.54958177
periodo 2 borrego3
0.0559 0.000198675 0.000198537 8.52453
0.1393 0.000610853 0.000609512 -7.40285 0.1013 0.00042305 O.oOO.t?1869 -7.77081
0.0947 0.000390432 0.000390588 -7.8478
0.061 0.000123881 0.0002?.4117 8.40329
periodo 2 borrego 4 Conc (g/mL) Conc (lg) Ln con
0.0196 1.92745E.05 1.93514E.05 -10.8579?7 0.1587 0.000706731 0.000705673 -7.25635 0.2069 0.000944944 O.ooo944 6.9653842
0.2524 0.001169813 0.001168878 6.7517 0.2307 '0.00106?568 0.00106013 6.8493 0.2169 0.000994366 0.000995461 6.912304
Conc (g/mL) Conc (lp) Ln conc 0.0987 0.ooo41020I 0.000410i6 -7.7989641 0.1489 0.000658298 0.000658035 -7.3262528 0.1539 0.ooo683009 0.000683282. .7.28860 0.2901 0.001356133 0.001357083 6.60241 0.7607 0.0012 10833 0.00 1214842 6 .7 13 14 0.L869 ~ 0.000846101 0.000844496 -7.07677
periodo 4 borrego 1 Conc (g/mL) Conc (lp) Ln co
0.1916 0.000869319 0.000868894 -7.0482
0.253 0.001 172778 0.001171022 6.74987844 0.1609 0.000717604 0.000719114 -7.?3749(H2
42
UNIVERSIDAD AUTONOMA METROPOLITANA DIVISION DE CIENCIAS BIOLOGICAS Y DE LA SALUD M. EN C. ARTURO PRCCIADO LOPEZ SECRETARIO ACADEMIC0
A QUIEN CORRESPONDA:
Por medio de la presente se hace mnstar que el (la)
del Departamento de: Biotecnología de la División de Ciencias Biológicas y de la Salud, asesoró el siguiente Servicio Social.
TiTüL0:”Efecto de la suplementación con Atriplex catiescens sobre la chética de sólidos en el rumen de borregos”.
ALUMNO: ALONSO ACURA INOCENCIA
DR SERGIO HUERTA WHOA
MATRICULA 91333709
LICENCIATURA: Ingeniería Bioquímica Industrial
PERIODO: 16 de diciembre de 1996 - 16 de junio de 1997.
Se extiende la presente para los fmes que al interesado convengan, en la Ciudad de México, D.F. a doce de noviembre de mil novecientos noventa y siete.
A t e n t a m e n t e
UNIDAD KTAPALAPA Av Michoacan y La Purlsima, Col. Vicentina. D.F. C.P. 09340,Tel: (5) 72446-79, Fax (5) 612-6043