2. metode umum dalam mikrobiologi
TRANSCRIPT
![Page 1: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/1.jpg)
Metode Umum dalam Mikrobiologi
![Page 2: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/2.jpg)
Metode umum dalam Mikrobiologi
Teknik Aseptis
Teknik Isolasi
Penghitungan Mikrobia
Pengecatan
![Page 3: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/3.jpg)
Teknik AseptisUsaha/aktivitas yang dilakukan untuk
menghindari kontaminasiTujuan steril dan mencegah kontaminasiKontaminasi : peristiwa masuknya
mikrobia lain ke dalam suatu biakan murni dan tumbuh di dalam biakan.
Kontaminan : jasad penyebab kontaminasi
Kultur murni : biakan yang hanya terdiri dari populasi mikrobia yang berasal dari satu jenis mikrobia.
![Page 4: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/4.jpg)
Teknik Aseptis (lanjutan)Ditempuh dengan:
◦Area kerja dibersihkan dengan disinfektan mengurangi jumlah kontaminan yang potensial
◦Alat disterilkan Misal: ose dipanaskan sebelum &
sesudah kerja
◦Pekerjaan dilakukan dengan cepat & efisien mengurangi kemungkinan terekspos kontaminan
![Page 5: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/5.jpg)
Laminar Air Flow
![Page 6: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/6.jpg)
SterilisasiSuatu usaha untuk
membebaskan bahan-bahan dan alat-alat dari semua bentuk kehidupan mikrobia
Cara sterilisasi: ◦Mekanik◦Fisik◦Kimia,
![Page 7: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/7.jpg)
Sterilisasi secara mekanik Dengan filtrasi Digunakan untuk bahan-bahan
yang tidak tahan panas Misalnya : serum darah,
antibiotika, gula sederhana
![Page 8: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/8.jpg)
![Page 9: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/9.jpg)
![Page 10: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/10.jpg)
Sterilisasi FisikUntuk alat dan bahan tahan
panasInsenerasi : > 500oCPerebusan : 100oCAutoclave : 121oC, tekanan 1
atm, 15 menit
Pemanasan keringPasteurisasi (batch method &
flash method)
![Page 11: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/11.jpg)
Prinsip Kerja Autoclave
![Page 12: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/12.jpg)
Autoclave
ManualDigital
![Page 13: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/13.jpg)
Sterilisasi secara kimia
Bahan kimia◦Berupa gas: etilen oksida dan
formaldehid,◦Bersifat cair: glutaraldehid
Teknik sterilisasi secara kimia dapat dilakukan dengan bahan yang mempunyai daya oksidasi seperti ozon dan hidrogen peroksida.
![Page 14: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/14.jpg)
Aseptic Transfer Technique
![Page 15: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/15.jpg)
Aseptic Transfer Technique
![Page 16: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/16.jpg)
Aseptic Transfer Technique
![Page 17: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/17.jpg)
Teknik IsolasiIsolasi ?
◦memindahkan mikrobia dari lingkungannya di alam dan menumbuhkan sebagai biakan murni dalam medium buatan.
Bagaimana caranya?
![Page 18: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/18.jpg)
Cara-cara Isolasi Teknik Goresan (streak plate
method) Teknik taburan (pour plate
method) Teknik Sebaran ( spread plate
method)
![Page 19: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/19.jpg)
Teknik Goresan (streak plate method)
Menghasilkan koloni terpisahMedia agar digores dg ose yg
berisi koloni bakteri/ jamur
![Page 20: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/20.jpg)
![Page 21: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/21.jpg)
![Page 22: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/22.jpg)
Teknik taburan (pour plate method)Pengenceran bertingkatInokulum diteteskan di petridis
dituang mediaKoloni terpisah
![Page 23: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/23.jpg)
Pengenceran Bertingkat
![Page 24: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/24.jpg)
![Page 25: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/25.jpg)
Teknik Sebaran ( spread method)PengenceranKultur disebarkan pada media
agar plate steril penyebaran dengan alat penyebar yang telah disterilkan dengan alkohol dan dibakar
![Page 26: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/26.jpg)
![Page 27: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/27.jpg)
Microbiology Song
![Page 28: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/28.jpg)
Perhitungan BakteriTotal cell count
◦jumlah bakteri secara keseluruhan◦Sel hidup maupun mati
Viable count◦Jumlah bakteri hidup
![Page 29: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/29.jpg)
Total Cell Count
1. Secara Mikroskopik Petroff-Hauser
Jumlah cairan antara kaca obyek dan kaca penutup mempunyai volume tertentu
Hanya cairan dg bakteri dalam jumlah tinggi
Coulter Counter Elektronik Menghitung benda dg diameter 30 μm Cairan harus benar-benar mengandung
bakteri
![Page 30: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/30.jpg)
Total Cell Count
2. Berdasar kekeruhan dengan spektrofotometer Dasar: banyaknya cahaya yang
diabsorbsi sebanding dg banyaknya sel bakteri
![Page 31: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/31.jpg)
![Page 32: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/32.jpg)
Viable CountTeknik agar tuangTeknik agar sebar
![Page 33: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/33.jpg)
Dilution
Plating
Incubation
Viabl
e
Coun
t
![Page 34: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/34.jpg)
PengecatanMikroba tidak mengadsorbsi atau
membiaskan cahayaZat warna meningkatkan
kontras mikroba dg lingkungannya
Pewarnaan khusus melihat salah satu struktur sel
Pewarnaan diferensial memilah/membedakan mikroba
![Page 35: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/35.jpg)
Zat warna yang digunakanBersifat basa
Bagian yang memberikan warna bermuatan (+)
Lebih banyak digunakan karena muatan (-) banyak ditemukan di dinding sel, membran sel, sitoplasma
Bersifat asamBagian yg berperan memberi warna
bermuatan (-)Umumnya dipakai untuk mewarna latar belakang
sediaan
![Page 36: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/36.jpg)
Berdasar prosedur pewarnaanPewarnaan positif
◦Menghasilkan pewarnaan mikroba◦Menggunakan zat warna basa (+)
atau asam (-)
Pewarnaan negatif◦Latar belakang sekeliling mikroba
yang terwarnai kontras dg mikroba yg tidak berwarna
![Page 37: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/37.jpg)
Contoh pengecatan1. Pewarnaan sederhana
◦ Menggunakan 1 macam zat warna◦ Umumnya menggunakan zat warna basa◦ Misal: kristal violet, metilen blue, karbol
fuksin basa, safranin, malachit green◦ Kadang dengan zat warna negatif/asam◦ Misal: nigrosin, congo red
2. Pewarnaan negatif◦ Mikroba dicampur dengan tinta cina atau
nigrosin, kemudian digesekkan di atas kaca obyek
◦ Zat warna mewarna lingkungan
![Page 38: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/38.jpg)
3. Pewarnaan Gram◦Diferensial◦Gram positif dan negatif
4. Pewarnaan Ziehl-Nielsen◦Dengan karbol fuksin ◦Memilah kelompok Mycobacterium
dan Nocardia
![Page 39: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/39.jpg)
Pewarnaan khusus
1. Pewarnaan kapsula Sulit diwarna Warna negatif untuk latar belakang, warna basa
untuk bakteri Kapsula tidak menyerap warna terlihat sbg
lapisan transparan
2. Pewarnaan spora Malchit green Safranin
3. Pewarnaan flagela Larutan mordan membengkakkan f;agela Larutan pewarna flagela – Gray Kristal violet
![Page 40: 2. Metode Umum Dalam Mikrobiologi](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022061206/5482951fb4af9f925c8b469b/html5/thumbnails/40.jpg)
Wassalam.....