structure–activity relationships for inhibition of human 5α-reductases by polyphenols

12
Structure±activity relationships for inhibition of human 5a-reductases by polyphenols Richard A. Hiipakka, Han-Zhong Zhang, Wei Dai, Qing Dai, Shutsung Liao * Department of Biochemistry and Molecular Biology, The Ben May Institute for Cancer Research, and The Tang Center for Herbal Medicine Research MC6027, University of Chicago, 5841 S. Maryland, Chicago, IL 60637, USA Received 17 April 2001; accepted 1 August 2001 Abstract The enzyme steroid 5a-reductase EC 1.3.99.5) catalyzes the NADPH-dependent reduction of the double bond of a variety of 3-oxo-D 4 steroids including the conversion of testosterone to 5a-dihydrotestosterone. In humans, 5a-reductase activity is critical for certain aspects of male sexual differentiation, and may be involved in the development of benign prostatic hyperplasia, alopecia, hirsutism, and prostate cancer. Certain natural products contain components that are inhibitors of 5a-reductase, such as the green tea catechin )- epigallocatechin gallate EGCG). EGCG shows potent inhibition in cell-free but not in whole-cell assays of 5a-reductase. Replacement of the gallate ester in EGCG with long-chain fatty acids produced potent 5a-reductase inhibitors that were active in both cell-free and whole-cell assay systems. Other ¯avonoids that were potent inhibitors of the type 1 5a-reductase include myricetin, quercitin, baicalein, and ®setin. Biochanin A, daidzein, genistein, and kaempferol were much better inhibitors of the type 2 than the type 1 isozyme. Several other natural and synthetic polyphenolic compounds were more effective inhibitors of the type 1 than the type 2 isozyme, including alizarin, anthrarobin, gossypol, nordihydroguaiaretic acid, caffeic acid phenethyl ester, and octyl and dodecyl gallates. The presence of a catechol group was characteristic of almost all inhibitors that showed selectivity for the type 1 isozyme of 5a-reductase. Since some of these compounds are consumed as part of the normal diet or in supplements, they have the potential to inhibit 5a-reductase activity, which may be useful for the prevention or treatment of androgen-dependent disorders. However, these compounds also may adversely affect male sexual differentiation. # 2002 Elsevier Science Inc. All rights reserved. Keywords: 5a-Reductase; Polyphenols; Flavonoids; Green tea catechins; Epigallocatechin gallate; Prostate cancer 1. Introduction The microsomal enzyme steroid 5a-reductase EC 1.3.99.5) catalyzes the NADPH-dependent reduction of the D 4,5 double bond of a variety of 3-oxo-D 4 steroids [1,2], including the conversion of testosterone to 5a-dihydrotes- tosterone, a process thought to amplify the androgenic response, perhaps because of the higher af®nity of the androgen receptor for 5a-dihydrotestosterone than for testosterone [3]. Two different 5a-reductase isozymes have been characterized in humans, monkeys, rats, and mice [4± 7]. The two human isozymes share approximately 50% sequence identity and have different biochemical proper- ties. For example, the type 1 isozyme has a broad basic pH optimum and low af®nity for testosterone K m > 1 mM), while the type 2 isozyme has an acidic pH optimum and high af®nity for testosterone K m < 10 nM) [8]. Studies of mice with genetically engineered 5a-reduc- tase gene knockouts, as well as investigations of natural 5a-reductase de®ciencies in humans, have identi®ed some of the roles this enzyme plays in different biological processes [7]. Female mice de®cient in the type 1 5a- reductase have impaired cervical ripening, leading to defective parturition [9,10]. This defect may be due to impaired catabolism of cervical progesterone, which is also a substrate for 5a-reductase. Uterine type 1 5a-reduc- tase is also important for fetal viability, because 5a-reduc- tase activity limits fetal exposure to toxic levels of 17b- estradiol by competing for substrate with aromatase, which catalyzes the synthesis of 17b-estradiol from testosterone [11]. In humans, activity of the type 2 isozyme is critical for differentiation of the prostate and male external geni- talia [4,12,13]. Based on studies of individuals with Biochemical Pharmacology 63 2002) 1165±1176 0006-2952/02/$ ± see front matter # 2002 Elsevier Science Inc. All rights reserved. PII:S0006-295202)00848-1 * Corresponding author. Tel.: 1-773-702-6999; fax: 1-773-834-1770. E-mail address: [email protected] S. Liao). Abbreviations: DMEM, Dulbecco's modified Eagle's medium; EC, )-epicatechin; EGC, )-epigallocatechin; ECG, )-epicatechin gal- late; EGCG, )-epigallocatechin gallate.

Upload: richard-a-hiipakka

Post on 13-Sep-2016

213 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

��������������� ����� ����� � � ���� � � ������������������ �� � ������ ��

������ �� ������� ������ �� ������ � !�� "�� !�� �������� #� $

���������� �� �������� ��� ��� ���� ������ ��� ��� ��� ��������� � ��� �� ������ �� ��� ��� ���� ������ �

������ ���� ��� ������ � ����� � !��"������ ��� ��� #$%& '( ��������� ��� ��� �) ���* � !'+

������ %& ���� '((%) �������� % ������ '((%

��������

*�� ��+��� ���� � ������������ ,-. %�/�00��1 ������+�� ��� 2�!3����������� ������ � � ��� � ���� � �� � � ����� � /� 4 ��5

���� �� ������� ��� � ���� � � ���� ���� �� � �������� ���� ���� ��� 6� ������� ������������ ����� � ������ � � ������ ������� � ���� ��4��� ���������� �� ��� ��� �� � ��� � ��� ���� ����� � ����� �� ����� ����������� �� ����� �������� ��� �� �����

������� .����� ������� �� ����� � ���� � �� ����� ���� ��� ���� �� � ������������� ���� �� ��� ����� ��� ������� ,�1������� ������� ������� ,-7.71� -7.7 �� 8� � ���� ���� � � ��������� ��� � � � 8� ������� ������ � ������������� ����������� � ��� ������� ����� � -7.7 8�� � ������� ����� ���� �� ����� � ���� ������������ ���� �� ���� 8��� ���� � � �� ��������� ���8� ������� ����� �������� 9���� :� � �� ���� 8��� � ���� ���� �� � ��� ���� % ������������ ������ �������� ;������� ����������� <����� = ����� �� ���+��� �������� ��� �������� � 8��� ���� ������ ���� �� � ��� ���� ' ���� ��� ���� % � +���� ������

���� ������� ��� �������� � ������ �� � �� ���� 8��� � �� ������� ���� �� � ��� ���� % ���� ��� ���� ' � +���� �������

��+���� ������� ��� � ���� �� � ������ �������� ���� ������ ��� ��������� ������ ��� ���� ��� � ����� ��������� *�� �������� � �

������ � �� �� 8�� ������������ � ��� �� ��� ���� �� ���� �� 8�� �������� � � ��� ���� % � +��� � ������������� ���� � �� ������ � �� ���� ��� � ������ �� ���� � ��� � ���� ��� � � ������������ ���� ��� ��� � ������ � ���� ������������ ������ 8������ �� ������ � � ��� ������ � � ��������� � ���� ������������� �� ������ � 8���� ����� � �� ���� ��� ��� �������� ������

���� ��4��� ���������� �� � '((' -����� ������ 6��� ��� ����� ��������

,��-���. ������������) 3 ������ ��) >�� � ��) 7���� ��� ��������) -����� ������� �������) 3� ����� ������

� ���� ������

*�� ��� � ��� ��+��� ���� � ������������ ,-.%�/�00��1 ������+�� ��� 2�!3����������� ������ � �

����5�� � ���� � �� � � ����� � /� 4 ��5 ���� �� ?%�'@�������� ��� � ���� � � ���� ���� �� � �������� ����� ���� ��� � �� ���� �� ���� � ������ ��� ���� ����

���� ���� ������� ������� � ��� ����� ��<��� � ���

���� ��� ������ � � � �������� ���� ���� �� ���� � ����� ���� �� ?/@� *8 �������� ������������ � +���� ������� ���������+�� � ������� � ������ ����� ��� ��� ?5�

&@� *�� �8 ����� � +���� ����� ���� 4������ �(A

��;����� ������ ��� ��� �������� � ������� �� ����

���� > � �4������ ��� ���� % � +��� ��� � �� �� ���� ��

����� ��� � 8 ��<��� � � ���� ���� �� ,,� � % �B1�8��� ��� ���� ' � +��� ��� �� ���� �� ����� ���

��� ��<��� � � ���� ���� �� ,,� � %( �B1 ?C@������� � ��� 8�� ���������� ��������� ���������

���� ���� �� �� ���� �� 8��� �� ������� �� � �������

������������ ��<������ � ������� ��� ����<�� � �� � ��� � ��� ��� ��+��� ����� � �������� � � ����

�� ������ ?&@� >����� ��� ��<���� � ��� ���� % ������������ ��� ������ ������ ������� ������ �

������� ������� � ?0�%(@� *�� ������ ��� �� ��� �

������ ����� ��� � ������ �� ������ ��� 8��� �

��� � ��������� � � ������������� D����� ���� % ������������� � ��� �� ����� � � ����� ������ ������� ������������� ����� ���� ����� �4� ���� � � 4� ����� � %&�������� � �� � ������ � � ��������� 8�� �� ������� 8���

