microarray isac

Utilità del microarray nelle gravi allergopatie

Filippo FassioAOU Careggi – SOD Immunoallergologia

(Direttore Prof. E. Maggi)

Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010


Diagnosi delle allergie: l’evoluzione…

Introduzione: la CRD…


Introduzione: le metodiche…


Introduzione: il microarray…


103

Il microarray: analisi in parallelo…


Array = disposizione, matriceMicro = microscopica

Il microarray: pannello standard…


Il microarray: nella pratica…


Allergopatie respiratorie

Allergia al latex

Allergeni meno frequenti

Allergia alimentare

Discriminare tra co-sensibilizzazione e cross-reazione

Identificare i pazienti più idonei all’immunoterapia

CRD: allergopatie respiratorie…


http://milano.blogosfere.it/images/asma.jpg

…può fare il “vaccino”?



Michele, 47 anni, soffre da alcuni anni di rinocongiuntivite nel periodo primaverile. Il suo

medico lo invia all’allergologo, che effettua prick test.

Graminacee +++Betulla ++Olivo ++

…co-sensibilizzazione o cross-reazione?



Co-sensibilizzazione!(Graminacee, Olivo, Betulla)

CRD: questa “ovviamente” è…


Cross-reazione!(solo Graminacee con Phl p 12: Profilina)

CRD: oppure no?


La stessa determinazione, poteva essere eseguita con ImmunoCAP?

SI!…ma sarebbe stato necessario richiedere singolarmente 18 allergeni molecolari….



http://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.mentecritica.net/wp-content/uploads/soldi.jpg&imgrefurl=http://www.mentecritica.net/soldi-soldi-soldi/informazione/il-bello-della-politica/ilbuonpeppe/4084/&usg=__YLB2vFbOcDJucGu9EqVNQLw-4TE=&h=428&w=500&sz=13&hl=it&start=7&sig2=CAjDWi9CiuoYFshz1K5Wcg&um=1&itbs=1&tbnid=PRwvIDPbG8g7LM:&tbnh=111&tbnw=130&prev=/images?q=soldi&hl=it&sa=N&um=1&ei=MUh4S-HGKpqasga4lrWpCg




Allergia al latex


Allergia alimentare

CRD: latex… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010

Marta, paziente di 38 aa, lavora come cuoca.Soffre di asma bronchiale di grado lieve, con sporadici

attacchi d’asma in vari momenti della giornata, sia a casa che al lavoro.

Marta sa già di essere allergica ad alcuni pollini ed all’acaro della polvere, ma….

CRD: latex… Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010




Allergia al latex


Allergia alimentare

CRD: allergeni meno frequenti…


http://images.google.it/imgres?imgurl=http://gianruggeromanzoni.files.wordpress.com/2008/10/ape2.jpg&imgrefurl=http://gianruggeromanzoni.wordpress.com/2008/10/08/quando-le-api-spariranno-la-natura-ci-presentera-il-conto/&usg=__vN5MQZ2nftcI-PCFMapWrR9-p5Y=&h=343&w=400&sz=35&hl=it&start=7&sig2=OcOz3zZWCOnuPV65uAmRmw&um=1&itbs=1&tbnid=AROhmZnbMOMIsM:&tbnh=106&tbnw=124&prev=/images?q=api&hl=it&sa=N&um=1&ei=K0t4S4WEHI-6sAa6wPDeDQ

http://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.osha.gov/SLTC/etools/hospital/hazards/images/latex.jpg&imgrefurl=http://www.osha.gov/SLTC/etools/hospital/hazards/latex/latex.html&usg=__q7EClX_Y3s4XwoniOoCK7QMBr_s=&h=205&w=205&sz=16&hl=it&start=7&sig2=WNfnqjVsGG_ZJK1oeMVX8w&um=1&itbs=1&tbnid=i8JmBvywxXHVBM:&tbnh=105&tbnw=105&prev=/images?q=latex+gloves&hl=it&um=1&ei=dEt4S9f1GcicsAbf_4WsCg

Franco, 44 anni, con rinite ed asma bronchiale, giunge all’osservazione per recente peggioramento della sintomatologia

Continua la tp già in atto da 3 anni con CCS nasali ed associazione CCS + beta2agonista inalatorio, che fino a pochi mesi prima aveva garantito un ottimo

controllo della sintomatologia

Il PT conferma le precedenti polisensibilizzazioni a pollini ed acari, senza sostanziali modifiche

Il paziente nega sostanziali modifiche al proprio stile di vita (casa,lavoro, sport, hobbies…)



Sarebbe emersa la positività senza un test multiplex?



http://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.blogalileo.com/wp-content/uploads/2009/01/domanda.jpg&imgrefurl=http://www.blogalileo.com/perche-nelle-domande-utilizziamo-il-punto-interrogativo/&usg=__0enf0EdCJctY95f1RNzu_B2o61w=&h=273&w=306&sz=12&hl=it&start=27&sig2=6gjEyyi0WiBd24o1kFlkoQ&um=1&itbs=1&tbnid=5RYj_OGwzmvoMM:&tbnh=104&tbnw=117&prev=/images?q=domanda&ndsp=18&hl=it&sa=N&start=18&um=1&ei=B0x4S7TjK8ybsAaExJWsCg




Allergia al latex


Allergia alimentare

CRD: allergia alimentare…


Una giovane paziente si rivolge allo specialista allergologo a causa di episodi recidivanti di

angioedema...

gli episodi erano iniziati fin dall’infazia ed erano scatenati dall’assunzione di frutta con guscio...



