UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCAESCUELA DE POST -G RADO

Maestra en Ciencias Mencin: Gestin Ambiental.

Curso:

Metodologa de la Investigacin

Profesor: Dr. Juan F. Seminario Cunya Tema: DESARROLLO DE PROYECTO DE TESIS

Alumno: AYCACHI INGA, Rmulo.

Cajamarca, Per.

Julio de 20111

TTULO: Evaluacin de la calidad microbiolgica del agua de las fuentes utilizadas para abastecimiento de agua potable de la ciudad de Rioja San MartnRESUMEN: I. PROBLEMA DE INVESTIGACIN: 1.1 Planteamiento del Problema: La ciudad de Rioja, capital de la Provincia de mismo nombre, est ubicada en la Regin San Martn, cuenta con una poblacin urbana de 26,055 habitantes, segn el censo del 2007. De toda esta poblacin, hacia el 2008, se abasteca con agua potable a 22,606 habitantes, es decir el 86.76% del total de la poblacin de la ciudad (SEDAPAR 2009). Esta ciudad es abastecida con agua potable a travs de dos fuentes de agua de tipo superficial, el ro Uquihua y la quebrada Cuchachi, las cuales son represadas a travs de estructuras de cemento. La Captacin Uquihua se encuentra ubicada en el casero de Pablo Mori, sector Mashuyacu, a 5 km de la ciudad de Rioja y sus aguas son llevadas a la Planta de Tratamiento a travs de una lnea de conduccin por bombeo. La Captacin Cuchachi se encuentra ubicada en el rea de Conservacin Municipal Cuchachi, a 2 km aproximadamente del casero de Nueva Salabamba y sus aguas son llevadas a la Planta de Tratamiento a travs de una lnea de conduccin por gravedad. La Captacin Uquihua opera desde el ao 1989, poca en la que la presencia de poblacin en esta rea era mnima, pero se ha visto que a lo largo del tiempo la poblacin en los alrededores y a lo largo del cauce del ro, sobre todo ro arriba de la estructura de captacin, ha ido creciendo de manera exponencial, generando serios peligros para la integridad y calidad de las aguas de este ro. Estas poblaciones, al no2

contar con sistemas de alcantarillado, eliminan todos sus desechos slidos y lquidos a estas aguas. Tambin se ha notado una creciente actividad ganadera bovina a lo largo del recorrido del ro, adems de agricultura de caf y arroz (PEAM 2008; SEDAPAR 2009; Rojas 2011). Situacin similar pasa la captacin Cuchachi, que empez a operar en el ao 1983, y que, a pesar de encontrarse en un rea de Conservacin Municipal, ha sido invadida por agricultores inmigrantes, lo cual ha generado un intenso proceso de deforestacin. Esta situacin, adems de repercutir en la disminucin del caudal en los ltimos aos, ha generado que sus aguas arrastren mayor cantidad de materia orgnica, que se refleja en el aumento de su turbiedad y color. Este fenmeno es ms notorio en poca de lluvias (PEAM 2008; SEDAPAR 2009; Rojas 2011).

Por lo antedicho, las dos fuentes de agua estn en riesgo por el progresivo proceso de contaminacin por las poblaciones inmigrantes asentadas a lo largo de su curso y tambin por la agricultura y ganadera que desarrollan. Estas aguas, as captadas, son administradas y distribuidas por la Empresa Municipal de Agua Potable y Alcantarillado de Rioja S.R.L. (SEDAPAR SRL), la cual realiza un tratamiento de tipo convencional que consiste en desarenacin, remocin de turbiedad y color con Sulfato de Aluminio tipo B y desinfeccin con Cloro Gas, de acuerdo al tipo de agua, para el que fue diseada la Planta de Tratamiento (Clase II, segn el Reglamento de la Ley General de Aguas 1969) en el ao de 1987. Este es del tipo de Filtracin Rpida Completa y empez a operar en el ao de 1989, junto con la captacin Uquihua.3

No se cuenta con datos que informen sobre la verdadera calidad microbiolgica del agua de las fuentes, ya que la Empresa slo realiz anlisis microbiolgicos de estas fuentes desde el 2006 hasta el tercer trimestre del ao 2008, en los que slo se realizaban anlisis de Coliformes Totales y Coliformes Termotolerantes de manera mensual. Estos informes revelaban una elevada presencia de estos

microorganismos indicadores en las dos fuentes (SEDAPAR 2006 2011).Todo esto pone en evidencia que la calidad microbiolgica de las dos fuentes debe haber cambiado a lo largo de los aos, ya que si bien en 1987 eran de Clase II segn el Reglamento de la Ley General de Aguas 1969, en la actualidad, con la creciente poblacin existente y las actividades agrcolas y ganaderas que se desarrollan a lo largo de sus recorridos y tenindose ahora como gua a los Estndares Nacionales de Calidad del Agua (D. S. N 002-2008-MINAM), no se conoce el verdadero estado microbiolgico de estas fuentes, el cual debera estar acorde al tipo de tratamientos a realizarse para su potabilizacin (OMS 2006), todo esto con el fin de preservar la salud de los usuarios a los cuales SEDAPAR SRL distribuye el agua potable.

1.2 Formulacin del Problema: Pregunta General: Cul es el grado de contaminacin, por agentes microbiolgicos, de las fuentes utilizadas para abastecimiento de agua potable en la ciudad de Rioja San Martn?4

Preguntas Especficas: Cul es la concentracin de Coliformes Totales presente en el agua de las fuentes utilizadas para abastecimiento de agua potable en la ciudad de Rioja San Martn? Cul es la concentracin de Coliformes Termotolerantes presente en el agua de las fuentes utilizadas para abastecimiento de agua potable en la ciudad de Rioja San Martn? Cul es la concentracin de Formas Parasitarias presente en el agua de las fuentes utilizadas para abastecimiento de agua potable en la ciudad de Rioja San Martn?

1.3 Justificacin de la Investigacin: La calidad microbiolgica de las fuentes de agua repercute de gran manera en la calidad sanitaria del agua que se distribuye a una poblacin y esta a su vez repercute de manera significativa en la salud de las personas y en la salud de los ecosistemas (OMS 2006; UN WATER et. al. 2010).

Esto se debe a que el agua y los microorganismos que en ellos se contiene, son los principales transmisores de las enfermedades de origen hdrico, las cuales generan gastroenteritis que van desde diarreas leves a procesos mucho ms graves como las diarreas severas y las disenteras, las cuales afectan con mayor impacto a la poblacin inmunolgicamente comprometida, como los nios, los ancianos y los que presentan enfermedades inmunodeficientes (Rojas 2002; OMS 2004; Aurazo de Zumaeta 2004). Por tanto la5

investigacin de la calidad microbiolgica de las fuentes de agua utilizadas para el abastecimiento de una poblacin debe ser tomada como prioritaria para las empresas responsables de su

abastecimiento (Vargas et. al. 2000?; Rojas 2002; Tomasini 2003?). Al tenerse un conocimiento de base actualizado sobre la calidad microbiolgica de las fuentes de agua de las cuales se abastece la ciudad de Rioja, la empresa responsable de su distribucin tendr una herramienta importante que le permitir tomar las acciones que sean necesarias para adecuar los procesos de tratamiento que se llevan a cabo para su potabilizacin, haciendo uso de los insumos qumicos necesarios de manera racional y adecuada, adems de tomar las acciones que sean necesarias para la conservacin y buen manejo de las fuentes (Guevara1996; Rojas 2002). De la misma manera, se podr dar un uso racional de agua para otro tipo de actividades como el riego para la agricultura y para actividades recreacionales. Por tanto, toda esta informacin a ser generada podr ser aprovechada tanto por la empresa responsable de la distribucin del agua potable, como por la poblacin que se sirve de estas fuentes, adems de generar informacin actualizada sobre los niveles de contaminacin de estas fuentes que forman parte del Bosque de Proteccin Alto Mayo y para usos futuros tanto para la ganadera como para la agricultura.