������+�� ��� �������� � %&�������� � �� � ���� ���� ��?%%@� 6� ������� ����� � ��� ���� ' � +��� � ������

� � ���������� � � ��� �� ����� ��� ���� �4������ ����

���� ?5�%'�%/@� =���� � ������ � ������� 8��

= ������� 3������ � �� E/ ,'(('1 %%E��%%&E

(((E�'0�'F('FG � ��� �� �� ������ � '((' -����� ������ 6��� ��� ����� ��������

366H � ( ( ( E � ' 0 � ' , ( ' 1 ( ( C 5 C � %

$ . ����� ���� ���� �� *���H �%�&&/�&('�E000) ��4H �%�&&/�C/5�%&&(�/0���� �������. ��� I����������������� ���� ,�� #� 1�

+����"������. !B-B� !������ J� � ���� -����J� �����) -.�

,�1����������) -7.� ,�1������� �������) -.7� ,�1���������� ��������) -7.7� ,�1������� ������� ��������

������� ��<������ � ������������ ����� �� 8��� ����� ��� �� ������ � �������� ������� ������������ ������ ��� � � �� � ��� ���� ����� � � ����� � �����

�� ����� ������� ����� �� ����� ���������� ?%5@� ����

?%�@� �� ���� ?%E�%&@� ��� ������� ?%C@� ��������������� ��� ���� �� � ��� � ��� � � �� � ��� ���� ����� �

�� ����� ������ ��� � ����� ��� �� ���� ����� � � ������

����� � �� ����� ������ � ������ �� �� �������� �����

�� ��� ?%0@� � � �� � ������� ����� � ,KC0#1 ����

��������� ��� ����� � ��� ���� ' ������������� � � ��� � �� �� ������ � �� �� ���� ��� � � 8�� � ������ �� �

�� ����� ������ � ������ 8�� �������������� ��� ���

� �������� 8���� ?'(@� >��������� � �������� ������������ ���� �� � ��������� ���� � ����� ����� �� �

����� ���������� ?'%@ ��� �� ���� ?''@� ��� � � ���

���� ������ � ������ ����� �� � ���� ��������� � �

�� ����� ������ ?'/@�

!�� ��� �� �� ����� � �� � � ������� ������ ���

����� ��� � ������� ��� ���������� � ��� ��� �4����

�� �������� ���������� � �� ����� ������ � ������

?'5�'�@� ���� ���� ���� �������� ��� �� 8�� ��� ����� �

� ��� � ���� �� ����� ��� �� ����� ������ ?'E�'&@� ������

� �� ����� ������� � ������� ��� �� 8�� ������� �����

8�� � ��� �� ����� ��� ������ �� ����� ������ ���� �����

��� �� ����� �� � ��� �� 8� ���� ����� ��� � �����

���� �������� ������ �������� ���� ��� ���� �� � ������������ ?'C@� 6� � � � �� 8� 8������ ����� ��� ��������

� ������ ���� ���� ����� �� "�" � ������� ��� ����

�L����� 8�� ��� ����� ��� ������� -7.7 ��� � �����

� ��� ���� �������� ������� � 8�� ����� ���� ���� ��

� �������� �� ��� ������� �� ������ ���� ��� � ��� �� ?'0@�

9���� ������� �� ���� ���� �� � ������������ ���� ������� ����<�� ������ � ������������� ����� ����� ���� ��

���� ���� ��� ?/(@) ��� ���� ����� ������������ �� ���� � ��� = ?/%�/'@) ��� :� � �� ��� �������

�������� � �� � ������ � ����� �� ���+��� � �����

�� �� �;� �� ��� ����� ���� �� ?//@) ��� �������� ;�� ���

������ � ?/5@) ��� ��� � ���������� :� �� ��� ��������

��� ����� ��� ��� � �� �� ?/�@� ���� ���� � �����

���� �� � ������������ ��� � ������ ��� 8� ��� ���������� ��� ����� � � ����� � ������� ��� ��������

� ������ �� � ���� ������������ � �������� 8������������� �������� ��� �� ����� � � � ���� ���� � �

������������ �� ��� ����� � � �� ���� � � �� ��� ��������� ��� 8� ������� ����� ��������

� ��������� �� ����� �

�(&( ���������

?5�%5.@�*��� ���� �� ,�(�E( �.F�� �1 8�� � �� ����

� 3�����-���� #�� �������� 3��<�� ��������� ,�1���������� ,-.1� ,�1������� ������� ,-7.1� ,�1����������� ������� ,-.71� ��� -7.7� 8��� � ����� �� � �����

��� ,�������� ��������1 � �� ��� ��� �� �� �������� ?'C@�

9���� �������� ����� 8��� ��������� �� � ���� �

������ � 8��� �������+�� � �� ��� ��� �� �� ��������

��� 8� .����� ��� ��������� ����� 8�� �������+�� ��

�������� ?/E@� � ����� � ������������ ������� �

��� ����� ��� ������� -7.8��� �������+�� �� ���������

�� �� �� ���� ��� ������� ���� � ��� /����� 4�

�� �� � -7. ,>�� %1� -7. ������� 8��� �������+��

�� ���������� ��� �4 ���� 4�� �� ��� � -7. ���� �����

�������� � ������� � �� 8�� �� ������� ���������� �

� *�� ������ �� �� C�' � �� ��� /�� � ������� ,�1������� � � ��� ���� �� ���� 4��� ��� �����;���� ����

������� � ��� ���� ������������� ������ ������� ,�1?/&@� ���� ������ ,�1 � -7. 8��� �������� �� �����������<��� � � ��� /����� 4�� 8�� ��� ���� ����� ������

������ ?/C@� ������� ������ ,�1 � -7. 8��� �������� ������� � 8�� ��� ��;���� ���� � ��� �������� � ����

�� ��4������ ���� ��� ���������� ������ ?/0@�

���� �� ����� �� ��� 8��� ���� ��� �� �� � � ��� �8�� ����������� ������ :� ���� �� ��� ��� -7.

���� ��� ��� � �� ���� �������+�� � �� ��� ��� �� 8���

���<�� �� ���� ��� ��� ��� ������ ��� 8��� ����������

+�� �� %��2B�� ������ �� �� ���� 8��� � ������� 8��

���� ���������� ���� -7.������ ����� � .!/9!H E�5'

,'�� �� ��� �1� ��0' ,%�� �� 1 � '�'C �+� ��� �1� ��CC,%�� �� 1 � '�'C �+� ��� �1� ��/E���'C ,/�� �� .�M.���/1� 5�0' ,%�� �� �'1� '�C' ,'�� �� 1 � &�5C �+� .�'.91�'�(( ,5�� �� .�'�.M.�.�'1� %��(�%�( ,%5�� �� .�'1�

(�0( ,/�� �� 1 � &�% �+� .�/1 ����

�(�( /2������� ����� #�0���� ���� ��3����

��� ���������� ��� �2��� ��

.��� ���� �4������� ��� �������� ����� � ����� ������������ 8��� �������� �� �������� ��� ���� ?'C@� 6�

����� �!2�� � � ��� ����� ����� % ��� ' �������������8��� � ����� �� � ����� �� ����� �!2� ������� ���

����� ��� �� ��� ���� ��� �4����� � ��� � �BK& ?5(@�

��� ��� ���� �� ��� � ����� � ������ ��� ����� % ��� '

������������ �!2�� 8��� ��������� ���� ��� ������������� =9�. '/ '0/ ?5%@� ��� %� ����� ?5'�5/@ 8��� �������

8�� ���� ���� ��� ����� � ������ ��������� ���� ���

8��� �������� � � ��������� � 75%C ?55@� .���� �4�������

����� ��� ���� % � ' ����� ������������ 8��� �4����������� 75%C ������ � ���� 8��� � �:����� 8��� ��� ��

�� � ������ �� ������+�� �� .���� 8��� � ������� ��

���������� � ,�(( � � � %( �� �� ''�1� 8����� ��� 8��������� ����� � ������ %(A ����� � �� ������

;����� �� +�� � ��� ��� ��� �� ��� �� �0(� ���� ����� ��� �������� � � � ��� � ��� ����� � � ������

���������������� %� ����� 8��� �� ��� � � �4����� � � ������������

����� � ���� � 8 ������ ��� � ������������ �����,%�C �� �F��F%(E �����1 � ������ 8�� � ����� � ����

���� ����� ���� 8��� ������� ������������ ����� ,���� % �'1 � ����� ���������� 8�� ��� ������ ���� ����� � ��

����� ������������ �!2�8�� 'C�� �� ������� ,�' �� �F

%%EE �(+( �����44� �� ��( 5 �� ���� �� 6����� ��� �* 7����8 &&�#9&& �

��F%(E �����1 ���� � ����� ���������� 8�� � ��� � ���

������ ������������ �!2�� ���� ��� ����� � ������ ������ ����� ������������ ����� 8�� � ����������� ���� ��� ��� �� ��� ������������� �� ��������� ��� ��:��� ������������� � ��� �4 ��� �� �����

��� � � ��� ��� ��� �� ��� ��+����

> � ��� �������� � � ��� � ��� � ������ �������������� ����� 8��� ���8�� � �� ��� ���� � � ���+�� �

%( �� � (�/' B ���� �� � ������ '( �B � ������

�� ������� �� &� % �B -!*�� (�% �B ����������������

� ��� :� ��� ��� % �� ��������F�#� ���� � ! ����� � ���+�� ��� ���� � ���� �� *�� � � ������ 8��

���������� �� %((( � � � %( �� �� 5� ��� ��� ������ 8����������� *�� ����������� 8�� ���������� �� %((�((( �

� � E( �� �� 5�� ��� ��� �������� ������ ,��� � �������� �1 8�� ����������� �� %(�'( �� �� ���F�# �

(�/' B ���� ��� '( �B � ������ �� ������� �� &�

% �B -!*�� ���� � ! ���� � � ���+��� *�� ��� �

� ��� ����� � 8�� �� +�� � ��� �� ��� �� ��� �� �0(����� ���� � ������ � ������������� � ������� ������������ � �� �� �������� ����� �� ����� ����������

���������� � � ���� �4������� 9� ��� � ��� ����������������� � ���� �4������� &(�C(A 8�� ������� � ��� ��� �

� ��� ����� �� %(�'(A � ��� ������� ����� � ,%((( �

������1� ��� '�EA � ��� ��� � �� ����� �� ����������������� � ��� � ��� � ����� �� � ����� ���������� 8��

��� � ������ ������������ �!2� 8�� /%�� ��

,/�( �� �F�� ��� �� � �� ���) ���� %1 ��� %0�� ��

,'%& �� �F�� ��� �� � �� ���) ���� '1 ������� ����

����� ,%%�� �� �F�� ��� �� � �� ���1 � ��� � ���

�� � ����� ���������� 8�� � � ��� � ����

�(*( +���� #�0���� ����

*�� ��������� ����� 8�� ����� � ��� ����������� �

�������� ���� ���� �� �� ���� � �� � ���� ���� �� � ����������� � ��� � ��� �������� �� � ����� � ������

����� ��� ���� % � ' ����� ������������� *�� ������4����� � � <��� ���� � (�'� �#� � ������ / �B?5�%5.@����� ���� ��� (�% �B2�!3�� %(( �B � ������

�� ������� �� &�(� *��� � �� ���� 8��� �������� � 8����

� ������� ���� 4��� ��� '�� �# � ���� ����� ���� ��8�� ����� � � ����� � �4 �� � � ��� ���� � �

��+���� . ��� �� � ������ ����� � �������� �� � � ��

����� *�� ����� � 8�� ������� �� ��� ���� � � '� �# ���� � ��� � ������ '� �� � �� ��� � ''� �# � ������� �4���� �� /&�� *�� �4���� 8�� �������� �� /&� � �% ��� ��� ��� ����� � 8�� �� ���� �� ��� ���� � �

(�� �# � ����� ������� ��� �4�� � � % ��� �����

���������� � ,%(�((( � � � � �� �� ''�1� ��� ���������� 8�� ��� ��� ���� ����� ������ ��� ��� �

'� �# � ����� ������� ��� ������ � � ���� ��� E(*#. ������ 8��� 8�� ���� ��� � � � ���� ������

� ������ � ��������� ��� ���H����� �������H������ �

,C�H%�H/1� . ���� � � ���� ���� �� � ���������� ������ ���� 8�� �������� �� ������� ��� *#. ����� � ��

>�� %� �������� ������ � � �� �� �� ���� ��� ������� ����� ������� � -7.� ��H �������) *=!B�H ����������������������) *=!B�.�H ��������

���������������� ��� ���) !..H ����� ��4������ ����) !B�3H �������������) *�>H ��������� �����) ��H ������� �� ��) ��H �� ���� �� ���

�(+( �����44� �� ��( 5 �� ���� �� 6����� ��� �* 7����8 &&�#9&& � %%E&

�B=6� ��� ��������� ������� � ������� � �� ��� �

������ �4� ��� � ��� *#. ����� � � �� �� CE( �� ��

�� ������ ���!���� ���� ���� �� 8�� ��� ���� ���������� ��� ,N0�A1� 8�� ����� � � � ���� � � ���� ��

��� �� � ���� ������ ��� ���� ����� ��� 5����� ������

� ��� � ���� ����� ����� ��� ��� ��� � ��� �����

8�� �� � 0( � 0�A�

6���� � � ������������ ����� 8�� ��� �������� ������ ����� �4������� ����� ����� ���� % � ' �������������� .���� 8��� ������ �� �(�((( ��� 8��� � � '5�8��� �����

� % �# � !������ J� � �<�� -����J� ����� ,!B-B1

� ������ �( D �������F�#� �( �� ������ ����F�#���� %(A ����� � �� ����� ��� ���� ������ � �� ����

��� � 8�� �A .9' � � %C �� �� /&�� *�� ����� 8�� ����������� � (�� �# � ���������� !B-B� ��� � �# � ����� �� ��� � 8���� � ������� ���� 4�� 8�� ������ .����

8��� �������� � � % �� �� /&� ��� �� ��� ���� � �?5�%5.@����� ���� ��� �� � <��� � �������� � � %�� �B�*��� ����� 8��� �������� � � / �� �� /&�� ��� ����� 8����� ��� ��� ��� ���� ���� �� 8��� �4������� 8��

����� �������� *�� �� ���� � ������� ���� ���� �� ���

�������� ���� ���� �� � �4������ 8��� ��������� ��*#. ��� ������� ��� *#. ����� �� �������� �� ��

*�� � �������� � � ���� � �� ��� ������ ��� � ����

� � � ���� ���� �� � �������� ���� ���� �� �� �(A,6.�(1 8�� ��������� �� ����� ��� � ���8��� ���� �����

���� � ���� ���!���� ���� ���� �� 8�� ��� ���� ���������� ��� ,N0�A1� 8�� ����� � � � ���� � � ���� ��

��� �� � ���� ������ ��� ���� ����� ��� 5����� ������

� ��� � ���� ����� ����� ��� ��� ��� � ��� �����

8�� �� � C� � 0(A�

�(%( �6)� ��������

*�� ������� � -7.7 �� /&� � ���� ������� �����,!B-B1 �;�������� 8�� �A .9' ,�� &�5�&��1 � �

%(( �B � ������ �� ������ ������� �� &�(� ����� �

������� ���� 8��� ���� � � 8� ������� ��� ��������� ������ �

������������� ����������� 8�� ��������� �� � �� ���-7.7 � �������� �� �� �3#. ���� � 2 ���� , �����1

.%C � ���� ,/�0��� %�( ��1 ��� � ����� ���� � ��5(� �� � : 8 ���� � % �#F�� 8�� ���� �����H������������H(�(�A �� ��� �� ��� � 8���� ,%'H'HCE1� -7.7

8�� �������� �� � �� ��� ��� ��� ������ �� '&� ���

� �������

*�� ���������� � �� �� � �� ���� ��������� � ���

��� �� ��� �� 8� � >��� ' ��� /� � � ����� � � ���

������ � ��� � �� ��L � ����� ��� ��������� -.� -7.�

-.7� ��� -7.7 ,>�� '1� � ���� ��� ����� % ��� '

>�� '� ���������� � ��� � �� ������ � � ���� �� ����� ������ �������������

%%EC �(+( �����44� �� ��( 5 �� ���� �� 6����� ��� �* 7����8 &&�#9&& �

� +���� � ������������ � ��������� ��� 8� ������������� � ��������� � *���� %� D��� � ��������� ������

-.7 ��� -7.7 8��� ������ ���� �� � ���������������� 8��� -. ��� -7.� ��� ��� ���� % � +��� 8�� � ��

������ � ����� ���� �� ���� ��� ���� ' � +���� ����

-.7 ��� -7.7 ��� ����� ������������ �� � -. ��� -7.

�� ��� �������� � � ����� ��� ����� � ��� /����� 4��� ���

������� �� �� � �� ����� � � ��� �������� ����� � -.7

>�� /� ���������� � � ������ �� ������ � � ���� �� ����� ������ �������������

�(+( �����44� �� ��( 5 �� ���� �� 6����� ��� �* 7����8 &&�#9&& � %%E0

��� -7.7 � ���� ������������� *���� ����� ��� ��������� ��� ����� ���� �� ����� ������ ������������ �8� �� ������ *�� ���� � ����� � 8� �� ����� ��� �� ���

� �� ������ � ����� �������� � �� �� ��� ���� ��������

� � ��+����� � � ����+����� ������� � ��� ���������

� ����� �������� � ������ ���� 8� ������� ��������� *��

������� � -7.7 � ������� ����� ��� �� ���� ������

� ����� ����� � � ��� � 8�� ����� � -7.7 � ��� ����

������� ������ ���� ��� �������� � -7.7 � �������

����� ��� �� ������ ������ ���� � � 8� ������� ���

��������� ������������ ������ 8�� 0��� (�� ���

&5�&� E�5 �� ,����� �-B� : � /1� ����������� *��������� � -7.7 � �;�� �� � ��� � � ����� ���������

� �� ?5��5E@� ��� ��� ��������� � �� ���8��� �������

����� ,�� &��1 ��� ��� �� ������ ������ � � ���������

������ ,�� &�(1 ��� �� ���� ������ � ����� � � ��� C�� ��

��������� � �������� *�� �������� � -7.7 � �� ������

�������� ������ �� &��� 8�� ��������� � �� '%�'�'�( ���.����� :� � ��� ������� -7.7� �� ���� ���� ���

��� 4�� � �;�� �� � ��� �� �� ���� � ���� ��� � ���

��� ��� ��� � ����� 4�� ���������� ?5&�5C@� * ������

��� � ����� ������ 4���� ������ ��� ��� � �� � ��

� ���� � � ������������ �� -7.7� 8� ����� ��������,'��'�( ��F�#1 � ����� 4�� �������� ,(���� ��F�#1� ����� �4����� � ������ -7.7� � 8���� ���� � �

����� ��+���� �� � � ������ ���� � � ���������������� % � ' �� '( � %(( �B -7.7� *����� ��� ��� 4����� ����� 4�� � � � ������ � �� ���� ����� � � ����

� � � ������������ �� -7.7� � ���� ���� � ����� ������� � ��� ���� � � ����

% ������������ �� -7.7 ���� ��� ��������� ����� � �������� ��� � �� � ���� � � -7.7 ?50@� -7.7

8�� � � ������ ���� � � ��� ��������� 2�!3� ��� �

� ��� ������ ���� � � ��� ��������� ���� ���� ��

����� � � ���������� ��� �� �� � ��� ����� ���� ,>�� 51�

* �������� 8��� ���������� �������� � ��� �������

�� �� � -7.7 8��� �� ����� � � ���� �� �����

������ ������������� ��� � �������� 8������ ����������������� � � ����������� � ��� ������� �� �� � ���

������� ���� �� ����� � 8� �� ������ � ����� �

-7. ������� 8�� �������+�� ��� ������ ���� ���

��������� ��� 8� ������� ������ ,*���� '1� B �<��� �

� ��� ���� 4�� �� ��� � ��� ������� ����� �� �������� �

� ����������� � ����� ��� 8�� �� �� �� ���� �� ���

8�� �� ���� �� �� ��� �� � � ��� � ���� �� �����

� ����� ��� ��������� � 8� ������� ������ *�� � �� ���

�<���� ���������� ������ ������ � �������� ����� �

��� 8� ������� ����� 8�� ��� ���� � � �� ������� ���

����� � ����� � ��� ����� ��� ����� � -7.7� -7.

������� 8�� � ������� ������� ���� 8��� ������

���� �� ���� ������� 8�� �� ������� ������� �����

��� ������� 8�� ������� ���� 8�� � �� ������ �

��������� � 8��� ������ ���� �� ���� -7. �������

�����<�� 8�� ��������� ������� ����� -7. �����<�� �

����� ���� ���� � ����� ��� ��� 8��� � ���� ���� �� � � �� ������������� � 8� �� ����� 8�� 6.�( ����� � �������� %� �B� � ��� ��� ���� ��� ���� ���� ������� ������������� ����� ����� ���� �� ���� ���� ���� ������� �� ,6.�(H ��%( �B1 � ������������ ?/(@� B�������� �� ������ � ������ � ���� ���� ��� 8��� � � � �������� �� � ������������ ,���( � %(( �B1 � ��������� ���8� ������� ������ ,���� � � �� 8�1� *����� ��� � � �����

���� ��� �������� ���� �� ����� � -7. �����<�� �

*���� %

6���� � � ������������ � +���� �� ����� ��� ���������

.������ ������������

.�������� ����� 6.�( ,�B1 � ������� ����� 6.�( ,�B1

*��� % *��� ' *��� % *��� '

-. N%(( ,%51 N%(( ,51 N%(( ,(1 N%(( ,%1

-7. N%(( ,%�1 N%(( ,/1 N%(( ,%�1 N%(( ,%1

-.7 %% ,%((1 E0 ,C/1 N%(( ,(1 N%(( ,(1

-7.7 %� ,001 &5 ,&51 N%(( ,E1 N%(( ,(1

�6.�(H � �������� � ,�B1 � � �� ��� �� ����� �(A ���� � �

������������ ������ K����� � ����������� ��� ������� ���� � � ������������ ����� � ��� �������� � %(( �B � �������� � � ��� �������� �� ����

>�� 5� O���� ������� � ��� ���� � � ���� % ������������ �� -7.7�6���� ����� � �� ���� ,;1 8��� ��������� � � �������� ��������� ,�����

�� ���� ���� ��) ����� =� 2�!3�1 � �������� �� ��� �� � ����� � �

-7.7 � �������� �H ( �B ,�1� � �B ,�1� ��� %( �B ,�1 � ����� ���� ( �B ,�1� '( �B ,�1� ��� /( �B ,�1 � ����� =�

%%&( �(+( �����44� �� ��( 5 �� ���� �� 6����� ��� �* 7����8 &&�#9&& �

���� ���� ��� � ��� � ��� � ����� ����� ����� � ��������� ��� � � ����� ��� � ���� ���� � ��� �����

� �� ��� ������� � ���� ���� ���� ���� ��� � ��������� ��� � ��� �� ��������� �� ���� ��� �� ��� 8�� � �

������� 8��� ����� 8��� �������� 8�� -7. �������

� ������ ���� ���� � ����� ��� ��� ������) ������ ������� � � ������������ � 8� �� ����� 8�� � � ��� � �� �� ������� � ���� ��������

* �������� 8��� ���� ���������� ��������� 8���

�� ����� � � ���� � � ������������ �� � ������ ��� �� ����� 8� ������ � ����� � ������� ��� ��������

� ������ �� � � ���� ����� � ���� ������������ � �+���� � � �� ��� ��������� ��� 8� ������� ������� ������

��������� ������� :� � �� 8�� ���������� ������� � ���

��� �������� 8��� ������ ,>�� '� *���� /1� > �� :� � ���

�������� ;������� �������� ��� <����� ��� ������

,���( � %(( �B1 ����� ��� 8��� � �� ���� ��������� ���� % ���� ��� ���� ' � +���� *�� ������ ���

� �� � � =���� ���� 4�� �� ��� ������ � �� �� �����

� � ���� �� ����� ������ ��� ���� % ������������� *��:� � �� ;������� �������� ��� <����� 8�� � ������ �

� ��� ���� � � �<����� � � ��� =���� ,>�� '1� ���

������� ���� �� ����� ������ ��� ���� % � +��� ����

��� :� � �� ������� �������� �� ��� � �� ���� ����

���� 4��� � � ������ � � ��� ���� � � �<����� �

,*���� /1� � � ����� � � ��� ���������� ��� ���� ��

������ � ��� :��� �� -. ��� -7. ��� ��� :� � ��

������� ��� ;������ �������� ��� �� ������ � � '�/�

� ���� � �� ��� � 5���� �� �� � ��� .���� � � ��������

���� �� ������ 6� � ������ � ;������� ����� ��� /�

���� �� ���� ��� � ;������� 8�� �������� ������

����� � +��� ,���( � %(( �B1� *�� ������ � ����� ������ 8�� ;������ ��� �� ��� � ��� �������� � ���

����� �� ��������� ���� �� ������ ����� ��������� �

� � �<��� � � ��� /����� 4� �� ��� *�4� ��� � :��

�� �� ���� � ������������ ����� � ;������ ��� ������

��� '�/�� ���� � �� � ��� .����� 8�� �������� ������

����� � +��� ,���( � %(( �B1� = ����� �� ��������� �� �������� ��� ���+�� 8��� � �� ������� ����

� �� � ��� ���� ' ���� ��� ���� % � +���� �� ���

�4���� � � �������� �� � :� � � 8�� � ����� =����

���� 4��� ����� ���� ' ���� �� ��� � :� ��� 8�� �����

���� 4��� � ��� =����� *�� ���� �� ������� � � ����

�� �� �������� ��� ���+�� � ������������ ��� ������� ���� ��� ���� ?//@� ��� ������ � � ���� �� ����

�� � 8� �� ������ � �� :� � �� �� 8�� ����� � �

*��%� '

6���� � � ������������ �� �� �� ������ � -7.�

7� �� �������� � ��� /����� 4�� � -7. ������������

.�������� ����� 6.�( ,�B1 � ������� ����� 6.�( ,�B1

*��� % *��� ' *��� % *��� '

� ,-7.1 E' ,E%1 N%(( ,/(1 N%(( ,%�1 N%(( ,%1

7������ ,-7.71 %' ,001 &/ ,&E1 N%(( ,%%1 N%(( ,�1

/�5���*����� 4����+ ��� /% ,051 N%(( ,'(1 N%(( ,%'1 N%(( ,&1

/���!���� 4��5����������+ ��� '0 ,0/1 00 ,�%1 2!� 2!

5����� 4��/�������� 4����+ ��� '0 ,0&1 N%(( ,'%1 5/ ,C/1 E' ,&'1

=��+ ��� 5C ,C�1 N%(( ,'51 2! 2!

