Presentacin de PowerPoint

Ratn Knock out Por: David Ramrez

HISTORIA.TRANSFECCINLa transfeccin es un mtodo para introducir material gentico Externo a una clula eucariota.

Transfeccin mediante fosfato de calcioInventado por F. L. Graham y A. J. Van der Eb en 1973, este mtodo se basa en la obtencin de un precipitado entre el cloruro de calcio y el DNA en una solucin salina de fosfatos, estos agregados son endocitados por las clulas. EL problema:1/1000.000La mayora del ADN tomado por las clulas no llegaban al ncleo donde podan cumplir su funcin, sino que llegaban a los lisosomas donde eran degradados.

En 1977 Capecchi tena un laboratorio en Utah y estaba experimentando con agujas sper pequeas de vidrio para hacer transfeccin, en el laboratorio adyacente, trabajaba el Dr. Larry Okun, un neurocientfico, trabajaba midiendo el potencial elctrico intracelular en ganglios espinales de polluelos. Con su aparato poda penetrar las clulas sin destruirlas

Usando este aparato Capecchi pudo realizar 1000 inyecciones intranucleares por hora.Dr. Larry OkunTk- Tk+HSV-TKMiopata mitocondrial por dficit de timidin kinasa 21977, Wigler and Axel Fosfato de calcioMario R. Capecchi1/3La efectividad de la transfeccin requera que el gen HSV-TK estuviera vinculado a secuencias cortas de DNA vrico.

neomycin-resistance geneHaciendo el ratn Knock out

GRACIAS.