(19) 대한민국특허청(kr) (12)...

(19) 한민 특허청(KR)

(12) 등 특허공보(B1)

(45) 공고 2012 09월11

(11) 등 10-1181321(24) 등 2012 09월04

(51) 특허 (Int. Cl.)

A61K 8/97 (2006.01) A61Q 19/00 (2006.01)(21) 원 10-2009-0133597

(22) 원 2009 12월30

심사청 2009 12월30

(65) 공개 10-2011-0077131

(43) 공개 2011 07월07

(56) 행 사 헌

JP02062827 X2

JP05140597 A

JP08157338 A

JP2011093880 A

(73) 특허

계 학 산학 단

역시 달 달 1095 (신당동)

(72)

양 아

역시 달 496 72, 한 맨 102동 1002 ( 어동)

역시 채보상 46 57, 동 3차 동 603 (평리동)

(뒷 에 계 )

(74) 리

철

체 청 항 : 11 항 심사 : 태

(54) 고 함 하 알러지 개

(57) 약

본 고 함 하 알러지 개 에 한 것 , 체 고

, 보다 직하게 고 비극 매 가 포함하 알러지 개

에 한 것 다. 본 고 매우 안 할 뿐만 아니 , 염 과 알러지 에

사 억 비만 포 타-헥 사미니 (β-hexosaminidase) 억 하 등

과가 어 알러지 상 개 하 하게 사 다.

도 - 도1

등록특허 10-1181321

- 1 -

(72)

역시 47 43-17, 501 (동, 원하 )

채 경

역시 원 16 52-5 ( 원동2가)

미

역시 달 다사 죽곡1 42, 실역e편한 상아 트 101동 1810

역시 청 261, 슬골드 1416동 1803 ( 동)

삼빈

역시 달 원 171, 지개타운 102동306 ( 곡동)

등록특허 10-1181321

- 2 -

특허청

청 항 1

고 함 하 알러지 개 료 .

청 항 2

1항에 어 , 상 고 비극 매 가 것 특징 하 알러지 개 료

.

청 항 3

1항 또 2에 어 , 상 고 헥산(n-hexane), 포 (chloroform, CHCl3) 에틸아

트(ethylacetate, EtOAc) 루어지 택 1 상 매 하여 득한

것 특징 하 알러지 개 료 .

청 항 4

1항 또 2항에 어 , 상 고 고 포 것 특징 하

알러지 개 료 .

청 항 5

1항에 어 , 상 고 량에 하여 0.02～30 량% 포함 것 특징 하

알러지 개 료 .

청 항 6

삭

청 항 7

1항에 어 , 상 알러지 개 료 피 것 특징 하 알러지 개

료 .

청 항 8

고 함 하 알러지 개 건강 식 .

청 항 9

고 비하 단계; 상 고 탄 1~4 알코 하여 고 얻 단계;

상 고 비극 매 하 단계 포함하 고 .

청 항 10

9항에 어 , 상 알코 탄 또 70% 에탄 것 특징 하 고

.

청 항 11

9항에 어 , 상 비극 매 헥산(n-hexane), 포 (chloroform, CHCl3) 에틸아 트

(ethylacetate, EtOAc) 루어지 택 1 상 매 것 특징 하 고

.

청 항 12

고 함 하 알러지 개 약학 .

등록특허 10-1181321

- 3 -

상 한

야

본 고 함 하 알러지 개 에 한 것 , 체 고[0001]

, 보다 직하게 고 비극 매 가 포함하 알러지 개

에 한 것 다.

경

알러지 질 경 염, 식생 변 향 등 복합 향 하고 , 우[0002]

리 경우 알러지 질 가 에 비해 꾸 가하고 실 다. 알러지 시간

경과 주 한 양상에 시 , 역 복합체 지연 등 게 4가지 (I～Ⅳ)

통상 알러지 함 한 항원에 하여 미 감 개체에 착 어 항체에 항원 결합한

후 내에 어 시 1 알러지 하 , 알러지 비염, 아 피 피 염

지 천식 등 알러지 질 들 1 알러지 (type Ⅰ allergic reaction)에 한다.

