subchronic mild noise stress increases hrp permeability in rat small intestine in vitro

7
Subchronic mild noise stress increases HRP permeability in rat small intestine in vitro P.B. Bijlsma a, *, M.T.M. van Raaij b , C.J.G. Dobbe b , A. Timmerman b , A.J. Kiliaan a , J.A.J.M. Taminiau a , J.A. Groot a a Department of Pediatric Gastroenterology and Nutrition, Academic Medical Centre/Institute of Neurobiology, University of Amsterdam, Kruislaan 320, 1098 SM Amsterdam, Netherlands b National Institute of Public Health and Environment, Bilthoven, Netherlands Received 21 March 2000; received in revised form 27 July 2000; accepted 15 January 2001 Abstract Recently we reported an increased trans- and paracellular protein permeability in rat small intestine after acute cold restraint stress. In the present study, we applied randomized 95- or 105-dB white noise pulses during 45 min/h, 12 h/day, duration 8 days, as a milder, but more chronic stressor to male rats. At 8 days before the noise experiments, 50% of the animals were cannulated in the vena cava for blood sampling during the experimental period. The other 50% of the animals were sacrificed at Day 9, segments of ileum were mounted in Ussing chambers and perfused at 37°C. Horseradish peroxidase HRP) was added mucosally, serosal appearance was detected enzymatically and tissues were fixed for electron microscopy. In the animals exposed to 95-dB noise, plasma corticosterone levels were enhanced twofold compared to controls, and ileal HRP flux was enhanced twofold. Electron micrographs of tissue from stressed or control animals showed no detectable paracellular staining of HRP. Quantification of HRP-containing endosomes in enterocytes revealed a twofold increase in endosome number in the animals exposed to 95-db noise indicating that the increased HRP permeability was primarily due to increased endocytosis. In contrast to the animals exposed to 95-dB noise, rats exposed to 105-dB noise showed no increase in corticosterone levels and ileal HRP fluxes were not significantly different from controls. We conclude that mild subchronic noise stress may cause a decrease in intestinal barrier function by increased transcytosis of luminal antigens. D 2001 Elsevier Science Inc. All rights reserved. Keywords: Noise; Stress; Permeability; Intestine; Protein; Endocytosis 1. Introduction Stress has frequently been associated with gastrointest- inal manifestations. These include gastric ulceration [10], increased colonic motility [20], changes in gastric emptying and small intestinal motility [4,13 ± 15] and changes in small intestinal transport of water and electrolytes [2]. Also, stress has been indicated as a factor that exaggerates the disease activity in irritable bowel syndrome [9,20] and in inflam- matory bowel disease [7]. A relation between stress and intestinal permeability has been shown for very severe stressors like burn trauma, surgical trauma, blunt injury trauma and hemorrhagic shock [6,8,22,23]. More recently, an increased permeability to mannitol and Cr-EDTA was reported in rat small intestine after acute 4-h) restraint stress [25]. In a subsequent study, an increased permeability was also observed using horseradish peroxidase HRP, 40 kDa) as a marker for antigenic protein permeability in rat small intestine after acute 2-h) cold restraint stress [17]. The increased HRP permeability appeared to be caused by increased endocytosis and by tight junctional leakage of this protein, and was mediated by a cholinergic mechanism. Still, restraint is an acute and rather strong stressor, as judged from increments in plasma corticosterone levels of 225±250 ng/ml, observed in rats cannulated in the vena cava [31], as well as in rats anesthetized after the restraint stress period [25]. This raises the question whether a more moderate, but subchronically applied stress stimulus also affects intestinal permeability. Such a stressor is noise exposure, a common environmental disturbance factor, which is a relatively mild 0031-9384/01/$ ± see front matter D 2001 Elsevier Science Inc. All rights reserved. PII:S0031-938401)00424-3 * Corresponding author. Tel.: +1-31-20-5257643/7650; fax: +1-31-20- 6659125. E-mail address: [email protected] P.B. Bijlsma). Physiology & Behavior 73 2001) 43 ± 49

Upload: pb-bijlsma

Post on 01-Nov-2016

213 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: Subchronic mild noise stress increases HRP permeability in rat small intestine in vitro

��������� �� �� � ��� ����� � ��� ��������� �

��� ��� ��� ��� � ����

���� ��� ����� ������ ��� ������ ���� � !������ "� �������"��� #������ ��"����� ������� ��"� �����

����������� ��� ��� � ������������� ��� ���� � �� ������ � ��� ��� ����������� ���� ����� ���� �� ���� �� ����������

��� ����� !"� #"$% &� ���������� ���'����������� ��� ���� ���� ���� � (����' ��� )�� ������� * ��'���� ���'�������

������� $% ����� $&&&' ������� � ��� �� (�� $) ���� $&&&' �������� %* ������� $&&%

��������

�������� +� �������� �� ����� �� ���� , ��� ������������ ������ ��������� � ��� ��� ��� ��� �(��� ����� ���� �� ����� ��� � -� ���

��� ��� ����� +� ������ �����.�� /*, �� %&*,�� +��� �� � ��� � ����0 1* �2�� %$ �2���� ������� 3 ��� � � � ����� ��� ���

������ ��� �� �� ��� ��� � "� 3 ��� ��(��� ��� �� � �4������ � *&5 �( ��� ���� +��� ���������� � ��� ���� ���� (�� ����� ����0

����0 ��� �4�������� ������ ��� ����� *&5 �( ��� ���� +��� ���(��� �� !�� /� �0��� �( ��� +��� ������ � 6 �0 ������

��� ���(� �� �� 7)��� ��� ���� � ����4�� � 8���9 +� ����� ��� ����� ��� �� ���������� +� �������� ��.�������� ��� � �� +���(4�� (�� �������� ��� ����� -� ��� ���� �4�� �� �� /*,�� �� �� ��� � ������ ������ ����� +��� �������� �+�(��� ������� ��

������� � ��� ���� ��� (��4 +� �������� �+�(���� :������� ���0���� �( � �� (�� ��� �� �� ������� ���� ��+�� �� ����������

������������ ����0 �( ���� ;����(����� �( ���,�������0 ���� �� � ���������� �������� � �+�(��� ����� � � ���� �� �����

� ��� ���� �4�� �� �� /*,�� �� � ������0 ���� ��� ����� �� ��� ��������� +� ������ ��� �� ����� �� �������� � -� ������ �

�� ��� ���� �4�� �� �� /*,�� �� �� ��� �4�� �� �� %&*,�� �� � ��+�� �� ����� � � ������ ������ ����� ��� ���� ��� (��4� +���

��� 0�(������ �((����� (�� ������� � <� �������� ���� �� �������� �� � ��� �� ��� � � ������ � � ��� ���� ������ (������ ��

����� �� ���� ���� �( ����� ���0�� � � $&&% :� ���� ������ -��� "�� �0�� �� ������

���+���, =� �' ���� ' ���������' -��� ���' ������' :�������

� ���� ������

���� �� (��>������ ���� � ������ +�� 0� ������ �,

��� ��(� ����� � ��� � ������ 0� ��� ��������� ?%&@�

����� �� ������ ����� ?$&@� ����0� � 0� ��� �����0

��� ��� ��� ���� ����� ?1�%7A%*@ ��� ����0� � ���

��� ���� ���� ���� �( +���� ��� ����������� ?$@� "� �� ���

�� ���� ������� � � (����� ���� �4�00����� ��� � �� �

������ � ������� ��+�� ������ ?/�$&@ ��� � �(��,

����� ��+�� � �� � ?)@� " ������� ���+��� ��� ���

��� ���� ��������� �� ���� ��+� (�� ���� �����

��� �� �B� ���� ������ ��0��� ������ ����� �����

����� ��� �������0� ���B ?C�3�$$�$7@� ���� ���������

�� ����� �� ��������� �� ������ ��� ��,:!�" +�

�������� � ��� ��� ��� ��� �(��� ����� 81,�9 �� ����� ���

?$*@� -� � �� �>���� ����� �� ����� �� ��������� +�

�� � �� ����� � �0 ��� ���� � ����4�� � 8���� 1& B!�9

� � ��B�� (�� ���0��� ������ ��������� � ��� ���

��� ��� �(��� ����� 8$,�9 ���� �� ����� ��� ?%)@� ���

����� �� ��� ��������� �������� �� �� ��� �� ��

����� �� �������� ��� �� �0�� ��������� ���B�0� �(

�� ������� ��� +� ������ �� � �������0� ����� �

����� �� ����� �� ����� ��� ������ ����0 ��� ��� �

���0�� (�� ������� � ��� � ������ ������ ����� �(

$$*A$*& �02�� �� ����� � ��� ���������� � ��� ����

���� ?7%@� � +��� � � ��� ��� ����.�� �(��� ��� �� �����

��� ����� ?$*@�

�� �� � ��� >�� ��� +������ � ��� �������� ���

������������ ������ ��� ���� �� � �((��� ��� ����

���������� ���� � ��� �� �� � �4�� ���� � ����

����������� � �������� (������ +��� � ��������� ��

&&7%,/7312&%2D A �� (���� ����� � $&&% :� ���� ������ -��� "�� �0�� �� ������

�--E �&&7% ,/731 8&% 9&&1$1 ,7

� ����� �����0 ������� ����E F%,7%,$&,*$*)C172)C*&' (�4E F%,7%,$&,

CC*/%$*�

)-�� � �������E ��� �G��������� 8���� ��� �9�

��� ���0� H ������� )7 8$&&%9 17A1/

Page 2: Subchronic mild noise stress increases HRP permeability in rat small intestine in vitro

