efecto protector del extracto de calendula officinalis

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EFECTO PROTECTOR DEL EXTRACTO DE CALENDULA OFFICINALIS CONTRA LA INDUCCION DE STRESS OXIDATIVO EN LA PIEL POR UVB : EVALUACION DE LOS NIVELES REDUCIDOS DE GLUTATION Y SECRECION DE METALOPROTEINASAS DE MATRIZ Presentado por Sandra Johanna Garzón P., O.D., Msc. Pharm. Candidata Ph.D Ciencias Farmacéuticas Universidad Nacional de Colombia [email protected]

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Page 1: Efecto Protector Del Extracto de Calendula Officinalis

EFECTO PROTECTOR DEL EXTRACTO DE CALENDULA OFFICINALIS CONTRA LA INDUCCION

DE STRESS OXIDATIVO EN LA PIEL POR UVB : EVALUACION DE LOS NIVELES REDUCIDOS DE GLUTATION Y

SECRECION DE METALOPROTEINASAS DE MATRIZ

Presentado por

Sandra Johanna Garzón P., O.D., Msc. Pharm.

Candidata Ph.D Ciencias Farmacéuticas Universidad Nacional de Colombia

[email protected]

Page 2: Efecto Protector Del Extracto de Calendula Officinalis

PROTECTIVE EFFECT OF CALENDULA OFFICINALIS EXTRACT AGAINST UVB-INDUCED OXIDATIVE STRESS IN SKIN:

EVALUATION OF REDUCED GLUTATHIONE LEVELS AND MATRIX METALLOPROTEINASE SECRETION

Fonseca , Y. et al (2009)

Page 3: Efecto Protector Del Extracto de Calendula Officinalis

INTRODUCCIÓN CALÉNDULA OFFICINALIS

• BOTÓN DE ORO, MARAVILLA, MARIGOLD

• 35 propiedades (Brown, Dattnerr, 1998)

• Enfermedades Inflamatorias: Traumas, Quemaduras,

Antitumorales (Jimenez, 2006), reparación (Zitterl et al , 1997), antioxidantes ( Katlinic, 2006)

• 2-4 ml tintura diluida

• 250-500 ml con Agua

• 2-5 g de hierba en 100g ungüento

Asteraceae

Page 4: Efecto Protector Del Extracto de Calendula Officinalis

Constituyentes Químicos

• Aceite esencial 0,02%

• Calendulina

• Carotenoides

• Esteroides

• Sesquiterpenoides

• Triterpenoides

• Flavonoides y Polifenoles

• Esteres de ácidos orgánico y otros • (Re et al, 2009)

•(Re et al, 2009)

Page 5: Efecto Protector Del Extracto de Calendula Officinalis

Las radiaciones UV de tipo B se encuentran entre las longitudes de onda de 280 a 320 _m y las menos energéticas son las de tipo A con longitudes de onda de 320 a 400 _m (Afaq et al., 2002; Bernerd et al.,2003).

ESPECIES REACTIVAS DEL OXÍGENO (ROS)

Page 6: Efecto Protector Del Extracto de Calendula Officinalis

Uso potencial de administraciones orales

de Marigold para prevenir el estrés

oxidativo en la piel por radiación UV

Deficiencia de glutation peroxidasa predispone a la formación de carcinoma de

células escamosas.

Page 7: Efecto Protector Del Extracto de Calendula Officinalis

MATERIALES Y MÉTODOS

Partículas Caléndula 0,3mm

Maceradas 50% Etanol (25 C- 5 dias)

Agitación mecánica 870 rpm (1h)

Filtración y Secado 40 C

Suspension 50% solucion hidroalcohica 200 ml (conservados 20 C)

Concentracion 15,7%

Solucion de extracto de Calendula fue preparada por dilucion de 100 microL de extracto concentrado en 10mL de solución metanolica al 50%

Metodos Colorimétricos: Polifenol y contenido de Flavonoides

Determinación de la Actividad antioxidante por el método DPPH (2,2-

difenil-1-picril hidrazilo)

Consiste en que este radical tiene un electrón desapareado y es de color azul-violeta, decolorándose hacia amarillo pálido por reacción con una sustancia antioxidante; la absorbancia es medida espectrofotométricamente a 517 nm. La diferencia de absorbancias, permite obtener el porcentaje de captación de radicales libres

Page 8: Efecto Protector Del Extracto de Calendula Officinalis

MATERIALES Y MÉTODOS Determinación in vivo de efecto protector contra stress oxidativo producido por UVB Los animales se dividieron en cinco grupos Grupo 1 = no irradiado control Grupo 2 = control irradiado Grupo 3 = irradió y se trató con una solución que contiene 150 mg / kg de EM Grupo 4 = irradiado y tratado con una solución que contiene 300 mg / kg ofME Grupo 5 = irradiado y se trató con una solución que contiene 600 mg / kg de EM

Esta fuente emite en el rango de 270-400nm con un pico de salida a 313 nm, dando lugar a una irradiación de 0.27mW/cm2 a una distancia de 20 cm, medida por un radiómetro 1700 IL

Induccion actividad gelatinasa (2.46 J/cm2)

vía oral 30 min y18 h antes de la irradiación.

Philips TL/12 RS 40W lamp

Glutation

Los niveles de la piel de GSH

spectrofotómetro de fluorescencia.

Page 9: Efecto Protector Del Extracto de Calendula Officinalis

Actividad gelatinasa por UVB

Electroforesis: Cascada de enzimas (colagenasas, gelatinasas, elastasas, stromelysin-1), que degradan a las proteínas de la matriz extracelular

Page 10: Efecto Protector Del Extracto de Calendula Officinalis

RESULTADOS

• Eficacia antioxidante mayor actividad sobre destrucción radicales superóxido producidos en el sistema xantina / luminol / XOD

• Bajas concentraciones de extracto de caléndula estimulan la proliferación de fibroblastos 27% incremento (11,25-15 mg/mL) Hepatoprotección (93%)

150 y 300 mg / kg de ME mantiene los niveles de GSH cercanos a los del control no irradiado, a la dosis más alta administrada de ME (600 mg / kg), Disminuye 43% de los niveles de GSH

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RESULTADOS

• Aumento de la expresión / actividad de las gelatinasas en la piel de ratones sin pelo se observó después de la irradiación UVB en este estudio. El análisis de las gelatinasas (MMP-2 y MMP-9) en la piel mostró que la MMP-9 sólo apareció en la piel irradiada

• 150, 300 y 600 mg / kg de Extracto, mostraron reducción MMP-9

Page 12: Efecto Protector Del Extracto de Calendula Officinalis

CONCLUSIONES

• ROS inducidas por UVB causa daño celular y alteraciones bioquímicas, tales como la oxidación de proteínas y lípidos, la inflamación, el daño al ADN, y la activación y la inactivación de enzimas (Shindo et al., 1993).

• Prevención reducción de GSH inducida por irradiación UVB: tratamiento con EM estrategia protección contra daños en la piel inducido por UVB

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CONCLUSIONES

• MMPs tienen dos actividades: pro-inflamatoria y anti-inflamatoria

• El daño en la piel generado por UVB se produce por degradación del procolágeno tipo I MMP-1

• Aumento gelatinasas: MMP-9 MMP-2: Benefician procolágeno tipo 1

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FIN

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