1.4 Alcances y Limitaciones: El presente trabajo de investigacin ser desarrollado en la ciudad de Rioja, ubicada en la provincia Rioja, regin San Martn. Las6

muestras de agua sern representativas y tomadas de puntos especficos en las estructuras de captacin de las fuentes de agua del Ro Uquihua, ubicado en casero de Pablo Mori Mashuyacu; y de la Quebrada Cuchachi, ubicada dentro del rea de Conservacin Municipal Cuchachi (bosque de proteccin), a aproximadamente 2 km del casero Nueva Salabamba. La temporalidad del presente trabajo ser de 15 meses, desde octubre del 2011 hasta diciembre del 2012, tiempo en el cual se tomarn dos muestras por mes, obtenindose en total 30 muestras. En este tiempo se cubrirn las estaciones climticas ms importantes de estas fuentes; las pocas de lluvia y las pocas de verano o estiaje (vaciante del ro). Para evaluar la calidad microbiolgica del agua de las dos fuentes, se tomarn en cuenta slo a indicadores bacteriolgicos como los Coliformes Totales y Termotolerantes y a indicadores parasitolgicos como las formas parasitarias de quiste de protozoarios y huevos de helmintos. No se tomarn en cuenta otros tipos de microorganismos bacterianos como Salmonella, Shigella, Vibrio, parasitolgicos como amebas de vida libre, Cryptosporidium, cianobacterias como las cianobacterias productoras de toxinas o virales como los colifagos. En cuanto a las limitaciones, las mayores se presentarn para la toma y transporte de muestras en la captacin Cuchachi, ya que esta se encuentra a ms 9 km de la ciudad de Rioja, en una zona boscosa, poco accesible, por ser en gran parte, camino de herradura y dentro de la zona de conservacin municipal, solo trochas en medio del bosque. En tanto que la captacin Uquihua se encuentra a solo aproximadamente 5 km de la ciudad de Rioja.7

II. MARCO TERICO: 2.1 Antecedentes tericos de la investigacin: No se cuentan con antecedentes sobre estudios realizados para la evaluacin de la calidad microbiolgica tanto del ro Uquihua como de la quebrada Cuchachi.

Se cuenta con estudios realizados por la Gerencia de Medio Ambiente y Desarrollo Econmico y la Oficina de Ordenamiento Territorial de la Municipalidad Provincial de Rioja desarrollados para la Zonificacin Ecolgica Econmica de la cuenca del Alto Mayo, en la Jurisdiccin de la Provincia de Rioja, donde se tienen datos ambientales generales sobre la quebrada Cuchachi y Uquihua (Cuchachi es un tributario del ro Uquihua, el cual a su vez lo es del Tnchima y este del ro Mayo). Adems se cuentan con estudios realizados por el Proyecto Especial Alto Mayo (PEAM) y su direccin de Manejo Ambiental a travs del Programa de Gestin Territorial para la Zonificacin Ecolgica Econmica de la cuenca del Alto Mayo y para el desarrollo del Bosque de Proteccin Alto Mayo. El PEAM tambin ha desarrollado estudios en el ro Uquihua y la quebrada Cuchachi para el desarrollo del Proyecto de Mejoramiento de las Redes de agua Potable y Alcantarillado de la ciudad de Rioja.

De los estudios realizados se concluy que estas fuentes de agua, y los bosques que las circundan, son reas naturales protegidas crticamente amenazadas. Las principales amenazas incluyen altos niveles de migracin de campesinos andinos, invasin de territorio y8

trfico de tierras, deforestacin con fines agrcolas y ganaderos. El impacto que esto genera, adems de la progresiva deforestacin, es la degradacin de la calidad del agua por los crecientes asentamientos humanos en estas zonas que generan adems de efluentes de aguas residuales y pluviales, una gran variedad de desechos slidos.

Los estudios para el Mejoramiento de las redes de agua Potable y Alcantarillado de la ciudad de Rioja mostraron que la razn para el uso de una nueva fuente de agua (el ro Negro) es que, adems de los bajos caudales que vienen presentado estas fuentes y que harn inviable en los prximos aos el abastecimiento de agua potable para la creciente poblacin de Rioja, las fuentes utilizadas actualmente (Uquihua y Cuchachi), presentan un elevado porcentaje de material orgnico en sus aguas, el cual es indicador una elevada contaminacin y sobre todo de una elevada produccin de residuos del proceso de desinfeccin como los trihalometanos, todo esto por la creciente contaminacin que se vienen dando en estas fuentes, en mayor medida en la fuente Uquihua.

Inspecciones de campo realizadas por la Oficina de Salud Ambiental de la Red de Servicios de Salud de la Ciudad de Rioja, en coordinacin con SEDAPAR, el ao 2007 a la Captacin Uquihua dan cuenta que se encontraron posibles focos de contaminacin en las viviendas establecidas en el margen territorial de la Captacin Uquihua. Esta misma inspeccin tambin recomend el desarrollo de anlisis parasitolgicos del agua de las fuentes y del agua producida para descartar contaminacin microbiolgica.9

SEDAPAR SRL tambin da cuenta que, en los anlisis desarrollados en las dos fuentes de agua durante los aos 2006 hasta el tercer trimestre del 2008, se detectaba contaminacin por Coliformes Totales y Termotolerantes en la fuente Uquihua y por Coliformes Totales en la Fuente Cuchachi. La empresa nunca desarrollo anlisis parasitolgicos en las aguas de estas fuentes. Gmez (1995) da cuenta de estudios sobre contaminacin en los cuerpos de agua en la ciudad de Tarapoto, los ros Cumbaza, Shilcayo y la quebrada Ahuashiyacu, los cuales vierten sus aguas al ro Mayo. En este estudio se concluy que estos cuerpos de agua se encuentran contaminados por Coliformes Totales en niveles superiores a los Lmites Mximos Permisibles (LMP) para consumo humano y contaminacin por Coliformes Termotolerantes en algunos puntos de estos ros, adems de contaminacin por nitratos en el ro Cumbaza y Ro Mayo, y en el ro Shilcayo despus de recibir las aguas servidas de la ciudad. Todo esto debido a que las aguas servidas generadas, propias de las actividades humanas, no solo de la ciudad, sino de otras poblaciones establecidas a orillas de estos ros, son vertidas a estos cuerpos de agua sin un tratamiento previo.

Tambin se concluy que de los desechos producidos por las actividades humanas, las cuales varan segn la actividad (domstica, industrial, comercial, etc.), por su volumen y capacidad de albergar grmenes patgenos para la salud humana, los desechos domsticos deben ser estudiados, priorizando las ciudades de mayor nmero de habitantes. Se recomienda adems que la monitorizacin de la calidad el agua potable que consume una poblacin deba ser peridica, siendo10

para poblaciones de 20,000 a 50,000 habitantes (como la ciudad de Rioja) de manera quincenal.

2.2 Marco Terico o Bases Tericas: 2.2.1 Generalidades sobre la calidad del agua: El agua es la base de la vida en nuestro planeta. Cubre el 71% de la superficie de la corteza terrestre, localiza principalmente en los ocanos donde se concentra el 96,5% del agua total (agua salina) que no puede ser consumida directamente por los seres humanos, los glaciares y casquetes polares poseen el 1,74%, los depsitos subterrneos (acuferos), los permafrost y los glaciares continentales suponen el 1,72% y el restante 0,04% se reparte en orden decreciente entre lagos, humedad del suelo, atmsfera, embalses, ros y seres vivos (Wikipedia 2011).