������������� �������� ������� �� ����� 8�����9 ���

��� ?*�$C@� =� � �� ���� � ������ +�� �������� ���

���� � �������� ��� ������ �� +���,���0 ��� ���(��,

���� � ���� ?%C�7%@� "���� �� � �4�� ��� ������

�� ����� � � ����� ����� �������� �� ��� ����0� � 0� ���

����� � ���������� ���� ?%7@� ��+����� �� ��� B��+�,

��0� ��� �((��� �( �� � �4�� ��� �� ��� ���� ���������

���� � ��� ��� ���� ������

-� ��� ��� ��� ���� +� ������ �����.�� /*,�� ��

%&*,�� +��� �� � ��� � ����0 1* �2�� %$ �2����

������� 3 ��� � � � �������� ��� �� �� ��� < ���

��� � ���� ��� ���� ������ ��������� +� �� ���� �

���� �0��� � 6 �0 (��4 ������ � ���� ���

� ��� �� �� �������� ��� ����� ������� ���� +�

�������� � ��� � ���� ���������� � ��� ���� ����

����+�0 (��� �������

� ��������� �� ����� �

!.#. �� ���� ��� '�� ��

���� < ��� ��� 8< ���E <6' ��I ���� 9� �������

(�� ��� =������ -� ����� �( ����� ������ ��� :�����,

���J �+� ������0 (������ +�0��0 �����4����� $*& 0

�� ������ (�� ��� �4������ � +��� ������ � �,������

�������� ��� �� �� ����� ���������� �( �����4�����

$%�� ��� � ���BA�0�� ������� �( %$E%$ � 8�0�� �� ��

&)&& �9� ��� ���� +��� ��������� ��� �� �������� ��

0�� � ���� ����� 0�� ��� ��� ������� +��� ���

�� ���� ��� ���� +��� ������.�� (�� %& ��� ���

+��� (�� +�� ���, � �������� (��� 8���� I�� � <���,

���� ��� =��������� 9 ��� ������� ����� ��� +���� ��

����� ���� +�0�� ��� (��� ���B� +��� �������� �����

�� � +��B ����0 ��� ����� �4������� ��� ���� ��0�

+��� ������ � ����,���������� ��� ��� ��� �4�����,

��� � ��� ��� ���� ��� ���� ���+��� &3E7& ��� %&E&&

�� "�� ����� ������ 8������0� ���������� �( ����

+�0��� ����9 � ��� ���� ��� +��� ���(���� ���+���

%&E7& ��� %$E&& ��

!.!. � �� �/��� �����

"��� +��� ����(�� �� ���� +�0�� ��� � 0��� ��

����� �4�������� 0���� E ������� 8�K %79� �� � ��0��

/* �� 8� K %79 ��� �� � ��0�� %&* �� 8� K 39� �������

���� +��� �4�� �� �� �������� ����� ���B0�����

�� � � ��� ���� ��� 8����� C1 ��� � ��� L 7 B�.�

�������� ������ �� ��� ��������� � ��9 ��� �����

���� ������ ����� ��� �4�������� �� � +� ������ ��

�� ��� ���B0����� ����� ��� ��� ��� �( ��(�� � ���,

���� +��� �� � 8$A$$ B�.9 0�������� �� � ���� ����

� ������ �� � ��� ���� �������� ��� 0��� +� ���(��

8������� "$&$9 ��� �������� �� B���� ��.� ���B��

8��������� #�= %&$*"9 +�� � ����� ������ ���� ��� �����

�� � (��>����� ���0� � �� ����� ������ �� ?7&@� ���

���(�� +� ��������� �� ������� ���� ����� �( /* ��

%&* �� � ��� ���� ��0� � ��� �� � ��0�� ������� /*,

�� %&*,�� +��� �� � (�� 3 ��� � %$ M�� � ���� J2��� ���

1* M�� � ���� J ��� �� � ���� 8*1& �2���9� =� �

���� +��� � ������� ���0 $1 �� ��� �� � ����

���0 C& � �( � �� � ����� �� � ����� �������

0�������� �� �� ��� ������������ ��� ���0���� �4�� ���

��������� �� � :4������ +�� ������� ��� /*,��,

�4�� �� ���� +��� ��� � �+� �������� � �� ���� 3

��� � %& ���� 8(�� ������� ��� (�� /*,��,�4�� ��

���� 9 � ��� (� � � �� ��� 87 ���� �����9 $1 ����

8�( +��� �0�� ������� ��� �0�� /*,��,�4�� �� ���� 9

� ��� ����� � ��� :4�� ��� �� %&*,�� �� � �( ��� �����

�0�� ���� (�� �� ����� +� ������ ������� �(���

��� ����� � ��� ��� �0�� ������� ���� (�� ���

����� � �� �� � ����� � ������� �� ��� %&*,��,

�4�� �� ���� �

!. . 0��/ ������������

��� +��� ��� ����.�� �� ������������� ������� �(

��� ������������ 8C& 02B09 ��� B���� �� ������0 �(

��� ������� ������ " �0��� �( � ��� ��� +� ������

������ ��� �� �� +�� ��0��J ������ �� �����

��� ���� ������� � ��� �0��� +� ������ �( � ���

����� ��� ��� �� �+� (��� ���� �( � �� ��� ���� +���

������ � � �� ������ �� ����� �� �+���� � ����� ?%$@�

��� �4�� �� ���� +� &�$ �$ ��� (��� �( �����J ������ �

���� �� �( ��� ������� +��� � ������� +�� ��0��J

������� 0� �� +�� ���(�� *5 �N$ F /*5 N$� ��,

�� ��� �( ��� ��0��J ������ +� 8� �9E =��� %%)�*�

#�� *�)� =���N7 $*� =��$�N1 %�$� ����$ $�*� �0�N1%�$� �� �� *� "(��� �����0������� ��� �� +� )�7 ��� ���

� ������ $/& N 2B0� ������� +��� ������� ��

7)�� +�� +���� ���B�� ��� ����� +�� �0���� ����0��� 8����� ����� 7 � �� ����� ��9� "(��� � %*,�

�>�������� ������ ��� 8�0�� ���� O-9 � ����� �

��0��J ������ +� ����� ��� ���� �� � (��� ���������,

��� �( %&� * �� ���� �� ���� �( $&& �� +��� ��B�� �� C&��� %$& � ��� �������� �� �4�0������ ��0��J �������

��� ���������� �( ��� � ��� ��� �� ���� +� �� ����

��.��������� -� ����� � &�%,� ���� �( �� � ������ +�

4�� +�� %�1 � ��� ����� ��((�� 8&�% �� �� C�&9

�������0 &�&&75 �$N$ ��� &�&&/5 ,��� ��� �,

���� ��� ������ ���,������������,��������� ���� �(

����� � � ������ �� ������ �� 1C& � +� ��������

+�� �� :�������( ����������

!.1. )������ � ������

"(��� ����0� � �� +��� ������� (4�� (�� ����,

���� ��� ����� � �� +��� (4�� � $�*5 0�������������

� &�% � ��� ���������� ��((�� 8�� )�19 (�� $ � �� ���

���������� ��� �� �� �����0�� 81��9 � &�% � ���

���������� ��((�� 8�� )�19 ��� ����� �� (�� * � ���� �

&�&* � �� ��((�� 8�� )�C9� ����4�� � ������ +�

�.*. * 2���� �� ��. � �'�� ��� 3 *�'�� � 4 5!""#6 1 71$11

Page 3: Subchronic mild noise stress increases HRP permeability in rat small intestine in vitro

