soluciones únicas hplc uhplc los u/hplc de agilent · un modelo de inyector para cada aplicación...

Soluciones únicas

para:

• HPLC

• UHPLC

Que solo Agilent le

podrá ofrecer

Elementos

diferenciales y

patentes

incluidos en

los U/HPLC de

Agilent

ver-Jun-2013

1290 Infinity Bomba Binária

con mezcla en alta presión

• Rango de Potencia (flujo x presion)

• Amortiguación electrónica de pulsos

• Mezclador “Jet Weaver”

• Volumen muerto de 45µl

Innovaciones Tecnológicas:

Agilent 1290 Infinity LC Sistema Binario con mezcla en alta presión

0

200

400

600

800

1000

1200

0 1 2 3 4 5

bar

ml/min

50 x 2.1 mm

100 x 2.1 mm

150 x 2.1 mm

250 x 2.1 mm 0.45 mL/min

H2O/ACN, 40 °C

ZORBAX RRHT SB-C18 de 1,8 µm

2.1 x 50mm

H2O/ACN

2.4ml/min

T=95 °C

560bar

1290 Infinity LC Binary Pump La siguiente generación en Tecnología de Bombas LC

Alta velocidad y resolución

1200 bar @ 2.0 mL/min

1000bar @ 3.5ml/min

800 bar @ 5.0 mL/min

Volumen muerto: 10 µl / 45 µl

Amortiguador electrónico de pulsos

Procesador de doble nucleo

dedicado al control de pulsos

Motores de 300 picolitros por

paso

Largos intervalos de mantenimiento

“Automatic Leak-Correction“

150 Litros de disolvente

Automatismo

Purga automática

Válvula de

Selección de disolvente

Mezclador

“Jet Weaver“

Desgasificador

Pistones de

“Silicon –Carbide“

Válvula de

purga

Canal

B

Canal

A

1290 Infinity Binary Pump Amortiguación electrónica de pulsos

ON

OFF Motor del Pistón

1290 Inifinity

Chanel A

1290 Inifinity

Chanel B

• Motores independientes

para cada pistón

• Pasos de 300 picolitros

HPLC 1200

UHPLC 1290

1290 Infinity Binary Pump El mas bajo volumen muerto y el mas bajo ruido de mezcla

1200 Series

Channel A

Passive Damper

0 - 300 µl

Passive Mixer

400 µl

1200 Series

Channel B

1290 Inifinity

Chanel A

1290 Inifinity

Chanel B

Very Low Noise

~ 800 µl

+ = Aktive Damping

10µl

Jet Weaver Mixer

35µl

Lowest Noise

• min. 50% lower

Delay Volume

• 10µl / 45µl

• 80x / 20x lower

Agilent Jet Weaver Siguiente generación: Mezclador de alta eficacia

Tecnología:

• Tecnología Propietaria de Microfluidos Multi-capa.

• Bandas de difusión de acero con estructuras de

(100x120µm)

La mas alta eficiencia de mezcla con el

mínimo volumen

• 35 µl para aplicaciones UV estándar

• 100 µl para Aplicaciones TFA

1290 Infinity Bomba Cuaternaria

con mezcla en baja presión

• Rango de Potencia (flujo x presion)

• Amortiguación electrónica de pulsos

• Pre Mezclador “Inlet Weaver”

• Válvula Multifunción

• Volumen muerto de 350µl


2.0 5.0 10.0

250

800

1200

p [bar]

[ml/min]

600

1000

1.0

•1200 bar: 0 - 2ml/min

• 800 bar: 2 - 5ml/min

• 250 bar: 5 - 10ml/min

Agilent 1290 Infinity LC Sistema Cuaternario con mezcla en baja presión

1290 Infinity Bomba Cuaternaria

Diversas innovaciones que permiten el alto rendimiento

4-channel

Degasser

MCGV (Multi-

Channel-Gradient-

Valve) Inlet-Weaver Pump Head

Multi-Purpose-

Valve

Switchable Jet

Weaver Mixer

In-line Filter

Premezcla el eluyente en baja

presión antes de entrar en el

cabezal de bombeo

Mezclador opcional en alta presión

(sólo para condiciones muy críticas-

p.e. TFA)

Agilent Inlet Weaver Premezclador en baja presión de alta eficacia

Influencia Rango Composición: Prestaciones con Pequeñas Proporciones de % Orgánico

