2005 cours infirmi res- 1 -...
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MICROBIOLOGIE
Microbiologie
Etude des micro-organismes ou «microbes»
• Invisibles à l’œil nu
• Observation au microscope
• Bactéries, virus, parasites, champignons
• Responsables d’infections
I - Principaux micro-organismes pathogènes
Bactérie
• Unité de structure : cellule (1µm)
• Procaryote : pas de membrane nucléaire
• Présence de systèmes enzymatiques de biosynthèse => autonome
• Homme, environnement, animaux…
Virus
• 100 fois plus petit qu ’une bactérie
• Procaryote
• Absence de systèmes enzymatiques de
biosynthèse => parasitisme obligatoire
Champignon
• Eucaryote : membrane nucléaire
• Responsable de mycoses
• Levuriformes (candida)
• Filamenteux (aspergillus)
Parasite
• Vit au dépens d’un autre organisme
• Eucaryote
• Protozoaires (paludisme)
• Helminthes (taenia)
II – Modes de reproduction
des différents micro-organismes
1 - Virus
parasitisme intracellulaire obligatoire
Nécessite la machinerie enzymatique des cellules pour se reproduire
Multiplication, in vitro, sur culture cellulaire
Structure des virus
- 1 élément constant : la nucléo-capside
• Acide nucléique (ARN ou ADN) : génome
• Capside : protection du génome
- 1 élément présent chez certains virus
seulement : les virus enveloppés
• L’enveloppe virale
Virus sans enveloppe : virus nu
Virus
Exemples de virus responsables de pathologies connues
- Herpes Simplex Virus (HSV): herpes
- Virus Varicelle Zona (VZV)
- Virus de l’immunodéficience humaine (VIH) : SIDA
- Virus de la grippe
- Virus de la rougeole
- Rotavirus : agents des gastro-entérites
Multiplication virale
1 - attachement
• liaison d’une protéine virale à un
récepteur cellulaire
2 – pénétration
• entrée du virus dans la cellule
3 – décapsidation
• libération de l‘acide nucléique virale
dans le cytoplasme de la cellule
Multiplication virale (suite)
4 - réplication
• migration de l’acide nucléique viral
dans le noyau
• « copies en plusieurs exemplaires »
du génome viral
Multiplication virale (fin)
5 – assemblage
• formation de nouvelles nucléo-
capsides dans le cytoplasme de la cellule
6 – libération
• virus nu : lyse cellulaire
• virus enveloppés : bourgeonnement
à travers la membrane cellulaire
2 - Parasites
Nécessite un ou plusieurs hôte pour effectuer son cycle de reproduction
• Protozoaires
• Helminthes
Parasite
Protozoaires
• plasmodium : agent du paludisme
• toxoplasme : agent de la toxoplasmose
Cycle de reproduction du plasmodium
1 – chez l’homme
• foie : cycle asexué
• sang : cycle sexué (gamétocytes)
2 – chez le moustique
• Tube digestif : cycle sexué
migration de la forme infestante pour
l’homme dans les glandes salivaires
Parasite
Helminthes
• Taenia : agent du « ver solitaire »
Cycle de reproduction du taenia
1 – chez l’animal (vache, porc)
• mange de l’herbe contaminée par des fecès
d’homme contenant des œufs de taenia
� embryon dans intestin � larve
� migration vers les muscles
2 – chez l’homme
• mange viande mal cuite
� migration de la larve dans l’intestin
� attachement et croissance du vers
� libération des anneaux et des oeufs
Bactérie, LevuresChampignons filamenteux
• Se multiplient de façon autonome dans la nature
• Faciles à cultiver sur des milieux de culture
1 - Bactéries, Levures
• multiplication par scissiparité (simple division) pour les bactéries
• multiplication par bourgeonnement pour les levures