���� ������ � ���������� � �� ����� ������ �� ?%%@�

��� � �� +� ����������� (�� %* � � * 0 ����,

���.��� � %& � &�&* � �� ��((�� 8�� )�C� $$��9 ��� �� �>������ �������� %* � � ��� �� ��((�� ������,

�0 &�&%5 �$N$� � �� +��� ���� ����� �� (�� ������

�������� ��� ����� N�������� �( ��� � �� +� ��� ����

���� ���� +��� ��� ���0��������� ��� ����� �( ������,

�� ��� ����� ��� +� >����(�� �� ������0 ��� ����� �(

��� ������� (���� ���� �� � �� ����� ���� �( C� 1 ��� � ������� ��� ��� �,������ ������ � �0 � �������,

�0�0 ���0��� ��� ������� ������� �����0���� ���

���� +��� ����� �� �� ��� ����� 0������ �( ��� �4���,

����� � ���� �( ��� �������

!.8. �������� � �/��� �����

-� ������� �� �( �4������ +�� ���� (�� ���

�� ������0 ������ ��� ������������� �� ��� � �� ���

�((����� �� � ��0�� +� ������� � �0 ����������

���������� ���� � =� � �4������ +��� ��� ��������

�� ��� � +�� ������������ ���� � � �0 %7 ���� 8�0��

������� ��� (�� /*,��,�4�� �� ���� 9 � ��� (� � � ��

��� $& ���� 8��� ������� � (�� /*,��,�4�� ��� ��� 4

%&*,��,�4�� �� ���� 9 � ��� ����� � ��� "(���

������.����� ��� ��� +��� ���������� ���������� � ���

���� ���� �� ��� ���� (����� � �� ����� ������ ��

?7%@� ��� ������� � �� ��(� ��� ��� �� �� �( ��� ��� ���

+� (4�� +�� � �0��+�0�� ����� ��� ��(( �>�����

+�� � ����� ���� +�� ���0 �� ������� ��� ��������

"��� +��� ��(� �� ������� (�� 3 ��� ��(��� �4��������

�������� +��� ������� ��(��� ����� ����0 ������� ���

���� +��� ��������� �� ��� � ������ (�� �+� ��� �,

����� ��� � ����� ���� +��� ������� �� �� ����

!�� � %� &� %� $� 1� ) ��� /� ����� ���� +��� ��+�� ������� ���+��� &3E7& ��� &/E7& � ��� �� � �4�� ���

������ ������� �(��� ������0 ��� ���� �( !�� &� ���

�4�������� �� � �4�� ��� +� ��+�� ������ �(( �� ��� �

1& � ���� �� ����� ����0� ��� � ���� +���

�����.�� (�� ������ ������ ��� ����������� � �� �����

������ �� ?7%@�

!.9. &��� �� ��� ������ �

!��� ��� ��� ����� � ��� P ��:��� (�� ���� 0�����

�0�(����� �( �((������ ���+��� ������� ��� �� �,

�4�� �� ���� +��� ��������� �� ����������� �+�,

����� ����A<����� �,�� �� �� +��� �������� ���,������

� �������

.#. ������ ��� ���� � ������� � ��

I0� % ��+ ��� ��� �� �� ��� �� (��4� �( ����� ���

� ���� �0��� �( ������������� ���� �4�� �� �� /*,

�� �� � 8�K %$9 ��� ������� 8�K %79 ���� ����0 ���

���(� �� ����� �( $ �� ��� ��������� �( ��� +�

�������� �+�(��� � /*,��,�4�� �� ���� � ���� ��� (� �

��� ����� ���(� �� ���� 8� L �&%9� !��� (�� ��� /*,��,

�4�� �� ���� 8+�� (��4 ����� � �� �������� *1 ��� %)&

���2�$ � � ��� (� � ��� ����� ����9 +��� B����

����� � ��� �4������ �0� (��4 ����� +��� ��� �� � ��

���0� ����0 ����������� I�� ��� ����� %$ ����

�4�� �� �� /*,�� �� �� 4 ���� ��+�� �� ���

��������� ����� ��� ���0� �( ������� ����� �

����� � ����� �� �������� �� ���� �� ����� � ���

���������� �( ��� �(��� ���� �� ����� ��� � � ���0�� �����

�( ���,(���� ���� �� +� �4������ � ��� ��� ��� ����

� +���� I0� $ ��+ ��� ����� �( ���,(���� ���� ��

� ����� ���� �( 1� C � � ���������� �( ����

�4�� �� �� /*,�� �� � ��� ������� ���� 8�� �� �� %&

������� ������� ���� ��� ����� %& ������� ��� ��

���� (�� ��� ������� 0���� �( %7 ���� � ��� %&

������� ��� �� ���� (�� ��� /*,��,�4�� �� 0����

I0� %� ���� �� �� ��� �� (��4� �( ����� ��� � ���� �0��� �( %$

������������� ���� �4�� �� �� /*,�� �� � ��� %7 ������� ����

����0 ��� ���(� �� ����� �( $ �� N�� �� �+� � �� ��� ���� +���

������� ����� (�� �+� � �� ��� ���� +��� �����0�� �� ��� ���

����� ��� ����� ��� ��������� �( ��� +� 0�(������ �������� �

/*,��,�4�� �� ���� � ���� ��� (� � ��� ����� ���(� �� ����

8 �L �&%9�

I0� $� =���� �( ���,(���� ���� �� � ����� ���� �( 1� C � � �������������� �( ���� �4�� �� �� /*,�� �� � ��� ������� ���� �

=���� �( ���� �� ��� ��� ����� �( %& ���� ��� ����� (�� %&

������� ��� �� ������� ���� 8�K %&9 ��� (�� %& ������� ��� �� /*,

��,�4�� �� ���� 8�K %&9� ����� +� � 0�(���� ����� � � ���

����� �( ���,(���� ���� �� � ��� �� �,�4�� �� ���� 8 � L �&1�

���,�����9�

�.*. * 2���� �� ��. � �'�� ��� 3 *�'�� � 4 5!""#6 1 71$ 1*

Page 4: Subchronic mild noise stress increases HRP permeability in rat small intestine in vitro