0 10 20 30 40 50

mAU

0

50

100

150

200

250

Gradiente Escalonado Saltos 1 % del 0 a 10 %

1290 Infinity Quaternary system Quaternary UHPLC from other vendor

1%

3%

7%

10%

Salto in

icia

l

Válvula Multifunción Mayor Comodidad y Flexibilidad

Purga Automática (controlada por software)

Filtrado de eluyentes en línea

para proteger la columna

Válvula Multifunción Mayor Comodidad yFlexibilidad

Lavado Automático del filtro

en contracorriente (backflush)


Mezclado Extra para las aplicaciones más exigentes Para el mínimo rizado/ruido de la línea de base

(p.e.TFA como modificador)


Agilent “Jet Weaver” Una Nueva Tecnología en mezcladores

Con “Jet

Weaver”

(b. binaria)

Sin “Jet

Weaver”

Competidor

1 ml/min

2-35 % ACN/H2O

(0.1 % TFA)

Prestaciones con TFA

La mejor eficiencia de mezcla, incluso

a flujos muy bajos, con el menor

volumen de retardo* (35 µl) para muy

bajo ruido UV

Bomba Cuaternaria

Bomba Binaria

1290 Infinity Inyectores Automáticos

1290 Infinity FlexCube

HTS

HTC

Flex Cube Std. Autosampler


• Ciclo completo de Inyección en 20 seg.

• Elimina la contaminación cruzada

• Permite realizar mezclas, diluciones,

derivatizaciones y dosificaciones

• Configuraciones para Inyección en Loop

fijo o Loop variable

1290 Infinity Inyectores Automaticos Un modelo de Inyector para cada aplicación

G4226A

1290 Infinity Autosampler

G4278A

1290 Infinity LC Injector HTC

G4277A

1290 Infinity LC Injector HTS

Hasta 2 well plates ó 108

viales de 2ml refrigerados.

Capacidad para realizar:

• Mezclas

• Derivatizaciones

• Diluciones

• Dosificaciones

Hasta12 well plates ó 324


Hasta 24 well plates ó 648


1290 Infinity “FlexCube“ Extendiendo las capacidades

Bomba de Jeringa

Rail para

válvula externa

Válvula opción 1 Válvula opción 2 Válvula

de baja presión

Aplicaciones:

a) Lavado automatico del asiento de la aguja y de todo el

sistema de inyección en contra corriente.

b) Inyección en modo Loop Fijo para rapidos ciclos de

inyección.

c) SPE “online“

1290 Infinity Inyector Automático con “FlexCube“ Lavado automático en “backflushing“ del sistema de inyección

Más robustez

para baja contaminación

Elimina posibles bloqueos

del asiento de la aguja de

inyección

Online SPE con

“FlexCube”

Kits de Sistemas de válvulas para SPE “on-line“

2pos-10port Valve

SPE

starter set

Multi SPE Kit

6pos-14port Valve 2pos-10port Valve

High volume

inject kit



Direct Inject

Kit

Direct Inject

Kit

Flask

sampling kit

Direct Inject

Kit

BondElut Online SPE

PLRP:

• 2.1x12.5mm 15-20um • 4.6x12.5mm 15-20um

1260 Pump

Sistema con SPE alternativo

Std. ALS

900µL head

Flex cube

pump

Waste

SPE starter

set

1- Modo Carga SPE

SPE2

SPE1

Load

Column

1260 Bin

Pump

Std. ALS

900µL head

Flex cube

pump

Waste

Sistema con SPE alternativo SPE starter

set

3- Modo Inyección SPE

SPE2

SPE1

Load

Elute

Column

1260 Bin

Pump

Std. ALS

900µL head

Flex cube

pump

Waste

Load

SPE starter

set

Sistema con SPE alternativo con

múltiples columnas SPE

Multi SPE Kit

1- Modo Carga SPE

Hasta 12 Cartuchos SPE

Column

SPE starter

set

Sistema con SPE alternativo con

múltiples columnas SPE

Multi SPE Kit

1260 Bin

Pump

Std. ALS

900µL head

Flex cube

pump

Waste

Elute

Load 3- Modo Inyección SPE

Hasta 12 Cartuchos SPE

Column

SPE starter

set


e Inyección Directa

Direct Inject

Kit

1260 Bin

pump

Flex cube

pump

Std. ALS

900µL head

Waste

1- Modo Inyección Directa

SPE1

SPE2

Column

SPE starter

set



Direct Inject

Kit

1260 Bin

pump

Flex cube

pump

Std. ALS

900µL head

Waste

2- Modo Carga SPE

SPE1

SPE2

Load

Column

SPE starter

set



Direct Inject

Kit

1260 Bin

Pump

Flex cube

pump

Std. ALS

900µL head

Waste


SPE2

Load

SPE1

Elute

Column

SPE starter

set

Sistema para Inyección de grandes

Volúmnes, con SPE alternativo


Direct Inject

Kit

1260 Bin

Pump

Flex cube

Waste

X

X

Std. ALS

900µL head

High volume

inject kit


SPE1

SPE2

5 mL loop

Column

SPE starter

set




Direct Inject

Kit

High volume

inject kit

1260 Bin

Pump

Flex cube

pump

Waste

X

X

Std. ALS

900µL head

Llenado del loop 5 ml

via “multidraw“ del

Autosampler

2- Modo Carga SPE

SPE1

SPE2

Load

5 mL loop

Column

SPE starter

set




Direct Inject

Kit

High volume

inject kit

Llenado del loop 5 ml

via “multidraw“ del

Autosampler

1260 Bin

Pump

Flex cube

Waste

X

X

Std. ALS

900µL head


SPE1

SPE2

Elute

Load

5 mL loop

Column

SPE starter

set

Direct Inject

Kit

Flask

sampling kit

1260 Bin

Pump

Flex cube

pump

Std. ALS

900µL head

Waste

Waste

Sistema con SPE alternativo,

Inyección Directa y selección

de Disolvente


Hasta 12 Solventes

SPE1

SPE2

Column

SPE starter

set

Direct Inject

Kit

Flask

sampling kit Sistema con SPE alternativo,


de Disolvente

1260 Bin

Pump

Flex cube

Std. ALS

900µL head

Waste

Waste

2- Modo Purga Disolvente

Hasta 12 Solventes

SPE1

SPE2

Column

SPE starter

set

Direct Inject

Kit

Flask



de Disolvente

1260 Bin

Pump

Std. ALS

900µL head

Waste

Flex cube

pump

3- Modo Carga SPE

Hasta 12 Solventes

SPE1

SPE2

Load

Column

SPE starter

set

Direct Inject

Kit

Flask



de Disolvente

1260 Bin

Pump

Std. ALS

900µL head

Waste

Flex cube

pump


Hasta 12 Solventes

SPE1

SPE2

Elute

Load

Column

../My Documents/My Videos/Descargas de RealPlayer/Valve-based workflow automation Agilent.mp4

1290 Infinity

Compartimento termostatizado de

columnas

• Refrigerado por efecto peltier

• Permite trabajar desde sub-ambiente hasta 100ºC

• Dos zonas independientes de temperatura

• Precalentadores de eluyente con distintos

volúmenes muertos

• Permite alojar una válvula termostatizada


1290 Infinity Compartimento de columnas Siguiente nivel en facilidad de uso:

New prolonged HX-carrier

with 3rd hand (not shown)

New valve drive and valve head

New capillary guide

New leak funnel

modified lowdisp HX

New door-open sensor

RFID-tag, stores

type, pressure

range, valve

switches

New

Thermal insulation

New 2PS/6PT, 2PT/10PT and 9PT/8PS Quick-Change high pressure valves

1290 Infinity Detector Diode-Array

• 1024 Fotodiodos activos

• Tecnologia de celda por “Guia de Ondas”

• 160 Espectros por Segundo

• Celdas de largo Caminino Óptico y bajo volumen muerto

• Rendija proglamable por software

• NO se ve afectado por los cambios de Índice de Refracción


1290 Infinity Detector Diode Array Como trabaja la óptica

Deuterium lamp

Max-Light cartridge cell

Programmable

slit

1024 element

diode-array

Grating Mirror 160 Hz

Cartucho de Celda “Max-Light“ Tipos de Celda

Non-coated fiber (fused silica)

CELDA Estandard: De 10 mm de camino óptico y tan solo 1 µl de volumen

CELDA de Alta Sensibilidad: De 60 mm de camino óptico y tan solo 4,8 µl de volumen

DISEÑO OPTICO PARA OFRECER UNA MINIMA DISPERSIÓN

1290 Infinity Detector Diode-Array Rendija programable:

nm 230 240 250 260 270 280

Absorbance

0

0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6

(mAU)

1 nm

2 nm

4 nm

8 nm

Nivel de ruido

Rendija Programable para la fácil optimización de la

sensibilidad o resolución espectral.

