FECUNDACIÓN

EN PECES

Blga. Acui. Carmen Yzásiga Barrera

Blga. Pesq. Eliana Zelada Mazmela

FECUNDACIÓN

Fenómeno por el cual se fusionan gametos femeninos y masculinos Cigoto

TIPOS

a) Externa:

- Ambos progenitores lejos. E.g.: trucha

- se acercan en un verdadero apareamiento

b) Interna: - Presencia de espermateca, falso pene, gonopodio

- En el interior de la hembra

- La fecundación = asociación gamética interna

Eventos:

Ova cae al agua adquiere forma, agua entra memb. del huevo y la masa central

Espermatozoide penetra por MICROPILO.

Formación del espacio perivitelino (exocitosis de alveolos corticales desde el micropilo hasta la zona vegetativa)

M. Vitelina se hace impermeable reacción cortical

Micrópilo se cierra y se eleva

•Sellado por sust. de la ves. de vitelo

• Hinchamiento egg.

Las vesículas de vitelo endurecen más la m. vitelina memb. de fertilización

Huevo turgente y duro al tactoV. vitelo también endurecen al corión

Tapón micropilar

1 – 2´externa

30´interna

Antes de la fecundación :

• Corión con agujeros

•Corión con filamentos enrollados. (desenrollamiento de los filamentos es indicador de la activación del huevo).

Depende de Sp

Fertilización: Cuando ambos pronúcleos se fusionan, los cromosomas se juntan amfinexis y se inicia proceso de desarrollo embrionario

MICROPILO:

•Abertura en la zona radiata

Abertura recta como un embudo

Canal micropilar

Un hoyo con un canal micropilar

TIPOS DE OVAS:

a) Libres

- Sobrenadantes p.e.< H2O

- Flotantes p.e. Lig > H2O

- Semiflotantes en la columna de H2O

- Rodantes p.e.> H2O

No pegajosos

Pegajosos temporalmente

Peso especifico depende de: volumen del espacio perivitelino y peso de la masa central

Pesada: sin gotas de grasa

Ligera: con gotas de grasa

Sobrenadante Flotante

Semiflotante Rodante

b) Adherentes:

La membrana presenta una capa adhesiva que se activa al contacto con el agua:

- a objetos entre sí :

- Adhesividad con So/oo y tiempo

-Atherinidae: al pasar por el tracto genital sufren una descomposición y desenrollan sus filamentos adhesivos.

SEGÚN VITELO: cantidad y distribución

En líneas generales el huevo puede variar de tamaño

La reducción de ova no a expensas de vitelo:Dimensiones de la masa centralEspesor de la membranaEspacio perivitelino

Huevo mesolecito: mediano, con cierta cantidad de vitelo depositado en el hemisferio posterior

Telolecito: mayoría, también en condrictios como tiburón. Mayor tamaño, vitelo representa mayor volumen

En teleósteos actuales, huevos pequeños

Espermatozoide:

Sin acrosoma.

No tiene motilidad hasta que entra en contacto con H2O “activación”

pH . P.o. Contenido iónico

- Arenque del Pacífico: 4 – 5 d.

- H2O dulce no más de 2 – 3´

- Carpa común:> motilidad 30 – 60” desaparece luego de los 5´

- Motilidad no es garantía absoluta de fertilidad pero los que la han perdido ya no pueden fecundar

Distancia recorrida: Turbot: 12mm; carpa: 4,8mm; trucha: 3mm

Modelo de frec. golpeo refleja su cap. para fecundarturbot: 40/seg

Atractante químico

Poder de fecundación: Duración e intensidad golpeo

Densidad de esp. emitidos

MANIPULACIÓN DEL ESPERMA

•Machos poco considerados en reproducción inducida

•Suspensión de espermatozoides en líquido seminal que resulta de la hidratación de testículos. Permanece inactivo dentro de pez. Se activa en H2O, motilidad frenética y de corta duración 1´

Tiempo motilidad caract. Diluyente: * osmolaridad

* comp. iónica

Grado de dilución con diluyente y composición. Determina la presencia o no de activación y el tiempo de motilidad

A) Aumento de volumen: Facilita utilización cuando hay poco.

usar diluyentes que no activen usar semen después

Ssf: 0,7 – 1,0% NaCl activan pero prolongan

[espermat.] 106 – 109/ml diluir 10 veces Sp grado de mad.

