신제품 출시 - EliA MPOS

Why a new EliA MPOS test?

검사성능 개선 기존의 EliA MPO 에서 민감도 향상 타사 제품보다 월등한 성능

EliA PR3S 와 함께 성능개선 두 가지 검사 모두 anchor technique 을 이용하여 ANCA

검사의 성능향상

새로운 international reference 에 따라 표준화 , International Units (IU/ml) 단위의 결과 제공

The new sensitive anti-MPO test

“S” 는 ” sensitivity” 를 의미 High sensitivity 는 anchor technique 를 이용한 indirect coating 방법으로

antigen 이 더 잘 보이도록 해서 얻은 결과

Product name Package size Article number

EliA MPOS Well 48 14-5537-01 new

EliA MPOS - Calibration

CDC MPO-ANCA Human Reference Serum #15 와 일치하는 calibration curve 를 사용하여 International Units (IU/ml) 으로 결과 산출

따라서 , 기존의 EliA MPO 검사와 다른 참고치를 적용

negative < 3.5 IU/ml equivocal 3.5 – 5.0 IU/ml positive > 5.0 IU/ml

EliA MPOS - Blood Donors and Normal Range400 blood donors were measured on Phadia 250.A substudy using 70 blood donors showed good comparison of Phadia 100.

0 1 2 3 4 5 60

20

40

60

80

All blood donors far below cut-off. Good discrimination.

IU/ml

Freq

uenc

y

Test Unit No of Mean 95% 99% samples value percentile percentile

EliA MPOS IU/ml 400 0.6 0.9 1.5

EliA MPOS - Serum / Plasma 검체 간의 상관관계

EliA MPOs: correlation serum / plasma

y = 1,1025x r=0,9981

y = 1,0866x r=0,9973

y = 1,0464x r=0,9977

0,00

20,00

40,00

60,00

80,00

100,00

0,00 10,00 20,00 30,00 40,00 50,00 60,00 70,00 80,00 90,00 100,00

serum [IU/ml]

pla

sma

[IU

/ml]

Plasma Heparin[IU/ml]

Plasma EDTA[IU/ml]

Plasma Citrat[IU/ml]

Serum 과 모든 types 의 plasma 검체 사용가능

EliA MPOS - 임상적 검사성능 , 질환의 변별력 평가

Samples used for performance validation n

Microscopic polyangiitis (MPA) 80

Churg-Strauss syndrome (CSS) 60

Necrotizing crescentic glomerulonephritis (NCGN) 12

Disease controls 150 Non-ANCA associated vasculitis (NAAV) 22 Ulcerative colitis 30 Crohn’s disease 30 Systemic lupus erythematodes (SLE) 15 Systemic Scleroderma 15 Infections 38

Total 302

EliA MPOS - 임상적 검사성능

Good sensitivity in MPA.

Only one false positive (EBV infection).

Microsc. Polyangitis Churg-Strauss NCGN NAAV IBD CTD Infections0.1

1

10

100

1000

Diagnostic Group

Eli

A M

PO

se

ns

itiv

e [

IU/m

l]

Microsc. Polyangiitis

High Specificity

단 하나의 disease control 만 양성

이 검체는 EBV infection 환자

이 검체에 대해 IFA ANCA 검사는 높은 양성의 p-ANCA pattern 을 나타냈고 , 모든 타사 검사법도 MPO-antibodies 를 검출

MPO antibodies in Churg-Strauss Syndrome

논문에 따르면 , CSS 환자의 약 38% 가 IFA 검사에서 양성 . 이 양성환자의 약 ¾ 이 MPO antibodies 에 의함 (30%) (Sinico RA et al, 2005, Arthritis Rheum 52:2926-35)

자사 평가에 의하면 60 명의 CSS 환자 혈청 중 23 명에서 ANCA pattern 이 나타남 (38.3%). 하지만 단 10 명만이 IFA 검사결과 전형적인 pANCA pattern 을 보임 (16.7%). 11 명의 혈청에서 MPO antibodies 가 검출됨 (18%).

EliA MPOS 보다 민감도가 좋은 타사 제품은 없었기 때문에 , 낮은 민감도는 EliA 때문이 아니라 sample panel 때문에 발생 .

평가에 사용된 Churg-Strauss 검체에서 anti-MPO antibodies 의 prevalence 가 낮아 2 번의 assay 결과를 가지고 계산 (with and without Churg-Strauss sera).

