TÉCNICAS DE

MICROMANIPULACIÓN

CÓMO MEJORAR LAS TASA DE

GESTACIÓN

ESTHER GREGORI MACHÍ Licenciada en Biología.

Máster en Biología Clínica y Experimental de la Reproducción.

Instituto FIVIR

Patrick Steptoe y Robert Edwards

HISTORIA

Primer “bebé probeta”.

Louise Brown, 1978.

FIV convencional

HISTORIA

Complejo Cumulo-Corona-Ovocito Cultivo ovocito-espermatozoides

EQUIPO de MICROMANIPULACIÓN

EQUIPO de MICROMANIPULACIÓN

Ooplasma

Oolema

Zona Pelúcida: glicoproteínas

Espacio Perivitelino

EL OVOCITO

Técnicas de MICROMANIPULACIÓN

• “Zona Drilling”: ácido Tyrodes.

• “Partial Zona Dissection” PZD: incisión en la ZP.

• “Subzonal Insertion” SUZI: inserción de spzs en el espacio perivitelino.

• Yanagimachi, 1976.

Técnicas de MICROMANIPULACIÓN

• ICSI “Intracytoplasmic Sperm Injection”: “Pregnancies after

intracytoplasmic injection of single spermatozoon into an oocyte”, Palermo

y cols., 1992.

Técnicas de MICROMANIPULACIÓN

• ICSI

• IMSI

• Assisted Hatching: Eclosión Asistida.

• Eliminación de fragmentos.

• Transferencia de citoplasma.

• DGP: biopsia CP o blastómeras.

FUTURO:

• Clonación.

• Células madre.

• Transgénicos.

ICSI

• Denudación ovocitaria: Hyaluronidasa + pipeteo mecánico

• Caja de ICSI

Técnicas de MICROMANIPULACIÓN

Ovocito VG

Ovocito MI

Ovocito MII

ICSI – Indicaciones

• Factor masculino grave: oligozoospermia, asteno, terato.

• Factor inmunológico: presencia Ac-antispz.

• “Sémenes valiosos”

• Fallos previos de FIV.

• DGP

• Baja respuesta.

• Mala calidad ovocitaria.

• Ovocitos desvitrificados.

ICSI - Modificaciones

• Ebner y cols., 2002: presión y succión

• Rienzi y cols, 2001.

Nagy y cols., 2002: ICSI por láser.

• Tesarik y cols., 2002: dislocación ooplasma.

• Baltaci y cols., 2009: activación piezoeléctrica.

IMSI: ICSI Altamente Magnificada

ASSISTED HATCHING

• Cohen, 1989.

• Objetivo: mejorar el potencial implantatorio.

• Metodología: perforación o adelgazamiento ZP

- Zona Drilling,

- PZD

- Ablación por láser

- Tratamiento enzimático

Balaban, 2002: evaluó los cuatro métodos

diferentes y concluyó que tenían similares tasas

de implantación y embarazo.

ASSISTED HATCHING

• INDICACIONES recomendadas:

• Ovocitos de pacientes mayores 37 años.

• Ovocitos ZP engrosada, color anormal.

• Valores elevado de FSH basal sérica.

• Fracaso repetido de implantación.

• Embriones de baja calidad.

• Embriones congelados/descongelados.

Mayor incidencia gemelos monocigóticos y

embarazos ectópicos.

ELIMINACION

DE FRAGMENTOS

TRANSFERENCIA de CITOPLASMA

• Hipótesis: efectos ooplasma interfieren en

desarrollo e implantación.

• Ha habido embarazos pero faltan estudios

controlados para verificar sus beneficios.

• Futuro: implicaciones éticas.

CONTRACCIÓN ARTIFICIAL

CAVIDAD BLASTOCELE

• Blastocele: cavidad llena de agua.

• Para mejorar la vitrificación: reducción

blastocele y salida del agua.

• Las tasas de embarazo mejoran al compararlo

con un grupo control sin micromanipular.

• Mukaida: láser para contracción. Método más

simple y conveniente.

FUTURO

CLONACION

- Transferencia Nuclear de Células Somáticas

(SCNT)

- Clonación TERAPÉUTICA

- Clonación REPRODUCTIVA

CÉLULAS MADRE

TRANSGÉNICOS

MUCHAS GRACIAS