汇 报 人：陈 琼

指导老师： 寇晓虹 副教授

15 种枣原花色苷， Vc ，总黄酮差异性分析

总三萜

下一部计划

总结

讨论

| 枣活性成分 总三萜 CORTENT PACKING ARRANGEMENT

1. 标准曲线的绘制：准确配制 0.1mg·mL-1 的齐墩果酸溶液。分别量取齐墩果酸标准溶液 0.2 、 0.4 、 0.6 、0.8 、 1.0 、 1.2 、 1.6 mL于试管中，水浴加热至挥干溶剂，加入新配制的 5% 香草醛 - 冰乙酸溶液 0.2mL 及高氯酸溶液 lmL ， 60℃ 恒温水浴 10min ，取出后流水冷却至 室 温 ， 再 加 入 冰 乙 酸5mL ，摇匀，于波长 548nm处测定吸光度，对应浓度绘制齐墩果酸标准曲线。

讨论 总结 下步计划

2. 样品的测定：精确称取 3.00g 枣样加入 30mL 85% 乙醇研磨，超声提取 45min ，过滤，吸取滤液 10ml 定容至 50mL ，吸取 0.5mL 于试管中，冷冻挥干溶剂。加入新配制的 5% 香草醛 - 冰乙酸溶液 0.2mL 及高氯酸溶液 1mL ， 60℃ 恒温水浴加热 10min ，取出后流水冷却至室温，再加入冰乙酸 5mL ，摇匀，于548nm 处测定吸光度。以溶剂作空白对照，平行测定三次。根据绘制的齐墩果酸的标准工作曲线计算样品中总三萜的含量。

20 40 60 80 100 120 140 160 1800

0.10.20.30.40.50.60.70.80.9

f(x) = 0.005005952381 x − 0.015535714286R² = 0.998289383143624

乙酰 -CoA

乙酸乙酰 -CoA

3- 羟基 -3- 甲基戊二酰 -CoA

甲羟戊酸

甲羟戊酸 -5- 磷酸

甲羟戊酸 -5- 二磷酸

异戊烯基焦磷酸 （ IPP ）

二甲基烯丙基焦磷酸 （ DMAPP ）

PMK

MPDIDI

ATOT

HMGS

MK

HMGR

| 枣活性成分 总三萜 CORTENT PACKING ARRANGEMENT讨论 总结 下步计划

三萜类化合物是由数个异戊二烯去掉羟基后首尾相连构成的物质。萜类化合物的合成有细胞质中的甲羟戊酸途径（ MVA 途径）和质体中的脱氧木酮糖 -

5- 磷酸（ DXP 途径）两条途径。

b 、 DXP 途径

| 枣活性成分 总三萜 CORTENT PACKING ARRANGEMENT讨论 总结 下步计划

IPP DMAPP

牛儿基焦磷酸（ C10 ）

法呢基焦磷酸（ C15 ）

角鲨烯SE

2,3- 氧化鲨烯

三萜碳环骨架

OSCs

IPP

GPPS

FPPS

SS

合成各种三萜化合物的共同前体

Transformation

| 枣活性成分 总三萜 CORTENT PACKING ARRANGEMENT讨论 总结 下步计划

用 excel 做柱形图，添加标准误差线，用 SPSS 作差异性分析 ( 显著水平<0.05) 。由误差线看出实验数据良好。图中总三萜以 μg/g 的熊果酸当量表示。

大龙枣

赞皇枣

壶瓶枣

平路尖枣

陕西龙枣

婆婆枣

黎城小枣

滕州长虹枣

灌阳短枣

南京鸭枣

来鹿糖枣

胜利枣

晋枣

襄汾圆枣

灰枣

0

2,000

4,000

6,000

8,000

10,000

12,000

14,000

16,000

18,000

14311.19bc

13640.25cd

13635.77cd

11198.50e

10847.45 ef

9830.81 f

15200.51 b

10821.44 ef

7759.54 g

8425.54 g7997.53 g

16572.84 a

12911.84 d

7518.64 g

13674.41 cd

总三萜 μg/g

15 种枣的总三萜含量从大到小排序如下：

其中，黎城小枣和大龙枣之间，大龙枣、灰枣、赞皇枣和壶瓶枣之间，灰

枣、赞皇枣、壶瓶枣和晋枣之间，平路尖枣、陕西龙枣和滕州长红枣之间，

陕西龙枣、滕州长红枣和婆婆枣之间，南京鸭枣、来鹿糖枣、灌阳短枣和襄

汾圆枣之间无显著性差异。（同一横线的之间无显著性差异） 相关文献

| 枣活性成分 总三萜 CORTENT PACKING ARRANGEMENT讨论 总结 下步计划

胜利枣 > 黎城小枣 > 大龙枣 > 灰枣 > 赞皇枣 > 壶瓶枣 > 晋枣 > 平路尖枣 >

陕西龙枣 >

滕州长红枣 > 婆婆枣 > 南京鸭枣 > 来鹿糖枣 > 灌阳短枣 > 襄汾圆枣

Transformation

作者及文献年限 文献 相关内容 结果

赵爱玲 et al. 2010,

11(6):811-816( 生理 )

枣品种资源的营养特性评价与种质筛选 ( 植物遗传资源学

报 )

测定分析 50 个枣品种的黄酮、三萜酸、多糖、

Vc 、 cAMP 及cGMP6 种功能性营养

成分含量。

三萜酸含量3·99~15·73mg/g 。所用方法相同，所测含量与

本文比较接近。

Sheng Guo, et alJournal of

Pharmaceutical and Biomedical

Analysis ， 49 (5) ：1296–1302.

