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농림수산식품부 장관 귀하

본 보고서를 산육능력향상 식품안전성확보 및 수정능력유지가 가능한 웅취제거기법 개발 과제“ , ”

의 최종보고서로 제출합니다.

년 월 일2012 06 18

주관연구기관명 고려대학교：

주관연구책임자 이 동 호：

연 구 원： 김 나 현

연 구 원： 김 금 옥

연 구 원： 권 재 영

연 구 원： 차 수 정

연 구 원： 김 선 희

연 구 원： 정 선 아

세부연구기관명 고려대학교：

세부연구책임자： 김 세 헌

연 구 원： 이 진

연 구 원 최： 승 혜

세부연구기관명 고려대학교：

세부연구책임자： 홍 기 창

연 구 원： 김 준 모

연 구 원： 임 규 상

연 구 원： 이 은 아

연 구 원： 강 지 훈

협동연구기관명 새원앤엘주식회사：

협동연구책임자： 나 종 주

연 구 원： 송 정 근

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β

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β

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β

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β

β

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· ·

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β

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β β

μ μ

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β β

β β

β

μ μ

μ μ μ

β

β

β

β

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β

β

β

β

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μ

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Treatment DMSO DMSO+MLTC-1 DMSO+MLTC-1 갈근+

Androstenone 0.182a ± 0.005 0.035b ± 0.005 0.012c ± 0.005

β β

β

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β

β

μ

μ μ

β

β

β

β

β

β

β

β

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β

β

β

β

μ μ μ

β

β

β

β

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β

β

β

β

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자돈사료 기간 급여량 두(kg/day/ ) 총사료량

1 주4 0.11 0.11kg x 28day x 25두 = 77kg

2 주2 0.65 0.65kg x 14day x 25두 = 228kg

3 주2 1.00 1.00kg x 14day x 25두 = 350kg

starter 주6 1.70 1.70kg x 42day x 25두 = 1,785kg

합 계 주14 2,440kg

자돈사료 기간 급여량 두(kg/day/ ) 총사료량

Grower 주6 3 3kg x 42day x 20두 = 2,520kg

Finisher 주5 3 3kg x 35day x 20두 = 2,100kg

합 계 주11 4,620kg

N 총사료량(kg)1 갈근첨가(kg) 유산균첨가(kg)

대조구1) 5 1,400

갈근2) 5 1,400 7.00

유산균3) 5 1,400 0.70

갈 유4) + 5 1,400 7.00 0.70

20 14.00 1.40

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차례 모돈번호 분만일 이표번호 산차

1 10-84-85 월 일9 7 1, 2, 3 2

2 09-25-7 월 일9 7 4 4

3 07-35-35 월 일9 7 5 9

4 10-40-1 월 일9 6 6, 7, 8 1

5 10-41-63 월 일9 7 9, 10, 11 1

6 10-42-22 월 일9 9 12, 13, 14, 15 1

7 10-85-31 월 일9 8 16, 17, 18, 19, 20 2

8 10-85-43 월 일9 8 21, 22, 23, 24 2

9 09-45-12 월 일9 8 25, 26, 27 3

10 09-128-102 월 일9 7 28, 29 4

11 07-64-65 월 일9 7 30 9

총 두: 30

β

β

β

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μ μ μ

β

β

β

β

β

β

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β β

β

　 3 -HSD/β

-actinβS.E

Control 0.748 0.063

갈근 0.927 0.044

유산균 0.874 0.036

갈근 + 유산균 0.765 0.038

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strains

내산성

(Log number of CFU/ml)

0 hour 3 hour

7PL3 7.73 5.50

A4 6.96 6.50

5PS2 7.87 7.20

5WL3 6.61 5.86

107A 7.18 5.50

1GS2 6.72 5.94

1YL3-1 6.70 3.86

1BS 6.76 5.37

5GS2 7.53 7.42

1WL1-1 7.83 7.23

1RS1 6.72 0.00

7RS2-1 6.86 0.00

strains내담즙성 (Log number of CFU/ml)

0 hour 24 hour

7PL3 7.81 8.57

A4 7.19 5.85

5PS2 7.79 5.93

5WL3 6.79 8.74

107A 7.15 5.29

1GS2 6.49 8.25

1YL3-1 6.77 8.74

1BS 6.73 8.90

5GS2 7.64 7.89

1WL1-1 7.78 5.74

1RS1 6.67 8.61

7RS2-1 6.58 8.52

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strains크기 투명도 박테리오신Inhibitor zone / ( )

cell supernatant

7PL3 - -

A4 ++ ++

5PS2 - -

5WL3 - -

107A - -

1GS2 - -

1YL3-1 - -

1BS - -

5GS2 - -

1WL1-1 - -

1RS1 - -

7RS2-1 - -

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strainsO hour 2 hour

mean S.E. mean S.E.

