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LIQUIDO CEFALORRAQUÍDEO LCR
Formación y Fisiología Reconocido por 1a vez por Cotugno 1764. Proporciona nutrientes al tejido nervioso,
eliminar desechos metabólicos y barrera protectora del cerebro y medula espinal contra traumatismo.
El cerebro y la medula espinal están recubiertos por las meninges, compuestas por tres capas:
1. Duramadre
2. Aracnoides
3. Piamadre
• EL LCR se producen en los plexos coroideos.
• Adultos producción de 20 mL por hora. El LCR fluye por el espacio subaracnoideo; a fin de mantener un volumen de 90 a 150 mL en adultos y de 10 a 60 mL en neonatos. El LCR se reabsorbe en la vellosidades o granulaciones aracnoideas.
• Los plexos coroideos (redes capilares) forman el LCR del plasma, por mecanismos de filtración selectiva.
Flujo del LCR a través del cerebro y la medula espinal
La composición química del LCR no se asemeja a un ultrafiltrado del plasma.
Las células endoteliales de los plexos coroideos forman la barrera hematoencefalica, la cual protege el cerebro de sustancias químicas que circulen en sangre.
Alteraciones en la barrera hematoencefalica por enfermedades como meningitis, permite el paso al LCR de Leucocitos, proteínas, etc.
Aspecto Normal: Límpido y cristalino.
La terminología mas usada para el LCR es límpido cristalino, opalescente o turbio, lechoso, xantocrómico y hemolisado o sanguinolento.
• Las muestras debe de llevarse con guantes y mascarillas para evitar salpicaduras.
Tubos de LCR. Aspecto de Izquierda a derecha: normal, xantocrómico, con hemolisis y turbio.
Xantocromía: termino utilizado para describir el sobrenadante rosa, anaranjado o amarillo del LCR, causado por varios factores (degradación de eritrocitos, aumento de proteínas, etc.). El color varia del rosa (cantidad leve de oxihemoglobina) al naranja (muy hemolisado).
Importancia clínica del aspecto del liquido cefalorraquídeo
RECOLECCION Y MANIPULACION DE LA MUESTRA
Punción lumbar El liquido se obtienen mediante la punción lumbar entre
las tercera, cuarta y quinta vertebras lumbares.
Punción Cisternal
La punción cisternal o suboccipital implica colocar una aguja debajo del hueso occipital (parte posterior del cráneo).
Punción ventricular
La punción ventricular es aún menos común, pero se puede recomendar en personas con posible hernia cerebral.
Las muestras se recogen en tres tubos estériles que se marcan como 1,2 y 3 en el orden en que se extraen.
QUIMICA Y SEROLOGIA
MICROBIOLOGIA
HEMATOLOGIA
Apariencia: transparente, sin color.
Presión de 70 a 180 mm H20.
RECUENTO CELULAR El recuento celular habitual en LCR es el de
leucocitos. Presencia de eritrocitos puede determinarse por el aspecto de la muestra.
El recuento de eritrocitos se realiza cuando se produce una punción traumática.
El recuento debe ser inmediato. Los leucocitos (granulocitos) y eritrocitos comienzan a lisarse dentro de la hora.
Muestras que no se recuentan deben de refrigerarse inmediato.
Metodología
El LCR de un adulto normal contiene entre 0 a 5 leucocitos/μL.
En niños el numero es alto, y es hasta 30 células que pueden considerarse normal en neonatos.
Muestras con 200 a 400 eritrocitos/μL pueden parecer límpidas pero deben examinarse al microscopio.
Para el recuento de células del LCR se utiliza una cámara de Neubauer mejorada.
No se han utilizado contadores celulares electrónicos.
El Advia 120 Hematology System fue aprobado por la FDA, como parte de un ensayo de LCR. Realiza el recuento de leucocitos en todas las muestras con menos de 1,500 células/L, y recuento diferencial de neutrófilos, linfocitos y monocitos.
Camara de Neubauer que muestra las nueve áreas de cuadrados grandes donde se realiza el recuento
Calculo de los recuentos de células en LCR
La formula para el calculo estándar de Neubauer usada para eritrocitos es aplicada para LCR, para determinar el núm. de células por μL.
Esta formula puede usarse tanto para muestras diluidas como puras.
Las muestras límpidas pueden contarse sin diluir, siempre que no haya superposición celular en la muestra.
Recuento de Leucocitos
En muestras diluidas o puras, debe realizarse la lisis de los eritrocitos.
Se usa acido acético glacial al 3% (lisar eritrocitos), se agrega azul de metileno al liquido de dilución que tiñe los leucocitos.
Correcciones por la contaminación Posible corrección por cálculos por presencia de
leucocitos y proteínas en LCR artificialmente. Es necesario:
1. Leucocitos en sangre
2. Eritrocitos en LCR
3. Eritrocitos en sangre
Un recuento aprox. de leucocitos en LCR es restar Leucocitos agregados del recuento real.
RECUENTO DIFERENCIAL EN UNA MUESTRA DE LIQUIDO CEFALORRAQUÍDEO
El recuento diferencial debe de hacerse en un frotis teñido y no en las células de la cámara de recuento. Para ello la muestra debe de ser concentrada.
Los métodos disponibles para la concentración son: la sedimentación, la filtración, la centrifugación y la citocentrifugación.
Se centrifuga durante 5 a 10 min. Se separa el liquido sobrenadante y se realiza el frotis con el sedimento resuspendido, se seca al aire y se tiñe con la técnica de Wright.
Se cuenta y clasifican 100 células y se reporta en %.
Constituyentes celulares del liquido cefalorraquídeo
Las células encontradas en LCR normalmente son: Linfocitos y monocitos (en adultos 70:30).