Champignons filamenteux
• reproduction par fabrication de spores pour les champignons filamenteux
III - Anatomie fonctionnelle des bactéries
– Forme sphérique : coque ou cocci• Groupés par deux : Méningocoques• Chaînette : Streptocoques• Amas ou grappe de raisin : Staphylocoques
– Forme bâtonnet : bacillesEscherichia coli
– Forme spirale : spirochètes Tréponèmes : Treponema pallidum (syphilis)
1- Morphologie
2 – Structure bactérienne
• Paroi bactérienne
• Membrane cytoplasmique
• Cytoplasme et ribosomes
• Appareil nucléaire
Eléments obligatoires
• Enveloppe rigide
• Principal constituant : le peptidoglycane
• Deux types de paroi bactérienne
– Bactéries à Gram positif
– Bactéries à Gram négatif
3 – Paroi bactérienne
• Permet l’identification des bactéries
• Coloration différentielle basée sur la différence de structure de la paroi
– Bactéries à Gram positif : violet
– Bactéries à Gram négatif : rose
Coloration de Gram
3 – Paroi bactérienne
• Couche épaisse de peptidoglycane (30-50 nm)
Bactéries à Gram positif
3 – Paroi bactérienne
Bactéries à Gram positif
– Cocci :
Staphylococcus aureus (abcès, furoncles …)Streptococcus pneumoniae (pneumonies …)
– Bacilles :
Listeria (Listeriose)Corynebacterium
Bactéries à Gram positif
3 – Paroi bactérienne
• Membrane externe– Double couche de phospholipides– Porines : passages de petites molécules– Lipopolysaccharide ou LPS : toxicité
• Mince couche de peptidoglycane (3-5nm)
Bactéries à Gram négatif
3 – Paroi bactérienne
• Bactéries à Gram négatif :
– Cocci : Neisseria meningitidis (méningite …)
– Bacilles : • Entérobactéries :
Escherichia coli (infection urinaire)
• Bacille pyocyanique ou Pseudomonas aeruginosa
Bactéries à Gram négatif (2)
• Paroi des mycobactéries– Structure différente
(très riche en lipides)
– Coloration de Ziehl-Nielsen
– Ex : Mycobacterium tuberculosis
Cas particuliers
• Cible de nombreux antibiotiques
– Bêta-lactamines : Pénicillines– Glycopeptides : Vancomycine
Paroi bactérienne et antibiotiques
• Capsule– Protection contre les cellules immunitaires
qui doivent détruire la bactérie
• Pili – Adhérence
• Plasmides – Gènes de résistance et/ou de virulence
4 – Facteurs inconstants de virulence
IV - Physiologie et croissance bactérienne
• Besoins élémentaires
• Eau
• Sels minéraux
• Oligo-éléments (fer, calcium, zinc ...)
• Carbone, azote …
• Nutriments (glucose)
• Besoins spécifiques :
• facteurs de croissance
4 – Nutrition bactérienne
• Température– Bactéries pathogènes 37°C
– Listeria monocytogenes 4°C
• pH– neutre (pH=7) ou légèrement alcalin (pH=7,5)
– Lactobacillus (pH=6,3-6,5)
2 – Conditions physico-chimiquesde la croissance
• Pression partielle en oxygène
– Aérobies stricts : ne peuvent vivre sans air (O2)• Pseudomonas
– Anaérobies stricts : sont tuées en présence d ’air• Clostridium
– Aérobies - anaérobies : peuvent pousser en présence ou en absence d ’air
• Entérobactéries, staphylocoque
2 – Conditions physico-chimiquesde la croissance
– Gélose nutritive ordinaire• bactéries non exigeantes
• Staphylocoques, Entérobactéries
• Bactéries de l’environnement
– Gélose enrichie • bactéries exigeantes
• Streptocoques, méningocoques ..
3 – Milieux de culture
• Etude des caractères :– Morphologiques (cocci, bacilles...)
– Gram (négatif ou positif)
– Culturaux (aérobies, anaérobies...)
– Biochimiques (catalase, oxydase...)
Classification