Ganancia de Sensibilidad Comparación de la celda Standad con la celda de Alta Sensibilidad

min 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6 1.8

mAU

0

5

10

15

20

25

30

35

40

DAD1 B, DAD1A, DAD: Signal A, 251 nm/Bw:10 nm Ref 360 nm/Bw:100 nm (F:\AE4-ANTHRACENE\ANTHRA-STD-CEL7.D)

DAD1 B, DAD1A, DAD: Signal A, 251 nm/Bw:10 nm Ref 360 nm/Bw:100 nm (F:\AE4-ANTHRACENE\ANTHRA-HS-CEL07.D)

Max-Light standard cell flow cell (10 mm)

S/N: 612 Sample: Anthracene, 16.4pg/µl

Column: 2.1x50mm BEH C18, 1.8µm

Mobile phases: Water/Acetonitrile = 30/70

Flow rate: 0.5ml/min

Detection 251, PW >0.05min,

Injection volume:1µl

Column temp: 36°C

Max-Light High Sensitivity cell (60 mm)

S/N: 2339

Up to 4~7 x Higher Sensitivity*

Incremento 30x del Rango Dinámico Lineal Para cuantificar en 1 sola inyección compuestos con

muy distinta respuesta o concentración

Agilent 1200 Infinity High Dynamic Range

(HDR-DAD) Solution

1260/1290 Infinity HDR-DAD

Rango Dinámico x30 con HDR-DAD Combina 2 DAD„s con celdas Max-Light de 3.7 mm y 60 mm

60 mm path-length

3.7 mm path-length

Computing the signals from 60 mm path-length for the low concentration

3.7 mm path-length for the high concentration

Detector Signal

[AU/cm]

Conc

[µg/mL] 10 x higher

sensitivity

~3x higher upper

limit

30x lower Limit of Detection

(LOD)

Combinaciones Dosis Fijas de varios Principios Activos

(API) con Muy Distinta Respuesta: From Roche Switzerland

API 1

API 2

Sin la opción HDR-DAD se

requerirán 2 inyecciones con distinto

volumen

• Agilent 1200 (black): API 2: 10 ml injected

• Agilent 1200 (red): API 1: 100 ml injected

• Infinity HDR-DAD (blue): API 1 and 2

simultaneously: 70 ml injected

API 2: iny. 10 ml (API 1 baja resp.)

API 1: iny. 100 ml (API 2 satura detector.)

3 UA

7 UA

API 1+2: iny. 70 ml con HDR

Bomba Cuaternaria 1290 Infinity: BlendAssist

(Asistente de Mezclas)

Heramienta de software para la dilución en línea de tampones y

modificadores:

• Mejora la reproducibilidad de los tiempos de retención (inter-día).

• Facilita la programación del gradiente con diferentes concentraciones a

partir de soluciones stock.

Water Water

1% TFA

ACN

ACN

1% TFA

Ejemplo: 2 Métodos con distinto % modificador:

1. 5 to 95% gradiente de ACN con 0.1% TFA en Agua y

0.08% TFA en ACN.

2. 20 – 80% gradiente de ACN con 0.5% TFA en Agua y

0.4% TFA en ACN.

Sin BlendAssist: Se deben preparar manualmente los 4 eluyentes requeridos

o programar complejos gradientes (%A, B, C, D).

Con BlendAssist: 1. Definir el factor de dilución de las soluciones stock.

2. Programar un sencillo gradiente binario

orgánico/acuoso!!

1290 Infinity Cuaternario: Asistente Preparación

Mezclas “On-line: BlendAssist*”

* BlendAssist standard incluido en bombas 1290 Cuartenarias. Opcional “BlendAssist Pro“ con funciones adicionales

Heramienta de software para la dilución en línea de tampones y modificadores:

Mejora la reproducibilidad y Facilita la programación del gradiente.

BlendAssist

calculará el factor

de dilución

necesario,

Programar un sencillo

gradiente binario

6 eluyentes mezclados dinámicamente

min 1 2 3 4

Norm.

0

5

10

15

20

25

30

Estudio Repetibilidad Composición y Flujo en

Análisis Isocratico de Glucocorticoides: - Mezcla

dinámica (/en linea) “vs” mezcla manual diversos usuarios

min 1 2 3 4

Norm.