�( %$ ���� � +�� ��������� (��4 ����� � � I0� %9�

����� +� � 0�(���� ����� � � ��� ����� �( ���,

(���� ���� �� � ��� �� �,�4�� �� ���� 8� L �&1�

���,�����9�

��������� ����� �������� �� �� � 0�(���� �������,

��� ���+��� ��� ��������� ��� ��� ����� ����,

�� ����� � � �� �( ������� ��� � �� +�

�� ����� � ������� 8I0� 7"9 � +��� � � �� �,

�4�� �� ��� 8I0� 7�9� +�� � ����� L �&&* (�� �������

��� L �&* (�� �� �,�4�� �� ���� � ��� ���� �( ���

���������� ��� � ������� ��� �� �,�4�� �� ����

+��� ��� 0�(������ �((����� 8�K�/*9' ������ +���

���� �,�4 �������� 8�K�7&9� ������������ ��� ����0

+� ��� �� ����� � �������� ���0���� (�� /*,��,

�4�� �� �� ������� ���� �

��� (��4� � ��� %&*,��,�4�� �� ���� 8� K 39 +���

��� ����� ��� ������ ������� �� � ��� ������� 0����

8� K 39 ��+� � I0� 1 8� Q �779� ��� �� ��� ����� �������

0���� �( I0� % 8�Q�C$9� N��� ��� %&*,��,�4�� �� ����

������� ��+�� �� ����� �� ��� (��4 87�% ��� %1�7 ���2

�$ � � ��� (� � ��� ����� ���(� �� ����� �� ��������9�

(��4 ����� �( ��� ����� ���� +��� � ��� �� ���0� �

��� � � ������� �

.!. (����� ������ � ���������� �� ����

I0� * ��+ ��� ��� � ������ ������ ����� � /*,��,

�4�� �� 8� K %&9� %&*,��,�4�� �� 8�K C9 ��� ������� ��,

�� 8�K %)9� "� !�� $ ����� +� � 0�(���� ����� � �

������ ������ ����� � /*,��,�4�� �� ���� � ��� �����

������ ����� �� �� !�� ) ��� / 8� L �&*9� =� �((��,

���� +��� �� ����� ���+��� ������� ��� %&*,��,�4�� ��

���� � (�� +��� ����� ���� +��� ������� ���� ��

!�� &� $� 1 ��� )�

��� � ���� ��� ��������� �� ��� � � ���0�� ������� ���

/*,��,�4�� �� 0���� ?7%@� ���� ���� �� � ��+�� �

��� ���� ����� � �( �����4����� 7&5 � ��� � ����,

�������� ����� � ��� /*,��,�4�� �� ���� �(��� $ ���

�( �� � �4�� ���� +����� ������������ ����� � ��� %&*,

��,�4�� �� ���� +��� ��� 0�(������ ����� �� ��,

����� �� ������� ����� 8+��� +��� ����� )& P %& �02�9� -�

��� 8 �����9 /*,��,�4�� �� 0����� ��� ����� � � ����,

�������� ����� +� ��� 0�(����� I���������� � �����

���� �� 0�(���� �((������ � ��� � ��������� �����

+��� �� ����� ���+��� /*,��, �� %&*,��,�4�� �� ����

I0� 7� 8"9 ���������� ���+��� ��� ��������� � ��� ����� ���(� ��

���� ��� ��� ����� ���� �� ����� � ���� � �� �( %&

������������� ������� ���� � " 0�(���� �� ��� ���������� +�

�� �����E � K�3$' � L �&&*� 8�9 ���������� ���+��� ��� ��������� �

��� ����� ���(� �� ���� ��� ��� ����� ���� �� ����� � ����

� �� �( %& ������������� ���� �4�� �� �� /*,�� �� �� " 0�(����

�� ��� ���������� +� �� �����E � K �C*' �L �&*�

I0� 1� ���� �� �� ��� �� (��4� �( ����� ��� � ���� �0��� �( �0��

������������� ���� �4�� �� �� %&*,�� �� � ��� �0�� ������� ����

����0 ��� ���(� �� ����� �( $ �� N�� �� �+� � �� ��� ���� +���

������� ����� (�� �+� � �� ��� ���� +��� �����0�� �� ��� ���

����� ��� ����� ��� ��������� �( ��� � %&*,��,�4�� �� ���� +�

��� 0�(������ �((����� (�� ������� � ���� ��� (� � ��� �����

���(� �� ���� 8 �K �779�

I0� *� ��� � ������ ������ ����� � ���������� /*,��,�4�� �� 8�K %&9�

%&*,��,�4�� �� 8�K C9 ��� ������� ���� 8�K %)9� "� !�� $ ����� +� �

0�(���� ����� � � ������ ������ ����� � /*,��,�4�� �� ���� � ���

����� ������ ����� �� �� !�� ) ��� / 8 � L �&*9� =� �((������ +���

�� ����� ���+��� ������� ��� %&*,��,�4�� �� ���� � (�� +��� �����

���� +��� ������� �� !�� &� $� 1 ��� )�

�.*. * 2���� �� ��. � �'�� ��� 3 *�'�� � 4 5!""#6 1 71$1C

Page 5: Subchronic mild noise stress increases HRP permeability in rat small intestine in vitro