…10 giorni prima della visita...

...appena dopo aver assaggiato un gelato artigianale, si è

verificato un angioedema…

http://images.google.it/imgres?imgurl=http://digilander.libero.it/venticelloprimavera/1234347594Cono.jpg&imgrefurl=http://blog.libero.it/profumodicaffe/7246057.html&usg=__MgN1y4SRd7cpJG-cr-lJJ0weI_k=&h=500&w=500&sz=124&hl=it&start=2&tbnid=B9gzh7NwpQIjLM:&tbnh=130&tbnw=130&prev=/images?q=gelato+cono&gbv=2&ndsp=18&hl=it&sa=N



La paziente è stata trattata con:• Anti-H1 per os

• Corticosteroidi per os

Il quadro clinico è regredito in circa 1 ora(non è stato necessario invio in PS)

http://images.google.it/imgres?imgurl=http://lifeinthefastlane.com/wp-content/uploads/2009/04/traumatic_angioedema_side.jpg&imgrefurl=http://lifeinthefastlane.com/2009/04/traumatic-angioedema/&usg=__XyfVX3Ntz5smaXmOqhLt-OsGhCg=&h=1200&w=1600&sz=331&hl=it&start=17&tbnid=FvyEUiuhHISkiM:&tbnh=113&tbnw=150&prev=/images?q=angioedema&gbv=2&hl=it



Oltre alle reazioni avverse ad alimenti:

• Non dermatite atopica• Non allergopatie respiratorie

• Non reazioni avverse ad altri alimenti• Non reazioni avverse a farmaci o imenotteri



Il prick test è risultato positivo per:

• Nocciola (+++)• Noce (+/-)

• Pinolo (+/-)

http://images.google.it/imgres?imgurl=http://www.hkbh.org.hk/en/images/service_allergy1.jpg&imgrefurl=http://www.hkbh.org.hk/en/313_allergy.htm&usg=__z-ebpYNYhpSXUXL12RBGYTTsq0s=&h=150&w=210&sz=23&hl=it&start=284&tbnid=RIBt9ktHGSB6EM:&tbnh=76&tbnw=106&prev=/images?q=prick+test&gbv=2&ndsp=18&hl=it&sa=N&start=270



Dosaggio IgE totali (RIST): 37 kU/l

Dosaggio IgE specifiche per inalanti: tutte < 0.10 kUI/l

Dosaggio IgE specifiche per alimenti:

• Nocciola 3,07 kUI/l• Noce 0,12 kUI/l



Cor a 1: Bet v 1-homologue (PR-10)

Cor a 2: profilina (omologo Bet v 2)

Cor a 8: LTP

Cor a 9: 11S globulin (omologo Ara h 3)



I pazienti con reazioni più gravi hanno una sensibilizzazione alla nocciola “polline-indipendente”, e più spesso sono allergici a:

- Cor a 8- Cor a 9

Queste molecole sono omologhe ad altri allergeni maggiori presenti in atri tipi di noci e noccioline!

Curr Op Allergy Clin Immunol, 2008



Studio condotto su pazienti allergici alla betulla:- Cor a 1: 16/17- Cor a 2: 2/17

- Cor a 8: nessuno

Nessun caso di anafilassi!

Allergy, 2003



Studio condotto su 57 pazienti allergici alla nocciola:- Cor a 1: 75% (100% nord europa, 17% sud europa)- Cor a 2: 42%- Cor a 8: 28% (5-15% nord europa, 71% sud europa)

Cor a 1 + Cor a 8 = 96%

JACI, 2009



Cor a 8 nel 71% delle reazioni “severe”

JACI, 2009



Cor a 1: Bet v 1-homologue (PR-10)

Cor a 2: profilina (omologo Bet v 2)

Cor a 8: LTP

Cor a 9: 11S globulin (omologo Ara h 3)



A cosa è allergica la paziente?

Cor a 1

Cor a 8

Cor a 2

Cor a 9



…ed il risultato esatto è…

Negativo!

…confermato su ImmunoCAP(Cor a 1, Cor a 8, Bet v 2)

http://images.google.com/imgres?imgurl=http://www.labraqui.com/immunocap/imagenes/ImmunoCAP250.jpg&imgrefurl=http://www.labraqui.com/immunocap/equipos.html&usg=__7ewj8Y-R7YRhMx2uA1n1ozbiRtw=&h=232&w=250&sz=29&hl=it&start=2&um=1&tbnid=e_ftlFa9vdx8AM:&tbnh=103&tbnw=111&prev=/images?q=immunocap&ndsp=20&hl=it&rls=com.microsoft:it:IE-SearchBox&rlz=1I7GGLL_it&sa=N&um=1



…perché 103 molecole sono molte…

…ma in natura ce ne sono DI PIU’…

Ed alla fine…Università degli Studi di Firenze SOD Immunoallergologia Winter School SIAIC 20 Febbraio 2010

vs

…alla prossima puntata…

Grazie!

[email protected]


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