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KITS P/A DE AGUAS USO EN ALIMENTOS El método P/A (Presencia/Ausencia) fué inventado durante la segunda guerra mundial para evitar que los soldados murieran por beber aguas contaminadas. Desde la década de los 1990, MICROKIT ha ido desarrollando numerosos Kits P/A cromogénicos para control de patógenos en aguas. Estos kits no sólo triunfan en todo el mundo gracias a las ONG que trabajan en la mejora del agua de bebida de los países tropicales, sino que además están reconocidos como el método más fiable, de acuerdo con sus numerosas validaciones. En el caso de las aguas y muestras líquidas incoloras, simplemente se agrega a los 100 ml de muestra el contenido de 1 vial de medio en polvo estéril adecuado para el microorgansimo que se busca; se incuba; y al dia siguiente, si no ha cambiado de color, se demuestra la ausencia del patógeno (sin falsos negativos) y si ha cambiado al color indicado, se demuestra su presencia. Así de sencillo. Y más efectivo que ningún otro método. Extendemos desde 2016 su uso para alimentos, líquidos opacos o coloreados y otras muestras donde se desee comprobar la ausencia de patógenos en 1 gramo, de la forma más fácil, cómoda y fiable: 1-Tratar la muestra en solución madre como de costumbre. Por ejemplo, si es un alimento con conservantes, diluir 1 g en 90-100 ml de Buffered Peptone Neutralizing Water (MICROKIT RPL112), si es un cosmético diluir 1 g en 90-100 ml de LPT Neutralizing Broth (MICROKIT RPL054), etc. Dejar actuar 25 minutos para neutralizar la acción de los conservantes que no dejarían detectar el microorganismo diana. Puede emplearse el medio deshidratado (MICROKIT DMT011, DMT217) y un frasco esterilizado, un bote estéril (MICROKIT VML155) o una bolsa StandUp (B2787B). 2-Añadir el contenido del vial P/A elegido para el microorganismo buscado. O bien las cucharadas necesarias de la nueva presentación económica de medios P/A en polvo estéril en botes de 100 g. 3-Agitar, incubar y ver al día siguiente si hay cambio de color (positivo presunto) o no (negativo confirmado). En caso positivo hacer pruebas de confirmación adecuadas. En caso negativo declarar la muestra como ausente del patógeno en 1 g de producto. GAMA (3 años de caducidad desde fabricación): E. coli (fluorescencia MUG) y Resto de coliformes (X-Gal vira a azul) Viales pre-pesados FPA900 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI900- Estreptococos fecales (incl. Enterococos, vira a negro opaco) Viales pre-pesados FPA901 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI901- Clostridios (Clostridium perfringens si se incuba a 44ºC, Clostridios sulfito- reductores si se incuba a 35ºC, vira a negro) Viales pre-pesados FPA902 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI902- Pseudomonas aeruginosa (vira a rosa y da fluorescencia bajo luz UVA 366 nm - linterna MICROKIT-) Viales pre-pesados FPA908 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI908- Burkholderia cepacia (vira a rojo) Viales pre-pesados FPA904 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI904- Levaduras y Mohos (enturbia o flocula) Viales pre-pesados FPA905 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI905- Vibrio cholerae (vira a crema opaco) Viales pre-pesados FPA906 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI906- Staphylococcus aureus (vira a naranja) Viales pre-pesados FPA907 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI907- Salmonella (vira a negro) y Shigella Tubos concentrados RPL331 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI331- Campylobacter (enturbia) Tubos concentrados RPL332 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI332- E.coli O157 (enturbia) Tubos concentrados RPL333 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI333- Podemos diseñar kits P/A para otros parámetros, sólo solicítenoslo! Laboratorios MICROKIT tiene el honor de ser desde 1994 el diseñador y fabricante exclusivo de esta gama de kits P/A, un “producto con estrella” para el laboratorio y el trabajo de campo. Numerosos países lo aplican ya no sólo en aguas sino además en alimentos y otros productos. Folleto actualizado el 28/09/2016. Apartado de Correos / P.O. Box 44 28210-Valdemorillo (Madrid, Spain) (34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41 E-mail: [email protected] Web: www.microkit.es http://www.laboratoriosmicrokit.blogspot.com/ Blog: http://www. medioscultivo.com Empresa Certificada bajo Norma ISO 9001 desde 1997 MCC P/A COSMETIKIT® CRIOTECA® CHROMOSALM DRY PLATES® PLAQUIS® KITPRO-PLUS DESINFECTEST® M-IDENT® NEOGRAM CCCNT MBS SEILAGUA® ENVIROCOUNT SALMOQUICK MUGPLUS CROMOKIT® AIRESANO

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KITS P/A DE AGUAS

USO EN ALIMENTOS

El método P/A (Presencia/Ausencia) fué inventado durante la segunda guerra mundial para evitar que los

soldados murieran por beber aguas contaminadas. Desde la década de los 1990, MICROKIT ha ido desarrollando

numerosos Kits P/A cromogénicos para control de patógenos en aguas. Estos kits no sólo triunfan en todo el mundo

gracias a las ONG que trabajan en la mejora del agua de bebida de los países tropicales, sino que además están

reconocidos como el método más fiable, de acuerdo con sus numerosas validaciones.