High-performance liquid chromatography—Two wavelength detection of triterpenoid acids from the fruits of Ziziphus jujuba containing various cultivarsin different regions and classification using chemometric analysis

建立了一种 HPLC-

DAD 法可同时测定 10 种枣果实三萜类化合物，用该法对来自

22 个地区 36 个品种共 43 个红枣样品进

行测定

发现影响枣果实三萜类化和物含量的主要因素是品种，其次是产地，所测样品以冬枣的三萜类化合物含量最高，总量高达 8.2

mg · g-1 ，是普通品种的

4 倍。Sheng Guo, et al

Journal of Pharmaceutical and

Biomedical Analysis 56 (2011) 264– 270

Simultaneous qualitative and quantitative analysis of triterpenic acids, saponins and flavonoids in the leaves of two Ziziphus species by HPLC–PDA–MS/ELSD

检测 9 种不同地区枣叶中的三萜酸（桦木酸和

齐墩果酸）含量。

含量从 2.06mg/g 至4.36mg/g 。

SHENG GUO, et al. J. Agric. Food Chem. 2010, 58, 6285–

6289

Characterization of Triterpenic Acids in Fruits of Ziziphus Species by HPLC-ELSD-MS

HPLC-ELSD-MS方法检测到 11 种三萜酸。

总含量从 3.283-

7.306mg/g 。

作者及文献年限 文献 相关内容 结果

胡 芳，赵智慧，刘孟军

2010-12-16( 生理 )

HPLC 法测定不同枣品种果实中白桦酯酸、齐墩果酸和熊果酸含

量（中国农学通报）

对 20 个枣品种果实中白桦酯酸、齐墩果酸和熊果酸的含量进行了

测定和比较

其中白桦酯酸含量最高的品种为晋枣，齐墩果酸和熊果酸含量最高的品种是长红枣， 3 种三萜酸总含量较高的品种为长红枣，南京枣和灰枣。含量从1.130-2.964mg/g 。

赵晓，河北农业大学（硕士论文）

枣果主要营养成分分析 比较了 35 个不同品种枣的总三萜及其他功能性成分的含量。香草醛-冰乙酸-高氯酸比色法

560nm

总三萜含量5910.01±316.33-

1137.75±176.22ug/g 。

苗利军，河北农业大学（硕士论文）

枣果中三萜酸等功能性成分分析 金丝小枣从 6月 14 到8月 23日齐墩果酸和熊果酸平均含量变化。

随着体积及成熟度的增大而增大，当达到一定体积和成熟度后继续增长三菇有一个小回落。没有总三

萜变化的数据。

由实验结果可知，不同的枣属之间还是有较大差异的，本实验所测胜利枣的总三萜含量最高为 16572.84±105.51μg/g 熊果酸当量，襄汾圆枣最低为 7759.54 ±

206.58μg/g 。赵爱玲 et al.所测的含量与本实验极为接近，其余用液相色谱测定结果与本文的差距较大。所用的方法原花色苷等多环聚合物可能影响比较大。 Sheng Guo, et al 表明种属影响比较大，其次是产地。

| 枣活性成分 总三萜 讨论 PACKING ARRANGEMENT总结 下步计划

原花色素（也称缩合单宁）是黄烷 -3- 醇的寡聚体与多聚体，属多酚类化合物。与其他酚类化合物不同，黄烷醇（缩合单宁，单体，双体等）在酸性介质中可与香草醛反应，生成在 500nm 处有最大吸收的有色物质，通过比色测其含量。

| 枣活性成分 总三萜 CORTENT PACKING ARRANGEMENT讨论 总结 下步计划

＋三萜类高氯酸

酚羟基 氧化脱氢形成共轭体系 香草醛

548nm显色

Transformation

CORTENT ARRANGEMENT HOMEPAGE 总结 | 枣活性成分 总三萜 讨论 下步计划

对以前所测枣总黄酮，原花色苷， Vc ，总三萜建立数学模型进行综合评判，找出 4 种成分含量均较高的枣属。利用线性加权和法，权系数的确定（机会均等法）：成分平均含量乘以权系数后等于同一数值 (机会值 V) ，以此确定权系数。