0

5

10

15

20

25

30

35

40

6 eluyentes mezclados manualmente (diferentes usuarios)

El mezclado dinámico mejora

considerablemente la reproducibilidad*

de tiempos de retención (*entre días)

Usuarios1 a 6

June 28, 2013 Confidentiality Label

53

Transferencia del método entre instrumentos Impacto del volumen muerto y de la calidad de la mezcla

¿Que ocurre cuando se programa un gradiente?

tiempo

90%

10%

respuesta

Pasos de programación del gradiente

1200 SeriE Bomba Binaria SL

1290 Infinity Bomba Binaria

1200 Series

1290 Infinity

Volumen muerto total del

sistema

(suma de los capilares,

mezclador, celda, valvulas..)

Volumen

Muerto

Perfil del gradiente/

Calidad de la mezcla

Analisis en Gradiente con diferentes LC´s Impacto del volumen muerto y de la calidad de la mezcla

min2 4 6 8 10 12 14

mAU

0

50

100

150

200

DAD1 B, Sig=275,4 Ref=400,40 (B:\RIC\AGI...RIC DATA\1 PHARMA METOCLOPRAMIDE\WAD PHARMA\XBRIDGE-2000004.D) 2

.747

3.0

49

8.1

21

8.3

23

8.7

47 8

.930

9.5

45

9.9

75

12.

005

12.

215

12.

393

min2 4 6 8 10 12 14

mAU

0

50

100

150

200

DAD1 C, DAD1B, DAD: Signal B, 275 nm/Bw:4 nm Ref 400 nm/Bw:60 nm (B:\RIC\AGI...A\GV 1PHARMA\HPLC000001.D)

2.7

44 2

.884

6.0

88

6.3

28

6.6

73

6.8

72

7.4

80

7.9

23 9.9

37

10.

249

min2 4 6 8 10 12 14

mAU

0

50

100

150

200

DAD1 C, DAD1B, DAD: Signal B, 275 nm/Bw:4 nm Ref 400 nm/Bw:60 nm (B:\RIC\AGI...A\GV 1PHARMA\HPLC000003.D)

2.8

87

3.3

20

8.5

38

8.7

44

9.1

59 9

.325

9.9

51

10.

379

12.

395

12.

630

12.

763

1200 Series LC Quatenary Pump

1290 Infinity LC

Sample: 0.5% impurities in formulation

(metoclopramide)

Xbridge C18, 150x3 mm, 3.5 µm dp,

0.45 ml/min, Eluent: A =0 .25 % AmAc, B = ACN,

Gradient: 0-15 min; 5-57 % B

El resultado:

• Diferencias en los RT y resolución

• ¡Desaparece un pico!

Sistema Inteligente

Tecnología de

Emulación

(ISET)

NUEVO

Transferencia de metodos: 1290 Infinity LC System Emulation Technology

FA

Seleccionar el equipo que quiere ser emulado con un simple click del

ratón:

Agilent

1100 Series

Agilent 1200

Series LC

Agilent 1260

Infinity LC

Agilent 1220

Infinity LC Other

Tecnología de Emulación Inteligente ISET Como?

Tecnología de Emulación Inteligente Como trabaja (p.e. 1290 con un 1200)

Programa de gradiente

1290 gradiente

1200 gradiente

0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5

0

50

100

150

200

250

300

350

400

min

mAU

Inyecctión

Mismas condiciones de gradiente pero

desplazando el gradiente y emulando el perfil de

gradiente a clonar

Tecnología de Emulación Inteligente - Como trabaja (1290 con un 1200)

0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5

0

50

100

150

200

250

300

350

400

min

mAU

Inyecctión

Mismas condiciones de gradiente pero

desplazando el gradiente y emulando el perfil de

gradiente a clonar

Programa de gradiente

1290 gradiente

1200 gradiente

Pesticidas con 1200/1260/1290/1290 ISET

Used Method: % B: 25-95 %; Time : 8 min; Flowrate: 0.8 ml/min

1290

ISET

1200

1290

1260

Agilent 1290 Infinity el UHPLC equipado con ISET El arte de la Emulación

Emula cualquier instrumento (U)HPLC

– con un simple click de ratón

Ejecuta cualquier método (U)HPLC

– sin ninguna modificación del método o del equipo

Consigue los mismos Tiempos de Retención y resolución

de picos

– para una Infinitamente mejor transferencia de métodos

63

Transferencia de métodos de HPLC a UHPLC

¿Preguntas?