La calidad de la vida depende directamente de la calidad del agua. Una buena calidad del agua sustenta la buena salud de los ecosistemas y, en consecuencia, mejora el bienestar de las personas (UN WATER et. al. 2010).

Por tanto, un agua contaminada es un vehculo eficaz de transmisin de la mayora de enfermedades de origen hdrico. Histricamente, una gran cantidad de microorganismos han causado epidemias de origen hdrico, siendo las salmonelas y shigelas las que se identificaron primero, aunque en la actualidad otros microorganismos como los rotavirus,11

Campylobacter o parsitos tales como Giardia se identifican tambin como responsables de las mismas. La mayora de los trastornos ocasionados por estos microorganismos son de una gravedad moderada

presentndose a menudo en forma de gastroenteritis asociada con diarreas, dolores abdominales y vmito. La contaminacin microbiolgica del agua ocurre por lo general a travs de heces de origen humano o animal. La presencia de descargas de aguas residuales domsticas o pecuarias en las inmediaciones de una fuente de

abastecimiento es una de las causas de contaminacin.

Los

contaminantes

biolgicos

poseen

diversas

caractersticas que les distinguen de los contaminantes qumicos, entre ellas (Tomasini 2003?):

-

Que no estn en solucin, sino que se presentan en formas de partculas.

-

Que el riesgo de contraer una infeccin no depende nicamente de la concentracin media de microorganismos en el agua.

-

La probabilidad de que in microorganismo patgeno consiga implantarse en el organismo y provoque una infeccin depende de su grado de invasin, de su dosis mnima infectiva as como de la capacidad de respuesta inmunolgica del individuo.Si se produce la infeccin, los microorganismos patgenos se multiplican en el husped. Algunas bacterias12

patgenas pueden incluso multiplicarse en los alimentos y las bebidas, lo que aumenta el riesgo de infeccin. Ese no es el caso de los contaminantes qumicos. Contrario a los efectos provocados por las numerosas sustancias qumicas, la relacin dosis efecto de los

microorganismos patgenos no es acumulativa. Una nica exposicin a un microorganismo patgeno puede bastar para provocar una enfermedad.

2.2.2 La Problemtica de la Calidad del Agua: En Amrica Latina y el Caribe el 43% de la poblacin rural no tiene acceso al abastecimiento de agua con una calidad apropiada para el consumo humano y para usos domsticos como la higiene personal.

Por otro lado, se ha demostrado que las enfermedades hidrotransmisibles como la gastroenteritis, la fiebre tifoidea, la hepatitis A y el clera, estn entre las principales causas de muerte en los pases de Amrica Latina. Hay una relacin directa entre la mortalidad infantil y la cobertura y calidad del agua de consumo debido a que los nios son especialmente propensos a enfermarse de diarrea (Aurazo de Zumaeta 2002).

Se considera que la diarrea es la primera causa de muerte en nios de entre menores de 5 aos de edad, ya que13

para el 2004, de las 1,8 millones de personas que mueren cada ao debido a enfermedades diarreicas (incluido el clera), un 90% de esas personas son nios de ese grupo de edad, y son procedentes principalmente de pases en desarrollo (OMS, 2004). Para el 2010 1101,503 personas fallecieron a causa de enfermedades diarreicas (Guerra y La Fuente 2011).

Los nios menores de 5 aos aun no tienen completo el sistema inmunolgico y en los pases en desarrollo, la mayor parte de ellos estn afectados por la desnutricin; ya que en general la diarrea es transitoria, en las personas bien alimentadas, y persistente en las mal nutridas. Adems la infeccin repetitiva puede aumentar la desnutricin que, a su vez, incrementa la vulnerabilidad ante nuevas infecciones.

Las comunidades rurales se encuentran en permanente riesgo de contraer enfermedades hdricas porque comnmente viven sin acceso a agua segura y a servicios de saneamiento. Las poblaciones que se abastecen directamente de aguas de origen hdrico (ros, lagunas, lagos) se encuentran aun en mayor riesgo debido a que la fuente de agua est expuesta a la contaminacin fecal. Las razones para ello incluyen la carencia de una apropiada disposicin de excretas y factores como la defecacin a campo abierto, las letrinas mal diseadas y la presencia de animales domsticos y silvestres que actan como reservorios de agentes patgenos.14

Por tanto se piensa que un 88% de las enfermedades diarreicas son producto de un abastecimiento de agua insalubre y de un abastecimiento y una higiene deficientes. Esto quiere decir que una mejora del abastecimiento de agua reduce entre un 6% y un 21% la morbilidad por diarrea, si se contabilizan las consecuencias graves. La mejora del

saneamiento reduce la morbilidad por diarrea en un 32%.

Las medidas de higiene, entre ellas la educacin sobre el tema y la insistencia en el hbito de lavarse las manos, pueden reducir el nmero de casos de diarrea en hasta un 45%. La mejora de la calidad del agua de bebida mediante el tratamiento del agua domstica, por ejemplo con la cloracin en el punto de consumo, puede reducir en un 35% a un 39% los episodios de diarrea (OMS 2004).

En el Per, para el 2008, solo el 61% de la poblacin rural tena acceso a fuentes mejoradas de agua potable, frente al 90% de la poblacin urbana y 36% de la poblacin rural tena acceso a servicios de saneamiento mejorados frente al 81% de la poblacin urbana. Este se ve reflejado en la distribucin de las causas de muerte en menores de 5 aos, en donde las diarreas representa en 4% para el 2008 (OMS 2010).

En la ciudad de Rioja para el ao 2008, el 86.76% de la poblacin contaba con servicio de agua potable en sus viviendas (22,606 habitantes), mientras que slo el 45.58% de15

la poblacin contaba con una conexin al sistema de alcantarillado (SEDAPAR 2009).

Esto demuestra que la calidad el agua y las cuestiones socioeconmicas como la pobreza, los medios de vida, la salud y la igualdad guardan una estrecha interrelacin. Proporcionar y mantener unos servicios de suministro de agua potable segura y de saneamiento resulta fundamental para mitigar la pobreza y mejorar la calidad de vida de miles de millones de personas.

Referente a esto, la comunidad internacional est an lejos de lograr la meta de los Objetivos de Desarrollo del Milenio (ODM) de reducir a la mitad el nmero de personas sin acceso a un agua segura y a unos servicios bsicos de saneamiento para el 2015. A pesar del avance logrado hacia la consecucin de sta meta, grandes sectores de la poblacin estn an lejos de alcanzarla. En el mundo, alrededor de 1,100 millones de personas todava carecen de acceso a una fuente de agua mejorada de abastecimiento de agua y ms de 2,600 millones carecen de acceso a unos servicios de saneamiento mejorados.

Aunque se estima que ms del 90% de la poblacin mundial utilizar una fuente mejorada de acceso al agua antes de 2015, ser preciso realizar grandes esfuerzos para que se alcance la meta en materia de servicios de saneamiento fijada16

en los ODM. Durante ms de 16 aos (entre 1990 y 2006) la proporcin de personas carentes de unos servicios de saneamiento mejorados disminuy en slo 8%. Teniendo en cuenta el crecimiento demogrfico, antes del 2015

aproximadamente 2,400 millones de personas seguirn careciendo de acceso a unos servicios bsicos de saneamiento en 2015 (UN WATER et. al. 2010).

