Genul Corynebacterium

Caractere generalebacili gram-pozitivi cu extremiti mciucate sau ascuite, dispui n litere unghiulare sau palisade, nesporulai;imobili;cultiv pe medii mbogite cu snge sau ser, unele specii fiind stimulate prin adaos de Tween 80 sau glbenu de ou;aerobi sau facultativ anaerobi;catalaz pozitivi i oxidaz negativi;descompun zaharurile fr producere de gaz;C. diphtheriae este singura specie nalt patogen pentru om;C.xerosis, C.pseudodiphthericum, C.jeikeium, C.urealyticum, C.striatum, C.minutissimum etc sunt oportuniti prezeni la nivelul tegumentului i mucoaselor colonizate.

Corynebacterium diphtheriaeCaractere morfo-tinctorialebacili gram pozitivi cu lungimi variabile, cu structur granular (granulaii din volutin) dispui n diplo- sau grmezi neregulate; aspectul morfologic caracteristic apare n produse biologice i culturi pe medii cu ser (mediul Loeffler). Caractere de cultivare i metabolicepe geloz-snge biotipurile mitis i gravis dezvolt colonii hemolitice;pe mediul Loeffler cultiv n 10-14 ore, coloniile avnd aspect de picturi de spermanet;pe medii cu telurit de K coloniile sunt de culoare neagr; pe mediul Tinsdale cu cistin apar nconjurate cu un halou brun;teste biochimice permit identificarea speciei i diferenierea biotipurilor gravis, intermedius i mitis.

Rezistena la factori din mediurezisteni la condiii de desicaie;sensibili la dezinfectante i antiseptice uzuale;distrui rapid la 1000C.Factori de virulenpatogeniatatea pentru om se datoreaz producerii toxinei difterice;elaborat numai de tulpinile lizogene (care posed profagul cu gena tox);exotoxin cu structur de tip A-B care inhib sinteza proteic celular (interacioneaz cu factorul de elongaie 2);se fixeaz de predilecie pe esutul miocardic, glandele suprarenale i sistemul nervos;poate fi pus n eviden prin inoculare la animale (cobai, iepuri), culturi de celule sau prin imunodifuzie (testul Elek);prezint un singur tip Ag; poate fi transformat n anatoxin.

Habitatprezent numai la om (bolnav sau purttor), pe mucoasa oro-faringian sau nazal, rar la nivelul tegumentului.;procentul purttorilor n masa populaiei este redus (1-2%).Manifestri cliniceagent etiologic al toxiinfeciei difterice;se localizeaz cel mai frecvent la nivelul amigdalelor, determinnd o angin cu false membrane;infecia poate progresa spre laringe (crup), existnd pericolul de asfixie;consecutiv ptrunderii toxinei n circulaia sangvin, apar manifestri de miocardit, hipotensiune, polinevrit sau paralizii ale sistemului nervos periferic;tulpini netoxigene au fost izolate din infecii sistemice la imunodepresai.

Imunitateconferit de Ac fa de toxina difteric (> 0,01U/ml);Ac antitoxin sunt stimulai dup administrarea de anatoxin difteric;infecia natural nu confer imunitate postinfecioas.Diagnostic de laboratorizolarea i identificarea bacilului difteric toxigen prin recoltarea exsudatului faringian pe trei tampoane: tampon 1 servete pentru examen microscopic direct,tampon 2 insamnat pe geloz-snge i mediu selectiv cu telurit de K;tampon 3 nsmnat pe mediu de mbogire OST (ou-ser-telurit), numit i OCST (ou-cistein- ser-telurit);coloniile suspecte sunt identificate la nivel de specie pe baza caracterelor de cultur, morfo-tinctoriale (mediu Loeffler) i biochimice;toxigeneza este pus n eviden prin testul Elek, prin inoculare la animale sau pe culturi de celule Vero.

Principii de tratamentseroterapie ct mai precoce, pe baza criteriilor clinico-epidemiologice;antibioterapie cu penicilin, eritromicin sau cefalosporine din generaia 1.Epidemiologieinfecie reemergent cu raportare obligatorie; n perioada 1990-1994 a evoluat o mare epidemie n ri ale fostei URSS;rezervorul este reprezentat de omul bolnav sau purttor;transmitere predominant pe cale respiratorie;receptivitate: copii, aduli sau btrni lipsii de niveluri serice protectoare de antitoxin difteric.Profilaxie specificvaccinarea copiilor i adulilor receptivi cu anatoxin difteric;antibioprofilaxie cu eritromicin la contaci.