En el caso de las aguas y muestras líquidas incoloras, simplemente se agrega a los 100 ml de muestra el

contenido de 1 vial de medio en polvo estéril adecuado para el microorgansimo que se busca; se incuba; y al dia

siguiente, si no ha cambiado de color, se demuestra la ausencia del patógeno (sin falsos negativos) y si ha cambiado al

color indicado, se demuestra su presencia. Así de sencillo. Y más efectivo que ningún otro método.

Extendemos desde 2016 su uso para alimentos, líquidos opacos o coloreados y otras muestras donde se desee

comprobar la ausencia de patógenos en 1 gramo, de la forma más fácil, cómoda y fiable:

1-Tratar la muestra en solución madre como de costumbre. Por ejemplo, si es un alimento con conservantes,

diluir 1 g en 90-100 ml de Buffered Peptone Neutralizing Water (MICROKIT RPL112), si es un cosmético diluir 1 g en

90-100 ml de LPT Neutralizing Broth (MICROKIT RPL054), etc. Dejar actuar 25 minutos para neutralizar la acción de

los conservantes que no dejarían detectar el microorganismo diana. Puede emplearse el medio deshidratado (MICROKIT

DMT011, DMT217) y un frasco esterilizado, un bote estéril (MICROKIT VML155) o una bolsa StandUp (B2787B).

2-Añadir el contenido del vial P/A elegido para el microorganismo buscado. O bien las cucharadas necesarias de

la nueva presentación económica de medios P/A en polvo estéril en botes de 100 g.

3-Agitar, incubar y ver al día siguiente si hay cambio de color (positivo presunto)

o no (negativo confirmado). En caso positivo hacer pruebas de confirmación adecuadas. En

caso negativo declarar la muestra como ausente del patógeno en 1 g de producto.

GAMA (3 años de caducidad desde fabricación):

E. coli (fluorescencia MUG) y Resto de

coliformes (X-Gal vira a azul) Viales pre-pesados FPA900 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI900-

Estreptococos fecales (incl. Enterococos,

vira a negro opaco) Viales pre-pesados FPA901 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI901-

Clostridios (Clostridium perfringens si se

incuba a 44ºC, Clostridios sulfito-

reductores si se incuba a 35ºC, vira a negro)

Viales pre-pesados FPA902 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI902-

Pseudomonas aeruginosa (vira a rosa y da

fluorescencia bajo luz UVA 366 nm -

linterna MICROKIT-)

Viales pre-pesados FPA908 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI908-

Burkholderia cepacia (vira a rojo) Viales pre-pesados FPA904 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI904-

Levaduras y Mohos (enturbia o flocula) Viales pre-pesados FPA905 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI905-

Vibrio cholerae (vira a crema opaco) Viales pre-pesados FPA906 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI906-

Staphylococcus aureus (vira a naranja) Viales pre-pesados FPA907 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI907-

Salmonella (vira a negro) y Shigella Tubos concentrados RPL331 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI331-

Campylobacter (enturbia) Tubos concentrados RPL332 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI332-

E.coli O157 (enturbia) Tubos concentrados RPL333 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI333-

Podemos diseñar kits P/A para otros parámetros, sólo solicítenoslo!

Laboratorios MICROKIT tiene el honor de ser desde 1994 el diseñador y fabricante exclusivo de esta gama de

kits P/A, un “producto con estrella” para el laboratorio y el trabajo de campo. Numerosos países lo aplican ya no sólo en

aguas sino además en alimentos y otros productos. Folleto actualizado el 28/09/2016.

Apartado de Correos / P.O. Box 44

28210-Valdemorillo (Madrid, Spain)

(34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41

E-mail: [email protected]

Web: www.microkit.es http://www.laboratoriosmicrokit.blogspot.com/

Blog: http://www. medioscultivo.com

Empresa Certificada bajo Norma ISO 9001 desde 1997

MCC P/A COSMETIKIT®CRIOTECA® CHROMOSALM

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KIT P/A COLICULT MCC

BOTE 100 g ESTÉRIL

El método P/A (Presencia/Ausencia) fue inventado durante la segunda guerra mundial para

evitar que los soldados murieran por beber aguas contaminadas. Desde la década de los 1990, MICROKIT ha ido

desarrollando numerosos Kits P/A cromogénicos para control de patógenos en aguas. Estos kits no sólo triunfan en todo

el mundo gracias a las ONG que trabajan en la mejora del agua de bebida de los países tropicales, sino que además están

reconocidos como el método más fiable, de acuerdo con sus numerosas validaciones y participaciones en servicios

intercomparativos. Se pueden emplear en trabajo de campo y en el laboratorio y ahorran tanto el trabajo de filtración de

membrana (MF) o de NMP, como su coste. Con ellos se puede decir ¡de la muestra a la estufa en 10 segundos!