비만 포 만 염 시 알러지 과민 에 여하 필 포 알 다. 비만 포 [0003]

에 하고 고 IgE 체 FceRI IgE 특 알 겐(allergen)과 결합함 , 포

질 내 도가 상승하고 탈과립 어 타민 헤 린, 가 해 그리고 interleukin-4(IL-

4), IL-6, IL-13, TNF-α 같 여러 가지 사 비하게 , 비 염 매개 들

시 고, 과도 가시 , 지 시 게 다. 비만 포 러한 알 겐과

IgE 통한 역학 극 에 비 역학 극 질 compound 48/80, protein kinase C(PKC) activator

phorbol 12-myristate 13-acetate(PMA), calcium ionophore(A23187) 등에 해 도 야 것 보고

어 다. Rat RBL-2H3 포 막 에 십만 개 IgE 체 포함하 , IgE 감 후에

항체에 하여 타민 리하므 , 항알러지 검색에 RBL-2H3 포가 포주 많 고

다.

역학 또 비 역학 과민 항 타민 약 에 해 상 시 경감 지만 료[0004]

지 않 다. , 알러지 매개 질 타민 것 하 재 개 , 천연

재 간 복 가 하고 험 므 다양한 천연식 한 검색

하게 루어지고 실 다. 재 알 진 천연 항알러지 시료 단삼, , 근,

도 지, 등골 등 다.

한민 공개특허 2004-97026 에 생 , 피, 생 가피 등 각 천연 한 아 피[0005]

피 염 료에 한 알 , 한민 공개특허 2005-9172 에도 역시 지

(熟地黃), 산약, 산 등 생약 한 아 피 피 질 체질개 개시 어

고, 한민 공개특허 2005-22586 에 질경 한 아 피 피 염 료 가 개시 어

다. 또한 한민 공개특허 2005-0072378 에 지 , 규, 아주 한 식 함 하

아 피 피 료 개시 어 다.

본 들 항알러지 상 천연 에 한 연 하 고 , 보다 직하게 고[0006]

비극 매 가 우 한 알러지 상 억 가지 것 하여 본

하 다.

내

해결 하고 하 과

, 본 고 함 하여 안 하 도, 알러지 개 과가 뛰어 알러지[0007]

개 공하 것 한다.

또한, 본 안 하 도 알러지 개 과가 우 한 고 공하 것 다 [0008]

한다.

과 해결 단

등록특허 10-1181321

- 4 -

상 달 하 하여 본 에 , 고 함 하 알러지 개 [0009]

공 다. 상 고 비극 매 가 것 직하다. 보다 직하게 상

고 헥산(n-hexane), 포 (chloroform, CHCl3) 에틸아 트(ethylacetate, EtOA

c) 택 1 상 매 하여 득한 다.

상 알러지 개 에 고 량 0.02 ～ 30 량%[0010]

함 것 직하다.

상 다 달 하 하여 본 에 , 고 비하 단계; 상 고 알코[0011]

하여 고 얻 단계; 상 고 비극 매 하 단계 포함하

고 공한다.

상 알코 탄 또 70% 에탄 것 직하다. 상 비극 매 헥산(n-hexane), [0012]

포 (chloroform, CHCl3) 에틸아 트(ethylacetate, EtOAc) 택 1 상

매 것 직하 , 욱 직하게 포 다.

과

본 에 알러지 개 천연 고 함 하므 안 하 도,[0013]

염 과 알러지 에 사 억 비만 포 타-헥 사미니 (β-

hexosaminidase) 억 하 등 과 알러지 개 한다.

실시 한 체 내

하 본 한다.[0014]

고 (Zizania latifolia) 못 도 , 강가 얕 에 리지어 벼과에 하 여러해살[0015]

, 또 고도 린다. 고 당뇨병, 고 압, , 심 병, 변비, 비만, 동맥경 등 여

러 가지 질병에 뛰어 과가 , 체 역 우 에도 뛰어 과가 다고 알 지고 다.