Se observan neutrófilos de forma normal en LCR, sin embargo un aumento (pleocitosis) es anormal.
Linfocitos y monocitos normales (500x)
También hallazgo de leucocitos inmaduros, eosinofilos, plasmocitos, macrófagos, células tisulares y malignas.
Cuando hay pleocitosis, el recuento diferencial de LCR proporcionara información diagnostica acerca del tipo de microorganismo o patología que causa la meningitis.
Neutrófilos • En meningitis bacteriana. • Fase temprana de meningitis
viral, micoticas, tuberculosa y parasitarias.
• Aumentan después de hemorragia del SNC, punciones lumbares repetidas o inyección de medicaciones.
• Neutrófilos con núcleos picnóticos indican células en proceso de degeneración. Semejantes a eritrocitos nucleados, pero por lo general tiene varios núcleos.
Neutrófilos con bacterias intracelulares (1000x)
Neutrófilos con picnóticos. Nótese la célula con un solo núcleo en el centro (1000x)
Linfocitos y monocitos• Meningitis viral,
tuberculosa y micoticas.
• Linfocitos durante infecciones virales.
• Leucocitos y linfocitos elevados pueden indicar esclerosis múltiple.
Amplio espectro de linfocitos y monocitos en meningitis viral (1000x)
Eosinofilos
• Aumentados en infecciones parasitarias infecciones micoticas (Coccidiodes immitis)
• Aumenta al introducción de material extraños; mediciones.
Eosinofilos (1000x). Nótese la distorsión por la centrifugación
Macrófagos
• Propósito en LCR eliminar los detritos celulares y elementos extraños como los eritrocitos.
• Aparecen después de las 2 a 4 horas después de que ingresen los eritrocitos al LCR.
• Tienden a presentar mas citoplasma que los monocitos de la sangre periférica.
Macrófagos. Nótese la gran cantidad de citoplasma y vacuolas (500x)
Macrófagos que muestran las eritrofagocitosis (500x)
Células malignas de origen hemático
• Los linfocitos, los mieloblastos y los monoblastos en el LCR se observan con mayor frecuencia como complicación grave de las leucemias.
• Se observa células de linfoma en el LCR que indican diseminación del tejido linfoide.
Monoblastos y dos linfocitos (1000x). Nótese los núcleos prominentes.
Mieloblastos por leucemia mielocitica aguda (500x)
Linfoblastos por leucemia linfocítica aguda (500x)
Células malignas de origen no hemático • Las células de carcinoma
metatasico de origen no hemico provienen de pulmones, mama, riñón y aparato gastrointestinal.
• Los tumores primarios de SNC incluyen; astrocitomas, retinoblastomas y Meduloblastoma
• Portaobjetos con células anormales son derivados al servicio de anatomía patológica.
Meduloblastoma (1000x). Nótese la agrupación celular, las irregularidades nucleares y la formación de roseta
PRUEBAS EN LCR
PRUEBAS QUÍMICAS
Proteínas del LCR La concentración normal es de 15 a 45 mg/dL.
La albumina constituye la mayor parte de las proteínas del LCR.
La prealbumina es la segunda fracción mas importante en el LCR.
La transferrina es la principal betaglobulina presente.
La principal gammaglobulina del LCR es la inmunoglobulina G (IgG).
IMPORTANCIA CLINICA
Valores anormalmente bajos están presentes cuando hay perdida de liquido del SNC.
Valores elevados se observan con mayor frecuencia en pacientes con meningitis, hemorragia y esclerosis múltiple.
Glucosa en LCR Ingresa al LCR por el transporte selectivo a través
de la barrera hematoencefalica.
El valor normal es del 60 al 70% de la concentración plasmática (65 mg/dL en LCR).
Concentraciones disminuidas se observan en pacientes con meningitis bacteriana, tuberculosa, y micotica.
Lactato en LCR Puede ser de ayuda valiosa en el diagnostico y la
conducta terapéutica en caso de meningitis.
Concentraciones >35 mg/dL se observan en pacientes con meningitis bacteriana.
Concentraciones >25 mg/dL se encuentran en pacientes con meningitis tuberculosa y micotica.
Concentraciones <25 mg/dL se encuentran en pacientes con meningitis viral.
Glutamina en LCR Se produce a partir del amoniaco y el a-
cetoglutarato en las células del cerebro.
La concentración normal es de 8 a 18 mg/dL.
La determinación de glutamina en el LCR representa una prueba indirecta de la presencia de exceso de amoniaco en LCR.
PRUEBAS MICROBIOLÓGICAS
Procedimientos confirmatorios mas que de diagnósticos.
Métodos:Tinción de Gram
Tinción para acido-alcohol resistencia
Tinta china
Los MO hallados con frecuencia con la Tinción de Gram son:
1. Streptococcus pneumoniae (cocos Gram +)
2. Hemophilus influenzae (bacilos Gram -)
3. Escherichia coli (bacilos Gram -)
4. Neisseria meningitidis (cocos Gram -)
Tinciones de acido-alcohol resistencia, realizadas en sospecha de meningitis tuberculosas.
Tinta china usada para detectar presencia de Cryptococcus neformans.
PRUEBAS SEROLOGICAS
Las pruebas serológicas del LCR se han realizado para detectar la presencia de neurosifilis.
El procedimiento recomendado por los Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades para diagnosticar neurosifilis es la VDRL ( Venereal Disease Research).
BIBLIOGRAFIA
Laboratorio clínico y pruebas de diagnostico. Kathleen Morrison Treseler. Editorial Manual Moderno.
Análisis de orina y de líquidos corporales. Strasinger-Di Lorenzo. 5ª Edicion. Editorial Medica Panamericana. 2010. Pag. 179- 201