En el caso de las aguas y muestras líquidas incoloras, simplemente se agrega a los 100 (ó 250 ml) de muestra de

agua el medio estéril adecuado para el microorganismo que se busca; se incuba; y al día siguiente, si no ha cambiado de

color, se demuestra la ausencia del patógeno (sin falsos negativos) y si ha cambiado al color indicado, se demuestra su

presencia. Así de sencillo. Y más efectivo que ningún otro método. Porque el método P/A no estresa los

microorganismos como sucede con la MF, que obtiene recuperaciones muy deficientes.

La legislación europea exige el recuento de E.coli (y demás coliformes), Enterococos fecales y Clostridium

perfringens y sus esporas en aguas de consumo humano para demostrar que no hay ni una sola célula en 100 mL; y en

aguas envasadas, el recuento de E.coli (y demás coliformes), Enterococos fecales, Clostridium sulfito reductores y

Pseudomonas aeruginosa para demostrar que no hay ni una sola célula en 250 mL. Dado que más del 99,99% de las

muestras que Ud. analiza, están exentas de estos microorganismos, está gastando enormes cantidades de tiempo y de

dinero en “contar ceros”. Cambie al método P/A y todas las ausencias las debe informar como “cero”, ya que no

existen células decimales, por lo que en microbiología, ausencia es exactamente lo mismo que cero. Y cuando tenga

alguna presencia, repita el análisis por MF e informe del recuento que obtenga. De este modo tan sencillo de “screening

negativo”, va a ahorrar ingentes cantidades de tiempo y de dinero, pero además, va a aumentar la fiabilidad de sus

análisis, ya que el método P/A detecta numerosas presencias que el método MF encuentra como “cero”, que son los

peligrosos falsos negativos. ¡Se acepta en la bibliografía internacional que cerca del 21% de las

aguas que contienen coliformes-E.coli, no son detectadas como positivas mediante el método MF!

Hasta ahora la presentación del método P/A MICROKIT era en frascos estériles con medio

líquido para agregar dentro 100 ml de muestra de agua (referencias RPL3..). O bien la versión

económica en viales de medio en polvo estéril para añadir un vial a 100 ml de muestra de agua (no

incluido el bote estéril, referencias FPA9..). Por petición de nuestros mayores usuarios, extendemos

desde finales de 2016 su uso en una nueva presentación extraordinariamente económica: Botes

de 100 g de polvo estéril con cucharilla esterilizable (referencias DMTI9..-).

En esta nueva presentación, que le llega estéril, debe abrir el bote cada vez que lo use, en

cabina o junto a un Bunsen, extraer con la cucharilla esterilizada (o sumergida en alcohol y tras dejar que se seque) el

volumen indicado de medio, y cerrar el bote inmediatamente para evitar que se contamine. A pesar de que es difícil que

esto suceda, ya que ninguno de los microorganismos implicados habitan en el aire. Use guantes estériles al manipularlo,

para no contaminar el resto del polvo interior de eventuales células todavía viables de coliformes-E.coli que pudiera

portar en sus manos.

1-Añada una cucharadita (1 gramo) de P/A Colicult MCC para buscar E.coli y demás coliformes en 100 ml de

agua (dos cucharaditas para buscarlos en 250 ml de agua). No hace falta enrasar ni ser muy estricto en el volumen de

medio añadido, ya que el medio funciona perfectamente incluso a la mitad y al doble de la concentración indicada. Si el

agua es clorada, añadir el tiosulfato sódico correspondiente para neutralizarlo.

2-Agitar, incubar a 37ºC y ver al día siguiente si hay cambio de color paja a azul-verdoso (presunto positivo de

coliforme) o no (negativo confirmado de coliforme). Y si hay fluorescencia azul celeste (presunto positivo de E.coli) o

no (negativo confirmado de E.coli) al mirar en la oscuridad bajo luz UVA de 366 nm (linterna MICROKIT VMT050).

3-En caso positivo hacer pruebas de confirmación adecuadas (oxidasa para coliformes, indol para E.coli). En

caso negativo declarar la muestra como ausente de estos patógenos/indicadores en 100 (ó 250 mL) de muestra de agua.