EliA MPOS - 임상적 검사성능 , 타사 제품과의 비교평가 주요 타사 제품과의 비교 :

EliA MPO Inova QuantaLite MPO IgG ELISA Orgentec Anti-MPO (p-ANCA) Euroimmun Anti-MPO-ELISA (IgG) Eurodiagnostica Wieslab Capture-MPO-ANCA (only test with IU/ml) Nippro The Binding Site

IFA 와의 비교

3. EliA MPOS - 최고의 민감도 , 특이도 ! 타사 제품과의 비교평가

EliA MPO(n = 302)

EliA MPOs

(n = 302)INOVA

(n = 302)Orgentec(n = 302)

Euroimmun(n = 302)

Eurodiagnostica(n = 302)

Nippro(n = 240)

Binding Site(n = 240)

Sensitivity 27,63% 41,45% 23,03% 37,50% 40,79% 40,13% 30,67% 28,67%

Specificity 99,33% 99,33% 99,33% 98,67% 97,33% 99,33% 98,89% 100,00%

0,00%

10,00%

20,00%

30,00%

40,00%

50,00%

60,00%

70,00%

80,00%

90,00%

100,00%

Sensitivity

Specificity

3. EliA MPOS - 최고의 민감도 , 특이도 ! Comparison to Competition with preset specificity

The performance of tests can be evaluated better if you look at the sensitivity at a certain set specificity.

Using ROC analysis we calculated the sensitivity at a specificity of 99%.

This evaluation shows that EliA MPOS performs best and this is not dependent on the recommended cut-off.

EliA MPO EliA MPOs INOVA Orgentec Euroimmun Eurodiagnostica Nippro Binding Site

Sensitivity at 99% specificity

35.5% 44.1% 34.9% 37.5% 32.2% 40.1% 38.0% 34.0%

EliA MPOS – 임상적 검사성능 , 타사 제품과의 비교평가 Churg-Strauss Sera 제외

0,00%

10,00%

20,00%

30,00%

40,00%

50,00%

60,00%

70,00%

80,00%

90,00%

100,00%

EliA MPO EliA MPOs INOVA Orgentec Euroimmun Eurodiagnostica Nippro Binding Site

Sensitivity

Specificity

EliA MPO(n = 242)

EliA MPOs

(n = 242)INOVA

(n = 242)Orgentec(n = 242)

Euroimmun(n = 242)

Eurodiagnostica(n = 242)

Nippro(n = 180)

Binding Site(n = 180)

Sensitivity 35,87% 56,52% 29,35% 50,00% 55,43% 55,43% 40,00% 38,89%

Specificity 99,33% 99,33% 99,33% 98,67% 97,33% 99,33% 98,89% 100,00%

The performance of tests can be evaluated better if you look at the sensitivity at a certain set specificity.

Using ROC analysis we calculated the sensitivity at a specificity of 99%.

This evaluation shows that EliA MPOS performs best and this is not dependent on the recommended cut-off.

EliA MPO EliA MPOs INOVA Orgentec Euroimmun Eurodiagnostica Nippro Binding Site

Sensitivity at 99% specificity

47.8% 59.8% 48.9% 54.3% 43.5% 40.1% 50.0% 45.6%

EliA MPOS – 임상적 검사성능 , 타사 제품과의 비교평가 Churg-Strauss Sera 제외

EliA MPOS – EliA MPO 와 ROC 분석 비교

0

0,1

0,2

0,3

0,4

0,5

0,6

0,7

0,8

0,9

1

0 0,2 0,4 0,6 0,8 1

False positive rate (1 - Specificity)

Tru

e p

os

itiv

e r

ate

(S

en

sit

ivit

y)

No discrimination

EliA MPOs in µg/l, neg<14, pos>20

EliA MPO in U/ml

EliA MPOS performs clearly better than the “old” EliA MPO.

EliA MPOS

EliA MPO

EliA MPOS – ROC Analysis compared to Competition:Wieslab MPO Capture and Orgentec Anti-MPO

ROC Analysis reveals that EliA MPOS performs better than the MPO tests from Wieslab (Eurodiagnostica) and Orgentec.