��� ������� � O���� ���0�� (�� $& �� *& �02� 8�� ���

��� ��+�9�

. . *�� +� �'� �'�����

I0� C ��+ ��� ���� +�0�� 0�� � ��� ������������

���� ���� +��� � �� (�� ��� (��4 �4������ � ��� %&*,

��,�4�� �� 0���� �� � +�0�� � ��� (� � $ ��� �( �� �

�4�� ��� 8������0� (��� ���B� +� ��� >����(��� +�

�� ����� ���� ��� ���� ��� � �� ��� ��� ����0 ��

�����9� ��+�� �� ����� �� +�0�� 0�� �� !�� C ��� �

�������� � +�0�� 0�� ������� �� ������� �� !�� 3�

��� /*,��,�4�� �� 0���� �� ��� ��+ � �� �( ����

+�0��� ��� �� 0���� ��+�� ��������� ����� ���+���

��� � � ������� ��� � ��� %&*,��,�4�� �� 0����� ����

����� +��� �� ����� � ���0�� 0���� �( ���������� ��,

�� ?7$@�

� ����������

�� ���� ��+ ���� �4�� ��� �( ��� �� �� ��������

�� � �( /* �� ����� � �+�(��� ����� � � ���� ���

��� ���� ��������� �� ����� ����������� � "�

����� �� �������� ������ �� �� ��� �� ����� �(

���� �������� ���� ����� � ��+� �� ��� �+�(��� ����� �

� ��� ����� �( ����� ���� �� ��� ���� 0�(����

���������� �� ��� (��4 ����� �( ������� ��� � ���� �

������� ��� �4�������� ������� � "� �� (�� ��� ��,

������� ���� ��� �,�4 �(( �� �( ��� ��0�� �� ��� 8I0�

7" ��� �9 � ��� �� ��������� ���� ��� ����� � �( ���

���� ���� ��� �� ��������� (�� �� ����� �� ��������

������ � ��� ������� ��� � ��� ���� ��� �� �� ������

������� ���� ���� ����+�� ���� ����� �� �������� � ���

���B �( ���������� ������������ �� �0�� ��������� ����0 �(

��� ����������� �� ������ ���

"� ����� �� �������� �( ��� +� �� � �� �����

�(��� ����� ���� �� ����� ��� � ��� ������ �( ��� ��� ,

� ������� < ���A#���� ��� ���� ?%)@� ��+����� ��

����� ��� �� �� � ������ � ��B�� �0�� ��������� ���B�0�

�( ���� +��� ���������� �� ��� (��(��� ����� � �

���� �������� ��������� �� ����� � ���� ����� ����

��� ����� �� �������� ��� ��� ������������ ���B �����

�� ��������� �� ������������� ������� �( ��� ���� +��

����������� ����0 ������� ����� ������ ���� �� ��� ���

���������� ������0 ���� � ����� �������� ����+��

+��� ������� � ��� �� ����� ��������� ����� �� -����,

� ��0��� � ��0 ���� ����� �� ����� ��� , ��� /&,�� �� �

��� ,������ ����0� � 0� ������ ���� ���� (������

+��� �� � ��������� �� ����� �� �������0� ������ ��

��0�� ����� ?%*�%/@� � ��������� �( �������0� ����,

� � ��� ��� ��������� ����� � ������ �� /*,��

�������� �� � � ��� ��� ��� ���� ������ �� ����� ����

�������� � ��� ,�B�0 �((��� �( ���������������

������� �����������,����� �0 ������ 8���9 �� ������

������������ ��������� +� ��+� � < ���A#����

��� ?$1@� �� �((��� +� ������� �� ���� �������������

������ �( ������� ��4������� �� �������� ������0

��� ��������� �( �������0� � +��� � �������0� ���,

��� � ��� �((��� �( ��� ����� ��� �� ����B�� �� ��������

������������� ������� �( ���0�������� �� �����

������� ������0�� �����0 $1 � ��(��� ��� ��� ,

������� �00� ��0 ���� ������ ������ ������� �� ���

��������� �� ��� ��������� �((��� �( ���� N� ��� �����

����� ��� � ����� ����� � � ��� ������ ������ �����

� ��� �4�� �� �� /*,�� �� � �� ���� �((��� �� ��� ����

��������� �� � ������� �((����� ����+��E !�4����� ���

��� ������ 8*A3 �020 ���� +�0��2��� �9 �� ��� (�� $

��� �� ����� � ������ �� ����� ����� �( �������� -0"�

�����0 �� ����� �� �������� ��������� �� ��� ��� ��

+��� �((����� ��� ������������ ��������� �( ����� ������

��� ������ �0��� ?$)�$3@� <������ �������� ���������

�� � �(������ �������� ��B��+�� ��� +� �� �����

�� �((������ � �������� ��������� ���+��� ������� ���

�4�������� ��� �� ��� �������� ��� ������ ������

=�������� � ��� ������������ ������ ���� � �� �4�,

��� ���� ������ (�� �( ��� �� �� ��� �((��� ��� ����

��������� �� ������� �( ����� ������� ������� ���2��

�����0��� ����0� � ��� ��0�� ����� �����

-� ��� ��� ��� ���� +� ������ ��� � (�� /*,�� �� �

�4�� ���� � � �������� (�� ������ ���� ���� �� �� �����

�( "���� ������ ������ ��� ����������� ������

������0�� ����0 �������� �4�� ��� �� 3*,�� �� �

?%�7%@� ����� � � 0������ �0��� ���� �� �( � ��� ��

���������� +�� ����0�� ��� ���0��� �� ��� � ��� ��+��

����� �( ��������� ?$%@� +� +��� �4�����0 � ���

������� �((��� �( %&*,�� �� � �4�� ��� �� ��� ����

������ ��������� ��� �� ��� ������ ������ ����� �

����� �0��� ���� �������� +��� ��� �((����� (�� ���,

���� ����� �

N�� �4�������� ����� �� ���� %&*,�� �4�� ��� ���� ��

����� �����0 �� ��� �� �������� ��� ���� ���0�� -�

�������� ����� �� � ����� �( %$& �� �4����� �� �������

�( ����� )*5 �( ��� ���� � +��� ������ ����� �( %%$ �� ��

�� ���� ������ 3A%&5 �( ��� ���� ���0� ?71@� ���

I0� C� ���� +�0�� 0�� 80213 �9 � ������������� ������� ����

8�K %79� ���� �4�� �� �� /*,�� 8�K %79 ��� %&*,�� �� � 8�K 39�

������� �� ������� � ��� %&*,��,�4�� �� ���� ��+�� � 0�(����

+�0�� �� �� !�� $� �� ����� �� +�0�� 0�� �� !�� C ��� � �������

+�0�� 0�� �� !�� 3 8 � L �&&*9� ���� +�0�� 0�� � /*,��,�4�� ��

���� ��+�� ��������� ����� � �((����� (�� ������� �� !�� C ��� 3

8 �L �&*9�

�.*. * 2���� �� ��. � �'�� ��� 3 *�'�� � 4 5!""#6 1 71$ 1)

Page 6: Subchronic mild noise stress increases HRP permeability in rat small intestine in vitro