Bote de polvo estéril 100g y cucharilla para E.coli y demás Coliformes, Ref: DMTI900- para 50-100 muestras, con ¡3

años de caducidad! Medio diseñado, validado y fabricado por MICROKIT desde 1994. Presentación 100 g desde Octubre de 2016. Revisado el 24-11-2016

Apartado de Correos / P.O. Box 44

28210-Valdemorillo (Madrid, Spain)

(34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41

E-mail: [email protected]

Web: www.microkit.es http://www.laboratoriosmicrokit.blogspot.com/

Blog: http://www. medioscultivo.com

Empresa Certificada bajo Norma ISO 9001 desde 1997

MCC P/A COSMETIKIT®CRIOTECA® CHROMOSALM

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KIT P/A ENTEROCULT

BOTE 100 g ESTÉRIL

El método P/A (Presencia/Ausencia) fue inventado durante la segunda guerra mundial para

evitar que los soldados murieran por beber aguas contaminadas. Desde la década de los 1990, MICROKIT ha ido

desarrollando numerosos Kits P/A cromogénicos para control de patógenos en aguas. Estos kits no sólo triunfan en todo

el mundo gracias a las ONG que trabajan en la mejora del agua de bebida de los países tropicales, sino que además están

reconocidos como el método más fiable, de acuerdo con sus numerosas validaciones y participaciones en servicios

intercomparativos. Se pueden emplear en trabajo de campo y en el laboratorio y ahorran tanto el trabajo de filtración de

membrana (MF) o de NMP, como su coste. Con ellos se puede decir ¡de la muestra a la estufa en 10 segundos!

En el caso de las aguas y muestras líquidas incoloras, simplemente se agrega a los 100 (ó 250 ml) de muestra de

agua el medio estéril adecuado para el microorganismo que se busca; se incuba; y al día siguiente, si no ha cambiado de

color, se demuestra la ausencia del patógeno (sin falsos negativos) y si ha cambiado al color indicado, se demuestra su

presencia. Así de sencillo. Y más efectivo que ningún otro método. Porque el método P/A no estresa los

microorganismos como sucede con la MF, que obtiene recuperaciones muy deficientes.

La legislación europea exige el recuento de E.coli (y demás coliformes), Enterococos

fecales y Clostridium perfringens y sus esporas en aguas de consumo humano para demostrar que

no hay ni una sola célula en 100 mL; y en aguas envasadas, el recuento de E.coli (y demás

coliformes), Enterococos fecales, Clostridium sulfito reductores y Pseudomonas aeruginosa para

demostrar que no hay ni una sola célula en 250 mL. Dado que más del 99,99% de las muestras que

Ud. analiza, están exentas de estos microorganismos, está gastando enormes cantidades de

tiempo y de dinero en “contar ceros”. Cambie al método P/A y todas las ausencias las debe

informar como “cero”, ya que no existen células decimales, por lo que en microbiología, ausencia es

exactamente lo mismo que cero. Y cuando tenga alguna presencia, repita el análisis por MF e

informe del recuento que obtenga. De este modo tan sencillo de “screening negativo”, va a ahorrar

ingentes cantidades de tiempo y de dinero, pero además, va a aumentar la fiabilidad de sus análisis,

ya que el método P/A detecta numerosas presencias que el método MF encuentra como “cero”,

que son los peligrosos falsos negativos. ¡Se acepta en la bibliografía internacional que cerca del 6 %

de las aguas que contienen Enterococos fecales, no son detectadas como positivas mediante el método MF!

Hasta ahora la presentación del método P/A MICROKIT era en frascos estériles con medio líquido para agregar

dentro 100 ml de muestra de agua (referencias RPL3..). O bien la versión económica en viales de medio en polvo estéril

para añadir un vial a 100 ml de muestra de agua (no incluido el bote estéril, referencias FPA9..). Por petición de nuestros

mayores usuarios, extendemos desde finales de 2016 su uso en una nueva presentación extraordinariamente

económica: Botes de 100 g de polvo estéril con cucharilla esterilizable (referencias DMTI9..-).

En esta nueva presentación, que le llega estéril, debe abrir el bote cada vez que lo use, en cabina o junto a un

Bunsen, extraer con la cucharilla esterilizada (o sumergida en alcohol y tras dejar que se seque) el volumen indicado de

medio, y cerrar el bote inmediatamente para evitar que se contamine. A pesar de que es difícil que esto suceda, ya que

ninguno de los microorganismos implicados habitan en el aire. Use guantes estériles al manipularlo, para no contaminar

el resto del polvo interior de eventuales células de Enterococos fecales que pudiera portar en sus manos.

1-Añada una cucharadita (1 gramo) de P/A ENTEROCULT para buscar Enterococos fecales en 100 ml de agua

(dos cucharaditas para buscarlos en 250 ml de agua). No hace falta enrasar ni ser muy estricto en el volumen de medio

añadido, ya que el medio funciona perfectamente incluso a la mitad y al doble de la concentración indicada. Si el agua es

clorada, añadir el tiosulfato sódico correspondiente para neutralizarlo.

2-Agitar, incubar a 37ºC y ver al día siguiente si hay cambio de color ámbar a negro-opaco (presunto positivo de

Enterococo fecal) o no (negativo confirmado de Enterococo fecal).

