Über die bestimmung von phosphatidgebundenem serin und colamin im gehirn

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230 Bericht: Spezielle analytische Methoden Bd. 195 SiO~ in Gegenwart yon weniger als 4,5 mg Phosphor und 3 nag Eisen mit ether Genauigkeit yon ~= 1 #gSiO~. -- AmmoniummolybdatlSsung. 5 g (NH~)0M%02~ 4Hue werden in 80 ml Wasser yon 60~ gelSst, nach Abkiihlung auf 100 ml mi~ Wasser erg~nzt und in dunkler paraffinierter Flasehe aufbewahrt. -- Reduk- tionsl6sung. 1,2 g Na~SO3, 0,2 g 1,2,4-Aminonaphtholsulfons~ure und 12 g Na2S20~ werden in 87 ml Wasser gelSst. Die LSsung wird in eine dunkle paraffmierte Flasche filtriert. ~ikroehim. Aeta (Wien) 1962, 513--523. Clinic Profess. Diseases, Brno (~SSR). -- ~ Biochemic. J. 27, 990 (1933); vgl. diese Z. 102, 459 (1935); 108, 9 (1935). A. :N~A~ ~ber die Bestimmung yon phosphatidgebundenem Serin und Colamin im Gehirn beriehten H . G, K~CAV]~F, G. M A u und D. MArx 1. In Fortsetzung friiherer Arbeiten 2 gewinnen Verff. in einem genau beschriebenen und durch Schema erl~utertem Verfahren Serin und Colamin. Die veto Salzs~ure-Aeeton- homogenat des l~attengehirnes ausgehende Gewinnung der serin- und colamin- haltigen Phosphatide gelingt mit ether Ausbeute yon ~ 95O/o . Im Endextrakt be- stimmen Verff. naeh ]-Iydrolyse Serin und Colamin papierchromatographisch nach H. G. K~xvrr, P. DIETE~]~ und H. Z~CKgRA~ a. Die gefundenen Werte in Milli- gramm/Gramm Frischgewicht stimmen mit s~ulenehromatographisehen Ergeb- nissen fiberein: 0,607 • 0,037 Serin und 1,07 ~= 0,040 Colamin. Hoppe-Seyler's Z. physiol. Chem. 826, 220--226 (1961). II. ivied. Klinik, Univ. Miinehen. -- 2 K~cAv~, H. G., G. 1VI~:z]~ u. D. MAI~X: Hoppe-Seyler's Z. physiol. Chem. 826, 78 (1961). -- a Hoppe-Seyler's Z. physiol. Chem. 816, 186 (1959) ; vgl. diese Z. 182, 394 (1961). E. MiY~, Wiirzburg tiber die Bestimmung yon Insulin im Blur mit Hilfe radioaktiver Glucose berichten H. DITSC]IUNEIT, J.-D. FAVLHAB~ und E. F. PF~I~'~ I. Als Mal~stab ffir die Insulinwirkung wird die Bfldung yon 1~C02 aus 1-1aC-Glucose dureh iso]ier- tes epididymales Fettgewebe der Ratte benutzt. Die Versuehsanordnung ist bereits frtiher beschrieben worden 2. Dos Verfahren kann dutch Verwendung yon Fliissigkeitsseintfllations-Z/~hlern wesentlich vereinfacht und die Genauigkeit er- hSht werden. Im Inkubationsgefa$ ist ein Kunststoffnapf mit 0,02 m Hyamin- hydroxid in Methanol zur Absorption der Kohlensaure aufgehangt. Dieses wird nach Beendigung der Absorption (etwa 90 rain) mit der LOsung in die Scintillations- flfissigkeit getaucht, die 0,4~ Diphenyloxazol und 0,2~ Phenyloxazolylbenzol in Toluol enthalt: Die Zahlausbeute betrag~ mit dem Gerat LSC-10B yon Tracerlab/ USA 780/0, wahrend bet der Bestimmung der Kohlensaure als Bariumcarbonat nut 6,9 ~ erreicht werden. 1Atompraxis 8, 172--175 (1962). 1. ivied. Univ. Klinik, Frankfurt a.M. -- DITSC~U~,I% H., R. ZIEGLER U. E. F. PF~FER: Klin." Wschr. 89, 41, 415, 426 (1961). A. NIE~AN~r Casein ehromatographierte B. R. D~wAs ~ in Anlehnung an die Methode yon WA~(~ ~ an Digthylamino~ithyl-Cellulose in Gegenwart yon Harnstoff. Die Tren- nung wurde sowoM in analy~isehen S~ulen (10 cm long, 1 em ~ ; Fraktionen zu 1,5 ml), wie ouch in pr~parativen (30 em long, 3 em ~; Fraktionen zu 10 ml) durehgef'fihr~. Dos Protein wurde in Imid~zol-0,01 m Salzs~ure-PufferlSsung veto Pl~ 7, 4,5 m an H~rnstoff, ~nf die S~ule gegeben. Die Elution erfolgte mit einem Puffer aus Imidazol und 0,02 m Salzsi~ure (p~ 7), 3,3 m an Harnstoff 2. Verf. ver- wendete zus~tzlich zur Elution einen exponentiellen Gradienten mit steigendem