2.2.3 La Calidad del Agua y los Ecosistemas: La calidad de los recursos hdricos se ve cada vez ms amenazada por la contaminacin. Durante los ltimos 50 aos, la actividad humana ha provocado la contaminacin de los recursos hdricos en una magnitud histrica sin precedentes. Se estima que ms de 2,500 millones de personas en el mundo viven sin un sistema adecuado de saneamiento. Cada da 2 millones de toneladas de aguas residuales u otros afluentes son drenados hacia las aguas del mundo. El problema es ms grave en los pases en desarrollo, en los que ms del 90% de los desechos sin procesar y el 70% de los desechos industriales sin tratar se vierten en aguas superficiales.

Las repercusiones del cambio climtico (como las inundaciones y sequas frecuentes o prolongadas) y el crecimiento del nmero de fuentes de contaminacin vienen a aadirse a los retos confrontados por la calidad del agua. El crecimiento demogrfico y los cambios en las pautas de produccin y consumo han conllevado la expansin de los17

procesos industriales, la

minera, la agricultura

y la

urbanizacin, lo cual ha provocado la liberacin en el medio ambiente metales pesados, elementos radioactivos, toxinas orgnicas y productos farmacuticos desechados.

Las sequas prolongadas, especialmente en ecosistemas frgiles como las regiones ridas y semiridas, disminuyen la capacidad de los ecosistemas para diluir el agua contaminada y mantener el equilibrio de las funciones naturales. Los ecosistemas afectados no pueden hacer frente al estrs adicional generado por el cambio climtico. En consecuencia su capacidad para servir de criaderos y viveros, protectores contra tormentas y sumideros azules de carbono resulta an ms disminuida. En algunas regiones, ms del 50% de las especies ictiolgicas de agua dulce nativas se encuentran en peligro de extincin, y est previsto que las repercusiones del cambio climtico compliquen aun ms la situacin.

La migracin de las zonas rurales a las urbanas aumenta a medida que la poblacin aumenta. Se estima que la poblacin urbana pasar de los 3,400 millones de personas en 2010 a 6,400 millones de personas antes de 2050. Si no se afronta adecuadamente esta situacin, mediante una

planificacin financiacin proactivas, este rpido crecimiento vendr a sumarse a los problemas que ya encara la calidad del agua. Unas infraestructuras insuficientes y un mantenimiento deficiente de las existentes generan los problemas en la18

gestin de los desechos municipales as como para el tratamiento y la descarga de las aguas residuales.

Por tanto resulta urgente acrecentar la investigacin, el monitoreo y la evaluacin de la calidad del agua a los niveles mundial, regional y local adoptando un enfoque integrado en el que la cuenca sea utilizada como unidad de gestin. Los resultados cientficos de las investigaciones deben

fundamentar la elaboracin y aplicacin racionales de polticas que conlleven a la proteccin integral de las cuencas y de esta manera tambin proteger la calidad del agua (UN WATER et. al. 2010).

2.2.4 Aspectos Microbiolgicos de la Calidad del Agua: Los agentes patgenos transmitidos por el agua constituyen un problema mundial que demanda un urgente control mediante la implementacin de medidas de proteccin ambiental a fin del evitar el incremento de la prevalencia de las enfermedades relacionadas con la calidad del agua (Vargas et. al. 2000?).

Por tanto el abastecimiento de agua de buena calidad fue uno de los ocho componentes de la atencin primaria de salud identificados en la Conferencia Internacional sobre Atencin Primaria de Salud celebrada en Alma-Ata en 1978.

19

En la mayora de los pases, los principales riesgos asociados al consumo de agua contaminada estn relacionados con microorganismos. Como se indica en el captulo 18 de la Agenda 21 de la Conferencia de las Naciones Unidas sobre el Medio Ambiente y el Desarrollo aproximadamente un 80% de todas las enfermedades y ms de una tercera parte de las defunciones en los pases en desarrollo tienen por causa el consumo de agua contaminada y en promedio, hasta la dcima parte del tiempo productivo de cada persona se dedica a las enfermedades relacionadas con el agua.

El riesgo de contraer enfermedades transmitidas por el agua aumenta con el grado de presencia de microorganismos patgenos. Sin embargo, la relacin no necesariamente es simple y depende de otros factores tales como la dosis infecciosa y la susceptibilidad del husped. El agua para consumo humano es solo uno de los vehculos de transmisin de enfermedades. A causa de la multiplicidad de vas de transmisin, no solo el mejoramiento de la calidad del agua y la disponibilidad del agua, sino tambin la disposicin sanitaria de excretas y la aplicacin de adecuadas reglas de higiene, son factores importantes en la reduccin de la morbilidad y la mortalidad causada por diarreas.

Independientemente de los agentes que afectan la calidad del agua para consumo humano, es necesario tener en cuenta los riesgos causados por la pobre proteccin de las20

fuentes de agua, el inadecuado manejo del agua durante el proceso de tratamiento y la mala conservacin de su calidad a nivel de redes de distribucin e intradomiciliario. Sin embargo, la ausencia de enfermedades en comunidades abastecidas con un agua de mala calidad o dudosa calidad no significa que la poblacin no este sujeta riesgos que puedan desencadenar una epidemia.

En la lista de agentes transmitidos por el agua que constituye un problema mundial y que pueden producir efectos adversos a la salud se encuentran entre los ms importantes a agentes microbiolgicos, entre ellos los ms resaltantes bacterias como Vibrio cholerae, Salmonella y Shigella; virus como los de la hepatitis A y E y protozoos como la Giardia y Cryptosporidium.

En la presente tabla se incluyen los microorganismos ms representativos causantes de enfermedades de origen hdrico (Tabla N 01).Tabla N 01: Patgenos y enfermedades de Origen Hdrico PATGENOS ENFERMEDAD CAUSADA Bacterias: Campylobacter jejuni Gastroenteritis Escherichia coli Gastroenteritis Legionella pneumophila Salmonella Shigella Vibrio Cholerae Enfermedades respiratorias agudas Salmonelosis, tifoidea, paratifoidea Disentera bacilar Clera 21

Yersinia enterocolitica Protozoarios: Cryptosporidium Entamoeba hystolitica Giardia lamblia Naegleria fowleri Enterovirus: Adenovirus Astrovirus Calicivirus Coxsackievirus A Echovirus Hepatitis viral A Norwalk virus Poliovirus Rotavirus Obtenido de Tomasini 2003?

Gastroenteritis Diarrea Disentera amibiana Diarrea Meningitis ceflica Enfermedades respiratorias, infecciones en los ojos, gastroenteritis Gastroenteritis Gastroenteritis Meningitis, enfermedades respiratorias, miocarditis Meningitis, diarrea, fiebre, enfermedades respiratorias Infecciones hepticas Diarrea, vmito y fiebre Meningitis, parlisis Diarrea, vmitos

Aunque los agentes patgenos tpicos transmitidos por el agua son capaces de sobrevivir en el agua de consumo, la mayora no crecen ni proliferan en el agua. Microorganismos como Campylobacter y E. coli pueden acumularse en los sedimentos y movilizarse al aumentar el caudal de agua.

Tras abandonar el organismo de su hospedador, la viabilidad y la capacidad infecciosa de la mayora de los agentes patgenos disminuye gradualmente. Su nmero disminuye normalmente de forma exponencial, y transcurrido cierto tiempo no podr detectarse su presencia. Los agentes patgenos con persistencia baja deben encontrar rpidamente22

nuevos hospedadores y es ms probable su transmisin por contacto de persona a persona o por una higiene personal deficiente que por el agua de consumo. Varios factores influyen en la persistencia, de los que la temperatura es el ms importante. El nmero de microorganismos disminuye habitualmente con mayor rapidez a temperaturas ms altas y la tasa de disminucin puede verse potenciada por los efectos letales de la radiacin UV de la luz solar que incide en la zona superficial del agua.