3-En caso positivo hacer pruebas de confirmación adecuadas (cocos en cadenas, catalasa negativos). En caso

negativo declarar la muestra como ausente de estos patógenos/indicadores en 100 (ó 250 mL) de muestra de agua.

Bote de polvo estéril 100g y cucharilla para Enterococos fecales, Ref: DMTI901- para 50-100 muestras, con ¡3 años de

caducidad! Medio diseñado, validado y fabricado por MICROKIT desde 1994. Presentación 100 g desde Octubre de 2016. Actualizado: 24-11-2016

Apartado de Correos / P.O. Box 44

28210-Valdemorillo (Madrid, Spain)

(34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41

E-mail: [email protected]

Web: www.microkit.es http://www.laboratoriosmicrokit.blogspot.com/

Blog: http://www. medioscultivo.com

Empresa Certificada bajo Norma ISO 9001 desde 1997

MCC P/A COSMETIKIT®CRIOTECA® CHROMOSALM

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KIT P/A CLOSTRICULT

BOTE 100 g ESTÉRIL

El método P/A (Presencia/Ausencia) fue inventado durante la segunda guerra mundial para evitar que los soldados

murieran por beber aguas contaminadas. Desde la década de los 1990, MICROKIT ha ido desarrollando numerosos Kits P/A

cromogénicos para control de patógenos en aguas. Estos kits no sólo triunfan en todo el mundo gracias a las ONG que trabajan

en la mejora del agua de bebida de los países tropicales, sino que además están reconocidos como el método más fiable, de

acuerdo con sus numerosas validaciones y participaciones en servicios intercomparativos. Se pueden emplear en trabajo de

campo y en el laboratorio y ahorran tanto el trabajo de filtración de membrana (MF) o de NMP, como su coste. Con ellos se

puede decir ¡de la muestra a la estufa en 10 segundos!

En el caso de las aguas y muestras líquidas incoloras, simplemente se agrega a los 100 (ó 250 ml) de muestra de agua

el medio estéril adecuado para el microorganismo que se busca; se incuba; y al día siguiente, si no ha cambiado de color, se

demuestra la ausencia del patógeno (sin falsos negativos) y si ha cambiado al color indicado, se demuestra su presencia. Así de

sencillo. Y más efectivo que ningún otro método. Porque el método P/A no estresa los microorganismos como sucede con la

MF, que obtiene recuperaciones muy deficientes.

La legislación europea exige el recuento de E.coli (y demás coliformes), Enterococos fecales y Clostridium

perfringens y sus esporas en aguas de consumo humano para demostrar que no hay ni una sola célula en 100 mL; y en aguas

envasadas, el recuento de E.coli (y demás coliformes), Enterococos fecales, Clostridium sulfito reductores y Pseudomonas

aeruginosa para demostrar que no hay ni una sola célula en 250 mL. Dado que más del 99,99% de las muestras que Ud. analiza,

están exentas de estos microorganismos, está gastando enormes cantidades de tiempo y de dinero en “contar ceros”.

Cambie al método P/A y todas las ausencias las debe informar como “cero”, ya que no existen células decimales, por lo que en

microbiología, ausencia es exactamente lo mismo que cero. Y cuando tenga alguna presencia, repita el análisis por MF e

informe del recuento que obtenga. De este modo tan sencillo de “screening negativo”, va a ahorrar ingentes cantidades de

tiempo y de dinero, pero además, va a aumentar la fiabilidad de sus análisis, ya que el método P/A detecta numerosas

presencias que el método MF encuentra como “cero”, que son los peligrosos falsos negativos. ¡Se acepta en la bibliografía

internacional que, al ser anaerobios estrictos, cerca del 49 % de las aguas que contienen Clostridios, no son detectadas como

positivas mediante el método MF!

Hasta ahora la presentación del método P/A MICROKIT era en frascos estériles con medio líquido para agregar dentro

100 ml de muestra de agua (referencias RPL3..). O bien la versión económica en viales de medio en polvo estéril para añadir un

vial a 100 ml de muestra de agua (no incluido el bote estéril, referencias FPA9..). Por petición de nuestros mayores usuarios,

extendemos desde finales de 2016 su uso en una nueva presentación extraordinariamente económica: Botes de 100 g de

polvo estéril con cucharilla esterilizable (referencias DMTI9..-).

En esta nueva presentación, que le llega estéril, debe abrir el bote cada vez que lo use, en cabina o junto a un Bunsen,

extraer con la cucharilla esterilizada (o sumergida en alcohol y tras dejar que se seque) el volumen indicado de medio, y cerrar

el bote inmediatamente para evitar que se contamine. A pesar de que es difícil que esto suceda, ya que ninguno de los

microorganismos implicados habitan en el aire. Use guantes estériles al manipularlo, para no contaminar el resto del polvo

interior de eventuales esporas de Clostridium que pudiera portar en sus manos.