또한, 약 독 식 독, 학약 독 같 여러 가지 독에도 뿌리 달 거 생 마시

과가 다고 알 다. 그러 러한 고 단지 민간에 만 식 어 과학 근거

거 없 실 , 근 들어 그 과 식 에 에 심 가 고 다. 신경 포에 산

상 시켜 뿌리 처리하여 포생 , DNA fragmentation 포고사

들 한 결과 한 결과 얻었다 보고가 , 고 고 가 각각 신체 지

향상과 항피 과 가진다 연 결과가 보고 었다.(Park WH, Cha YY. Inhibiton effect of zizania

latifolia on apoptosis induced by H2O2 in Neuro2A cell. Korean J. Oriental Physiology&Pathology. 19(4):

1062-1067 (2005), Song YH. Anti-fatigue effect of Zizania caudiflora(Turczaninow) Nakai the forced

swimming test in ICR mice. Graduate school of Kyung-Hee university, Seoul, Korea. (2009))

본 고 염 과 알러지 에 여러 사 억 하 , 비만 포[0016]

타-헥 사미니 (β-hexosaminidase) 억 하 등 알러지 상 개 에 하

다 사실에 하여 고 함 하 알러지 개 공하 것에 특징

다.

상 고 통상 매 , 에탄 , 탄 , 탄 , 포 , 탄,[0017]

헥산, 에틸아 트 등 사 가 한 매 하여 하거 , 계 산 탄 통해 도

얻 , 또한 하여 얻어진 것 다시 함 욱 고 도 할 도 다.

또한, 본 상 고 고 비극 매 가 경우에 통상 [0018]

보다 월등 우 한 알러지 개 과 가진다 사실에 하 것 므 , 본 알러지 개

고 비극 매 가 함 하 것 욱 직하다.

상 비극 매 가 고 비하 단계; 상 고 알코 [0019]

하여 고 얻 단계; 상 고 비극 매 하 단계 포함하

에 해 다.

상 알코 탄 또 70% 에탄 다. 들어 고 건 량 10～40[0020]

등록특허 10-1181321

- 5 -

(w/v) 탄 또 70% 에탄 1 ～ 2 하고 3 ～ 4 복한 후, 여과, 동결 건

하여 고 얻 다.

상 단계에 얻어진 고 비극 매, 직하게 헥산(n-hexane), 포 (chloroform,[0021]

CHCl3) 에틸아 트(ethylacetate, EtOAc) 택 1 상 매, 욱

직하게 포 하여 비극 매 가 얻 다.

들어 동결 건 한 상 70% 에탄 10～40 (w/v) 에 후 n-헥산, 포 또[0022]

에틸아 트 차 3 복 하여 각 매별 계통 한 후 감압 하여 비극

매 가 얻 다.

상 고 , 에탄 과, 여러 β-hexosaminidase 에 미 향 사한[0023]

결과, 고 에탄 경우 10μg/mL, 50μg/mL, 100μg/mL 도에 각각 101.4%, 71.1%, 45.5%

도 억 시켰 , 경우 포생 에 향 미 지 않 도 50μ

g/mL 하 도에 비 하 , 50μg/mL에 β-hexosaminidase 헥산 (hexane

fraction), 포 (chloroform fraction), 에틸아 트 (ethyl acetate fraction)에

각각 73.98%, 15.23%, 51.84% 타내어 포 (chloroform fraction)에 억 과가 가

다 것 할 었다.

또한, 고 비만 포 비 염 사 TNF-α 생 억 가지[0024]

지에 하여 사한 결과, 에탄 도 TNF-α 비 억 시켜주 것 할

었 , 에 포 경우 특 우 한 억 타내 것 할

었다.

본 알러지 개 , 량에 하여 상 고 0.02 ～ 30 량% , [0025]

욱 직하게 1～10 량% 포함하 것 직하다.

본 실시 에 , 상 알러지 개 , 샴 , 닉, 워 등 [0026]

가지 료 다. 본 알러지 개 상 생약복합 에 가 지 ,

매, 해 , 겔 , 연 , 항산 , 탁 , 안 , 포 (foaming agent), 향

, 계 , , 또 비 , , 쇄 킬 트 , 보 , 비타

민, 차단 , 습 , 필 , 염료, 안료, 또 , 지질 낭 또 에 통상

사 보 함 할 다.