7PL3 9.07 0.01

A4

5PS2

5WL3

107A

1GS2

1YL3-1

1BS

5GS2 9.95 0.03 7.86 0.06

1WL1-1

1RS1

7RS2-1

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StrainsLog number of CFU/mL

초기 농축 동결 산소접촉

7PL3 7.30 7.93 7.92 7.95

A4 8.80 9.22 9.19 9.15

5PS2 9.84 10.08 9.48 9.51

5WL3 8.68 8.68 8.64 8.78

107A 9.04 9.42 9.24 9.05

1GS2 8.41 8.74 8.28 8.58

1YL3-1 8.81 8.70 8.56 8.65

1BS 8.62 8.51 8.73 8.74

5GS2 9.74 10.11 9.14 9.44

1WL1-1 9.76 10.12 9.45 9.49

1RS1 8.81 8.52 8.13 8.50

7RS2-1 8.31 8.38 8.26 8.17

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Dextrose 20.0 5.0

Beef extract 10.0 0.0

Proteose peptone No.3 10.0 0.0

Yeast extract 5.0 2.0

Sodium acetate 5.0 0.0

Ammonium citrate 2.0 2.0

Dipotassium phosphate 2.0 2.0

Magnesium sulfate 0.1 0.1

Manganese sulfate 0.05 0.05

Tween 80 1.0 1.0

Skatole 0.0 70

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Strains 시간 Glucose F.O.S Tagatose Xylitole

5GS20hr 6.40 6.45 6.43 6.44

48hr 3.70 5.96 3.74 6.36

5PS20hr 6.39 6.42 6.43 6.44

48hr 3.55 4.06 6.34 6.40

1WL1-10hr 6.37 6.40 6.45 6.44

48hr 3.69 3.77 6.35 6.28

5WL30hr 6.51 6.54 6.52 6.51

48hr 4.96 6.44 6.52 6.37

1GS20hr 6.46 6.51 6.49 6.53

48hr 4.87 5.60 6.30 6.35

1BS0hr 6.46 6.50 6.48 6.49

48hr 4.86 5.88 6.59 6.50

A40hr 6.41 6.47 6.45 6.45

48hr 5.40 5.44 6.31 6.38

5PS2

Time

0h 6h 12h 24h 30h 36h 48h

O.D

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

1.2

1.4

1.6

GlucoseFOSTagatoseXylitose

5GS2

Time

0h 6h 12h 24h 30h 36h 48h

O.D

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

1.2

1.4

1.6

GlucoseFOSTagatoseXylitole

5WL3

Time

0h 6h 12h 24h 30h 36h 48h

O.D

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

1.2

1.4

GlucoseFOSTagatoseXylitole

1BS

Time

0h 6h 12h 24h 30h 36h 48h

O.D

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

1.2

1.4

Glucose

FOS

Tagatose

Xylitole

1GS2

Time

0h 6h 12h 24h 30h 36h 48h

O.D

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

1.2

1.4

GlucoseFOS

Tagatose

Xylitole

1WL1-1

Time

0h 6h 12h 24h 30h 36h 48h

O.D

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

1.2

1.4

Glucose

FOSTagatose

Xylitole

A4

Time

0h 6h 12h 24h 30h 36h 48h

O.D

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

1.2

1.4

1.6

Glucose

FOS

TagatoseXylitole

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* *

Strains

선발( prebiotics) Glucose Prebiotics Glucose Prebiotics

5PS2 (F.O.S)

5GS2 (Tagatose)

1WL1-1 (F.O.S)

5WL3 (F.O.S)

1GS2 (F.O.S)

1BS (F.O.S)

A4 (F.O.S)

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Ingredient 조성MRS (g/L)

Dextrose 20.0

Beef extract 10.0

Proteose peptone No.3 10.0

Yeast extract 5.0

Sodium acetate 5.0

Ammonium citrate 2.0

Dipotassium phosphate 2.0

Magnesium sulfate 0.1

Manganese sulfate 0.05

Tween 80 1.0

Skatole 0.0

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β

β

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β

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β

β

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β

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β

β

β

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β

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β

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β

μ

μ

β

β

β

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β

β

β

β

β

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β

β

β

β

μ

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β

β

β

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β

β

β

β

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β β

β β

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산육능력향상, 식품안전성확보 및 수정능력유지가 가능한 웅취제거기법 개발 요약문목차제1장 연구개발과제의 개요제1절 연구개발의 목적제2절 연구개발의 필요성제3절 연구개발의 범위

제2장 국내외 기술개발 현황제3장 연구개발 수행 내용 및 결과제1절 간세포 내 androstenone 분해활성물질 발굴제1항 간세포 내 androstenone 분해활성물질의 시험관 내 효능 평가제2항 간세포 내 androstenone 분해활성물질의 소동물(생쥐) 모델에서 효능 평가제3항 돼지모델에서 androstenone 분해활성물질의 효과 검증

제2절 장 내 skatole 생성 미생물의 제어기술 개발제1항 돼지 정상균총에서의 total bacteria의 분리 및 정제제2항 선발된 균주의 skatole 생성저하능력 In vitro 실험 및 screening제3항 최종 선발된 prebiotic균주들 이용한 사료첨가제의 개발 및 효능 입증

제3절 사료첨가제 생산공정 개발제1항 사료첨가제용 기초사료 선정제2항 실험용 사료첨가제 개발 및 생산제3항 웅취제거용 사료첨가제 생산공정 개발

제4절 웅취원인물질관련 DNA표지인자 개발제1항 웅취원인물질 관련 후보유전자 분석제2항 웅취관련 DNA표지인자 개발제3항 개발된 DNA표지인자의 실용화방안 마련

제4장 목표달성 및 기여도제1절 간세포 내 androstenone 분해활성물질 발굴제2절 장 내 skatole 생성 미생물의 제어기술 개발제3절 사료첨가제 생산공정 개발제4절 웅취원인물질 관련 DNA표지인자 개발

제5장 연구개발 성과 및 성과활용 계획제1절 추가 연구의 필요성제2절 타 연구에의 응용

제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보제7장 참고문헌