Los agentes patgenos y parsitos transmitidos pro el agua ms comunes son los que poseen una infectividad alta y/o pueden proliferar en el agua o poseen una resistencia alta fuera del organismo.

Los virus y las formas latentes de los parsitos (quistes, ooquistes, huevos) no pueden multiplicarse en el agua. Por el contrario, la presencia de cantidades relativamente altas de carbono orgnico biodegradable, junto con temperaturas clidas y concentraciones residuales bajas de cloro, pueden permitir la proliferacin de Legionella, V. cholerae, Naegleria fowleri, Acanthamoeba y organismos molestos en algunas aguas superficiales y en los sistemas de distribucin de agua.

La calidad microbiolgica del agua puede variar muy rpidamente y en gran medida. Pueden producirse aumentos repentinos de la concentracin de agentes patgenos que23

pueden

aumentar

considerablemente

el

riesgo

de

enfermedades y desencadenar brotes de enfermedades transmitidas por el agua. Los anlisis de la calidad microbiolgica del agua normalmente tardan demasiado para que sus resultados puedan ser tenidos en cuenta por los responsables de la adopcin de medidas para evitar el suministro de agua insalubre (OMS 2006).

2.2.5 Indicadores Microbiolgicos de la Calidad del Agua: Resulta terica, tcnica y financieramente imposible investigar en el agua todos los microorganismos patgenos susceptibles de provocar infecciones de origen hdrico debido a:

- La dificultad de que todos los laboratorios responsables por el monitoreo de la calidad del agua identifiquen

sistemticamente estos microorganismos. - La imposibilidad de aislar algunos de ellos con las tcnicas analticas actuales. - La presencia, por lo general irregular, de los

microorganismos patgenos en el agua, por lo que la deteccin debera hacerse de manera continua. - El largo tiempo requerido para obtener resultados de los anlisis, no permitiendo un control eficaz y por lo tanto una proteccin satisfactoria.24

Debido a esto, los laboratorios responsables del monitoreo de la calidad del agua se les dificulta la identificacin sistemtica de los microorganismos. Para evaluar la contaminacin se ha tenido que recurrir a la extrapolacin de riesgos de contaminacin bacteriolgica, mediante

microorganismos tipo. A tales microorganismos se les conoce como indicadores de contaminacin microorganismos testigo.

La gran mayora de los microorganismos transmitidos por el agua son de origen fecal. Consecuentemente su monitoreo se basar en demostrar la presencia de los microorganismos ms representativos indicadores de esa contaminacin.

Los indicadores deben tener algunas caractersticas particulares: ser poco o nada patgenos, fciles y rpidos de detectar a un costo moderado. Adems debern presentar una resistencia a los tratamientos fsico-qumicos.

Los indicadores bacteriolgicos son organismos de un grupo especfico, el cual por su sola presencia demuestra que ocurri contaminacin y en ocasiones sugiere el origen de dicha contaminacin. Tradicionalmente los coliformes fecales es el grupo de bacterias indicadoras que se consideran en los estudios y trabajos para evaluar la calidad del agua. Estos son25

bacterias causantes de diarreas y malestares estomacales leves, su dosis infectiva es de aproximadamente 102 Nmero Ms Probable por 100 mL de agua. Si la muestra contiene microorganismos indicadores es evidencia de contaminacin y existe la posibilidad de que haya otros microorganismos patgenos en el agua. A mayor nmero de coliformes fecales, mayor es la probabilidad de encontrar otros organismos patgenos.

El indicador parasitolgico utilizado para determinar la contaminacin del agua por parsitos es el huevo de Helmintos. Los Helmintos son un amplio grupo de organismos que incluyen a todos los gusanos parsitos (de humanos, animales o vegetales) de forma libre, con forma y tamao variado (Tabla N 02). Su alto riesgo a la salud se debe principalmente a que sus estadios presentan una lata persistencia en el ambiente, su dosis mnima infectiva es de un huevo, no existe inmunidad en los humanos, su periodo de latencia es largo (meses), son resistentes a los procedimientos convencionales de desinfeccin. Adems es de importancia su altsima capacidad de ovoposicin (huevos puestos por da) durante los 10 a 24 meses que tienen de vida, por ejemplo Ascaris 200,000 huevos, Hymenolepis 100,000 huevos, Trichuris 5,000 a 7,000 y Taenia 700,000. Existe una gran variedad de huevos de helmintos de importancia sanitaria que afectan tanto al hombre como a los animales. Estos huevos son eliminados por el portador en la materia fecal y la va de26

entrada al hospedero es oral, por contaminacin del agua y alimentos con agua residual y/o heces de animales de sangre caliente.Tabla N 02: Parsitos Patgenos Transmitidos por el Agua Taenia solium Taenia saginata Ascaris lumbricoides Trichuris trichuria Enterobius vermicularis Strogyloides stercolaris Ancylostoma duodenalis Necator americanus Toxocara canis Dipylidium caninum Hymenolepis diminuta Hymenolepis nana Schistosoma mansoni Fasciola hepatica Obtenido de Tomasi 2003?

Por tanto, para la evaluacin microbiolgica de la calidad del agua, se debe realizar sistemticamente pruebas de laboratorio que permitan estimar la magnitud de la contaminacin.

2.2.6 Legislacin Peruana sobre la Calidad del Agua: La Resolucin Suprema del 17 de diciembre de 1946 dio a la luz el Reglamento de los Requisitos Oficiales Fsicos, Qumicos y Bacteriolgicos que deben reunir las Aguas de Bebida para ser Consideradas Potables. En este reglamento se describan los valores mximos de los parmetros fsicos,27

qumicos y microbiolgicos que deban tener las aguas para ser consideradas potables. En lo que respecta a parmetro microbiolgicos, slo se toma en consideracin al grupo coliforme en general, denominndose como una muestra bacteriolgicamente pura aquella en la que ninguna de las cinco porciones estndar examinadas muestren presencia de grmenes de este grupo, por el mtodo del Nmero Ms Probable (NMP < 2.2). No se toma en consideracin en este documento a las formas parasitarias como parmetro para mediar calidad del agua.

El 24 de junio de 1969, mediante Decreto Ley N 17752 se crea la Ley General de Agua y su Reglamento (de los ttulos I, II y III) el 12 de diciembre del mismo ao. En este documento, en el captulo IV se da la Clasificacin de los cursos de aguas y de las zonas costeras del pas, la cual devide los cursos de agua en cinco clases. En la Clase I estn comprendidas las aguas que podrn ser utilizadas para fines de agua potable mediante desinfeccin y libremente para usus agrcolas, piscicultura y recreacin, considerndose como grado o lmite para el parmetro microbiolgico Nmero ms probable de bacilos coli (NMP): < 50 coliformes/100 mL.

En la Clase II estn comprendidas las aguas que podrn ser utilizadas para fines de agua potable, previo tratamiento consistente en sedimentacin, filtracin y desinfeccin y libremente para piscicultura y agricultura. En este caso se28

considera como grado o lmite para el parmetro microbiolgico Nmero ms probable de bacilos coli (NMP): < 5,000 coliformes/100 mL.

En la Clase III, estn comprendidas las aguas que podrn ser utilizadas para fines de agua potable, previo tratamiento consistente en predesinfeccin, coagulacin, sedimentacin filtracin y desinfeccin final. Podrn ser utilizados tambin para fines agrcolas. En este caso se considera como grado o lmite para el parmetro microbiolgico Nmero ms probable de bacilos coli (NMP): < 20,000 coliformes/100 mL.

La Clase IV y V no son recomendadas para su uso en la produccin de agua potable.