본 다 실시 에 , 상 알러지 개 사 액 , 연고, 취 또 등[0027]

가지 피 다.

또한 본 다 실시 에 , 상 알러지 개 알러지 개 건강 식 [0028]

다.

본 직한 여량 상태 체 , 질병 도, 약 태, 여경 간에 [0029]

다 지만, 당업 에 해 하게 택 다. 그러 직한 과 해 , 본

1 0.1 ～ 500㎎/㎏ , 직하게 1 ～ 200 ㎎/㎏ 여하 것 다. 여 하루에 한 여할

도 고, 어 여할 도 다. 상 여량 어 한 든 본 한 하 것

아니다.

[실시 ][0030]

하, 하 실시 시험 들 통하여 본 상 하게 하지만, 본 들에 하여 한[0031]

것 아니다.

1: 고 [0032]

고 (Zizania latifolia) 경상 도 경산시 하양 에 건 상태 것 하 다. 건 시료 100g에[0033]

30 (W/V) 탄 첨가하여 24시간 동안 하고, 3 복하 다. 액 여과지(Whatman

No. 3, Maidstone, England) 여과한 다 rotary vacuum evaporator(UT-1000, EYELA, Tokyo, Japan)

등록특허 10-1181321

- 6 -

한 후 동결건 하여 15.4g 얻었 , -20℃에 보 하 실험에 사 하 다.

시험 1:RBL-2H3 포 탈과립 찰[0034]

포주 양[0035]

본 시험에 사 한 RBL-2H3(KCLB No. 22256) 포 Rat 염 포주 Korea Cell Line[0036]

Bank(Seoul, Korea) 양 았 , 10% fetal bovine serum과 1% streptomycin/penicillin 함

MEM 지 양액 하여 37℃, 5% CO2 건 하에 양하 다.

RBL-2H3 포 24-well plate(2 × 105

cells/well)에 4시간 양한 후, 200 μL incubation buffer(119 mM[0037]

NaCl, 5 mM KCl, 0.4 mM MgCl2, 25 mM PIPES, 40 mM NaOH, 5.6 mM glucose, 1 mM CaCl2, 0.1% bovine serum

albumin, pH 7.2) 고 10 간 양하 다. 0.1% DMSO 액 상 1 도별 시료 25 μL 각

각 어 37℃에 10 간 시켰다. 후, compound 48/80(Sigma) 액 25 μL 첨가하여 40 간

시켰다. 후, 비만 포주 태 도립 미경(DM IRE2, Leica, Wetzlar, Germany) 600 하

에 찰하 다. 200 하에 체 탈과립 도 하 , 3 실험 재 하

다.

그 결과 도 1에 타내었다.[0038]

Compound 48/80 formaldehyde에 하여 cross-linked phenethylamine mixed polymer 비만 포 막[0039]

체에 하여 포 포 내 시켜 포 내 양 가시켜 비만 포 탈과립

도한다. 도 1에 같 Compound 48/80 처리하지 않 (도 1 1, 2 3) 상 비만

포주 태 원 또 원 포 곽 뚜 하고, 매 러운 갖 , compound 48/80 처

리 (도 1 4, 5 6) 어 탈과립 어 포 태 살 시 같 포 곽

하고 가 , 포질 내 과립들 돌 거 포주 에 어 것 볼 다.

Compound 48/80 처리하지 않고 시료만 처리한 경우(도 1 2 3), 탈과립 어 지 않아 포 태

에 변 가 없었 , compound 48/80만 처리한 경우(도 1 4) 내에 포 가 리가 규 하게

과립들 포 돌 습 찰할 었다. 또한, 50μg/mL 고 미

리 처리한 경우(도 1 3 6) 또 100μg/mL 고 미리 처리한 경우(도 1 2 5)에

compound 48/80에 한 포 탈과립 도 하게 억 것 찰할 었다.