EliA MPOS vs. Wieslab MPO Capture

EliA MPOS vs. Orgentec Anti-MPO

0

0,1

0,2

0,3

0,4

0,5

0,6

0,7

0,8

0,9

1

0 0,2 0,4 0,6 0,8 1

False positive rate (1 - Specificity)T

rue

po

sit

ive

ra

te (

Se

ns

itiv

ity

)

No discrimination

EliA MPOs in µg/l, neg<14, pos>20

OrgenTEC MPO in U/ml

EliA MPOS vs. Orgentec MPO Capture

0

0,1

0,2

0,3

0,4

0,5

0,6

0,7

0,8

0,9

1

0 0,2 0,4 0,6 0,8 1

False positive rate (1 - Specificity)

Tru

e p

os

itiv

e r

ate

(S

en

sit

ivit

y)

No discrimination

EliA MPOs in µg/l, neg<14, pos>20

Eurodiagnostica MPO in IU/ml

EliA MPOS – ROC Analysis compared to Competition:Inova and Euroimmun Anti-MPO Assay

ROC Analysis reveals that EliA MPOS performs better than the Euroimmun and the Inova Anti-MPO tests.

0

0,1

0,2

0,3

0,4

0,5

0,6

0,7

0,8

0,9

1

0 0,2 0,4 0,6 0,8 1

False positive rate (1 - Specificity)

Tru

e p

os

itiv

e r

ate

(S

en

sit

ivit

y)

No discrimination

EliA MPOs in µg/l, neg<14, pos>20

INOVA MPO in Units

0

0,1

0,2

0,3

0,4

0,5

0,6

0,7

0,8

0,9

1

0 0,2 0,4 0,6 0,8 1

False positive rate (1 - Specificity)

Tru

e p

os

itiv

e r

ate

(S

en

sit

ivit

y)

No discrimination

EliA MPOs in µg/l, neg<14, pos>20

EUROIMMUN MPO in RU/ml

EliA MPOS vs. Euroimmun MPO EliA MPOS vs. Invoa

0

10

20

30

40

50

60

70

MPOs PR3s p-ANCA c-ANCA x-ANCA* ANA sum EliA sum IFAANCA+

Total AAV

Total Controls

EliA MPOS – Comparison with IFA on granulocytes**

in % An ANCA pattern was found in 63.2 % of ANCA-associated vasculitis (AAV) and in 29.3 % of controls.

The classical MPO-associated pANCA pattern was found in 35.5 % of AAV and 2.7 % of controls.

*x-ANCA: in most cases positive in ethanol-fixed granulocytes but negative in formalin-fixation.

**Measurements are based on the MPOs serum panel (see slide 8) plus 30 additional sera from patients with Wegener’s granulomatosis

Almost 30% of non-AAV are positive in IFA. pANCA is less sensitive and less specific than EliA MPOS.The clinical usefulness of IFA as screening test is questionable.

EliA MPOS - 임상적 검사성능 , 요약

EliA MPOS 검사는 기존의 EliA MPO 보다 민감도 향상 .

EliA MPOS 검사는 타사 검사법보다 검사성능 우월 .

EliA MPOS 는 Wieslab 의 Capture-MPO-ANCA (capture assay) 보다 약간 더 우수하고 , 이 두 가지 검사만이 IU/ml (standardized to the CDC standard) 을 사용할 수 있기 때문에 최고의 검사법으로 인정 .

IFA 는 AAV (ANCA associated vasculitis) 에서 민감도가 높지만 특이도는 아주 낮음 . Disease control 의 ¼ 이상에서 ANCA 양성 (granulocytes)의 결과를 보임 .

pANCA 는 EliA MPOS 에 비해 민감도와 특이도가 모두 낮음 .

따라서 , IFA 의 임상적 유용성은 의문의 여지가 있음 .

EliA GBM for detection of anti-GBM in ANCA-positive samples

ANCA 양성 환자는 GBM antibodies 를 반드시 확인해야 한다 !

ANCA 양성 검체의 5-14% 정도는 anti-GBM 도 양성 . Anti-GBM 음성인 vasculitis 환자보다 두 검사에서 모두 양성인 환자가 질환에 대한 예후가 더 심각 . (Levy et al, 2004, see PoM 01/05)

빠르게 악화하는 glomerulonephritis 로 의심되는 환자 중 약 2% 가 ANCA 와 anti-GBM 모두 양성 . 예후는 ANCA 만 양성인 경우가 anti-GBM 만 양성인 경우보다 좋다 . (Jayne DRW et al, Kidney Int 1990; 37:965-70)

EliA MPOS and EliA PR3S

Cutting edge automated ANCA testing!