En junio de 1987 el entonces Instituto de Investigacin Tecnolgica Industrial y de Normas Tcnicas (ITINTEC) desarroll la Norma Tcnica Peruana (NTP) 214.003 Agua Potable: Requisitos. La cual establece los requisitos fsicos, qumicos, organolpticos y microbiolgicos que debe cumplir el agua para ser considerada potable. En esta NTP se consideran Requisitos biolgicos para el agua y dentro de ellos se considera la ausencia de Parsitos y Protozoarios para el agua potable y valor mximo admisible para los requisitos microbiolgicos: Recuento total: 500 UFC/mL, Coliformes totales: Ausencia y Coliformes Fecales: Ausencia.29

El 2 de febrero del 2007, mediante Resolucin de Consejo Directivo N 011-2007-SUNASS-CD, la

Superintendencia Nacional de Servicios de Saneamiento (SUNASS) se crea el Reglamento de Calidad de la Prestacin de Servicios de Saneamiento, el cual tiene como objetivo regular las caractersticas que debe tener la prestacin de los servicios de saneamiento bajo el mbito de competencia de la SUNASS, el cual alcanza a las Entidades Prestadoras de Servicios de Saneamiento (EPS) pblicas, privadas o mixtas; considerndose como calidad de servicio al conjunto de caractersticas de la prestacin de los servicios de agua potable y alcantarillado sanitario. En este Reglamento, en el captulo 2: Calidad del Agua Potable, artculo 51: Calidad Sanitaria del agua potable, se hace mencin de la que la calidad del agua potable distribuida por la EPS para consumo humano debe cumplir con los requisitos fsicos, qumicos y microbiolgicos establecidos en las normas sobre calidad del agua para consumo humano emitidas por la autoridad de salud.

El 30 de julio del 2008, mediante Decreto Supremo N 002-2008-MINAM, el Ministerio del Ambiente crea los Estndares Nacionales de Calidad Ambiental para Agua el cual tiene como objetivo establecer el nivel de concentracin o el grado de elementos, sustancias o parmetros fsicos, qumicos y biolgicos presentes en el agua, en su condicin de cuerpo receptor y componente bsico de los cuerpos acuticos, que no presenta riesgo significativo para la salud de30

las personas ni para el ambiente. Estos estndares son aplicables a los cuerpos de agua del territorio nacional en su estado natural y son obligatorios para el diseo de normas legales y las polticas pblicas, siendo un referente obligatorio en el diseo y aplicacin de todos los instrumentos de gestin ambiental. Estos estndares dividen a los cuerpos de agua en tres categoras: Categora 1 Poblacional y Recreacional, Categora 2 Actividades Marino Costeras, Categora 3 Riego de Vegetales y Bebida de Animales.

Dentro de la Categora 1 se subdividieron en Aguas superficiales destinadas a la produccin de agua potable que a su vez se subdivide en A1: Aguas que pueden ser potabilizadas con desinfeccin, A2: Aguas que pueden ser potabilizadas con tratamiento convencional y A3: Aguas que pueden ser potabilizadas con tratamiento avanzado; y Aguas Superficiales destinadas a la recreacin, con sus subdivisiones B1: Contacto primario y B2: Contacto secundario.

A continuacin se describen los valores (LMP) tomados en cuenta para los Parmetros Microbiolgicos de las aguas superficiales destinadas a la produccin de agua potable.

Tabla N 03: Estndares Nacionales de Calidad Ambiental para Agua - Categora 1: Poblacional y Recreacional

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Aguas superficiales destinadas a la produccin de agua potable A1 PARMETRO UNIDAD Aguas que pueden ser potabilizadas con desinfeccin VALOR 0 50 0 0 0 Ausencia Ausencia Ausencia A2 Aguas que pueden ser potabilizadas con tratamiento convencional VALOR 2,000 3,000 0 0 0 Ausencia Ausencia Ausencia A3 Aguas que pueden ser potabilizadas con tratamiento avanzado VALOR 20,000 50,000

MICROBIOLGICO Coliformes Termotolerantes (44,5 C) Coliformes Totales (35 - 37 C) Enterococos fecales Escherichia coli Formas parasitarias Giardia duodenalis Salmonella Vibrio cholerae

NMP/100 mL NMP/100 mL NMP/100 mL NMP/100 mL Organismo/Litro Organismo/Litro Presencia/100 mL Presencia/100 mL

Ausencia Ausencia Ausencia

Adaptado del Anexo I de los Estndares Nacionales de Calidad Ambiental para Agua DS N0022008-MINAM

Por ltimo, el 25 de septiembre del 2010, mediante decreto supremo N 031-2010-SA, la Direccin General de Salud Ambiental (DIGESA), aprueba el Reglamento de la Calidad del Agua para Consumo Humano, el cual tiene como finalidad establecer las disposiciones generales con relacin a la gestin de la calidad del agua para consumo humano, con la finalidad de garantizar su inocuidad, prevenir los factores de riesgo sanitarios, as como proteger y promover la salud y bienestar de la poblacin y es de obligatorio cumplimiento para toda persona natural o jurdica, pblica o privada, dentro del territorio nacional, que tenga responsabilidad de a cuerdo a ley o participe o intervenga en cualquiera de las actividades de32

gestin, administracin, operacin, mantenimiento, control, supervisin o fiscalizacin del abastecimiento del agua para consumo humano, desde la fuente hasta su consumo. En este reglamento, el agua destinada para el consumo humano, de acuerdo a los parmetros microbiolgicos, debe estar exento de:

- Bacterias Coliformes Totales, Termotolerantes y E. coli, - Virus; - Huevos y larvas de helmintos, quistes y ooquistes de protozoarios patgenos; - Organismos de vida libre, como algas, protozoarios, coppodos, rotferos y nematodos en todos sus estadios evolutivos; y - Para el caso de bacterias heterotrficas menos de 500 UFC/mL a 35 C.

2.3 Definicin de Trminos Bsicos: 2.3.1 Agua de Consumo Humano: Tambin llamada agua potable o agua inocua, es la que no ocasiona ningn riesgo significativo para la salud cuando se consume durante toda la vida, siendo por tanto apta para el consumo humano y para todo uso domstico habitual, incluido la higiene personal.

2.3.2 Bacterias Coliformes Totales:33

Son bacterias pertenecientes al Grupo Coliforme, Gram negativos, de forma bacilar, no esporulados, aerobios y anaerobios facultativos, algunos de vida, y otros propios del tracto digestivo, que se caracterizan por fermentar la lactosa con produccin de cido y gas a temperaturas de 34 a 37 C en un tiempo mximo de 48 horas. Son utilizadas como indicadores de la calidad higinica del agua.

2.3.3 Bacterias Coliformes Termotolerantes: Sub grupo de bacterias pertenecientes al Grupo Coliforme, propios del tracto digestivo del hombre y de animales de sangre caliente, que se caracterizan por ser capaces de fermentar la lactosa, con produccin de cido y gas a temperaturas de 44 C en un tiempo mximo de 24 horas. Son utilizadas como indicadores de la calidad sanitaria del agua, relacionada con la transmisin de patgenos.

2.3.4 Contaminacin: Es la alteracin de las caractersticas fsicas, qumicas o biolgicas del agua, resultante de la incorporacin deliberada o accidental en la misma de productos o residuos que afectan los usos del agua.

2.3.5 Enfermedades Hidrotransmisibles: Son las enfermedades transmitidas a travs del agua, el cual acta como vehculo para los patgenos causantes de34

dichas enfermedades. Por lo general las enfermedades hidrotransmisibles se caracterizan por procesos

gastroentricos, que van desde diarreas leves a procesos ms agudos.