시험 2: β-Hexosaminidase 에 한 고 억 과[0040]

RBL-2H3 포(2 × 105

cells/well) 450 ng/mL IgE 함께 CO2 incubator에 12시간 양하여 포 감[0041]

시켰다. 감 시 포 siraganian buffer(119 mM NaCl, 5 mM KCl, 0.4 mM MgCl2, 25 mM PIPES, 40 mM

NaOH, pH 7.2) 척한 후, 각 well당 160μL siraganian buffer(119 mM NaCl, 5 mM KCl, 0.4 mM MgCl2,

25 mM PIPES, 40 mM NaOH, 5.6 mM glucose, 1 mM CaCl2, 0.1% bovine serum albumin, pH 7.2) 고 20 간

양하 다. 상 1 각 도별 시료 5μM wortmannin(Wako Pure Chemical Industries, Tokyo,

Japan) 어 10 간 시 고, 10 μg/mL DNP-BSA(Alpha Diagnostic International, San Antonio,

TX78244, USA) 첨가한 후 다시 10 간 양하여 포 시켰 Ice bath에 지시켰다.

상 액 25 μL 96-well plate에 고, substrate buffer(p-nitrophenyl-N-acetyl-β-D-glucosaminide 1

mM in Citrate buffer 0.1 M, pH4.5) 25μL 후 37℃에 1시간 시켰다. 후, 각 well에 stop

solution(0.1 M Na2CO3/NaHCO3, pH 10) 200μL 첨가하여 지시 고, ELISA reader(Spectra MAX 340

pc, Molecular Device, Sunnyvale, CA, USA) 사 하여 405㎚에 도 하 다.


비만 포가 함 하고 과립에 타민 tryptase 등 다양한 알러지 상 하 매개체들 함[0043]

등록특허 10-1181321

- 7 -

어 어 항원에 한 러한 매개체들 비 하 것 매우 하다. β-Hexosaminidase 비만

포가 역학 타민과 함께 비 므 비만 포 탈과립 지

리 사 고 다.

에 RBL-2H3 포에 비 β-hexosaminidase 하여, 고 에 한 β-[0044]

hexosaminidase 억 과 검색하 다. 10, 20, 50, 100μg/mL 도 고 처리 포에

리 β-hexosaminidase 에 비해 각각 97%, 77%, 58%, 37% 타내어, 도

감 함 할 었 , IC50 값 73.8 μg/ml 타났다. 또한, 양 사 5μM

wortmannin 29% 타내어 β-hexosaminidase 강하게 억 시켜주 것 할 었다(*p <

0.05, **p < 0.01).

시험 3: TNF-α 비 억 과[0045]

RBL-2H3 포 24-well plate (2 × 105

cells/well)에 주한 후 12시간 양하 다. 새 운 MEM 지에 상[0046]

1 고 시료 도별 처리하고, A23187(1 μM)과 PMA(50 ng/mL) 처리하여 4시간

동안 양하 다. 양 후 상 액 리하여 -70℃에 보 하 다가 TNF-α ELISA kit(Invitrogen

Corporation, CA, USA) 사 하여 하 다. ELISA reader(Spectra MAX 340 pc, Molecular Device,

Sunnyvale, CA, USA) 사 하여 450nm에 도 하여 생 TNF-α 양 계산하 다.


TNF-α 비만 포 식 포 등에 생 어 많 염 하 , 알러지 염[0048]

에 한 역할 하 것 알 다. 고 비만 포 비 염

사 TNF-α 생 억 시켜 지 ELISA 사하 다. RBL-2H3 포에 비

TNF-α 양 아 런 처리 하지 않 경우 5.06 pg/mL 매우 낮았 , A23187 PMA 처리한 경우

87.14 pg/mL 가 것 하 다. 10, 50, 100μg/mL 고 처리한 경우 각

각 79.76, 65.38, 53.4 pg/mL 어, A23187 PMA만 처리한 에 비해 각각 91.5, 75, 61.3% 감

어 도 TNF-α 비 억 하 것 알 다. 또한, 양 사 1.43μ

g/mL luteolin 처리 경우 TNF-α 양 32.5 pg/mL 타 에 비해 37.3% 억 할

었다(*p<0.05, **p<0.01).