Alte specii Corynebacterium de interes medicalC.ulcerans i C. pseudotuberculosis specii patogene pentru animale;unele tulpini pot produce toxin difteric, fiind descrise n infecii la om.C.urealyticumdetermin infecii urinare cu formare de calculi vezicali i hematurie macroscopic;se remarc prin multirezistena la antibiotice, vancomicina fiind activ.C. jeikeiumspecie lipofil, izolat din infecii de cateter, endocardite la protezai valvulari, bacteriemii la imunodepresai;este indicat tratamentul cu vancomicin, fiind natural rezistent la alte antibiotice active pe bacterii gram-pozitive

Listeria monocytogenesCaractere morfo-tinctorialebacili gram-pozitivi de lungimi variabile, dispui n diplo (V sau Y), palisade sau lanuri scurte, nesporulai;mobili la temperatura camerei prin flageli cu dispoziie peritriche.Caractere de cultivare i metabolice cultiv pe medii mbogite la 4 - 450C, temperatura optim fiind de 300C (bacterie psihrofil);este favorizat de atmosfer cu 5-10% CO2 ;dezvolt colonii mici, S, nconjurate de zon ngust de hemoliz pe geloz-snge;catalaz-pozitive i oxidaz-negative;teste biochimice suplimentare permit identificarea la nivel de specie.

Factori de patogenitatespecie constituit din tulpini cu nivele de virulen variabile;bacterie facultativ intracelular, capabil s supravieuiasc n macrofage, eliberarea din fagozom datorndu-se listeriolizinei;internalina permite ptrunderea n celulele epiteliale unde se multiplic i se propag apoi n esuturi trecnd direct de la o celul la alta.Habitat naturalbacterie ubicvitar, larg prezent n mediul extern (sol, ape de suprafa, vegetale);izolat de la numeroase specii animale;omul poate fi pasager colonizat dup consum de alimente contaminate.

Listerioza umaninfecie autolimitat la femeia gravid (sindrom pseudogripal);infecii grave sistemice la nou-nscui, precoce i tardive, cu manifestri de sepsis sever i/ sau meningit (granulomatosis infantiseptica);infecii cu evoluie bacteriemic i localizri secundare (meningite, meningo-encefalite, endocardite, osteomielite, artrite etc) la aduli imunodeprimai;la aduli normoreactivi infecia evolueaz cel mai frecvent inaparent.Imunitateconferit de mecanisme imune celulare;Ac serici nu au efect protector.

Diagnostic de laborator:se bazeaz pe izolarea i identificarea L. monocytogenes din snge, LCR sau alte produse, n raport cu sediul infeciei;pe medii selective, speciale: colonii cenuii sau negre, nconjurate de halou brun-nchis; identificare: clasic, eventual testul CAMP i testul de patogenitate pe animale;diagnosticul serologic este lipsit de valoare din cauza reaciilor ncruciate (comunitilor Ag).

Testul CAMP (tulpini de L. monocytogenes i S. aureus)

Mediu cromogenDetectarea Listeria din alimenteBazat pe producerea de beta-glucozidaza (de ctre toate tulpinile colonii bleu) i producerea de fosfatidilinozitol fosfolipaza C (phosphatidylinositol phospholipase C PIPLC), produs de tulpini patogene (halou clar, opac)

Principii de tratament

ampicilina sau penicilin + gentamicina - - tratamentul de elecie;alternativ pentru alergicii la penicilin: macrolide sau cotrimoxazol;specia este natural rezistent la cefalosporine.

Epidemiologie

la aduli infecia are loc cel mai frecvent pe cale digestiv, dup consum de alimente contaminate;femeia gravid i persoanele imunodepri-mate au receptivitate maxim;la n.n. infecia este transmis in utero, transplacentar sau consecutiv contactului cu flora vaginal a mamei.