2.3.6 Formas Parasitarias: Son los estados o formas evolutivas por las cuales pasan de los parsitos que infectan el tracto digestivo del hombre, a lo largo de su ciclo evolutivo. Entre ellos se consideran los quistes de protozoarios como Giardia, Entamoeba y

Cryptosporidium y los huevos de helmintos como Ascaris, Hymenolepis, Trichuris, y Taenia.

2.3.7 Lmite Mximo Permisible: Son los valores mximos admisibles de los parmetros representativos de la calidad del agua.

2.3.8 Parmetros Microbiolgicos: Son los microorganismos indicadores de

contaminacin y/o microorganismos patgenos para el ser humano analizados en el agua de consumo humano.

2.3.9 Parsito: Formas de vida que se caracterizan por depender fisiolgicamente de su husped, al cual infectan y del cual extraen sus nutrientes para poder sobrevivir. Este tipo de35

relacin husped hospedero, siempre afecta al primero y beneficia al segundo.

2.3.10 Proveedor del servicio de agua para el consumo humano: Toda persona, natural o jurdica bajo cualquier modalidad empresarial, junta administradora, organizacin vecinal, comunal u otra organizacin que provea agua para consumo humano. As como proveedores del servicio en condiciones especiales.

2.3.11 Sistema de abastecimiento de agua para consumo humano: Conjunto de componentes hidrulicos e instalaciones fsicas que son accionadas por procesos operativos, administrativos y equipos necesarios desde la captacin hasta el suministro de agua.

2.3.12 Sistema

de

tratamiento

de

agua

(Planta

de

Tratamiento): Conjunto de componentes hidrulicos, de unidades de procesos fsicos, qumicos y biolgicos, y de equipos electromecnicos y mtodos de control que tienen la finalidad de producir agua apta para el consumo humano.

III. HIPTESIS DE LA INVESTIGACIN:36

La concentracin de Coliformes Totales, Coliformes Termotolerantes y Formas Parasitarias en el agua de las fuentes utilizadas para el abastecimiento de agua potable en la ciudad de Rioja San Martn es superior a los Lmites Mximos Permisibles, establecidos por los Estndares Nacionales de Calidad Ambiental para Agua destinada a la produccin de agua potable mediante tratamiento convencional

IV. OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIN: Objetivo General: Evaluar la calidad microbiolgica del agua de las fuentes utilizadas para el abastecimiento de agua potable en la ciudad de Rioja San Martn, durante un periodo de 15 meses.

Objetivos Especficos: Determinar la concentracin de Coliformes Totales presente en el agua de las fuentes utilizadas para el abastecimiento de agua potable en la ciudad de Rioja San Martn, durante un periodo de 15 meses. Determinar la concentracin de Coliformes Termotolerantes presente en el agua de las fuentes utilizadas para el abastecimiento de agua potable en la ciudad de Rioja San Martn, durante un periodo de 15 meses.

37

Determinar la concentracin de Formas Parasitarias presente en el agua de las fuentes utilizadas para el abastecimiento de agua potable en la ciudad de Rioja San Martn, durante un periodo de 15 meses.

38

V. DISEO DE CONTRASTACIN DE HIPTESIS: 5.1 Definicin Operacional de Variables: Tabla N 04: Operacionalizacin de variables de la HiptesisVARIABLE DEFINICIN CONCEPTUAL Bacterias pertenecientes al Grupo Coliforme, algunos de vida, y otros propios del tracto digestivo, que se caracterizan por fermentar la lactosa con produccin de cido y gas a temperaturas de 34 a 37 C en un tiempo mximo de 48 horas. Son utilizadas como indicadores de la calidad higinica del agua. Bacterias pertenecientes al Grupo Coliforme, propios del tracto digestivo, que se caracterizan por ser capaces de fermentar la lactosa, con produccin de cido y gas a temperaturas de 44 C en un tiempo mximo de 24 horas. Son utilizadas como indicadores de la calidad sanitaria del agua, relacionada con las transmisicin de patgenos. Son los estados evolutivos de los parsitos que afectan al hombre. Entre ellos se consideran los quistes de protozoarios como Giardia, Entamoeba y Cryptosporidium y los huevos de helmintos como Ascaris, Hymenolepis, Trichuris, y Taenia. DEFINICIN OPERACIONAL INDICADORES

Coliformes Totales

Concentracin de Coliformes Totales (NMP/100 mL) en muestra de agua.

Coliformes Termotolerantes

Concentracin de Coliformes Termotolerantes (NMP/100 mL) en muestra de agua.

Formas parasitarias

Presencia de Formas Parasitarias (N Organismos/Litro) en muestra de agua.

5.2 Unidad de Anlisis, Universo y Muestra: Unidad de anlisis: Las unidades de anlisis del presente estudio sern las aguas de las fuentes utilizadas para el abastecimiento de agua potable en la ciudad de Rioja San Martn, estos son el ro Uquihua y la quebrada Cuchachi.

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Universo: El presente estudio tiene como universo a los cuerpos de agua del Ro Uquihua y la quebrada Cuchachi.

Muestra: Las muestras sern tomadas quincenalmente, por un lapso de 15 meses, tenindose en total 30 muestras por cada indicador.

5.3 Tipo y Descripcin del Diseo de Contrastacin de la Hiptesis: Tipo de investigacin: Segn los criterios ms usados por los investigadores, la investigacin se tipifica de la siguiente manera:Tabla N 05: Diseo de contrastacin de hiptesis por criterios CRITERIO TIPO DE INVESTIGACIN Finalidad : Aplicada Estrategia o enfoque metodolgico : Cuantitativa Objetivos : Descriptiva Fuente de datos : Primaria Control en el diseo de la prueba : No experimental Temporalidad : Longitudinal, diacrnica o evolutiva Contexto donde sucede : Campo Intervencin disciplinaria : Multidisciplinaria

Descripcin del diseo de Contrastacin de la hiptesis: El diseo de contrastacin de la Hiptesis del presente trabajo ser para un tipo de investigacin aplicado, no experimental, desarrollndose de manera descriptiva, para una temporalidad longitudinal y en un contexto de campo.40

5.4 Tcnicas e Instrumentos de Recoleccin de Datos:Tabla N 06: Tcnicas e instrumentos de recoleccin de datos (matriz de consistencia) OPERACIONALIZACIN DE RECOLECCION DE DATOS VARIABLES VARIABLE FUENTE DE INDICADOR TCNICA INSTRUMENTO DATOS Colimetra para determinacin Concentracin de Ro Uquihua y de Coliformes Mtodo del Coliformes Coliformes Totales Quebrada Totales por el Nmero Ms Totales (NMP/100 mL) en muestra Cucachi modelo de Probable de agua. clculo de probabilidades Colimetra para determinacin Concentracin de Ro Uquihua y de Coliformes Mtodo del Coliformes Coliformes Quebrada Termotolerantes Nmero Ms Termotolerantes Termotolerantes (NMP/100 Cucachi por el modelo Probable mL) en muestra de agua. de clculo de probabilidades Anlisis Concentracin de Formas Mtodo de Ro Uquihua y cualitativo Formas Parasitarias (N Concentracin Quebrada Tcnica de Parasitarias Organismo/Litro) en Flotacin con Cucachi concentracin e muestra de agua. Sulfato de Zinc identificacin