1-Añada tres cucharaditas (3 gramos) de P/A CLOSTRICULT para

buscar Clostridium en 100 ml de agua (seis cucharaditas para buscarlos en 250 ml

de agua). El mismo medio sirve para C.perfringens si se incuba a 44-46ºC y para

Clostridios Sulfito-Reductores si se incuba a 37ºC. No hace falta enrasar ni ser

muy estricto en el volumen de medio añadido, ya que el medio funciona

perfectamente incluso a la mitad y al doble de la concentración indicada. Si el

agua es clorada, añadir el tiosulfato sódico correspondiente para neutralizarlo.

2-Agitar, incubar y ver al día siguiente si hay turbidez y/o cambio de color crema a negro-opaco, sea en el fondo o sea

en la totalidad del agua (presunto positivo de Clostridium) o no (negativo confirmado de Clostridium). Si no hay cambios, dejar

incubando otras 18-24 h y volver a verificar el ennegrecimiento parcial o total del agua. Recuerde que de la temperatura de

incubación depende que sean C.perfringens o C.Sulfito-Reductores.

3-En caso positivo hacer pruebas de confirmación adecuadas (resiembra en TSC-MUP Agar o en SPS). En caso

negativo declarar la muestra como ausente de estos patógenos/indicadores en 100 (ó 250 mL) de muestra de agua.

Bote de polvo estéril 100g y cucharilla para Clostridios, Ref: DMTI902- para 16-32 muestras, con ¡3 años de caducidad! Medio diseñado, validado y fabricado por MICROKIT desde 1994. Presentación 100 g desde Octubre de 2016. Revisado el 24-11-2016

Apartado de Correos / P.O. Box 44

28210-Valdemorillo (Madrid, Spain)

(34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41

E-mail: [email protected]

Web: www.microkit.es http://www.laboratoriosmicrokit.blogspot.com/

Blog: http://www. medioscultivo.com

Empresa Certificada bajo Norma ISO 9001 desde 1997

MCC P/A COSMETIKIT®CRIOTECA® CHROMOSALM

DRY PLATES®

PLAQUIS® KITPRO-PLUSDESINFECTEST®

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SALMOQUICK

MUGPLUS

CROMOKIT®AIRESANO

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KIT P/A PSEUDOMONAS

BOTE 100 g ESTÉRIL

El método P/A (Presencia/Ausencia) fue inventado durante la segunda guerra mundial para evitar

que los soldados murieran por beber aguas contaminadas. Desde la década de los 1990, MICROKIT ha ido

desarrollando numerosos Kits P/A cromogénicos para control de patógenos en aguas. Estos kits no sólo

triunfan en todo el mundo gracias a las ONG que trabajan en la mejora del agua de bebida de los países tropicales, sino que

además están reconocidos como el método más fiable, de acuerdo con sus numerosas validaciones y participaciones en

servicios intercomparativos. Se pueden emplear en trabajo de campo y en el laboratorio y ahorran tanto el trabajo de filtración

de membrana (MF) o de NMP, como su coste. Con ellos se puede decir ¡de la muestra a la estufa en 10 segundos!

En el caso de las aguas y muestras líquidas incoloras, simplemente se agrega a los 100 (ó 250 ml) de muestra de agua

el medio estéril adecuado para el microorganismo que se busca; se incuba; y al día siguiente, si no ha cambiado de color, se

demuestra la ausencia del patógeno (sin falsos negativos) y si ha cambiado al color indicado, se demuestra su presencia. Así de

sencillo. Y más efectivo que ningún otro método. Porque el método P/A no estresa los microorganismos como sucede con la

MF, que obtiene recuperaciones muy deficientes.

La legislación europea exige el recuento de E.coli (y demás coliformes), Enterococos fecales y Clostridium

perfringens y sus esporas en aguas de consumo humano para demostrar que no hay ni una sola célula en 100 mL; y en aguas

envasadas, el recuento de E.coli (y demás coliformes), Enterococos fecales, Clostridium sulfito reductores y Pseudomonas

aeruginosa para demostrar que no hay ni una sola célula en 250 mL. Dado que más del 99,99% de las muestras que Ud. analiza,

están exentas de estos microorganismos, está gastando enormes cantidades de tiempo y de dinero en “contar ceros”.

Cambie al método P/A y todas las ausencias las debe informar como “cero”, ya que no existen células decimales, por lo que en

microbiología, ausencia es exactamente lo mismo que cero. Y cuando tenga alguna presencia, repita el análisis por MF e

informe del recuento que obtenga. De este modo tan sencillo de “screening negativo”, va a ahorrar ingentes cantidades de

tiempo y de dinero, pero además, va a aumentar la fiabilidad de sus análisis, ya que el método P/A detecta numerosas

presencias que el método MF encuentra como “cero”, que son los peligrosos falsos negativos. ¡Se acepta en la bibliografía

internacional que cerca del 33 % de las aguas que contienen Pseudomonas aeruginosa, no son detectadas como positivas

mediante el método MF!

