1-2 el microscopio
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EL MICROSCOPIO
Vanessa V. Valdés S. M.Sc.
UNIVERSIDAD TECNOLÓGICA DE PANAMÁ
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HISTORIA: EL INVENTO
❚ Se inventó, hacia 1610, por Galileo, según los italianos, o por Jansen, en opinión de los holandeses
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EL NOMBRE
❚ La palabra microscopio fue utilizada por primera vez por los componentes de la "Accademia dei Lincei“
❚ Micro=pequeño❚ Scopein=ver
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GALILEO GALILEI
❚ La “Accademia dei Linceii” era una sociedad científica a la que pertenecía Galileo y publicaron un trabajo sobre la observación microscópica del aspecto de una abeja
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MALPIGHI
❚ Las primeras publicaciones importantes aparecen en 1660 y 1665 cuando Malpighi observa los capilares sanguíneos y Hooke publica su obra Micrographia
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ANTONY VAN LEENWENHOEK
En el siglo XVII un comerciante holandés, utilizando microscopios simples de fabricación propia describió por primera vez protozoos, bacterias, espermatozoides y glóbulos rojos
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MICROSCOPIO DE LEEUWENHOEK
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CARACTERÍSTICAS DEL MICROSCOPIO DE LEEUWENHOEK
❚ El primitivo microscopio de Leeuwenhoek tenía dos lupas combinadas con las que llegó a alcanzar 260 aumentos, lo cual le permitió visualizar algunos protozoos e infusorios
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MICROSCOPIOS DEL SIGLO XVIII
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ERNST ABBE
❚ Las mejoras mas importantes de la óptica surgieron en 1877 cuando Abbe publica su teoría del microscopio
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CALR ZEISS
❚ Mejora la microscopía de inmersión sustituyendo el agua por aceite de cedro lo que permite obtener 2000 aumentos
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FUNDAMENTO DE LA MICROSCOPÍA
❚ Cuando el observador se acerca el objeto se agranda
❚ Pero a menos de 25 cm no se ve con claridad
❚ Si se aumenta el ángulo visual se ve con claridad
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EVOLUCIÓN DEL MICROSCOPIO
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ESQUEMA DEL MICROSCOPIO
❚ Un tubo cilíndrico aloja el sistema óptico ocular/objetivo. Una platina de original diseño permite observar las preparaciones, que son iluminadas por un espejo cóncavo que concentra la luz sobre el objeto a estudiar.
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PARÁMETROS ÓPTICOS
❚ Aumento❚ Poder de
resolución❚ Nº de campo❚ Profundidad de
foco❚ Contraste
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AUMENTO
❚ Se calcula multiplicando el aumento del objetivo por el aumento del ocular
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PODER DE RESOLUCIÓN
❚ Distancia si dos puntos se distinguen
❚ Mayor, cuando menor es la longitud de onda
❚ Mayor, cuanto mas grande es la apertura numérica
❚ Mayor, con aceite de cedro
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Número de campo
❚ Es el diámetro de la imagen observada a través del ocular, expresado en milímetros
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PROFUNDIDAD DE CAMPO
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CONTRASTE
❚ Diferencia de absorción de luz entre el objeto y el medio
❚ Puede aumentarse con las tinciones
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BUENOS PARÁMETROS
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MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO
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PARTE MECÁNICA QUE SE PUEDE DESMONTAR
Estativo
Oculares
ObjetivosCondensador
CabezalTornillos
de la platina
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SISTEMA DE SOPORTE O ESTATIVO
Píe
Brazo
Tubo
Platina
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SISTEMA DE AJUSTE (1)
Anillo de ajuste de los
oculares
Tornillo que permite mover el cabezal
Tornillos reguladores de la platina
Tornillos del condensador
Palanca de cierre del diafragma
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SISTEMA DE ENFOQUE
Tornillo micrométrico
Tornillo macrométrico
Freno
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PLATINA
Escala
Pinza
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PARTE ÓPTICA
❚ Sistema de iluminación: fuente de luz, condensador y diafragma
❚ Lentes: objetivos y oculares
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SISTEMA DE ILUMINACIÓN: FUENTE DE LUZ
❚ Suele ser una lámpara halógena de intensidad graduable
❚ Se enciende y apaga con un interruptor
❚ En el exterior puede tener un filtro
Interruptor y graduación de la luz
Lámpara
Filtro
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CONDENSADOR Y DIAFRAGMA
❚ Condensador: concentra la luz de la lámpara en un punto de la preparación
❚ Diafragma o iris (está dentro del condensador):si se cierra mejora el contraste, pero empeora la resolución
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LENTES: OBJETIVOS
❚ Están colocados en el revolver
❚ Tienen un sistema de amortiguación
❚ Un anillo coloreado indica los aumentos
❚ Son de 4, 10, 40 y 100 (inmersión) aumentos
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OBJETIVOS
Azul40x
Amarillo10x
Rojo4x
Blanco100x
Amortiguación
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LENTES: OCULARES
Ajuste de la distancia interpupilar
Oculares
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OCULARES: 10x; 15x; 20x
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TETRAOCULARES
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MATERIAL NECESARIO: PORTAS Y CUBRES
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ACEITE DE INMERSIÓN
❚ Hoy no son de madera de cedro, sino sintéticos
❚ Los hay de baja, media y alta viscosidad
❚ Su empleo es imprescindible con el objetivo de inmersión (100x)
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MANEJO DEL MICROSCOPIO
❚ No poner la preparación al revés
❚ Regular la luz a intensidad media
❚ Ajustar condensador y diafragma al medio
❚ Empezar por poco aumento
❚ Mirando por fuera subir la platina
❚ Enfocar y ajustar❚ Pasar al siguiente
aumento y enfocar❚ Al acabar retirar la
preparación❚ Apagar la luz
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CONSERVACIÓN DEL MICROSCOPIO
❚ Ponerle su funda al guardarlo
❚ Limpieza de lentes con papel de gafas
❚ El exceso de xilol al limpiar las lentes desgasta el cemento
❚ Usar pincel y pera de aire
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TIPOS DE MICROSCOPIOS
Tipos demicroscopios
Microscopioóptico
Microscopioelectrónico
MicroscopioÓptico Simple
MicroscopioÓpticoCompuesto
M.O. NormalCampo oscuroContraste de fasesFluorescencia
TransmisiónBarridoDigitalEfecto túnel o cuántico
Lupa
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PODER DE OBSERVACIÓN DEL MICROSCOPIO
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MICROSCOPÍA DE CAMPO OSCURO
Treponema pallidum
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MICROSCOPÍA DE CONTRASTE DE FASES
Células epiteliales 20 x
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MICROSCOPIA DE FLUORESCENCIA
Células epiteliales 200 x
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ERNST RUSKA
❚ El microscopio electrónico de transmisión (T.E.M.) consiguió aumentos de 100.000 X. Fue desarrollado por Max Knoll y Ernst Ruska en Alemania en 1931
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PRIMER MICROSCOPIO ELECTRONICO
❚ Utilizó un haz de electrones en lugar de luz para enfocar la muestra.
❚ Posteriormente, en 1942 se desarrolla el microscopio electrónico de barrido (SEM).
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PRIMER M.E. EN ESPAÑA (1949)
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MICROSCOPIO ELECTRÓNICO
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MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE BARRIDO
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M.E. DE TRASMISIÓN
Bacilos en división
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M.E DE BARRIDO
Glóbulo rojo
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M.E. DE BARRIDO
Glóbulo blanco
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FIN