�4�� �� �� +��� �� � (�� 1 +��B 8C �2���9 ��+�� ��

���� %&5 �����0 �� �� %&& �� ��� ����� $&5 �� %%& ��

?$/@� -� ��� � ����� 8%�* �9 �4�� ��� �� %%&,�� +��� �� �

������ ���� ����B ������ )$ � ����� ��� ���� � +���

�� �� ��� ���� � ��������� �((��� �� �������� �4�� ���

?%3@� -� ��� ����� ��� ��� �4�� �� �� %&*,�� �� � ��+��

� ��� ����0�� ������ � � ���� +�0�� 0�� ��� (���

���B� ���� ��� /*,��,�4�� �� ���� � �� ����0�� �0,

0� � ���� ���� �����+��� ��� %&*,�� �� � � ��� ����,

��� ��� � �������� ���� ����� �����0 �� ���� �� ���

�� ����� �������� � +�0�� 0�� ��� ��� �((�������

�������� �� ��� ��

-������� ���� �� �� ���� >��� �((������� ��

��� (�� �4������� ?77@� ��� �������� +� �������� ���� ���

+�� �((����� ����0 ���� � ���� ���� ��+,�������� ���

���� �0�,�������� ���� � ��+�� � �((�������

�� ��� � �� ���� �� ����� ��� +�� �� ���� �� ��� ����

��������� ?7@E ��� ��+,�������� ��� +�� � ������

���� �������� 8��0��9 ��� �� ��� � ��+�� � �����(���

��������� ����� �� +����� ��� �0�,�������� ��� +��

� ������ �������� ��� �� ��� � ��+�� �� �((��,

���� � ���������� ������� �� ���� �� ������ ������� �

�� ���� ������� (�� ���� ����0 ���� �� ��+ �((��,

��� �� ��� � +��� �4�� �� �� ��� �� ��� ��� ��� < ���

��� � �� � ��� ��� ��� ���� +��� ��� ������� (�� ����0

����� ��� ��� �� >�� ��� +������ ��� �((����� �� ���

+�� /*, ��� %&*,�� �� � ��� ����� �� �4������ ��

�((���0 ������� ����0 ���� �( ��� ���� ����� �����

��B�0 ��� ������� ���� *&5 �( ��� %$ ���� �4�� �� ��

/*,�� �� � ��+�� �� ��� ��������� ����� ��� �������

���0� ��� �� ���� � �� ��� �� ������ � �� +����

��� ���� ��� ������ �( � ������� ��� �� 0���� �( �0��

���� ������0 ��� �� ��� �� ������ 3� &�*3 K 75���� � � ���� ���B��� ���� �� ��� ��� �� ���� ���� ���

�( ��� �0�� ���� �4�� �� �� %&*,�� �� � ��+�� ��

��� ��������� ����� ������� ����� � ��������� �����,

����� ���� (�� ��� �� ������0 ������ ��� ������

��+�� ����� �� ��� � ������ ������ ����� �(��� ��,

������ /&, �� /*,�� �� � �4�� ��� ?7%�7$@� +����� ����

�� ��� ��+ ��� � �� ��� � �� �������� 3*,�� �4�� ���

?7&@ �� �� �������� %&*,�� �� � �4�� ��� 8��� ��� ����9�

��B�� ��0������ +� �������� (�� ��� ��� ��� (���0 ����

���� ����0� ���� ��� ���0��� ��� ,���������

�� ��� � +��� �4�� �� �� �((����� �� � ���� �� �

<������� ��� �4��� ��� ���0��� ����� ����� ��

�((������� �� ��� � �� �� � ��� �� ��� � ������ ��

���� ��� �� ���+� ���� ��� �� ��� � �( ��� ���� ��

���� �� ��� ��� ���� ���� ������� �� �,���������

+�� �� ���� �� �((��� �� ��� ������ ����� ��� ��� �,

��� ������ (������� ��� � (���0 �� ���� � ���0�

���� �� �������0��� ���� � +��� �������0���

�((��� �( ����������� �� � ��� ��� �0����� ���� +��� �

��.����� �((��� �� ����� ���� ��� ���0�� ����

���������� �� �� � ���� ��� �� ��� ��� ���� ���� ���

���� ����� �� ��� �� ������� �� ���+��� ��� ��.��� ���

��� �� ��

-� ����� ��� ��� ��� ���� ��+ ���� �������� /*,

�� �� � ��� �� ��� � � ������ � � ��� ���� ������

(������ ��� �� �� ����� �� �������� ����B� �( �����

������������ �� ����� � �� �� ���� �� �� ����� ��

���0��� ���� �� ��� ��� �� ��� � ��� +�� ���

�� ���� �( �����0 �� �.���� �� (��� ���0�� ���

�(������� �� ��� � �( ��� 0�� ��� �� I���������� ���

�((��� �( �� � ��� �� ��� ���� ������ (������ ���

���� ���� ������� �� �,����������� ������� �� ��� ���� ��

�( ��� �� � �4�� ����

����������

?%@ "���� "� �� ������� ��� ���� �� �� "�������� �( ������� �������

������ �� ������ �� � ��� � ��� ��� � ����� =����� ���

%/31'1%E)%AC�

?$@ ������� �� �������0 R"� :((��� �( � ������0��� ��� �� ��� ���

+���� ���� ���� � ��� ���� ������� � �����������0� %/3)'/7E/%A)�

?7@ ��� � ��� ������� ��� !� ���� �� #������ ��� ����� �"���

������ ��� ���� �"� "���� ��� ������� ��� ���� ���������

�� ����� ������ � ���� ��+ �������� ��� � ��� ��� � ���� �0�

�������� ��� � �� � �������0� ����� � � �����������0� %//3'

%%1E"7*$�

?1@ ���S�� R� ��S �� :������ (�� ��� ��������� �( �����������,��,

��� �0 (����� � ��� 0� ������ ���� � �������� ������ �� ���� ��

��� ���� ��� � ��� ���� �� %/33'11%E%A1�

?*@ !� ���� �I� ����0�� �R� ��� ��� �0��� �� "�������� �( ��� �

����������� ��� ������ ������ �� ��� � �� ����,��� ��������

�� � ��� � ��� � ��� �� ����� %/33'11E$)7A3&�

?C@ !���� :"� -��� ���� ��������� ����� �� � ���� ������ ������

�(��� ������ ���0��� %//&'%&)E1%%AC�

?)@ !�((� R�� T����.� �"� ��� ���� ��� ���� �:� <� �� ��� ���,

�� �I� ���B� ��� N0�� �R� ���� �� ��������� �( ���� ���

����� � �� ������� �( � �� � ������ ���������� � �(�������

��+�� � �� �� ����� ��� %//%'%)E%&%A%&�

?3@ :� ��� �!� ��������B�� �-� "��4����� �<� ���� �� ��� O� ��� �<�

-����� �� 0�� ��������� (����+�0 ���� ������ "��� ���0 %//%'