시험 4: 독 시험[0049]

IgE 감 포에 한 고 독 MTT assay 하 다. RBL-2H3 포(3 ×[0050]

104

cells/well)에 450 ng/mL DNP-specific IgE(Sigma, St. Louis, MO, USA) 처리하여 37℃, 5% CO2 건

에 하룻 양한 후 여러 도(10～100μg/mL) 고 포에 처리하 다. 12시간 후 각 well

에 5㎎/mL 도 MTT 액 10 μL씩 첨가하고 다시 4시간 동안 37℃ incubator에 양하 다. 지

거하고 100μL DMSO well에 생 formazan 결 해시켜 ELISA reader (Spectra MAX 340 pc,

Molecular Device, Sunnyvale, CA, USA) 사 하여 550nm에 도 하 다. 포독 시료

도 도에 한 타내었다.

IgE 감 RBL-2H3 포에 한 고 독 도 사하 해 MTT assay 행하 ,[0051]

그 결과 도 4에 타내었다. 포생 에 한 실험 포 생 타내었다. 고

실험에 사 0～100μg/mL 도에 12시간 동안 어 한 포독 도 타내지 않았다.

2: 고 [0052]

고 (Zizania latifolia) 경상 도 경산시 하양 에 건 것 하 , 사 하 다. 건[0053]

량 30 (w/v) 70% ethanol 어 3 , 여과(No. 3 filter paper, Whatman, Maidstone, UK)하

등록특허 10-1181321

- 8 -

고 rotary evaporator 한 후 동결건 하여 -70℃에 보 하 실험에 사 하 다. 고 70% 에탄

하여 , 동결건 한 후 고 한 결과 15.1% 타났다.

실시 1 ～ 5: 고 [0054]

동결 건 한 상 2 70% 에탄 30 (w/v) 에 후 n-hexane, chloroform,[0055]

ethyl acetate n-butanol 차 3 복 하여 각 매별 계통 하 고,

water 감압 하여 매 시 -70℃에 보 하 실험에 사 하 다.

각각 0.94%, 0.55%, 0.23%, 1.21%, 10.43% 타났다.

시험 5: β-Hexosaminidase 억 과 [0056]

상 시험 2에 같 상 2 고 에탄 과 상 실시 1～5 [0057]

β-hexosaminidase 에 미 향 사하 다.


고 에탄 경우 10 μg/mL, 50 μg/mL, 100 μg/mL 도에 각각 101.4%, 71.1%, 45.5% 억[0059]

타내어, 상 1 탄 보다 약하지만 사한 경향 타냄 할 었다.

또한, 상 실시 1 ～ 5 경우 포생 에 향 미 지 않 도 50 μg/mL 하 도

에 비 하 , 가 도 50 μg/mL hexane fraction, chloroform fraction, ethyl

acetate fraction, butanol fraction, water fraction 각각 β-hexosaminidase 에 비해

73.98%, 15.23%, 51.84%, 81.31%, 71.86% 감 시켜 chloroform fraction 억 과가 가 할

었다 (*p < 0.05, **p < 0.01). 해 고 에 알러지 억 과 타내 들 비극

에 재한다 것 할 다.

시험 6: TNF-α 비 억 과[0060]

상 시험 3에 같 β-Hexosaminidase 억 가 았 포 택[0061]

하여 TNF-α 비 억 과 하 다.


아 런 처리 하지 않 경우 RBL-2H3 포에 비 TNF-α 양 거 0 pg/mL 었 , A23187과[0063]

PMA 처리하 에 101.4 pg/mL 하게 가하 다. 그러 5, 10, 25, 50 μg/mL 포

처리하 에 각각 100.7, 73.4, 43.6, 22.4 pg/mL 타 에 비해 각각 99.3, 72.3,

42.9, 22.1% TNF-α 생 감 것 할 었다(**p < 0.01).

