UNIVERSIDAD NACIONAL TECNOLOGICA DEL CONO SUR DE LIMA

ASIGNATURA: Ecotoxicologia

LABORATORIO Nº 12

TEMA: Determinacion de plaguicidas

NOMBRE DEL PROFESOR:

José Alfonso Apesteguía Infantes

GRUPO DE TRABAJO:

Nº 6

INTEGRANTES DEL GRUPO:

CARRERA:

Ingeniería Ambiental

HORARIO:

Viernes 6:00pm – 10:10pm

FECHA:

2014

I. RESUMEN

El laboratorio de plaguicidas con cromatografía de capa fina representa la segunda etapa después del aislamiento de los tóxicos orgánicos. Los plaguicidas se depositan en el residuo ácido y posteriormente se lleva hacia una placa en la cual se siembra la muestra problema junto con otros estándares que sirven como punto de comparación.

Se deja secar y se procede a comparar de forma cualitativa las manchas, en el caso de no ser distinguida la forma se le agregara sustancias que servirán como reveladores. Para tener mayor severidad en los resultados se realizan los cálculos del factor de retención.

II. INTRODUCCION

La determinación de plaguicidas es de importancia relevante puesto que los efectos producidos en el hombre y en los cultivos resultan graves de manera que se necesitan realizar estudios toxicológicos en fin de evaluar y cuantificar los niveles de daños producidos por estos a través de su uso excesivo. Los plaguicidas han sido diseñados para matar a una serie de organismos vivos presentes en las plantas empleadas por el hombre a nivel mundial para la protección de los cultivos y el tratamiento de enfermedades transmitidas por vectores u hospederos intermediarios con respecto a la salud pública. Es por ello que por su alta actividad biológica y su persistencia en el medio puede causar efectos adversos a la salud humana y al ambiente.

Se debe hacer compatible la protección de la Salud pública con la defensa sanitaria de los cultivos contra las plagas y enfermedades para favorecer la producción, por lo que las autoridades han dictado una serie de normas legales que fijan límites máximos de residuos en los alimentos. En la actualidad se viene introduciendo nuevas estructuras tecnológicas que dan lugar a la publicación de numerosos métodos analíticos que se basan en el uso de técnicas cromatográficas, que en laboratorio se realizó con cromatografía de capa fina.

III. OBJETIVOS

Determinar la concentración de plaguicidas con cromatografía en capa fina. Identificar compuestos tóxicos orgánicos fijos.

IV. MARCO TEORICO

Actualmente, se utilizan centenares de plaguicidas de diferente naturaleza química mayoritariamente en agricultura, para eliminar malas hierbas, plagas y hongos de los cultivos, aunque también presentan aplicaciones no agrícolas, como el control de malas hierbas en vías de ferrocarril, carreteras, caminos y áreas industriales. La Tabla I.1.1 muestra algunos de los usos de distintos productos químicos que se han utilizado a lo largo de la historia para combatir plagas, así como el hecho de que a partir de los años 20 haya aumentado la preocupación de la población por el uso indiscriminado de los mismos (Gavrilescu, 2005).

Pese a que los beneficios obtenidos a partir del uso de plaguicidas son numerosos, la utilización a escala mundial de grandes cantidades de estos compuestos ha dado origen a un conjunto de problemas que afectan al medio ambiente y a la salud humana. De hecho, el uso continuado e incontrolado de los plaguicidas, así como la elevada persistencia de muchos de ellos en el medio ambiente, ha provocado la aparición de problemas que inciden directamente sobre la salud humana y la supervivencia de numerosas especies. En este sentido, es posible encontrar residuos de plaguicidas en frutas, verduras, aguas, suelos, etc. como consecuencia de su utilización en actividades agrícolas, industriales y domésticas.

Por todo ello, resulta de vital importancia conocer los riesgos y la toxicidad de estos compuestos, así como asegurar su aplicación correcta (siguiendo las pautas de seguridad establecidas, aplicando las dosis adecuadas y respetando los tiempos de seguridad indicados), de manera que el alimento llegue al consumidor con mínimos riesgos para su salud. Sin embargo, no siempre se llevan a cabo estas indicaciones y, si no existe un control apropiado, los alimentos pueden llegar al consumidor con niveles de plaguicidas más elevados de los que deberían contener. Como consecuencia, se hace muy necesario su análisis, especialmente en alimentos, con el fin de asegurar su consumo seguro.

Pa el estudio de los plaguicidas se utilizara la técnica de cromatografía en capa fina, que consta de dos etapas; estacionaria y móvil.

La etapa estacionaria consta de la sili cagel G dispuesta sobre el vidrio, y la fase móvil consta de la placa de silica gel g dentro de la cubeta cromatografíca previamente saturada con el sistema solvente.

El ensayo de esta prueba consiste poder comparar mediante la forma y tamaño de la muestra problema y un estándar, de esta manera si existe similitud en los parámetros antes mencionados se podrá concluir que se encuentra cierto tipo de plaguicida.