������� ,.'H(1 N%(( ,/�1 N%(( ,C1 N%(( ,C1 N%(( ,01

.��� ��� ,.EH(1 5& ,0(1 N%(( ,/01 N%(( ,%(1 N%(( ,(1

.�������� ,.CH(1 /( ,0C1 &C ,&51 �C ,C01 &' ,C/1

B������� ,.%5H(1 �0 ,0�1 &% ,C51 'C ,0&1 /' ,0C1

B���� ����� ,.%5H%1 '( ,001 &E ,0E1 & ,001 C ,0C1

�������� ,.%CH(1 N%(( ,/%1 N%(( ,(1 5' ,0(1 &5 ,C%1

��#� ������ ,.%CH/1 '� ,0&1 E/ ,0/1 C ,001 %5 ,0C1

�6.�(H � �������� � ,�B1 � � �� ��� �� ����� �(A ���� � � ������������ ������ K����� � ����������� ��� ������� ���� � � ������������

����� � ��� �������� � %(( �B � �������� � � ��� ������� � �� ���� -7. ��� -7.7 ��� ��������� � � � ����� � ��� ��� ��� ������� � �� ����� ����� �� � ����� ����

� 2!H � � ����������

*���� /

6���� � � ������������ � +���� �� �� �� ������� � ������ ���

3 ������ � ������������

.�������� ����� 6.�( ,�B1 � ������� ����� 6.�( ,�B1

*��� % *��� ' *��� % *��� '

B������ '/ ,0E1 N%(( ,/%1 N%(( ,%%1 N%(( ,%%1

"������ '/ ,0E1 N5(( ,%51 N%(( ,%�1 N%(( ,'01

=������ '0 ,&01 00 ,�%1 N%(( ,'51 N%(( ,51

>���� �& ,0&1 N%(( ,51 N%(( ,5'1 N5(( ,'&1

= ����� � %(( ,�(1 %& ,&51 E5 ,E51 � ,0/1

!��+�� N%(( ,/1 '0 ,E01 N%(( ,%/1 & ,C01

O������� � N%(( ,''1 %' ,E'1 &0 ,E(1 '( ,C�1

7������ N%(( ,%E1 '/ ,&E1 N%(( ,''1 '( ,C01

B �� N%(( ,E1 N%(( ,//1 2!� 2!

*�4� �� N%(( ,�1 N%(( ,�1 2! 2!

.����� N%(( ,'1 N%(( ,%1 2! 2!

���� N%(( ,51 N%(( ,(1 2! 2!

�6.�(H � �������� � ,�B1 � � �� ��� �� ����� �(A ���� � �

������������ ������ K����� � ����������� ��� ������� ���� � ������������� ����� � ��� �������� � %(( �B � �������� � � ���������� � �� ����

� 2!H � � ����������

�(+( �����44� �� ��( 5 �� ���� �� 6����� ��� �* 7����8 &&�#9&& � %%&%

����� ������ ��� ���� % � ��+���� ������� �������

����� �������� � � ����� � ������ 4� � �� ����

��� �� ��� ���� �������� � ��+����� � � ����+�����

������� � ��� ��������� � ����� � �� ���� � ������

���� 8� ������� ��������� 6� � ������ � ��� ������� 8�� ���

���� % ��+���� � �� :� � ��� � ����� �� ���+���

�������� ��� �������� �� ��� ���<���� ���� �� ����

��� ������ ��� ���� ' � +��� � ��� 8� ������� ������ *��

� �� ���� � ������ � ����� � ��� ���+��� ��� ���

�8 ��� ����� ���� ���� 4�� �� ���� ����������� *����

:� � �� ��� �� ���� � 8� �� ����� ������� ���� ���

��������� ����� ����� ���� ���� :� � �� ���� ��� � ��

���� 4�� �� ���� *���� :� � �� ��� ��� �� ���� ����

������� � � �<��� � � ���� ���������

���� :� � �� ���� ��� ������ � � ���� 8��� � ����

���� �� � ��� ���� % ������������� � ����� � ��������� ������� ��� �������� � �� ���� ���� ��� ������ �

�� ��� �� ���� � ���� ��������� 8��� ������ � � ���� ��

����� ������ ������������ ,*����� 5 ��� �� >�� /1��4���� � �� ���� ��� 6.�( ����� ��� 8 %(( �B ���<� � �� ���� ��� 6.�( ����� ��� 8 %( �B� ��� 8���� �� ���� ������ ��� ���� % ���� ��� ���� ' � +����

������ � ����� � �� ����� ������� ��+���� ��������

��� � ����� �������� � ���� �� ���� �������� ������ ���

��������� ������ ��� � ������ �������� ��� ��� 8���

���� �� � ������������ � 8� ������� ������ 8�� 6.�(����� � ���� ���� '( �B� 6� ��� 8� ������� ������ �������� �� ��� ��+��� 8��� ���� � �� ������� ������ ���

���� % ���� ��� ���� ' � +���� 8������ ��� ���� <�

���� �� 8��� �;����� ������� ���� �� � � �� � �

+����� ��+��� ,%�'������ 4�������;�� ��1 ��� ����

���� ,%�'�5������� 4�������;�� ��1� 8��� � ���� �

������ � �� �� � �� ������;�� �� ����� ��� 8��� � ����

���� �� � ������������� *�� ���������� � ���� � ���+���� ������:�� ��� ,'�E������ 4�������;�� ��1�

��������<� ,%�������� 4�������;�� ��1� ��� ;��+���

,%�5������ 4�������;�� ��1� 8��� � � � ��� �����

�� �� � ���� ���������� 8��� 8��� ���� ��� ���������

���� ��� �� ������ � ������ �� � � ���� �� �����

������ ������������� *�� ��;�� �� ��������� � ��� �

��+��� ��� � � �� ��������� � � ���� �� ������ ����

������� �� ,%�'�%(������������� �1 ��� ���� �� �����

*���� 5

6���� � � ������������ � +���� �� � �� ���� � ������ ������ ���

.����� � ������������

.�������� ����� 6.�( ,�B1 � ������� ����� 6.�( ,�B1

*��� % *��� ' *��� % *��� '

������� �� 5 ,001 �( ,0&1 E ,0%1 N%(( ,/%1

=� � ��� ���� � ��� & ,0C1 C5 ,�C1 2!� 2!

7 ���� � & ,001 '%,001 & ,%((1 E ,001

3�� ���� � ��� %� ,0&1 N%(( ,'&1 2! 2!

2 ������ �������� ��� %0 ,001 �( ,C(1 %0 ,001 '' ,001

.����� ��� ��������� ����� '� ,0&1 N%(( ,/E1 C ,001 & ,0C1

9���� ������� '& ,001 �C ,0(1 & ,001 %C ,051

3����� ����� /( ,C%1 N%(( ,/%1 2! 2!

���� 4�� ����� 5' ,E01 N%(( ,5%1 2! 2!

! ����� ������� 5/ ,CC1 N%(( ,/E1 / ,001 & ,0C1

3�� ������ � ��� 5C ,C�1 N%(( ,5&1 2! 2!

3�� ���� � &( ,E(1 N%(( ,'C1 N%(( ,&1 N%(( ,%�1

.����� ��� N%(( ,%/1 N%(( ,C1 2! 2!

-������� N%(( ,&1 N%(( ,%/1 2! 2!

-����� ��� N%(( ,&1 N%(( ,01 2! 2!

.����� � N%(( ,�1 N%(( ,(1 N%(( ,01 N%(( ,/1

B����� ������� N%(( ,�1 N%(( ,/1 N%(( ,(1 N%(( ,(1

3� ��� ������� N%(( ,(1 N%(( ,(1 N%(( ,�1 N%(( ,(1

>��4��� P%(( ,'1 N%(( ,'1 2! 2!

�6.�(H � �������� � ,�B1 � � �� ��� �� ����� �(A ���� � � ������������ ������ K����� � ����������� ��� ������� ���� � � ������������

����� � ��� �������� � %(( �B � �������� � � ��� ������� � �� ����� 2!H � � ����������

*���� �

6���� � � ������������ � +���� �� ���� 4�������;�� ����

������;�� �� ������������

.�������� ����� 6.�( ,�B1 � ������� ����� 6.�( ,�B1

*��� % *��� ' *��� % *��� '

3������ ' ,0�1 N%(( ,'(1 2!� 2!

��+��� / ,0�1 N%(( ,�51 E ,&�1 N%(( ,'&1

��+��� ��� � /( ,0%1 N%(( ,C1 N%(( ,''1 N%(( ,%1

���������� 5( ,E&1 N%(( ,%/1 2! 2!

����������

���

N%(( ,'&1 N%(( ,''1 2! 2!

9��+��� N%(( ,'E1 N%(( ,&1 2! 2!

�6.�(H � �������� � ,�B1 � � �� ��� �� ����� �(A ���� � �

������������ ������ K����� � ����������� ��� ������� ���� � � ������������ ����� � ��� �������� � %(( �B � �������� � � ��� �������� �� ����

� 2!H � � ����������

%%&' �(+( �����44� �� ��( 5 �� ���� �� 6����� ��� �* 7����8 &&�#9&& �

�;������ � ���� � ��+��� ,*����� 5 ��� �1� ��+��� ���

�� 8��� � ������������ ����� � ��+���� ��� ��� ��

���� ��� /�������� �� �� ��L����� � ��� ������ �� 8��

%(�'( ���� ���� � ���� ���� ��+��� ,*���� �1� *��

������� ������� �� �� � ��+��� ��� � ��� �������� 8��

����� � ������������� � ���� �� �� ��+���� �� 8��� ���������� 8�� ��� ������ �� � ��� ����� � � ������ ��� ��

��� ���� ��������� *�� ��������� � ��� ������ �

������ ��� ,���( � %(( �B1 ��� ������ ��� �������������� ,���( � '� �B1 ,*���� 51 ��� ��� � ����� �4������� �� 7 ���� �� � � ���� ���� � � � �� 8� ������� ���

��������� ������� � ����� �8 ������ � � ����� = �� �

����� �� ��� � ��� �� � �������� � ��� ���� �� �����

� ��� � �� ���� *�� ������ ��� �� ��� ������ � �����

��� 8��� ���� ���� � ���� ���� �� � ������������ ������� ���� ��� � ����� ������� *�� ������ ��� � �� ���� �

�� �� ���� ��� � ���� ��� ��� ������� � �� ������ 8��

��� � ��� ������������ ������� � ���� ���� �� ��������� ! ����� ��� ���� ������� 8��� � �� � ���� ���

�� �� � ��� 8� ������� ���� � ��� ��������� ����� ,*���� 51�

*�� � �� ����� ��� ������ � � ����� ��� ���� ������� ���

������� ������ � ����� � �� ���� � 8� �� ������ ���

����� � �� ���� ��� � ��������� � ���� ���������

������ � ���� � � ������������� ���� 4�� �����,/�5��������� 4��������������1� 8��� � ������������

����� � ��� �� ������� ������ � ����� ���� ��� �

� ����� ������� �� ���� � ���� ��� ��� ���� ��

����� � ��� ��������� ����� ���� 8�� ����� � � �����

� ���� � � ����� �������� *�� � �� ���� ������ � ,%�

'������ 4����+���1� ��� ���� � ,%�'�/������� 4�����

+���1� ��� ����� ��� ,/�5��������� 4����+ � ���1� 8���

��� ������ �� � ���� ���������� ���8��� ���� �� �����

� � �� ��������� ��� 8� ������� ����� �������� *���� �����

�� � ��� ���� � ��� ,���������� � ��� ���� ����� �����������1� ��� ������ � ��� ,��� ������ ����� ��������

���1� ��� ��� ���� � ��� ,��� ���� ����� ����������1�

���� � ������ ������ � �� ���� 8��� � ���� ���� ��

� ������������ � ��� ��������� ������ 6� � ������ � ����+���� �� ��� ����� � ����� ���� ��� ������� ���� ��� ���

�� ��� ���� � ���� � ������� ������� �� ��� *�� ������

���� � ���� �� � ����� ��� �� ������� ��� ������� �

����+� ��� � � ��L����� � ��� ������ � �� ��� 8��� ���

������� �� �� � ��� ���� ���� ���� ��� ���� ���� �� �

� ����� � �� ������� �� � ��� ������ � �� ��� *����

��������� ������� ������ ��� ������ � �� ����� ������

���� � � ������� � �� ���� � �8 ����� ��� � ��������

��� ��� � ������� �������� ,E�&������ 4�� �����1 ���

���4��� ,&�C������ 4��E����� 4�� �����1� ��� �����

����� ,���( � %(( �B1 � ��� ��������� ������

� ����������

� ���� ���� ��� ��������������� ����� ���� �����

� ������������ ���� �� � �� ��� �� � �� �� � ������� �� ��� �������� �� 8��� -7.7� � ����� ���

� ������ �� ����� ������������� �� 8��� �� � ������ ���� ������� �� ���� ���� �� � ��� ��+���� 6���� �

������ 8��� � ������� ���� � ��������� ������ �� 8��� ��

������ 8�� ����� ������ *�� ������ ����� ��� �� �� � ��

������� � ��� � ������ � � ��������� � �� ��� � ����

������������ ����� �� "�"� *�� ����� ����<�� ������

������� �� ����� ���� 8��� ���� �� � ������������� ����� �� � ����� � �� ����8��� ������� �8� �� ������ ����

��� �� ������� � � ������� ��� ����� � �������������� "�"� ����� �� "�" 8�� ��������� �� ��������� �� �

������� ������� � ������ ���� ����� � ����� ������

� ������ ������� 8��� 8�� ������ � ��� ��� �� �������

� �� ����� ���� ��� �4���� � � ��� �������

*���� � ��� � ������ ���� ���� � ������ �������

���� �� � ������������ ��� �������� ������ �� ��������������� �� � ������������ ������ ���� �� ���� ��4������������� �� B���� �� � ��� ���� ' ������������ ������� ���� ����� � � ����� ����� � ��� ������� �

� �� � ���� ������� ��� ������ � ��� ���� ���� �

����� ����� ?�(@� 6� ��� ��� ���� ��� ���� ���� � ��������

�������� ��� ����� ��������� � ��� ����� 8��

��� ������ ?�%@� *�� ���� �� � ��� ����� ����������

���� ���� ���� ���� � ��� �������� ��� ��� ��� �

������� �� ������ � ��� ���� ��� ���� ���� �����

������� 6� ��� ����� � ����� ���� ������� � ��������

������ � �� ����� ���� ��� � ���� ���� �� � ������������� ��� ��� ������ ������� � ���� ��4��� ���� �����

8��� � ������ � ��� ����� �� ������ ��� �� �����

����������

� ����� � ������� ��� �������� � ������ �� � ��

� ���� 8��� � ��� � �� ���� �� � ������������� B��� � ����� � �� ���� 8��� ������ ���� �� � ��� ���� %

���� ��� ���� ' � +���� 8��� � ��8 ������ � ��

� +���� �;������ = ����� �� ���+��� �������� ���

�������� � 8��� ��� ��� � ������ �� ������ ���� 8���

������ ���� �� � ��� ���� ' ���� ��� ���� % � +���� *��

<��� ����� � �� ���� ��� � :� ���� 8��� �������� � �

� :� � �� *���� � �� ���� ��� � ��� � � ����� � �����

������ �� ����� ������� � ����������� �� ������ ����

��� ���� ' � +��� � ������������ ��� � ������ � �� ��� ����� ���� ����� ��� � ��� ���� ����� � +���

������� � ��� ����� ����� �� ����� ?�'@� ���� ��� � �����

��������� � �� ���� ��� ��� � ������ � ������ ���

���� ����� ��� ����� � � ��� �� ����� �� � �������

��� ����� � ������������� ���� �4����� ����������������� ��� ���� �� � ��� � �� � � ����� � ��������

���� � � �� ����� ������ ���� ����� � �� ����� � ?%0@�

��� ���� ����� ��� �� ����� � � �� ����� ������ ���

��� �� �������� �� ���� � ������ ���� �� � ������������� .����� ������� ������ ������ ��� ��� ���

����� � ��� �� �� ����� ������ ���� ��������� ������

�� � ������� ������������ ������ 6� � �� � ������ �� ���� ��� ���� �� "�"� ���� ��� �� �� �����

��������� � � �� ����� ������ ���� ��������� �������

����� ����� � ���� � ������� � ������ �� � �� � ��

� ����� � ������� ������ �� ������ !��������� � ���

�(+( �����44� �� ��( 5 �� ���� �� 6����� ��� �* 7����8 &&�#9&& � %%&/

����� � ������ ���� �� � ������������ ��� ��� ������ ������ � ����� � � �� �������� ��� ����� ����������

� �� ����� ������ � �������

� � ������� ������ � � ��� ����� 8�� ���� � ���

���� �� ���� �� � ��� ���� % ������������ ��� ������� � � ���� ���������� >�� � �� ���� 8��� ������

���� �� � ��� ���� ' ���� ��� ���� % �������������� 8���� �� � � � ���� ������ ��� ���� ��� � ������ �

�� �� 8�� ��������� � � � ���� ���� � � ��� ���� %

� +��� �� � ������ ��� � 8�� � � ��8��� ���<����� > �

�������� ��� ������� �� ���� ������ ��� � ����� �8

������ � �� ��� ��� 8�� � 8��� ,���( � %(( �B1 ���� � � ������������� *�� �� 4��� � ��� ������ �� � ��������� � ���� � ������� �� ��� ��� ��� ����� �������� ���

��� ����� � �������� ��������� � ������ ��� ��� ������

����� ��� ������ ������� ������� �� ��������� � � ���

�� � �� ������ ��� ������ � �� �����

6���� � � ��� ���� % ������������ �� -7.7� 8���� ����� �8 �������� ������ �F��� ���� � �� ��� � ��

���������� 8�� � ������ 8�� ��� ��������� 2�!3��

*����� ��� ��� ������ � �� ��� � -7.7 ��� �� ��������

�� 8�� ��� ��� ������� �� ����� � � ����� � ���

� ���� � �� ������������� ������ ������� ����� �� ����������+�� � � ��������� ������� ������� ?�/��5@�

����������� ���������� ?����&@� ��� �� � ��<��� ������

�� ?�C@ � ������������� ��� ����<�� ������ ��� ���������� ���� ��� ��� � � �� � ��������� ��� � ���� �

������ 2�!3������� � ������� �� ������ ��� ���

������� � ��� ���� 4���������� ���� � ��� �� ���� 8���

��������� ,���� ���� ��1 � ���� � ,<��������1 ����� �

�������� ���� ������� �� ������� � ��� ��� ��������

���� � ��� �� ���� ���� ��� � �� ������� � ��� ���� 4���

������� ���� ��� ������ ����� � ���������� 3� � ��<���

������� � ��� ��� ���� % ������������ 8�� '��+� 2�!3�

� �<�� � � �� � � ��� ���� 4���������� ���� � ���

�� ��� ���� � � ������ �� �� ����� ��� ��� ������������� � � ��� ?�C@� ���� -7.7 8�� � � ������ ���

�� � � 2�!3�� � ��� ��� ������ ��� ��+��� ��

������� �� 8�� ������� � ��� ���� 4���������� � �� �

� ��� �� ���� ���� ��� ��� ���� � � �������������� -7.7 8�� ��������� � �� � ������� 8� ���

������ ���� ���� � � ��� ���� % ������������ ��%(( �B -7.7 � ��� � � �� ������� �� �������� ��� �� ��� �4� ��� � -7.7 ��� ���� ����������� ���� �

��8 ����� � ������ 8�� �� -7.7� -7.7 ����� ���� ��

��� ���� � ��� � ��� � ��� � ���� ����������� �����

������������ ������ ��������� ���� �� 6���� � ������������� �� -7.7 ��� �� � � ������� 8��� ��� �� ��� � ������ ��� ���� % � ' ������������ 8����������� 8�� -7.7 � � %��E( �� �� � � ��� �����

� ��� ����� ,���������� ������ ��1�

2������ � ������ ��� ���� �� -7.7 ��� ������ ����

:� � ��� ��� ���� �� 8� � ���� � ����� � ��+����

?�0�E(@� *���� �� ������ � ����� � �� ���� ���� ��� ��

���� ����� � � ���� � � ���� ����� ��� ���� ����� �

� �� � ����4�� 8�� ������ ����� ��� ���� ���� 4����

��� �� � 4���� ������� ��� ���� ����� � � �� � ��

���4�� 8�� �� ���� ?�0@� 7�� �� ������� ������������

� ��� �������� � ������������� � � �� � � ������ ��������� ����� � � ����4�� � � ���� � �� � 4���� �����

8 ��� �� ���� ����� � � ���� � � ������������ ��-7.7 ��� ���� � ������ ��� *�� ��� �������� -.7 ���

-7.7 8�� � �� ���������� 8�� � ����� �� 4�������

��� ����� ��� � � ������ ������ ?E%@� � ��� ���

������ ���� -7.7 8�� ������ ��������� ������ �� �

����� ���� �� ������ ��� 8��� ��� +��� ,����������

������ �1� *�� ���� � � ��� �������� � ����� ���

� � ���� ��<��� �� � ������ ��� � ��� �� ��� � ��� �����

� ������ � ������ �� � � �� � �� ����� �� ��� ���

8�� � �� ���� �� 8��� �� ��������� ��� ��� � � ���

�� ���� ����� � � � ������ � 8�� ������ ��� �����

��������� �� ���� ?�0@� *���� % ��� ' ����� �������������� � ���� %5 ,��5A1 ��� %& ,E�&A1 �� ��� ��������

����������) ������ ����� ��+���� ��� � � �� �������

�� ����� ��� � ��� <� � ����� �� ��� ������� ��� � ���

���� 4���������� ���� � ��� �� ��� � ������ ��� �����

�� 2�!3������� ����

.����� �� ��� � �� �;�� ���� 8��� ��� �� 8� �

����� � ������� 8�� � �� ������ ����� ��� �����������

?E'@� *���� ��� ��� ��� ���� -7.7 ?E/@ ��� ���� ����� ���

�������� ?E5@ ����� � ������� 8�� ������������ = �� ���

���� % ��� ' ������������� ��� ������ �� ����������� ����� ������� ���� �� :�������������� �������� ���,'���� ���+ � ���1� '�'��������������<��� ������ �4����������+ ���� ��� ������� ��� ��� ,����������

������ �1� � 8���� ����� � � (�%�%( �B ��� �

����� � � ��������� ����� � � ������ �� � � ���������� � � ������������ �� -7.7 ,���������� ������� ��1� *����� ��� � � ������� ���� -7.7 ������

������������ �� � ������� � ����� �������� ������������ ����

�������� ������

*�� 8 �� 8�� ���� ����� � ����� �� ������ �� � ���

2�� ��� 6������� � ������ ��� ��� *��� > ����� � �

��#�

����������

?%@ B�7��� Q�� � ��� K � * ���� 7B� � �� ������������� � ���

��� � ��� ���� � ���������� ,��1 � ��� ���� Q = � .���%0E()'/�H/%%'�&�

?'@ ������� ! � �� � Q!� ���� � ������������H �8 �����F�8 ��+����� ��� �� = ���� %005)E/H'��E%�

?/@ #� �� #��� *� >��� �� .�������� -� ��� *�.� ���� � ���������

��� ���� ���� ������ ��������� � ��� � ��� ������ � �����

��� ������� ������ � � �� �� ���� ����� Q = � .���

%0&/)'5CHE%�5�E'�

?5@ ������� � �� =����� !B� Q����� -3� ������� ! � !���� � �

���� � ������������ ' ���� � ���� ����� �������� ����� 2�����%00%)/�5H%�0�E%�

%%&5 �(+( �����44� �� ��( 5 �� ���� �� 6����� ��� �* 7����8 &&�#9&& �

?�@ 2 ����� � O� ������� ! � *���� ������� � ��� �����

������������� � ��� ���� � ������������ � +����� -����� � ������� ���� � ���� ����� ��� Q = � .��� %00')'E&H%0�5C��5�

?E@ #�� B�� =����� B� ������ OB� � �� !�� ������ Q6� *��� QQ� ����

3Q� B ��� ��� 7���� � #B� =������ !Q� .� ���� �4����� � ���

����� ��� ���������+�� � � ���� % ��� ���� ' ���� � ��������������� � .�� � ���� � ����H � ����� �� 8�� ����� ��� ���

� ��+����� Q ���� � = ���� B � = � %00�)�'H/(&�%0�

?&@ B������ B�� ������� ! � B��� ��� ������ � ��+���� � ���� �

������������� �� ���� � %000)5H%&0�C/�?C@ *����� �-� .��� OB� ������� ! � .��������+�� � � .�����

������� ��� ���� ���� �4������� ����� ���� � ������������� +����� Q = � .��� %00/)'ECH%&5(5�%'�

?0@ B������ B�� 3 ���� �� ������� ! � �� ��� *�� ������� �

������ � ���� � ������������ ���� % �� �� �� ��� � ��� � ������ ������ ������� B � -�� ��� � %000)%/H0C%�0'�

?%(@ B������ B�� .��� OB� ������� ! � ���������� ���� ���� ����� ��� � �� � ����� ������� �� B � -�� ��� � %00E)%(H/C(�0'�

?%%@ B������ B�� .��� OB� #������ .3� ������� ! � >���� ����� �

��� ������ ������������ ���� % ������ �� ���� ��� �4����� B �-�� ��� � %00&)%%H0%&�'&�

?%'@ 6������ �B�7���� Q� 7������ #� 7����� *� 3����� � �-� ���� �

������������ �������� � ���H �� ������� � �� � ����

����� �������� ����� ������ %0&5)%CEH%'%/���

?%/@ �� � Q!� 7���� Q-� ������� ! � ���� � ������������ '��������� -�� �� �� %00/)%5H�&&�0/�

?%5@ � �� � �� =���� �� ����� ����������H ��8 ������� Q .��

-�� ��� � B���� %00')&5H�(5��.�

?%�@ ���� �� 7� ������ �B� !��������� ����� � � ���� � �

���� ���� �� � ����� ���� ���� �� � ���� ��� � � ���� �����

���H � � ����� ���� ���� ���� � � ����� Q 6���� !����� �

%0&%)�EH/EE�&'�

?%E@ =����� O!� ���8 !�� *�� ����� ��� � ���� ���� �� �� �����

���� ����� ���� Q -�� ��� � %0&/)'�HC/�0%�

?%&@ ���8���� �D� �� � Q!� ������� � � ����� �� 8�� �� ���� �

� �� ���� 6� *��� ���� �� ����� ��� � � ����� ����� Q .��

-�� ��� � B���� %0&5)/CHC%%�0�

?%C@ O������ >� B 8�+ 8�+ 6� ����� � 7� B�����Q��� 3� ���� ���

�� ���� � ��� ��� ����� ��� � �������� Q -�� ��� �

%0&&)'�HC/�0%�

?%0@ � �� �O� =������� #� # � ��� ���+� �� �����+�� >�� 3�� B.�

������� � =-� ������������ ����� ��� ��� � �� ����� �������� �� Q������� ��� D� 8��� ��� ����� ������ #�����

%00')//0HCC&�0�

?'(@ B������� 2� � �� �O� 3�� B.� .���� #� �����+�� >�� O � ���

#2� �� .�R� R� B.� ������� � =-� �������� QOK� � ��������

������� �������� � ���� � ������� ����� � �� ����� ���� � ������������� .����� ��� %00&)�&H%('(�'�

?'%@ �� ��� -� *�� >�������� ����� 7� ��� *�� ������ ������� � � ������������ ���� �� ���������� � ����� �� ����� ����������� Q

D� � %00')%5&H%'0C�/('�

?''@ O������ O!� 9���� -�� ���� !� ��� �� !�K���+ �� =�������

� 3��� K�� K�� 2���� !� � ����� Q#� � ������ B� ����� Q�

=�� 8�+ =� 7 ����� 7Q� *�� >�������� B��� 3������ ��� # ��

����� 7� ��� >�������� � ��� ��������� � ��� 8�� ���� ������

�� ����� Q �� ���� !����� � %00C)/0H�&C�C0�

?'/@ =��8��� 9 � > �� #7� *� ��� � 6� 3������ Q�� O����� =�� ������������ ���� � ��� �� ����� ������ ������ �� .�����

-���� � = ������� 3�� %005)/H%&&�C'�

?'5@ O � ��� #2� 2 ���� �BR� . ��� �K� !����� ��� ��� �� �����

������H ������� ������� Q 2�� .����� 6��� %000)0%H5%5�'C�

?'�@ .��� � �O� 7 ������ -� !��� ����� � ��� �� ����� ������� ���

�� 2��� %00C)%CH5%/�5(�

?'E@ ������ .� � ���� .K� ������ � �� ����� ������� 6� *�� ������ �

������� �� .����� ��� %05%)%H'0/�&�

?'&@ ������ .� ������ �-� � ���� .K� ������ � �� ����� ������� 66�

*�� ������� � ������� � � ������� ����� �� � ��� �� �����

������ ���� ���� %05%)5/H'(0�'/�

?'C@ #� �� ������ ��� ������� ���� � � ���� � ������������� +���� �� ��� ����������/�������� ��� ������ ��������/���������

= ���� = ���� ��� . ���� %00�)'%5HC//�C�

?'0@ O� R��� ������ ��� #� �� B ����� � � ��� ���� �������

��� � � ����� �� ����� ��� ������ ������� �������� -�� ��� � ��

'((()%5%H0C(�&�

?/(@ #��� *� #� �� 6���� � � ���� � ������������ �� ������������� ����������� ����� ����� = ���� Q %00')'C�H��&�E'�

?/%@ #������ !� =��L ����� Q� . � .� !���4 3� ! ���� =� 7 ����� Q>�

O���� =� #��� .� #������ �� # 8��� B� B�;�� 3� 3����� ��

��� � =� *������ 7� !�������� � � �� ���� = �� ��� ���� ������������ ������ ������� � ��� � �� ������ /�������

���"������ Q 2�� 3� � %00E)�0H50(�'�

?/'@ !����� =� B���� � �� 7 ���� �� ������� � � � ��������� O�

6���� � � ������������ ��� �� ������ �� ��� ����������� �� ���� � ��� �� ���� = �� � /������� ������� 3����� B��

%00&)E/H%%%�5�

?//@ -��� =�Q� 7������ O� B �� � B�� 6���� � � ������������ ������� ��� ������ ��� �� ����� ����� �� ������ ������ ���

� ����� ��� Q -�� ��� � %00�)%5&H'0��/('�

?/5@ 6����� O� 9�� �� O�� *� *��� ���� �� ������������ ���� �������� ;�� �� ������ �� � ��������� ���������� 3��� ����

��� '((()%5H�5�E�

?/�@ ���+� O� >����� B� O �� �� ���� O� *�� ���������������� �� � �� ����� �� � �����8 � � +�� ����� �� ����H

��������������� ������� ��� 3����� B�� '((()EEH%E�0�

?/E@ 7��������� !� =����L�� �� -����� O� 9��+ -B� -�� � -B� .���8���

B� -����+ K� 2������ O� 3���������� ��� � 4��� � ��� � �����

�� ������ ��� ��������� ����� �� � �� � ��� -4�������

%0CC)55H'/(�'�

?/&@ 3������� QQ� 7���� �!� ��� � �� �� �������� � � �� !- ��� .!-

��� ���� �� � ����� ������ Q �� .��� � � %0&')05HCE%/���

?/C@ B����. �� 9� � ������ � 8����� ��� ������� ���� � � �

�������������� �� Q .��� � �� .��� . ���� %0CE)%0CEHE0��&�

?/0@ 2���� � Q-� B�.���� *!� ���;��� 3� 6��� ��� �� �� ����� �������

!��������� ���� ��� � ����� ���+�� ��� ?5��@��������� *�����

���� � #��� %0C�)'EH�/0/�E�

?5(@ O�������� 3*� � ���� 7B� Q ��� � B!� 3����� ��� ������

6=� . ������� � ��� ���������+�� � � � ���� ��� ��� �

��� �������� ������� �4����� � � �� ��� �!2� ��;�������

!2� %0CC)&H'%0�'��

?5%@ 3��� �� 2 ��� 73� �� �� B#� =���� �� !� 3� ���� � � ��������

����������� ���� ����� �� �������� ��������� �� 3� � 2��� ���� ��

D�� %00/)0(HC/0'�E�

?5'@ >������ ! � =�� � QB� *������� �4���� � BR. ����� ��� ����

��� �� �������� ��� ��� �������� 3� � 2��� ���� �� D��

%000)0EH/05(�5�

?5/@ * �� .� 2 ���� ��� ���� ���� ������� � ������� ������� ������

K� � �� %0C%)%%/H5(C�%%�

?55@ =� 8� �B.� �� �� B�!� ���� ��� ��� ��� 6�H 7� �� !B� ��� ��

!2� �� ���� � �������� ���� ���� �� 666� 94� ��H 6�# 3����� %0C&�

�� %C0�'%'�

?5�@ ��� "�R� ����� �� *���� !� ����� R� .��� �R� ������� � �����

��� ��������� Q ���� > � .��� %00&)5�H5E'5�C�

?5E@ ���� Q� * �� .�� !������� � ������ � ,�1������� �������������� �� � ����� � � �� ��� ��� ��� 4���� � � �;�� � ���

������� Q > � �� %000)E5H&�/�C�

?5&@ B��� R�� * ��� 6� ������� *� ������� *� >��� �� ����

4����� ������� � �� ����� ��� = � 3���� =��� %00C)'%H0/�E�

?5C@ # �� #�� .������ BK� ����8��� =� �������� � ���� �������H ����

������� � � ���� ��� ��� 4�� � ���� � � ,�1������� ��������,�1������� ������� �������� ,�1��������� ��� ;������ � � ��� ��� ���� ���� ������� ����� = ���� = ���� ��� . ����

'((()'&/H�(�/�

�(+( �����44� �� ��( 5 �� ���� �� 6����� ��� �* 7����8 &&�#9&& � %%&�

?50@ !4 � B� ��� -.� -�+����� 2�8 R ��H ������� 3����� %0E5�

?�(@ ���� �6� ������� ! � ������������ ���� ' ����� �� ��� ������� �� �� � �� 8�� � ����� ��� ������� Q D� � %000)%E'H%%5'���

?�%@ 2 ��� O� 7 ���� Q� *�� �#�3�. ����� *���� � ��������

�������� ��� � ��������� � ��� ����� 8�� ��� ������� =� Q

D� � 6�� '((()C�H%(&�%/�

?�'@ *����� �-� ���� �6� 7������� QB� .���� B#� B�. ����� Q!�

������� ! � *���� ������� � ��� �� ���� � ���� � ������������� +��� �4����� �� Q .�� 6���� %00/)0'H0(/�%(�

?�/@ ���� .� 3�� �� Q�� B 8�+ 8�+ 6� B��� ��� ==� 2�8 B6�

�� � Q!� ������� ! � 2������ ���������� ����� � ��� �����

���� � ������������ ' � +���� = �������� %005)//H%'E��&(�?�5@ B������� 2B� � ����� -� �������� QOK� = ������� ���

������� ������ ������ � � ����� ���� � ������������ ���� '�3������ ������� '((()%(H5(&�%/�

?��@ *����� �-� ������� ! � > �� ��� ��� ������� � ���� �

������������ % � ����� ������� � ���������� � � ���������� �� Q = � .��� %00')'E&HC�&&�C/�

?�E@ =�4��� >9� *�� �� #�� 6�� ��������������� � ������ � �����

������������ ���� ' ���� ��� ������� ����������� Q ���� �= ���� B � = � '((%)&&H%E&�&��

?�&@ =������������ �O� . ���� !.� ����������� ���������� ������ �

��� ���� � ������������ ,� +����%1H ����� � � ������� � ���

� ���� � ����� ��� .�������� ��� ��� Q ���� � = ���� B � = �

'((%)&&H%&&�C'�

?�C@ =������������ �O� .���� �Q� ����� =-� *��� � B>� . ���� !.�

6�������� � � ��� 2�!3,�1 ����� ��� � ��� ��� ��� � ���

������������ ,� +����%1H ������� � � � �� � ������� ������� ����� ���� � ��� ������ ����� � ���� = ��������

%00�)/5H/EE/�0�

?�0@ ������ -� 2������ � ������ �� ,�������� ������1 �� �����H � �����

� ��� � ��� �� Q 2�� 3� � %00E)�0H'(��%��

?E(@ #� �� O� R��� ������ �� 7���� ���H � � ���� ��� � �������

���� � � ������ �������� 6�H #�8��� 7� ��� �� K����� ���

� �� ���� �� E'� 2�8 R ��H ������� 3����� '((%� �� %�05�

?E%@ ����� Q� O�L8��� *� B ��� *� �������� �� 6������� � � ���

�������� 8�� �� ����H � ���� � � �� ��� ���������� ���� = �

.��� %0C5)5CH%0E/�&�

?E'@ = �� � Q#� *���� B�� 3����� *�� !������� 7� B ��� *Q� � �� �

;�� ��� � � 4� � ��� .��� ��� * 4� � '((()%/H%/E�E(�

?E/@ R����� �� �����8� *� !� � �+�� �������� � ,�1������� �������� ������� ������ ������ ���������� = �� = ���� = ����

%00�)�0H%'/'���

?E5@ O������ !9� B����� � B� O L�� �� B�����R���� 6� .�������

�� � ������ ��� ���� ����� � ��� ������ � ����� ��� � ������ �� �

-����� ������ ��� � ������ .��� = � 6������� %000)%''H�0�&%�

%%&E �(+( �����44� �� ��( 5 �� ���� �� 6����� ��� �* 7����8 &&�#9&& �