Hasta ahora la presentación del método P/A MICROKIT era en frascos estériles con medio líquido para agregar dentro

100 ml de muestra de agua (referencias RPL3..). O bien la versión económica en viales de medio en polvo estéril para añadir un

vial a 100 ml de muestra de agua (no incluido el bote estéril, referencias FPA9..). Por petición de nuestros mayores usuarios,

extendemos desde finales de 2016 su uso en una nueva presentación extraordinariamente económica: Botes de 100 g de

polvo estéril con cucharilla esterilizable (referencias DMTI9..-).

En esta nueva presentación, que le llega estéril, debe abrir el bote cada vez que lo use, en cabina o junto a un Bunsen,

extraer con la cucharilla esterilizada (o sumergida en alcohol y tras dejar que se seque) el volumen indicado de medio, y cerrar

el bote inmediatamente para evitar que se contamine. A pesar de que es difícil que esto suceda, ya que ninguno de los

microorganismos implicados habitan en el aire. Use guantes estériles al manipularlo, para no contaminar el resto del polvo

interior de eventuales células todavía viables de Pseudomonas aeruginosa que pudiera portar en sus manos.

1-Añada dos cucharaditas (2 gramos) de P/A PSEUDOMONAS para buscar

Pseudomonas aeruginosa en 100 ml de agua (cuatro cucharaditas para buscarla en 250

ml de agua). No hace falta enrasar ni ser muy estricto en el volumen de medio añadido, ya

que el medio funciona perfectamente incluso a la mitad y al doble de esta concentración. Si

el agua es clorada, añadir el tiosulfato sódico correspondiente para neutralizarlo.

2-Agitar, incubar a 37ºC y ver al día siguiente si hay viraje del agua de color paja

a rosa y si da fluorescencia verde-amarillenta en la oscuridad bajo luz UVA de 366 nm

(linterna MICROKIT VMT050). Si no hay cambios, dejar incubando otro día y volver a

verificar si hay viraje a rosa del agua. Por si las Ps.aeruginosa estuviesen muy estresadas, es prudente dejar los negativos

incubando hasta 3 días y verificar después si sigue sin haber viraje a rosa y fluorescencia.

3-En caso positivo hacer pruebas de confirmación adecuadas (resiembra en Cetrimide Agar y uso de M-Ident-PS). En

caso negativo declarar la muestra como ausente de este patógeno en 100 (ó 250 mL) de muestra de agua.

Bote de polvo estéril 100g y cucharilla para Pseudomonas aeruginosa, Ref: DMTI908- para 25-50 muestras, con ¡3 años de

caducidad!

Medio diseñado, validado y fabricado por MICROKIT desde 1994. Presentación 100 g desde Octubre de 2016. Revisado: 24/11/2016.

Apartado de Correos / P.O. Box 44

28210-Valdemorillo (Madrid, Spain)

(34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41

E-mail: [email protected]

Web: www.microkit.es http://www.laboratoriosmicrokit.blogspot.com/

Blog: http://www. medioscultivo.com

Empresa Certificada bajo Norma ISO 9001 desde 1997

MCC P/A COSMETIKIT®CRIOTECA® CHROMOSALM

DRY PLATES®

PLAQUIS® KITPRO-PLUSDESINFECTEST®

M-IDENT® NEOGRAM

CCCNTMBS

SEILAGUA® ENVIROCOUNT

SALMOQUICK

MUGPLUS

CROMOKIT®AIRESANO

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1

MICROKIT® P/A Burkholderia cepacia

Detección Presencia / Ausencia (P/A) en 100 ml de agua

INTRODUCCIÓN:

Medio estéril Cromogénico diseñado por MICROKIT en base al BCA (BCPT), para

detección P/A (o recuento NMP empleando cubetas NMP Ref:1001020 ó Quantitry de

Idexx) de Burkholderia cepacia (viraje del agua a rojo burdeos en sólo 18-24h e indol - con

reactivo de Kovacs SBH056), que puede elegir en tres formatos diferentes:

a) RPL323 Frascos tomamuestras con caldo estéril hidratado y tapón a rosca

para añadir en ellos 100 mL de la muestra de agua. Cajas 10u ó 9x10u

b) FPA904 Viales prepesados de polvo estéril con tapón a rosca para añadir a

100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o

bolsa standup 100 mL B2787B estériles). Cajas 40u ó 10x40u.

c) DMTI904- Botes 100 g de polvo estéril y cucharilla dosificadora para

añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155

o bolsa standup 100 mL B2787B estériles), Bote para 50 test.