V. METODOLOGIA

Materiales

Placa de vidrio Silica gel

Cuba cromatografíca Metanol

Capilar Acetona

Procedimiento

1. El residuo acido que se obtuvo en la práctica anterior, de aislamiento de tóxicos orgánicos por extracción en fase orgánica, y que se supone contenga I.O.F, I.O.C, I.O.CL, o piretroides; es sometido a cromatografía en capa fina para la determinación de plaguicidas

2. Se colocó sobre una placa de vidrio una capa uniforme de absorbente, en esta práctica se usó silica gel , a esta fase se le denomina estacionaria

3. Luego se adiciona a la cuba cromatografía un eluyente, metanol: acetona en proporción de 5:1 , a esta fase se le conoce como fase móvil

4. Posteriormente se sembró en la placa de vidrio con silica gel, muestras estándar de I.O.F Y un I.O.C respectivamente, y después dos muestras problema, las 4 muestras fueron sembradas con un capilar, estas fueron agregadas a una misma distancia de separación y en una misma fila.

5. Esta placa se introdujo en la cuba cromatografíca y se procedió a taparla y a esperar los resultados

6. Una vez pasados los minutos, se procedió a retirar de la cuba cromatografíca la placa de vidrio y se observaron los resultados, es decir la distancia del recorrido de las sustancias a determinar, en el caso de la muestra problema que no se notó su recorrido , se utilizó reveladores los cuales ayudaron a la definición de la mancha. Para el caso de I.O.F se usa Pdcl2 0.1% y en el caso de I.O.C se utiliza PDAB(para-dimetil amino Benzaldehído) 1%

7. Finalmente se procedió a calcular el factor de retención, el cual se encontró midiendo el frente de soluto y el frente de solvente de cada sustancia, conociendo que lo normal es que, una vez que el eluyente sube por capilaridad, el soluto corra hasta las ¾ partes de la placa y además que el factor de retención siempre será menor a 1.

VI. CALCULOS

R f=Frente se solutoFrentede solvente

Para muestra problema 1 (MP1):

R f=10 cm15 cm

=0.667

Para muestra problema 2 (MP2):

R f=13.5cm15cm

=0.9

VII. RESULTADOS Y DISCUSIONES

CUADRO Nº 1: Desplazamiento de los compuestos a lo largo de la placa

MuestrasEstandar (ST) Problema

Solvente Metilparation Propoxur MP1 MP2Desplazamient

o 15cm 10cm 13.5cm 10cm 13.5cm

El desplazamiento de las manchas de la muestra problema a través de la placa fueron equivalentes al de las muestras estándares; es decir, tuvieron una distribución equivalente. Con ello comprobamos que el residuos acido que se obtuvo del proceso de aislamiento de la muestra problema contiene estos dos tipos de plaguicidas: metilparatión y propoxur.

Un factor muy importante para el arrastre de estos compuestos a lo largo de la columna es su polaridad. Moléculas más polares quedan retenidas en la fase estacionaria; es decir, corren menos. Mientras que las moléculas menos polares son menos retenidas y se desplazan con mayor velocidad.

El factor de retención me indica que tanta afinidad hay entre los compuestos y el adsorbente, en este caso, el silicagel. Al obtener un Rf para la MP2 mayor que el de la MP1 nos damos cuenta que el Propoxur tiene una mayor afinidad con el silicagel. Pues este adsorbente al ser muy polar va a atraer a las moléculas menos polares como en el caso del propoxur.

El uso del revelador permitió que se observe con mayor claridad el desplazamiento del plaguicida carbámico ya que en un inicio no se pudo observar con claridad.

VIII. CONCLUSIONES

En el desarrollo de está practica de laboratorio logramos aplicar la técnica de c.c.f. como criterio de pureza e identificación de los plaguicidas ( metilparation y propoxur) según con la pigmentación que estas presenten al realizarse en la cromatografía, conociendo sus características y los factores que influyen en la separación ,además de aprender a calcular los valores del factor de retención de las sustancias para poder deducir la relación que existe entre la polaridad de las sustancias que se analizan con la de los eluyentes que se utilizan con ellas.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

http://es.scribd.com/doc/14172689/5-Cromatografia-en-Capa-Fina

http://organica1.org/1311/1311_6.pdf

http://abe.ufl.edu/carpena/files/pdf/zona_no_saturada/avances_en_la_investigacion_v2/c23_p321_356.pdf

http://www.ehowenespanol.com/factores-afectan-valores-rf-cromatografia-capa-delgada-info_140571/

IX. ANEXOS

1. Indique que otras sustancias en fase estacionaria se encuentran (AlO3)

Para la elección del adsorbente se debe tomar en cuenta su polaridad, el tamaño de particula, diámetro, área superficial. Entre las sustancias que se puede mencionar se encuentra:

Óxido de Aluminio ó Alúmina (ácida, neutra ó básica) Celulosa (Nativa o micro-cristalina) Poliamidas Tierra silicea o Kieselguhr

Fig. Nº 1: SilicagelFig. Nº: Placa con silicagel

Fig. Nº 3: Plaguicidas Fig. Nº 4: Tubo capilar

Fig. Nº 5: Adición de estándar

Fig. Nº 6: Muestra problema

Fig. Nº 7: Adición de muestra problemaFig. Nº 8: Metanol:Acetona (Eluyente)

Fig. Nº 9: Placa en cuba cromatografica con adicion previa del eluyente.

Fig. Nº 10: Resultados