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230 Bericht: Spezielle analytische Methoden Bd. 195

SiO~ in Gegenwart yon weniger als 4,5 mg Phosphor und 3 nag Eisen mit ether Genauigkeit yon ~= 1 #gSiO~. - - AmmoniummolybdatlSsung. 5 g (NH~)0M%02~

4Hue werden in 80 ml Wasser yon 60~ gelSst, nach Abkiihlung auf 100 ml mi~ Wasser erg~nzt und in dunkler paraffinierter Flasehe aufbewahrt. -- Reduk- tionsl6sung. 1,2 g Na~SO3, 0,2 g 1,2,4-Aminonaphtholsulfons~ure und 12 g Na2S20~ werden in 87 ml Wasser gelSst. Die LSsung wird in eine dunkle paraffmierte Flasche filtriert.

~ i k r o e h i m . Aeta (Wien) 1962, 513--523. Clinic Profess. Diseases, Brno (~SSR). - - ~ Biochemic. J. 27, 990 (1933); vgl. diese Z. 102, 459 (1935); 108, 9 (1935). A. : N ~ A ~

~ber die Bestimmung yon phosphatidgebundenem Serin und Colamin im Gehirn beriehten H. G, K~CAV]~F, G. M A u und D. MArx 1. I n Fortsetzung friiherer Arbeiten 2 gewinnen Verff. in einem genau beschriebenen und durch Schema erl~utertem Verfahren Serin und Colamin. Die veto Salzs~ure-Aeeton- homogenat des l~attengehirnes ausgehende Gewinnung der serin- und colamin- haltigen Phosphatide gelingt mit ether Ausbeute yon ~ 95O/o . Im Endextrakt be- stimmen Verff. naeh ]-Iydrolyse Serin und Colamin papierchromatographisch nach H. G. K ~ x v r r , P. DIETE~]~ und H. Z~CKgRA~ a. Die gefundenen Werte in Milli- gramm/Gramm Frischgewicht stimmen mit s~ulenehromatographisehen Ergeb- nissen fiberein: 0,607 • 0,037 Serin und 1,07 ~= 0,040 Colamin.

Hoppe-Seyler's Z. physiol. Chem. 826, 220--226 (1961). II . ivied. Klinik, Univ. Miinehen. -- 2 K~cAv~, H. G., G. 1VI~:z]~ u. D. MAI~X: Hoppe-Seyler's Z. physiol. Chem. 826, 78 (1961). -- a Hoppe-Seyler's Z. physiol. Chem. 816, 186 (1959) ; vgl. diese Z. 182, 394 (1961). E. M i Y ~ , Wiirzburg

tiber die Bestimmung yon Insulin im Blur mit Hilfe radioaktiver Glucose berichten H. DITSC]IUNEIT, J.-D. FAVLHAB~ und E. F. P F ~ I ~ ' ~ I. Als Mal~stab ffir die Insulinwirkung wird die Bfldung yon 1~C02 aus 1-1aC-Glucose dureh iso]ier- tes epididymales Fettgewebe der Rat te benutzt. Die Versuehsanordnung ist bereits frtiher beschrieben worden 2. Dos Verfahren kann dutch Verwendung yon Fliissigkeitsseintfllations-Z/~hlern wesentlich vereinfacht und die Genauigkeit er- hSht werden. Im Inkubationsgefa$ ist ein Kunststoffnapf mit 0,02 m Hyamin- hydroxid in Methanol zur Absorption der Kohlensaure aufgehangt. Dieses wird nach Beendigung der Absorption (etwa 90 rain) mit der LOsung in die Scintillations- flfissigkeit getaucht, die 0,4~ Diphenyloxazol und 0,2~ Phenyloxazolylbenzol in Toluol enthalt: Die Zahlausbeute betrag~ mit dem Gerat LSC-10B yon Tracerlab/ USA 780/0, wahrend bet der Bestimmung der Kohlensaure als Bariumcarbonat nut 6,9 ~ erreicht werden.

1Atompraxis 8, 172--175 (1962). 1. ivied. Univ. Klinik, Frankfurt a.M. -- DITSC~U~,I% H., R. ZIEGLER U. E. F. P F ~ F E R : Klin." Wschr. 89, 41, 415, 426

(1961). A. NIE~AN~r

Casein ehromatographierte B. R. D~wAs ~ in Anlehnung an die Methode yon WA~(~ ~ an Digthylamino~ithyl-Cellulose in Gegenwart yon Harnstoff. Die Tren- nung wurde sowoM in analy~isehen S~ulen (10 cm long, 1 em ~ ; Fraktionen zu 1,5 ml), wie ouch in pr~parativen (30 em long, 3 em ~ ; Fraktionen zu 10 ml) durehgef'fihr~. Dos Protein wurde in Imid~zol-0,01 m Salzs~ure-PufferlSsung veto Pl~ 7, 4,5 m an H~rnstoff, ~nf die S~ule gegeben. Die Elution erfolgte mit einem Puffer aus Imidazol und 0,02 m Salzsi~ure (p~ 7), 3,3 m an Harnstoff 2. Verf. ver- wendete zus~tzlich zur Elution einen exponentiellen Gradienten mit steigendem