De gran utilidad como screening negativo de muestras rutinarias, al ser un

método más fácil de emplear que la filtración de membrana y más fiable (escasez de falsos

positivos y de falsos negativos, que en filtración de membrana es de nada menos que el 33%

de las muestras analizadas en el mundo, por el estrés provocado durante la filtración).

También muy útil para que las potabilizadoras no dejen de analizar en festivos y

fines de semana, ya que este método puede ser empleado por personal no especialista en

microbiología, el mismo guarda de la depuradora puede hacerlo. La única precaución es que

el operario no toque ni el agua ni el polvo con sus manos, para evitar contaminaciones

artificiales.

MODO DE EMPLEO:

Es necesario tratar previamente el agua clorada, mediante Tiosulfato Sódico, para

que las células dañadas subletalmente se recuperen, excepto en los frascos tomamuestras

RPL302, que ya incluyen el tiosulfato.

Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va

a utilizar; en el caso de los viales, añadir todo el contenido sobre el agua; en el caso de los

botes de 100g, ponerse guantes estériles para no contaminar el medio y usarlo en cabina de

flujo laminar; añadir 3 cucharaditas rasas sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla

dentro para los posteriores usos. Agitar para homogeneizar. El color resultante es naranja,

transparente. Incubar 18-48 horas (la rapidez del viraje depende del estado metabólico/estrés

de la cepa, aun que casi siempre vira en 18h) a 35-37° C. La muestra inoculada sirve

también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después

de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir hasta horas entre toma e incubación.

Monitorice todos los puntos necesarios para el análisis preventivo de tendencias.

Apartado de Correos / P.O. Box 44

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(34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41

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2

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS: El viraje del agua

a color rojo burdeos (vino tinto) y opaco demuestra la

Presencia de B.cepacia en la muestra de agua. La ausencia de

fluorescencia azul que se observa en la oscuridad bajo U.V.A.

de 366 nm (linterna VMT050) confirma que no se trata de

P.aeruginosa. Además, con 0,5 ml de KOVACS-SBH056, no

hay anillo rojo de Indol en superficie, lo que descarta falsos

positivos de coliformes. Ya que hay otros microorganismos

capaces de virar a rojo, pero son más lentos, fluorescentes o

indol +. Puede conseguir que el kit sea muy selectivo

añadiendo a cada frasco 0,14 ml del suplemento MICROKIT

SMT301 (Ticarcilina + Polimixina). Preferimos ofrecer el kit

sin suplemento porque algunas cepas de B.cepacia subletales

podrían no crecer (por ejemplo la DSMZ 50181 no crece bien

con los antibióticos).

Es necesaria la ausencia (no viraje), que equivale a

0 ufc/100 mL. Sólo en caso positivo debería repetirse la muestra por método cuantitativo si

se requiere un recuento concreto, aunque la legislación exige 0 y por tanto no importa si hay

2 ó 950, en ambos casos el agua no es aceptable para fabricación de medicamentos y

cosméticos.

Como siempre en microbiología, resiembre los positivos en estría en agar selectivo

BCA (BCPT) e identifique las colonias con galerías bioquímicas (MICROKIT 245000) o

con nuestro servicio de identificación molecular (SFI004).

Material necesario no incluído: Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976)

excepto en los frascos tomamuestras RPL323, que ya lo incluyen. Bote estéril 100ml

(VML155), o bolsa estéril autosellable Stand-Up (B2787B). Estufa o incubador 35-37ºC

(SIL12AR ó SIL24AR).

PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O INCLUSO PARA ANÁLISIS

DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS

Y ANIMALES.

Los viales FPA904 y botes DMTI904- son extremadamente higroscópicos:

manténgalos bien cerrados en lugar seco, fresco y oscuro (no en nevera). Agite el bote antes

de usar. En zonas de elevada humedad ambiental, guardar bien cerrados en un tupper

hermético con silicagel. Los frascos RPL323 tampoco precisan nevera, sólo oscuridad.

CONTROL DE CALIDAD: Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio

siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras largos fletes, tras

conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de

la etiqueta,...) DESHIDRATADO: Polvo, rosado, sólo existe versión agarizada y versión irradiada.

PREPARADO: Estéril, crema-anaranjado a menudo con precipitados negros de hierro

CONTROL DE CRECIMIENTO 18 h a 35°C aproximadamente:

Burkholderia cepacia MKTA 25416, Viraje a rojo burdeos, opaco

Burkholderia cepacia MKTN 10743, Viraje a rojo burdeos, opaco

Burkholderia cepacia MKTD 50181, Viraje a rojo burdeos, opaco

Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027 (WDCM00026), Inhibido, Viraje ocasional a rojizo tras 24h

Escherichia coli MKTA 25922, Inhibido, Viraje ocasional a rojizo tras 24h

Staphylococcus aureus MKTA 6538, Inhibido

El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación

medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.

Diseñado, Validado y Fabricado por MICROKIT desde 1994. Texto revisado en 6-2018

Izda: positivo. Dcha: negativo

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