Manipulación:

B) Prolongación de motilidad

Incrementar 20 – 60 veces mejorando la tasa de fertilización

Son para H2O dulce y salada

Sol. Carbomida: 3% NaCl + 4% úrea

También para evitar aglutinación

C) Conservación a corto plazo

• No diluido a T° amb: 0,5 – 1,5h

• No diluido a 4°C : 3h – 3d

• Con antibiótico a 4°C: 3 – 12d

• Con diluyente (D) energético, c/antibióticos a 4°C: hasta 30d (D:e =1:1)

•No debe estar activado

D: 5 ml yema 5ml citrato de Na 3,1% 80 ul(50mg/l de sulfato de gentamicina) 55mg de piruvato de Na

Especie N° espermatozoide/ml

CarpaTruchaSalmón

MugilidosRodaballo

25 – 30000 millones10 – 25000 millones12 – 30000 millones50 – 60000 millones 4 – 8000 millones

Valoración espermática

a) Motilidad: Indicador de eficiencia. Al microscopio con diluyente

(D:E) = 4:1 5”

No usar laminillas. Porque ocasiona asfixia

Se anota como una estimación %. Desechar movimientos previos

b) Coloración diferencial: diferenciar espermatozoides vivos de muertos. Láminas preparadas. Indica viabilidad

Índice de la eficiencia del esper

Tipo diluyente y grado de dilución > 4:1

d) Fertilización:

Medida más cierta es la tasa de fertilización

c) [esperma]:* Conteo * Neubauer* Espermatocrito: centrífuga * espectofotómetro: 420nmRaramente es problema para la valoración

espermática

PROCESO ARTIFICIAL

Fecundación:

a) En seco:

b) En húmedo:

c) Sol. Salina:

Sol. Carbomida: NaCl 0,4% + úrea 0,3% (10 – 20 % vol huevos)

Requerimientos esperma: calidad de huevos

Turbot: 1500 huevos gupi :50000 – 10000

Trucha: 20000 – 30000 catfish: 40000

Carpa: 13000 – 300000

Lucio: 26000 - 700000

Fecundación artificial

Calidad del H2O: manantial

T° : 25°C

Conductividad 40 umhos.cm

O2: 6 ppm

CO2 L : debe ser 0,0; pero H2O manantial tiene 12 ppm

¡cuidado!

NH3: 0,35 ppm

DoMg: 1,00

DoCa: 19,00

pH: 5,6 ¡cuidado! Niveles menores de 5,5 presentan [CO2] que se adhieren al huevo como burbujas

>O2 al inicio de incubación, Colossoma requiere más que otros peces

(°C) Óvulos fec.Larvas recien

nacidasLarva antes de

tomar aire

282520

11710380

14411683

309241171

Demanda de O2 en mg/100000 larvas

•10000 huevos 2500 mg O2 rep durante desarrollo que dura 50 h

•100000 huevos gamitana 2500 mg 12 – 14 h

Insuficiente 4 mg/L [ ] influye en la velocidad de difusión. Causa deformaciones (10-35%) y eclosión prematura

T°: >res de 31°C fatal para mayoría

Incubadoras

-Aguas frías

-Aguas calientes

Flujo: 0,6 – 0,1L/seg en incubadoras de 60 L

2L/min. Brasil 600 ml de ovas

Carga: 30 – 50g ovas (30000 – 50000)

CRITERIOS DE UNA BUENA INCUBACIÓN

Incubadora de material neutral

Flujo corriente H2O. Ingreso con tubo angular

Retiro continuo de CO4 NH3

Movimiento suave de H2O

Desborde de H2O con filtro

EMBRIOGÉNESIS

EN PECES

EMBRIOGENESIS

A) Segmentación o clivaje: División blastómeros cigoto se convierte en un embrión multicelular blástula

Crecimiento hacia espacio perivitelino

Segmentación meroblástica

Disco de unas células de espesor (hoja plana)

(la polaridad está relacionada con los ejes del futuro cuerpo)

• La segmentación se inicia con la división del núcleo luego la del citoplasma. • Contracciones oscilatorias causan migración del citoplasma cortical periférico hacia el polo animal, donde se forma el blastodisco. •Dos pequeñas marcas en el blastodisco sirven para identificar la localización del surco de segmentación.• El plano de esta primera división es generalmente vertical. La célula se divide en dos células hijas. (blastómeros).

• Las gotas de aceite migran hacia el polo vegetativo y coalescen aumentando de tamaño. • La segunda división es vertical y atraviesa al eje principal formando ángulos rectos con el primer plano de segmentación. • El plano de la tercera división forma ángulos rectos con los dos primeros planos y el eje principal del huevo

•De los ocho blastómeros, cuatro se sitúan encima de los otros cuatro, igualmente superpuestos. •Los cuatro primeros blastómeros incluyendo el hemisferio animal del huevo y los restantes en el hemisferio vegetativo. •El plano de la cuarta división celular es paralelo al de la segunda división y divide las dos filas de blastómeros en cuatro blastómeros cada una, formándose 16 blastómeros. La quinta división celular da origen a 32 blastómeros.

• Células en contacto con vitelo región vegetal

La segmentación origina:

a) Blastódérmicas: son diferentes.

b) Periblásticas: entre vitelo y blastodérmis cubriendo la masa vitelina. Se origina de los blastómeros exteriores y más marginales. Se vuelven sincitiales y son responsables de la movilización del vitelo.

Cav. Segmentación: o blastocele, está entre el blastodermo exterior y el periblasto.

