15.11.2011 - la fotometria nel campo delle analisi del vino
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Lezione tenuta da Simone Bellassai - CDR WineLab Specialist - il 15.11.2011 agli studenti del corso di Enologia I (Prof.ssa Fia - Facoltà di Agraria - Università di Firenze)TRANSCRIPT
- 1. CdR-WineLab A cura del dott. Simone Bellassai
2. CdR
- Le competenze di CdR sono:
- Progettazione meccanica e micro-meccanica
- Fotometria
- Biochimica
- Progettazione elettronica e del software
3. Telematica
- Compucard
- Lepar
4. Diagnostica medica CL Analyzer Ves Ves - mouse Tritek MetaLab-Vet 5. Diagnostica alimentare FoodLab / FoodLabFat Oxitester-K270 / Palmoil tester FoodLab Latte eprodotti caseari: - e-Fruttosil lisina- Acido lattico - Ammoniaca - Cloruri - Fosfatasi alcalina - Perossidasi - Acqua Ossigenata - Urea Puree vegetali: -Acido lattico - Cloruri Pomodoro: -Acido lattico - Glucosio Uovo: -Acido 3-idrossibutirrico - Colesterolo FoodLabFat Analisi su oli e grassi: - Acidit - p-Anisidina (AnV) -Perossidi -Saponi Frutta secca: - Acidit - Perossidi Analisi su olio d'oliva: -Acidit -Perossidi -Polifenoli -K270 Analisi su olio di palma: -Acidit -Perossidi -N Iodio -Dobi-Carotene 6. Diagnostica alimentare WineLab Analisi su vino Analisi su mosto Analisi su uve 7. Diagnostica alimentare WineLab AntocianiSO 2libera SO 2totale Acido Malico Acido lattico Glucosio e fruttosio Grado alcolico pH Acidit totale Acidit volatilePolifenoli A.P.A. 8. Spettrofotometria Se c' assorbimento!! I 0 I
- La spettrofotometria una tecnica che si basa sull'assorbimento selettivo,da parte di una molecola, di una radiazione ad una determinata lunghezza d'onda.
- Sorgente
- Monocromatore
- Campione
- Rivelatore
9. Radiazione elettromagnetica h : costante di Plank n :frequenza c:velocita della lucel :lunghezza d'onda 10. Spettrofotometria g XUVUV-visIR / M. OndeOnde Radio Radiazione elettromagnetica 11. Spettro I 0 I Cosa questa grandezza?
- Sorgente
- Monocromatore
- Campione
- Rivelatore
12. Trasmittanza - Assorbanza I 0 I
- Sorgente
- Monocromatore
- Campione
- Rivelatore
13. Legge di Lambert - Beer Legge di Lambert-Beer A= bC I 0 I C: concentrazione dell'analita b: spessore della cella e:coefficiente di estinzione molare A=k C
- Sorgente
- Monocromatore
- Campione
- Rivelatore
14. Correlazione ISVEA
- Il sistema CdR WineLab validato da ISVEA 15. E' un sistema che non necessita di calibrazione, in quanto correlato ai metodi di riferimento ufficiali.
Cosa significa? 16. Correlazione con ISVEA
- ISVEA ha validato il WineLab testando i metodi CdR su un elevato numero di campioni di varie tipologie di vino ed analizzando gli stessi anche con i metodi di riferimento abitualmente utilizzati. 17. Questo lavoro di correlazione, durato circa 6 mesi, ha portato a delle curve di calibrazione con ottimi coefficienti di correlazione (R 2 ).
Ac. Malico =K (Segnale) +q K : coefficiente angolare q : termine noto Ottenuto dalWineLab Ottenuto dal metodo di riferimento R 2 =0,986 18. Correlazione con ISVEA R 2 =0,97 R 2 =0,98 R 2 =0,98 19. WineLab Il sistema CdR-WineLab costituito da:
- Fotometro termostatato con emettitori a stato solido (LED). 20. I kit sono costituiti da provette preinfialate. 21. Pipette 22. Print Manager , software per scaricare i dati su PC 23. Metodiche analitiche ed illustrate 24. 3 anni di garanzia
25. WineLab
- Qual il target del WineLab?
Piccola, media o grande cantina Consulente enologico / vitivinicolo 26. WineLab
- Il WineLab esegue analisi incineticaedend point
CINETICA END-POINT 27. WineLab
- Nell'analisi incineticalo strumento misura istante per istante l'aumento/diminuzione di assorbanza, che avviene in modo lineare con il tempo. Il WineLab calcola il coefficiente angolare, il quale correlato alla concentrazione dell'analita.
28. WineLab
- Nell'analisi in end pointlo strumento legge l'assorbanza del bianco (A 1 ), successivamente l'aggiunta di un reagente provoca l'aumento dell'assorbanza, la quale in un determinato tempo di incubazione si stabilizza. Lo strumento legge quindi questo valore (A 2 ). La differenza A=A 2 -A 1 correlata alla concentrazione di analita.
29. Specifiche tecniche 30. Glucosio e fruttosio
- Il principio del metodo si basa su una reazione enzimatica che coinvolge glucosio e fruttosio. La reazione utilizza il cofattore NADH (Nicotinammide dinucleotide), il quale in rapporto stechiometrico 1:1 con glucosio e fruttosio. Tale molecola presenta un assorbimento a 366nm, ed quindi utilizzata per determinare la concentrazione dei due zuccherifermentescibiliescludendo quindi i pentosi che non sono assimilati dai lieviti. 31. Il metodo utilizzato una reazione di end -point con un tempo di incubazione di 5 min.
32. Le reazioni enzimatiche Glucosio 33. Glucosio e fruttosio Fruttosio 34. Glucosio e fruttosio
- Determinazione degli zuccheri fermentescibili!! Escludendo quindi i pentosi che non sono utilizzati dai lieviti. 35. Ho una detection limit di 0,1 g/L! Posso sapere con elevata precisione quando finita la fermentazione alcolica. 36. Si eseguono fino a 30 test/ora.
Vantaggi del metodo CdR-WineLab 37. Azoto inorganico (ammonio) Azoto organico(a -amminico) Azoto prontamente assimilabile Assorbe a 366nm 38. Azoto Prontamente Assimilabile Vantaggi del metodo CdR-WineLab
- Permette di determinare separatamente i contributi relativi all'azoto inorganico (NH 4 + ) e a quello organico ( a -amminico). 39. Non risente dell'interferenza di prolina ed idrossiprolina 40. Si eseguono fino a 30 test/ora.
41. In conclusione....
- Il WineLab uno strumento rapido, semplice ed affidabile, che permette di seguire il processo di vinificazione dall'inizio alla fine.
- Rende una cantina autonoma dal punto di vista analitico fornendo dati in tempo reale.
- D l'opportunit ad un enologo di fare consulenza analitica/enologica senza aprire un laboratorio!!
42. CdR- WineLab Grazie perl'attenzione
- CDR S.r.l. Via degli Artigiani, 650055 - Ginestra F.naFirenze - ItalyTel. +39.055.871431Fax +39.055.8714322 www.cdr-mediared.com www.foodlab.it Dott. Simone Bellassai [email_address]