시험 : Western blot 한 알러지 억 [0064]

RBL-2H3 포(1 × 106

cells/well) 6-well plate에 450 ng/mL IgE 함께 CO2 incubator에 12시간 양[0065]

한 다양한 도 시료 처리하여 30 양한 다 항원 처리하여 15 또 4시간 양하 다. 각

포에 lysis buffer(1 M Tris-HCl, 0.5 M EDTA, 1% Triton X-100, 100 mM PMSF) 첨가하여 lysis 시 후

BCA(Bicinconinic acid) kit 단 질 량하 다. 단 질 도 20 μg 하여 10% SDS-polyacryl-

amide에 loading하여 125 V 동 하 다. 동하여 리한 단 질 Immobilon-P transfer

membrane과 transfer buffer (20% methanol, 25 mM Tris-HCl, 192 mM glycine) 사 하여 350 mA에 120

간 transfer시 고 5% non-fat skim milk solution blocking하 다. TTBS 액에 1:1000 한 차

항체(COX-2, p-ERK, p-JNK, p-P38, p-AKT) 4℃에 12시간 시 후 TTBS 3 하고, 1:2000

anti-rabbit IgG conjugated horse radish peroxidase(HRP) 차 항체 상 에 2시간 시 후

TTBS 척하 다. 항체 membrane에 ECL 진단 kit 처리하고 X-ray film에 하여 상한 후

band 하 다.

등록특허 10-1181321

- 9 -

시험 7: cyclooxygenase-2(COX-2) 에 미 향[0066]

비만 포 내 COX-2 arachidonic acid 염 과 알러지 상 질 eicosanoids 프[0067]

타 생합 매개하 여러 극에 해 도 다.

에 고 포 (chloroform fraction) COX-2 단 질 할 지 알아[0068]

보 해 상 western blot 실시하여 비만 포 내에 COX-2 양 하 다.


극 주지 않 경우에 비해 극 주었 COX-2 가하 5～50 μg/mL 포 [0070]

(chloroform fraction) 처리하 경우 도 감 하 것 할 었다.

고 포 (chloroform fraction) COX-2 해 통해 프 타 생

억 시켜 알러지 염 감 시켜주 것 단 다.

시험 8: mitogen activated protein kinase(MAPK) 산 에 미 향[0071]

MAPK 하 질에 ERK, JNK p38 MAPK 가지 그룹 다. MAPK 들 포 [0072]

식과 그 다양한 생 학 하 , 특 감염에 해 사

지질매개 질 등 염 매개 질 생 도하 한 역할 하 것 알 다. 본

시험 에 비만 포에 생하 MAPK 들 산 에 한 고 chloroform fraction

억 과 사하 다.


극 주지 않 경우에 비해 극 주었 MAPK 들 산 가 가하 5～50 μg/mL 고[0074]

chloroform fraction 처리하 도 들 산 가 감 것 할 었다.

고 chloroform fraction MAPK 들 산 감 통해 염 매개 질 생 감 시켜 알

러지 억 시 것 단 다.

시험 9: protein kinase B (Akt) 산 에 미 향[0075]

비만 포 식과 사 생 에 한 역할 하 , PI3-K 지 질 Akt 산 에 미[0076]

고 포 (chloroform fraction) 향 사하 다.


극 주지 않 경우에 비해 극 주었 Akt 산 가 가하 5～50 μg/mL 고 [0078]

포 (chloroform fraction) 처리하 산 가 감 것 할 었다. 고

포 (chloroform fraction) Akt 산 억 통해 비만 포 식 하고 사

생 억 시켜 것 단 다.

시험 10: T 림프 역 과 검색[0079]

포 양[0080]

T 포주 MOLT-4 Korean Cell Line Bank (KCLB) 양 아 사 하 다. MOLT-4 포 양에 15%[0081]

FBS 1% antibiotics 함 한 RPMI1640 지 사 하 다. MOLT-4 5% CO2가 재하 37℃ incubator에

양하 1주 에 3～4 계 양하 다.

MOLT-4 포 양액 내에 비 IFN-γ IL-4 ELISA kit 사 하여 하 다. MOLT-4[0082]

포(5 × 105

cells/well) 6-well plate에 주하여 30 간 양한 후, 포 도별 시료

처리하여 다시 24시간 양하 다. 양 후 원심 리 하여 상 액 리하 , 상 액 -70℃에 보

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하 다가 사 하 다.