%$CE%/3A$&&�

?/@ I�B��� �� =���� �� ���0� �� -���� �( �����������,����� �0

������ �� 0� ������ ���� ����� ��� ����������������� ������

� ����� ������� ��� ������ +�� ������� ��+�� ������� ��

%//3'1$E31*A/�

?%&@ ���� �� �� ����� �����E � ����� ������� �� ����� ��� (����� ,

������� � ���� �� ���� %/3&'*E*%A3�

?%%@ ���� ��� #����� B� ��� �������� ���������� 6���� ���������

���������� ���� � �0 ����4�� � � ������ ������ � � :4� ���

%/CC'%$1E%%$7A71�

?%$@ ���� �"� "��� �� ��0�����B ��� ���B��� �� " ����� �� �4,

�������� �( ��� �((��� �( ���� � �� 0���( � ��� ���� ���� �����

�(���0�� "��� 8:�� � ��� ��9 %/)/'7)/E%A/�

?%7@ ��S �� I������ �� ���S�� R� :((��� �( ���� �� ��� �� 0� ���,

��� ���� ����� � ��0 � � �����������0� %/3C'/&E%11$A)�

?%1@ ��S �� I������ �� ���S�� R� ��������� �(������ �( ���� ��

��� ���� ��� �� 0� ������ ���� ���� � � ��� " � ��� ��

%/3)'$*7E %$1A3�

?%*@ ��S �� ������ �� !��������� -� O��������� � ���S�� R� ���� ,�,

����� ����0� � 0� ��� �����0� �� �������� ������ ��� ��� �

0�� ������ ����� � ��0 � � �����������0� %/3/'/)E%%&%A)�

?%C@ ������ ������ �( ��� =��������� � =� � ��� ������� ������ %//12

%*:� %* �������� %//1� ��� ��0��� ��� =��������� � %//1�

?%)@ #���� "�� ������� ��� ��� � ��� ���� ��� ����� �"�

���� �"� ������ ��� ���� ������ ���� �������� �������,

����� ����B� � ��� ������� " � ��� �� %//3'$)*E %&7)A11�

�.*. * 2���� �� ��. � �'�� ��� 3 *�'�� � 4 5!""#6 1 71$13

Page 7: Subchronic mild noise stress increases HRP permeability in rat small intestine in vitro

?%3@ R ��� ���B� N�� ���� �<� ����� ��� "�� ������ �"� !����,

��� �( ��� )$ ����� �(��� ���� �� ���� ������� � ��� ��������

���� �� %//7'C/E%1CA*&�

?%/@ ����� ��� ����. �� ������ �� ��. ��� ����. ��� ������ �I�

"0���� �� ����� �� R� O�0�� � �� ��������� � ����0� � ���

��+�� ����� ����0 �� ����� ��� E �� �4�������� ���� � ���

��0� �� � ���0 %//7'3&E1)/A37�

?$&@ =������ I� ����� <�� ������ <�� R����� �R� ����� �� -����� ��

������ ����� ����0 �4�� ��� �� � ��� (�� ������� !0 ! ��

%/3*'7&E1&A1�

?$%@ ���� !R� N����+����� �:� =���� �� ��� :((��� �( ��� �� ���� ��

�� ��������� ��� �� �.���� �( 0����������� �� ��� � � ��� �

����� =���� � %//&'%&1E$3A7C�

?$$@ ����� ��� #����� B� ��� R� �( ������������ ������ (������

� ������ +�� ��0��� ����� �� ��� ��� ���� R�� -��� � %/)%'

$*E$$&A/�

?$7@ ����� ���� �����B �� <���� �"� �� �"� -��� ���� ����,

����� �(��� ����� ����� ��� �������0� ���B ����� �� +�����

������� �� ���� ��������� � "��� ���0 %//7'%$3E1*7A)�

?$1@ ����� �� ������� ��� ��� �� =��� U��0 �,�� U��� !� ���� �"�

������ ��� �����������,����� �0 ������ � ��� ,������

������ �������� �������� ���0� � ��� ���� " � ��� �� %///'$))E

7/%A/�

?$*@ ������� ��� #� ��B� 6� ��#�� !�� ������ ��� "���� ��� ��

������ �� ������� ��� ����� � �������� ��������� � ��� �,

�� ���� " � ��� �� %//1'$C)E )/1A/�

?$C@ �������B "� !� ���� �I� O�� !�B � ���((�� "�� ������� ���

��������� ����� ������� � ��� ��0������ �( ���������,

��� ���(��+� -�E ������� �� "0����� � ������ :� #������ B�

�� ����� � ���� E ��������� 0����� ��� ���������0��� ��,

����� � =�+ U��BE ����� ��� ����� ������ ���� ��� %//C'

$$)A1%�

?$)@ ���. �� ����� � ������ �� "�� :� "������ �� ��� �((��� �( ��4,

����� ��� ��� ������ �� ��� ��� ���� ���������E ��� ���� �(

�������� ���������� � �����������0� %//1'%&CE7*A1%�

?$3@ ���. �� ���� �� ������ �� "�� :� "������ �� ��������� �� �(

��� ��� ���� �������� ������ ����0 ������ ��������� ��� 0����,

������� ��� � ��� ���� ��� %//C'$1EC7*A1%�

?$/@ ������� ��� ������� ��� !� �A �� ��� � �����0,�� (�� +���

�� � � ��� ����0��A!�+��� ���� I���� "��� ��4��� %/33'%&E

%&/A%7�

?7&@ O�� ���� ���� N���0� �� �� ����� ��� !���� �� � ���

R������ �� ��,��������� �((������� ����0� �( ��� (������

� ��� �4�� �� �� ������ ��������� �� �� ��� �� ����� %//C'

C&E%*$)A77�

?7%@ O�� ���� ���� !���� �� � :���� �� ����� "� �����B :�

N���0� �� �� <�0��� O�� ������� ���� ��� ��� �������������

�� ��� � �� � ����� ���������� ��� �� ������0 �������� �� �

�4�� ���� =��������������0� %//)'C*E$&&A/�

?7$@ O�� ���� ���� N���0� �� �� ��� ���� R� ������ �((��� �(

�������� �� � ��� ����� �.��� �4�� ���� "�:� %//)'/E*/A)%�

?77@ O�0�� <�� ��� � �� ������ ��� ��� ��� � ����������� ���

������ ������ ����� � ��� ��� � =���� � R��� %/33'$$�83)9E%37A3�

?71@ <��� <!� ���� �"� !���� "�� ������ �<� ����� ����0� ��� ������

���� �� ������� � �� � ���0�� "�� N���� ������ R����0��

%/3%'/&E*31A/&�

�.*. * 2���� �� ��. � �'�� ��� 3 *�'�� � 4 5!""#6 1 71$ 1/