Erysipelothrix rhusiopathiae

bacili fini gram-pozitivi, de lungimi variabile,dispui izolat, in diplo sau in scurte lanuri, nesporulai;cultiv pe medii imbogite (ex geloz snge sau geloz chocolat) la 35 - 370C, preferenial n atmosfer cu CO2; Microaerofil in primo-cultur, aerofil dup subcultivare (poate suferi variaia de faz S-R)pe geloz-snge coloniile sunt S, lucioase, transparente, convexe, -hemolitice;catalaz i oxidaz negativ;bacterie ubicvitar prezent la numeroase specii de animale i n mediul extern;

Strutura antigenic: 2 antigene TL (termo-labil) si unul TR (termo-rezistent) clasific specia. 26 serotirpuri (notate cu cifre arabe) i un serotip N (cuprinde tulpinile care nu reacioneaz cu serurile imune).

Virulenadezine;o structur similar capsulei;2 enzime (hialuronidaza i neuraminidaza).

Erysipelothrix rhusiopathiae

determin infecii cutanate la om, consecutiv contactului cu animale bolnave sau purttoare (rujetul porcului), care se manifest ca celulite acute (erizipeloid Rosenbach) ce pot evolua bacteriemic cu localizri n special la nivelul endocardului; diagnosticul bacteriologic se bazeaz pe evidenierea i identificarea speciei n biopsii cutanate sau hemoculturi n cazul infeciilor sistemice;tratament cu penicilin sau alte antibiotice active pe bacterii gram-pozitive (cefalosporine, macrolide, clindaminicin, flurochinolone); este natural rezistent la glicopeptide.

Erizipeloidul Rosenbach(1909)Incubaie: 10-14 zile/Forme: localizat sau sistemic.Debut: papul foarte dureroas, la locul inoculrii (are tenidina de a se extinde).Evoluie: vindecare sau:limfangit i limfadenit;infecie sistemic i apariia de flictene la locul inoculrii;sepsis i endocardit subacut;rar: meningit, glomerulonefrit, abes cerebral, osteomielit.

Profilaxie

Msuri care privesc animalele (atenie la furaje!)Vaccinul eficien incert. OmAtenie la alimente ca: salat de raci, homari, brnzeturi fermentate, etc.Fierbere, splare la jet puternic de ap, etc.Nu exist vaccin.

Genul Bacillus

Caractere generale

bacili gram-pozitivi cu extremiti drepte sau rotunjite, dispui izolai sau n lanuri de lungimi variabile, cu endospori ovalari sau sferici dispui central, subterminal sau terminal;majoritatea speciilor sunt mobile datorit unor flageli cu dispoziie peritriche;aerobi strici sau facultativ anaerobi;

Caractere generale

nepretenioi nutritiv, capabili s se dezvolte n limite largi de temperatur (specii mezofile, termofile sau psihrofile);catalaz i oxidaz pozitivi;larg rspndii n natur (sol, ape de suprafa, vegetale);B.anthracis este singura specie nalt patogen pentru animale i om.

Bacillus anthracisCaractere morfo-tinctorialebacili mari gram-pozitivi cu extremiti drepte in frotiul din produse patologice prezint capsul, fiind dispui n diplo- i n scurte lanuri;n culturi pierd capsula dar dezvolt endospori ovalari situai central sau paracentral far s deformeze conturul bacilului, fiind dispui n lanuri lungi;imobili.Caractere de cultivare i metabolicecultiv pe medii uzuale, prefernd condiii aerobe;formeaz colonii mari de tip R, nehemolitice pe geloz-snge;caractere biochimice suplimentare permit identificarea speciei.

Coloraie albastru de metilen: bacili colorai n rou, spori albastru nchis

Coloraii cu tu de India i IF

Bacillus anthracis pierderea caracterului Gram in culturi vechi

Colonii mucoide capsulate in vitro (incubare concetraii mai mari de CO2)

Rezistena n mediul externforma vegetativ este vulnerabil la ageni fizici si chimici;sporii supravieuiesc n sol zeci de ani, fiind distrui de unele dezinfectante i n 10 min la temperatura de 1000C.Factori de patogenitatecapsula de natur polipeptidic;toxina crbunoas, de tip A-B, un complex de 3 proteine:Ag protector (cu rol de ligant);factorul edematogen;factorul letal.genele care codific cei 2 factori de virulen sunt prezente pe plasmide distincte (pXO1 i pXO2) care pot fi pierdute (una sau ambele).