• Áreas pre – destinadas: tracto digestivo, notocorda, células neurales y epidérmicas, la región del mesodermo potencial.

Blastula – Gastrula

-No es típica

-El embrión se transforma en un estadío con 2 capas

•Exterior o epiblasto ectodermo

•Interior o hipoblasto mesodermo – endodermo

-Se establece eje antero – posterior, la gástrula se alarga y las zonas formadoras de órganos se extienden

-Borde inferior de blastodisco se engruesa borde germinal, se le agrega el anillo germinal (capa interna células)

Más grueso en la parte caudal escudo embrionario

Engrosamiento en el borde int.

• Se abre el blastoporo

•Las células endodérmicas del escudo pasa por debajo del blastodermo región endodérmica del hipoblasto

•Células de la placa precordal y de la notocorda establecen eje embrionario.

•Células mesodérmicas potenciales, se acomodan por si solas al lado del eje por debajo del ectodermo región mesodérmica del hipoblasto

•Ocurre una proliferación y laminación de los componentes ectodérmicos y mesodérmicos se organizan para formar primordios de los sist. orgánicos internos.

la presunta placa neural, precursora de SNC se transforma en cresta cubierta por epidermis Se hace tubular TUBO

NEURAL

Gastrulación termina:•Masa y células vitelo se ha desarrollado•Mesodermo se organiza en SOMITES

Se distinguen embrión de saco vitelino

Células del anillo germinal y ectodérmicos que no

participan en la involución, crecen cubriendo por

completo la masa vitelo epiblasto el periblasto

y epiblasto al cubrir el vitelo forman el saco

vitelino.

Período de segmentación y de faringulación

El período de faringulación, embrión presenta morfología con simetría bilateral, se ve alargado, la cola se distingue claramente y crece.

Período de eclosión

El embrión comienza el movimiento fuerte y avanza en forma rectilínea, para alcanzar la eclosión.

Desarrollo embrionario de Xenomelaniris brasiliensis. A) Quinta división celular, B) Mórula, C) Blástula, D) Gástrula, E) Néurula temprana.

F) Formación del escudo embrionario, G) Néurula con vesícula de Kupffer, H) esbozos primarios del corazón y los ojos.

ORGANOGÉNESIS

Prosigue a la gastrulación con la formación de órganos cuerpo forma primitiva

- Región cefalo – faringe cola

hasta

Se proyecta

Aparecen 5 tubos formadores:

1) Mesodermo

a) Epímero: al lado de notocardo y tubo neural segmentado en bloques de tejido SOMITES c/somite considera:

- esclerótomo columna

- miótomo músculo, esq. apendicular, apéndices y sist. Muscular

- dermátomo piel ( dermis y escamas)

1 t

ub

o

b) Mesómero: Ubicado lateralmente, segmentado anterior. Est. genitales, conductos.

c) Hipómero: No segmentado, pero se divide durante desarrollo de celoma:

- Capa somática. Alinea pared del cuerpo

- Capa media espácnica: corazón, Sistema digestivo, Sist. Respiratorio,

meso

derm

o

2) Ectodermo: cerebro, médula, parte superficial – piel, capa exterior de dientes, epitelio y nervio olfatorio, cristalino y oído interno.

3) T. Neural: origen mesodérmico. Algunas partes del ojo (retina y nervio óptico), melanóforos. Ganglios del SN, cerebro y médula

4) Endodermis o endodérmico: parte de tejido hepático y pancreático, int. delgado y epitelio, cél. sex primordiales, tiroides, glándulas

Períodos del Desarrollo embrionario

A) Embrionarios iniciales

fertilización sist. Org. Generalizados. Ova embrionada

B) Embrionarios o larvales transicionales: Forma del cuerpo recuerda al adulto. Incluye transformacion de órganos que forman sist. generalizados.

Dos formas de larvas:

a) de vida libre:

b) de vida no libre

dentro del huevo o de la hembra

Pre y post larva

C) Post embrionario: Sist. Rep. Completa desarrollo: juvenil, adulto, senectud

Fuera de estructuras protectores Forma adulto luego de eclosiónDespués de varios estadíos: piel, escamas, esq. Axial, forma aletas dorsal y anal.

•Organogénesis puede ocurrir en:

-Agua (ovíparos)

-Dentro de la madre (ovovivíparos)

-Dentro de la madre (vivíparo) >ría.

Útero

Ovario

folículos

Desarrollo embrionario de Xenomelaniris brasiliensis. A) Esbozos primarios de lentes ópticos, protocerebro y notocordio, B) Miómeros, C) Embrión de X. brasiliensis, D) Canales de circulación vitelina

E) Engrosamiento de los canales de circulación, F) Embrión con ojos pigmentados, G) Detalle de los ojos, H) Larva recién eclosionada

2 horas 9 horas

12 horas 15 horas

20 horas 1 día larva

2 días larva

4 días larva