EXAMEN DIRECTO DE FLUJO VAGINALDIRECTO AL FRESCO DE SECRECIÓN VAGINALPPRINCIPIO:

Investigar en una muestra de secreción vaginal se basa en la búsqueda de la presencia de Trichomonas vaginalis a veces con movimiento rotatorio sobre su eje, levaduras o pseudohifas, flora coco bacilar, leucocitos polimorfo nucleares, células epiteliales.

UTILIDAD:

Útil para descartar o confirmar un diagnostico causados por diversos agentes tales como: trichomoniasis, vaginosis bacteriana, candidiasis vaginal.

MUESTRA REQUERIDA:

Secreción vaginal, tomada con un escobillón estéril de las paredes de la vagina y colocarla en un tubo con 2 ml de solución salina estéril 0.85%.

MATERIALES Y REACTIVOS:

Tubos de vidrio 16 x 150 mm. Gradilla para tubos. Lámina portaobjeto. Laminilla cubreobjeto. Marcador de vidrio. Solución salina estéril 0.85%.

EQUIPO: Microscopio.

PROCEDIMIENTO:

1. Identificar la lámina portaobjeto.2. Colocar una gota en el portaobjeto y cubrir con laminilla cubre objeto, con el cuidado de no formar

burbujas de aire.3. Examinar toda la preparación al fresco en el microscopio con objetivo 10x- 40x.4. Buscar presencia de Trichomonas vaginalis, levaduras o pseudohifas.5. En caso de una sospecha de vaginosis bacteriana se procede a la realización de una coloración

GRAM.

FUENTES DE ERROR:

- Contaminación de la muestra.- Solución salina contaminada.- Dejar secar la preparación.- Formación de burbujas de aire en la preparación.

VENTAJAS

Económico Más rápida

DESVENTAJAS

Personal debe ser capacitado

FORMA DE REPORTE:

CRITERIOS PARA EL DIAGNOSTICO

VAGINOSIS BACTERIANA

Para el diagnostico de la vaginosis bacteriana se pueden usar los siguientes criterios: Aspecto del flujo (viscoso, gris y homogéneo) PH vaginal > 4.5 Presencia de células guía que representan del 10% al 20% de las células epiteliales vaginales Prueba de aminas positiva Coloración de Gram.

INTERPRETACION E INFORME DE LA LECTURA DEL GRAM

El sistema está dividido en tres partes.

A. Cuantificación de:1. bacilos Gram positivos ( Lactobacillus sp.)2. cocobacilos Gram variables ( G. Vaginalis + Bacteroides sp.)3. bacilos curvos Gram negativos (Mobiluncus sp)

Las bacterias se cuantifican de 1+ a 4+ de acuerdo con el número que se encuentren por campo microscópico, con un aumento final de 1000X.

0+ no hay bacterias1+ 1 bacteria/ por campo2+ 1-4 bacterias /por campo 3+ 5 – 30 bacterias /por campo 4+ > 30 bacterias /por campo

B. Una vez establecida la cantidad de Lactobacillus sp., G. Vaginalis más Bacteroides sp. Y Mobiluncus sp, se asigna un puntaje de acuerdo con la siguiente tabla:

Lactobacillus G. vaginalis y bacteroides sp. Mobilluncus

4+ : 0 puntos

3+ : 1 punto

2+ : 2 puntos

1+ : 3 puntos

0+ : 4 puntos

4+ : 4 puntos

3+ : 3 puntos

2+ : 2 puntos

1+ : 1 punto

0+ : 0 puntos

4+ : 2 puntos

3+ : 2 puntos

2+ : 1 punto

1+ : 1 punto

0+ : 0 puntos

El criterio diagnostico para la vaginosis bacteriana es una puntuación de 7 o más; una puntuación de 4 a 6 se considera intermedia y una puntuación de 0 a 3 se considera normal.

Características Normal Vaginosis bacteriana

Presencia en el introito

Color

Viscosidad

Consistencia

Presencia en vagina

pH

Aminas

Células guía

Gram:

Lactobacillus

G. vaginalis y Bacteroides sp.

Mobiluncus sp.

Total de puntos

No

Blanco

Elevada

Flocular

En declive

< 4.5

negativa

no

3+, 4+ (1 punto)

0+, 1+ ( 1 punto)

< 2+ ( 1 punto)

3 puntos

Sí

Gris

Baja

Homogénea

En paredes

> 4.5

positiva

si

< 3+ (2 puntos)

> 2+ (3 puntos)

> 2+ (2 puntos)

7 puntos

TRICHOMONIASIS

- Se observan Trichomonas vaginalis: cuando están presentes en la preparación.

- Se observan levaduras y pseudohifas: cuando están presentes en la preparación.

- No se observan Trichomonas vaginalis ni levaduras y pseudohifas: cuando no están presentes en la

preparación ninguna de ellas.

CANDIDIASIS VAGINAL

Anote la presencia de blastoconidias y pseudomicelios de acuerdo con los siguientes parámetros:

Blastoconidias y pseudomicelios x cm (400)

Cantidad: Escasa 1 – 10 Moderada 10 – 20 Abundante > 20

Para la mejor identificación del tipo de micosis se sugiere realizar Coloración de Gram.: Haga un extendido y coloree con Gram. Determine la presencia de las blastoconidias y los seudomicelios.

Tubo germinal: La producción del tubo germinal permite la rápida identificación presuntiva de C.albicans.

FORMATO DE INFORME EXAMEN DIRECTO DE SECRECION CERVICAL COLOREADO CON GRAM

Fecha_____________

Nombre del paciente______________________

Resultado

PMN X cm 1000X: 0___ 1-5____ 6-10______ >10_______

Diplococos Gram negativos intracelulares Si_____ No______

Diplococos Gram negativos extracelulares Si_____ No______

Otras bacterias

Morfología: cocos _______ bacilos ________ cocobacilos ______

Coloración: Gram + ______ Gram - _________

Observaciones ________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

ANEXO

Células guía(Clue cells) Pseudomicelius/Blastoconidias

BIBLIOGRAFIA

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS TECNICOS DE LABORATORIO CLINICO DEL PRIMER NIVEL DE ATENCION - Dr.Max Bloch - Primera Edición 2007, El Salvador C.A. http://asp.mspas.gob.sv/regulacion/pdf/manual/manual_procedimientos_lab_clinico.pdf

GUIA DE MANEJO DE FLUIDOS VAGINALES-VERSION 1-2007: http://www.slideshare.net/doctor-Alfredo-Bolano/13-gu

Trichomonas vaginalis Flora cocobacilar