Determinacin de Coliformes Totales y Termotolerantes: Para la determinacin de Coliformes Totales y Coliformes Termotolerantes se utilizar el Mtodo del Nmero Ms Probable (NMP) por tubos mltiples (Mtodo Tradicional), la cual consta de dos fases: la fase presuntiva y la fase confirmativa. Este procedimiento es el recomendado para el anlisis de muestras de agua superficial que sirven como fuentes de abastecimiento. El procedimiento que se describir a continuacin es una versin simplificada de la tcnica multiple tube fermetation for members of the coliform group del Standard Methods41

for the Examination of the Water and Wastewater (American Public Health Association-American Water Works Association, 1999) y OMS (1988) (Aurazo, 2004). o Toma de muestra: Se tomar una muestra representativa de 250 mL de agua cruda, una de cada fuente, en un frasco de vidrio estril, de boca ancha y con tapa rosca, siguiendo las instrucciones para tomas de muestra en una corriente de agua (Rojas, 2002; Arauzo de Zumaeta, 2004). Las muestras sern transportadas en una caja trmica a una temperatura de 4 a 10 C. o Prueba presuntiva: - Se utilizar el procedimiento de siembra de 10 tubos, cada uno con 10 mL de muestra. - Se homogenizar el frasco con la muestra, agitando un nmero no menor de 25 veces, inclinado el frasco y formando un ngulo de aproximadamente 45 entre el brazo y el antebrazo. - Con una pipeta estril, sembrar 10 mL de muestra en cada uno de los 10 tubos de caldo lauril triptosa estril de doble concentracin. Verificar que en cada tubo haya un tubo de Durham invertido. - Despus de la inoculacin de todos los volmenes de muestra, agitar la gradilla con los tubos inoculados. Hacerlo de forma horizontal y evitando que el medio sembrado llegue a la tapa de los tubos.42

- Luego colocar la gradilla en la incubadora a 35 0.5 C durante 24 3 horas. - Despus de la incubacin por 24 3 horas, retirar los tubos de la incubadora para efectuar la primera lectura de los resultados. Agitar suavemente cada tubo y examinar la produccin de gas. - Retira los tubos con resultado positivo (produccin de gas en el tubo de Durham; no es importante la cantidad de gas) y anotar los resultados. - Devolver a la incubadora (35 0.5 C) todos los tubos con resultados negativos, por un periodo adicional de 24 1 hora. La segunda lectura (a las 48 3 horas) ser hecha en las mismas condiciones, despus de esta ltima lectura. - Los tubos con resultado positivo sern separados para continuar la marcha analtica y los que resulten negativos sern descartados. o Prueba confirmativa: Prueba confirmativa para coliformes totales: Todos lo tubos positivos de la prueba presuntiva son confirmados. Agitar cada tubo positivo de la prueba presuntiva con un asa de siembra estril. Retirar el material e inocular al tubo de 10 mL de caldo verde brillante lactosa bilis 2% (CLVBB 2%) correspondiente. Evitar tomar la pelcula superficial.43

-

Incubar los tubos de CLVBB 2% sembrados a 35 0.5 C durante 24 horas 3 horas.

-

Despus de la incubacin, retirar los tubos para efectuar la primera lectura. Agitar suavemente cada tubo y examinar la produccin de gas. Retirar los tubos con resultado positivo (produccin de gas en el tubo de Durham; no es importante la cantidad de gas) y anotar los resultados.

-

Volver a incubar los tubos negativos a 35 0.5 C durante 24 horas 1 hora y repetir el procedimiento de lectura. Anotar los resultados.

-

Con los datos obtenidos en la prueba confirmativa, calcular el NMP de coliformes totales.

Prueba confirmativa para coliformes Termotolerantes: La prueba confirmativa para coliformes

Termotolerantes se realizar sembrando todos los tubos positivos de la prueba presuntiva en tubos con 10 mL de caldo EC. Despus de la siembra, agitar la gradilla con los tubos inoculados. Hacerlo de forma horizontal y evitando que el medio sembrado llegue a la tapa de los tubos. Incubar todos los tubos de caldo EC inoculados (no ms de 30 minutos despus de la inoculacin) en bao Mara a 44,5 0.2 C durante 24 2 horas.

44

-

Proceder a la lectura considerando como resultado positivo para la prueba todos los tubos que presentaron formacin de gas en el tubo de Durham.

-

Con los datos obtenidos en la prueba confirmativa, calcular el NMP de coliformes termotolerantes.

o Clculo del Nmero Ms Probable: Para la siembra de una serie de 10 tubos con 10 mL de muestra, NMP se calcular utilizando el siguiente cuadro:

Tabla N: 07: ndice de NMP y lmites de confianza de 95% para varias combinaciones de resultados positivos y negativos cuando se siembra 10 porciones de 10 mL N de tubos que Lmites de confianza de 95% presentan reaccin ndice de NMP positiva a partir de 10 de 100 mL Inferior Superior tubos de 10 mL 0 < 1.1 0 3.0 1 1.1 0.03 5.9 2 2.2 0.26 8.1 3 3.6 0.69 10.6 4 5.1 1.3 13.4 5 6.9 2.1 16.8 6 9.2 3.1 21.1 7 12.0 4.3 27.1 8 16.1 5.9 36.8 9 23.0 8.1 59.5 10 >23.0 13.5 Infinito (Obtenido de Aurazo de Zumaeta 2004)

Determinacin de Formas Parasitarias: Para la determinacin de Formas Parasitarias se utilizar la tcnica de Centrifugacin Flotacin con sulfato de Zinc, el cual es un mtodo45

de tipo cualitativo. Este mtodo es recomendado para la concentracin de quistes de protozoarios, huevos de helmintos y algunos cstodes. El mtodo descrito a continuacin es una adaptacin del mtodo propuesto por la APHA, 1985 (Aurazo de Zumaeta 1993).

o

Toma de la muestra: Se tomar una muestra representativa de 5 L de agua

cruda, una de cada fuente, en un garrafn de polietileno con interior de paredes lisas, boca ancha y con tapa rosca, previamente desinfectadas con cloro y enjuagadas varias veces con agua destilada; siguiendo las instrucciones para tomas de muestra en una corriente de agua (Arauzode Zumaeta 1993; Tomasini 2003?). Las muestras sern transportadas en una caja trmica a una temperatura de 4 a 10 C.

o

Procedimiento de anlisis: - Distribuir volmenes de muestra en tubos de centrfuga, preferiblemente de 250 mL. - Centrifugar la muestra a 2500 rpm durante 5 minutos. - Descartar el sobrenadante teniendo cuidado de no desprender el sedimento. - Lavar el sedimento, adicionarle de 3 a 5 mL de agua [destilada] a cada tubo y luego de homogenizar, completar el volumen del tubo con agua destilada y centrifugar. Repetir este paso para obtener un sobrenadante claro.46

- Juntar el sedimento de todos los tubos en un tubo de centrfuga de 50 mL, agregar 20 mL de sulfato de zinc al 33% (densidad: 1.18) y homogenizar la muestra con una bagueta. - Centrifugar a 2500 rpm durante 5 minutos. - Tomar la pelcula superficial con un asa de siembra y colocarla sobre una lmina portaobjetos y cubrir con una laminilla o colocar una laminilla sobre la pelcula superficial despus de formar un menisco en el tubo. - Examinar en un microscopio ptico. Observar un grupo de lminas con lugol y otros sin colorear, lo cual facilitar la diferenciacin entre enteroparsitos y otros

microorganismos, entre diversos estados evolutivos de nemtodes de vida libre y algas microscpicas con morfologa semejante y que igualmente se tien con lugol. - Anotar los resultados obtenidos (formas parasitarias observadas). 5.5 Tcnicas de Procesamiento y Anlisis de los Datos: Para el presente trabajo de investigacin se utilizar el anlisis estadstico descriptivo; los datos ha obtenerse sern procesados utilizando el programa estadstico SPSS V.15. Tambin se realizarn clculos de frecuencias absolutas y relativas, adems mediante la prueba de chi-cuadrado se evaluar la diferencia de los resultados obtenidos de las concentraciones de Coliformes Totales, Coliformes Termotolerantes y Formas Parasitarias entre las diferentes fuentes de agua, considerando como significativo un p