Diagnosticul maladieihidatice, de la preclinic la biologia moleculară

• Patricia Mihailescu1, Carmen Cretu1,2, Claudia Istrate1

• 1-SC EcoParaDiagnostic SRL București

• 2-UMF”Carol Davila” București

A XIV - a Conferință Științifică Națională a OBBCSSR ”Medicina de laborator - tehnici și/sau diagnostic de laborator?”

10 noiembrie 2018 Rin Grand Hotel București

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

Istoric• Antichitate_ Hippocrates, Aretaeus și Galen

”ficatul plin cu vezicule cu lichid” – condiție care ducea la decesul pacientului

• Evul mediu_ 1758 -în prezent 85 de denumiri.

• 1801 Rudolphi, a definit genul Echinococcus

• 1855 au fost descrise două tipuri de hidatide

• 1957 Vogel_demonstrează prin infecții experimentale ciclul bilologic al Echinococcus multilocularis demonstrând existența celei de-a doua specii implicate.

• 1980_ Echinococcus: granulosus, multilocularis, oligarthus șivogeli

• 1990_ secvențe scurte de mtADN (cox1 și nad1)

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

EchinococcusE.granulosus sensu stricto

G1-G3

E. equinus

G4

E.ortleppi

G5

E.canadenșis

G6-G10

E.felidis

E.multilocularis

E.oligarthra

E.vogeli

E.shiquicus

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

Încadrare taxonomică

Încrengătura Plathelmintes

Clasa Cestoda

Familia Taeniidae

Genul Echinococcus

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

Raspândirea geografică

(după Ito A și col., 2016)

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

Stadiul infectant

Stadiul de diagnosticOncosferele eclozează și străbat peretele intestinal.

Chist hidatic în ficat, plamani, etc)

Scolex care se atșează de intestine

Gazda intermediară (ovine, caprine, porcine, etc)

Ingestia chisturilor(în organe)

Gazda definitivă: câinele și alte canidae

Ingestia ouălor (cu fecale)

Ou embrionat (în fecale)

Adult în intestinul subțire

Protoscolex din chist

1. Adult E.g;

2. Ou embrionat;

3. Oncosferele ce străbat peretele intestinal;

4. Chist hidatic în diferite organe;

5. Protoscolex din chist;

6. Scolex care se atașează pe peretele intestinal.

Ciclul biologic

Echinococcus granulosus

Adaptat după:https://et.wikipedia.org/wiki/Fail:CDC_Echinococcus_Life_Cycle.svg

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

Ciclul biologic

Echinococcus multilocularis

Adaptat după:Wahlström et al. Acta Veterinaria Scandinavica 2011, 53:9 http://www.actavetscand.com/content/53/1/9

Infecția gazdelor definitive: consumul de rozătoare infectate

Excreția ouălelor prin materiile fecale în mediu

Infecția porcinelor/mistreților: ingerarea ouălor din mediu

Infecția oamenilor: contactul cu câînii infectați

Infecția oamenilor: consumul de fructe de pădure infestate

Infecția rozătoarelor: ingerarea ouălor din mediul inconjuraător

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

Echinococoza

Chistică – Echinococcus granulosus Alveolară – Echinococcus multilocularis

După: Eckert J.&Deplazes P.-10.1128/CMR.17.1.107-135.2004. Clin. Microbiol. Rev. 2004, 17(1):107.

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

Echinococcoza chistică

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

Localizări

Ficat 65%

Plămân 25%

Alte organe 10%

Dupa:Gottstein, 1986OBBCSSR C

ONFERINTA 2

018

Diagnosticul

• Clinic_ anamneza pacientului

• Durere in zona ficatului (localizări hepatice)

• Hepatosplenomegalie

• Icter

• Varsături

• Reacții alergice (produse la fisurarea chisturilor)

• Coma (localizare cerebrală)

Pacienți ASIMPTOMATICI

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

Diagnosticul paraclinic

• Hemoleucograma completă

• Parametrii hepatici

• Parametrii renali

NESPECIFICI

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

Diagnostic paraclinic specific

• Screening – ELISA

• Confirmare – Western blot

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

Diagnostic imagistic

• Radiografia pulmonară

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

Diagnostic imagisticEcografia abdominală

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

Diagnosticul imagisticCT/RMN

RMNCT

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

Studiu retrospectiv01.01.2017 –01.08.2018

Laboratorul Centrului Medical Eco-Para-Diagnostic SRL București

470 analize serologice pentru determinarea anticorpilor specifici IgG anti Echinococcus granulosus

9 teste de viabilitate

9 analize de genotipare

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

Metodele utilizate

• ELISA

• WESTERN BLOT

• EXAMEN MICROSCOPIC

• ANALIZE DE BIOLOGIE MOLECULARĂ

• Extracție ADN din membrane proligere

• Amplificare (PCR)

• Secvențiere

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

Rezultate

ELISA

• 256

• 82 (32,04%) POZITIVE

• 9 (3,51%) INCERT

• 165 (64,45%) NEGATIV

Western Blot

• 214

• 34 (15,88%) POZITIVE

• 180 (84,12%) NEGATIVE

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

Localizările chisturilor

Ficat17/34 – 50%

Plămân3/34 – 8.82%

Muscular1/34 – 2.94%

Alte localizări13/34 – 38.24%

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

Test de viabilitate(9 probe)• 8 pozitive

• 1 negativ

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

Genotipare (secvențe scurte de ADN mitocondrial_ mtADN_ cox1)

• 9 probe/9

• Echinococcus granulosus sensu stricto

• Genotipul G1

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

Concluzii

Anamneza completă a pacientului este o etapă esențială în despistarea precoce a cât mai multe cazuri;

Diagnosticul = corelație între cel clinic, imagistic și de laborator.

Profilaxia prin:

• Respectarea regulilor esențiale de igienă personală și comunitară;

• Aplicarea tratmentelor antiparazitare corecte, periodic și regulat de către medicii veterinari;

• Educatia medicală este esențială în cunoașterea/popularizarea modalităților de transmitere și prevenție, contribuind semnificativ la reducerea cazurilor de echinococoză.OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8

OBBCSSR CONFERIN

TA 201

8