비만 포 뿐만 아니 T 포 또한 역 에 한 역할 하 , 들 생 하 단 질에 1[0083]

(Th1)과 2 (Th2) 다. Th1 포가 비하 IFN-γ, IL-2, IL-12 등 질 가 역질

향 , Th2 포가 비하 IL-4 IL-5 등 질 알러지 질 향

에 들 균 맞 어주 것 또한 알러지 질 에 하다고 할 다.

에 사 T 포주 MOLT-4 하여 고 포 (chloroform fraction) T 포[0084]

사 비에 미 향 사하 , 그 결과 도 10에 타내었다. 고 포

(chloroform fraction) Th1 포가 비하 사 가시켜주고 Th2 포가 비하 사

감 시켜 것 상하고 실험 진행하 , 고 포 T 포 사 비에

향 미 지 않 것 타났다. 고 포 (chloroform fraction) T 포

역 에 향 미 지 않고 비만 포에만 택 향 미 것 단 다.

시험 11: 독 시험[0085]

상 시험 4 동 한 2 고 70% 에탄 과 실시 1～5 각 포독[0086]

하 그 결과 도 11에 타내었다.

10～100 μg/mL 사 도에 포독 한 결과 70% 에탄 과 hexane fraction, ethyl[0087]

acetate faction, butanol fraction water fraction 사 도에 어 한 포독 도 타내지 않았

, chloroform fraction 100 μg/mL 도에 약 77.3% 포생 타내었다.

실시 1: [0088]

하 1과 같 가지 하 다.[0089]

1

[0090] 함량( 량%)

고 (실시 2) 20

C14～22 알코 /C12～20 알킬 루코시드 1.5

헤닐 알코 1.0

쿠알 8.5

1,3- 틸 리콜 4.0

향,색 미량

량

합계 100

실시 2: 샴[0091]

하 2 같 가지 샴 하 다.[0092]

2

[0093] 함량( 량%)

암 우 트 12.0

암 우릴 트 4.0

코 미도프 필 타 7.0

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알킬폴리 리코사 드 1.5

폴리쿼 10 0.5

리 린 1.5

고 ( 2) 20.0

향료 0.2

량

합계 100

실시 3: 건강 료[0094]

하 3과 같 가지 건강 료 하 다.[0095]

3

[0096] 함량

고 ( 2) 1000㎎

연산 1000㎎

리고당 100g

타우린 1g

량

합계 900ml

도 간단한

도 1 본 고 탄 탈과립 억 과 타내 사진도 다.[0097]

도 2 본 고 탄 타-헥 사미니 (β-hexosaminidase) 억 과 타내[0098]

그 프 다.

도 3 본 고 탄 사 억 과 타내 그 프 다.[0099]

도 4 Rat 비만 포주 RBL-2H3 cell에 한 본 고 탄 독 시험결과 타내[0100]

그 프 다.

도 5 본 고 에탄 타-헥 사미니 (β-hexosaminidase) 억 과[0101]

타내 그 프 다.

도 6 본 고 에탄 사 억 과 타내 그 프 다.[0102]

도 7 본 고 포 (chloroform fraction) COX-2 해 타내 그 프[0103]

다.

도 8 본 고 포 (chloroform fraction) 비만 포에 생하 MAPK 들 [0104]

산 에 한 억 타내 그 프 다.

도 9 본 고 포 (chloroform fraction) Akt(protein kinase B) 산 억[0105]

타내 그 프 다.

도 10 사 T 포주 MOLT-4 하여 본 고 포 (chloroform fraction) T[0106]

포 사 비에 미 향 타내 그 프 다.

도 11 Rat 비만 포주 RBL-2H3 cell에 한 본 에탄 독 시험결과[0107]

타내 그 프 다.

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도

도 1

도 2

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도 3

도 4

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도 5

도 6

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도 7

도 8

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도 9

도 10

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도 11

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(19) 대한민국특허청(kr) (12)...

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