枣属 权重晋枣 53.74

南京鸭枣 51.05

黎城小枣 42.32

胜利枣 42.12

大龙枣 41.52

来鹿糖枣 41.01

滕州长红枣 38.46

灌阳短枣 38.38

赞皇枣 37.82

襄汾圆枣 37.19

婆婆枣 36.53

陕西龙枣 36.36

灰枣 36.31

平陆尖枣 35.42

壶瓶枣 33.20

确 定 的 权 系 数ω ：总 黄 酮： 10.60

原花色苷： 14.47

Vc ：0.32

总 三 萜 ： 0.86

V= Σ ωi×C

Services

晋枣的原花青素含量最高，陕 西 龙 枣 的最低分 别为0.997 ， 0.511mg/g 鲜重儿 茶 素 当 量 。

南京鸭枣的总黄酮含量最高为 2.00mg/g ，壶瓶枣最低0.47mg/g鲜重芦丁当量。

灌阳短枣 Vc 含量最高，大龙枣 Vc 含量最低，分别为为15.71 ， 42.47mg/g

总 三 萜 胜 利 枣 最 多 为16.573mg/g, 襄 汾 圆 枣7.519mg/g 。

CORTENT ARRANGEMENT HOMEPAGE 总结 | 枣活性成分 总三萜 讨论 下步计划

4 种营养成分

含量均较高的有晋枣、南京鸭枣、黎城小枣、胜利枣、大龙枣；

含量中等的有来鹿糖枣、滕州长红枣、灌阳短枣、赞皇枣、襄汾圆枣。

含量较低的有婆婆枣、陕西龙枣、灰枣、平陆尖枣、壶瓶枣。

苦菜清除 DPPH自由基结果：

0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.40.000

0.100

0.200

0.300

0.400

0.500

0.600

0.700

0.800

0.900

1.000

甲醇组清除率

0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.40.000

0.100

0.200

0.300

0.400

0.500

0.600

0.700

0.800

0.900

1.000 乙酸乙酯组清除率

甲醇组 DPPH自由基清除作用均很强 <0.2mg/mL时抑制作用特别明显， >0.2时趋于平缓；乙酸乙酯组在 0.05 至 0.35mg/mL范围内呈线性的剂量依赖关系。总体甲醇组大于乙酸乙酯组的 DPPH自由基清除作用。实验测了超氧阴离子自由基做了 3 次预实验，但是空白组剂量抑制大于 3.0 ，一直没有调到合适的反映环境。

CORTENT ARRANGEMENT HOMEPAGE 总结 | 枣活性成分 总三萜 讨论 下步计划

CORTENT ARRANGEMENT HOMEPAGE 总结 | 枣活性成分 总三萜 讨论 下步计划

苦菜清除羟基自由基结果：

0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.4 0.450.000

0.100

0.200

0.300

0.400

0.500

0.600

0.700

0.800

0.900

1.000

甲醇提取物清除率

乙酸乙酯提取物清除率

向试管中依次加入磷酸盐缓冲液 (50mmol/L pH 7.5) 0.4mL ，一定浓度的提取物溶液（空白对照中以等体积蒸馏水代替） 0.1mL ，1.04mmol/L 的 EDTA 溶液 0.1mL ， 10mmol/L 的 H2O2 溶液 0.lmL ， 2mmol/L 的 VC 溶液 0.1mL ， 60mmol/L 的脱氧核糖 (DR) ( 对照组中以蒸馏水代替 DR) 0.lmL ， 1mmol/L 的 FeCl3 溶液 0.1ml ，最终使各管总体积为 1.0 ml ，在 37℃ 的恒温水浴中反应 lh 后取出，快速加入 25% （ v/v ）的 HCl 溶液 lmL 以终止反应，再加入 l% 的 TBA 溶液 lmL ，沸水浴中反应 15min ，取出，立刻用流水冷却，在波长 532nm 处测定吸光值，并按照如下公式计算 ·OH清除率：

·OH清除率 (%)={[A0-(A1-A2)] /A0}×100

其中 A0代表对照组的吸光度， A1代表样品组吸光度， A2代表空白组的吸光度

0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.50.000 0.100 0.200 0.300 0.400 0.500 0.600 0.700 0.800 0.900 1.000

甲醇组清除率

乙酸乙酯组清除率

换空白溶液

CORTENT ARRANGEMENT HOMEPAGE 总结 | 枣活性成分 总三萜 讨论 下步计划

0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.50.000 0.020 0.040 0.060 0.080 0.100 0.120 0.140 0.160 0.180 0.200

乙酸乙酯组清除率

甲醇组清除率

水杨酸体系： 减少过氧化氢含量

0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.4 0.450.000

0.050

0.100

0.150

0.200

0.250 甲醇组清除率

乙酸乙酯组清除率

结论：对羟基自由基可能没有显著的清除作用。

Services

CORTENTHOMEPAGE | 接下来 3 1 2 计划

实验：

苦菜

总还原能力

ABTS

巨晓英师

姐论文翻

译

正在进行的

苦菜抗癌实

验：

乙酸乙酯提

取物

甲醇提取物

谢谢！