Proteaze ale gazdei (snge, celule eukariote) activeaz AP, expunnd situs-urile de legare pentru FL si FE.Ulterior, cele dou structuri competiioneaz pentru acelai situs de legare. Complexul rezultat (AP + FL, sau AP + FE) este internalizat prin endocitoz, iar dup acidifierea din endozom, FL sau FE traverseaz membran, n citozol via canale transmembranare, cu ajutorul AP.Model similar cu toxina de tip AB, unde AP joac rol de subunitate B, de legare.

Patogenie

FE este responsabil de edem, fiind o structur (adenilat-ciclaz) calmodulin-dependent (calmodulin receptorul intracelular cel mai important pentru calciu, pentru celulele eukariote).

FL este o metalo-proteaz dependent de zinc (cu substrat i mod de aciune incomplet cunoscute).

Elementul protectiv, toxina (inactivat i inoculat, ca vaccin); tulpina Cap- Tox+, vie atenuat (AP este cel mai imunogen).

Infecia crbunoasantraxul sau crbunele este o zoonoz grav care afecteaz n special ierbivorele domestice;infecia la om este accidental i poate avea caracter profesional; n raport cu poarta de intrare exist 3 forme clinice:antraxul cutanat sau pustula malign (buba neagr, dalac), cea mai frecvent manifestare (90-95%);antraxul pulmonar deosebit de grav i frecvent mortal; transmis pe cale respiratorie;antraxul digestiv, forma curent ntlnit la ierbivore, dar foarte rar la om; ingestie de carne;infecia crbunoasa poate evolua cu bacteriemie masiv i meningit hemoragic, ntotdeauna mortal.

Anthrax

Leziune nedureroas, nconjurat de edem, ce se poate extinde.Durere si puroi daca se suprainfecteaz cu germeni piogeni (nsoite i de limfangit i febr)De regul rmne limitat i se poate vindeca spontan.Periculoase: leziunile (gt, fa) care se complic (obstrucii de ci aeriene, meningit!!!! henoragic)In 20% din cazuri: complicaii septicemice fatale.

Forma pulmonar: sporii sunt inhalai, transportai de ctre M alveolare la nodulii limfatici mediastinali, unde germineaz i determinm manifestarea sistemic.In forma digestiv, tot sistemul limfatic capteaz bacteria.Ambele se pot complica cu meningit grav, cu lichid hemoragic, mortal!!!

Antrax pulmonar

Diagnistic de laboratordiagnostic bacteriologic prin examen microscopic direct, cultur sau inoculare la animal (cobai sau oareci) pe prelevate care variaz cu forma clinic;diagnostic serologic n suspiciunea clinic cu examen bacteriologic negativ;n fragmente de organe prelevate de la cadavru poate fi pus n eviden Ag polizaharidic termostabil (reacia de precipitare inelar Ascoli).Tratamentpenicilina este antibioticul de elecie; altele: tetra-, cloramfenicol fenicol 50 s, genta-, eritro-. Ciprofloxacin quinolone de gen 2 pentru chimioprofilaxie.n formele severe de boal se administreaz ser anticrbunos.

Tulpin capsulat (albastru de metilen)

Tulpin necapsulat (albastru de metilen)

Profilaxie specific

vaccinarea animalelor cu vaccin atenuat;persoanele cu risc profesional pot primi vaccin pe baz de Ag protector.

Bacillus cereus

caractere morfo-tinctoriale asemntoare cu B.anhracis;se difereniaz prin mobilitate, caracterul hemolitic al coloniilor pe geloz-snge, activitate lecitinazic i proteolitic, sensibilitate la fagul , rezisten la peniciline;Ag flagelare permit diferenierea mai multor serotipuri;factori de patogenitateenterotoxine termostabil i termolabil, cu rol n forma emetic (incubaie scurt 4 ore) sau forma diareic (incubaie mai lung 18 ore) de toxiinfecii alimentare;toxina necrotic, cerebrolizina i fosfolipaza C implicate n patogeneza infeciilor oculare;

Bacillus cereus

manifestri clinice la om: toxiinfecii alimentare, infecii oculare grave post-traumatice, bacteriemii de cateter, endocardite la utilizatorii de droguri i.v., pneumonii sau meningite la imunodepresai;semnificaia clinic a izolatelor se bazeaz pe criterii cantitative i izolarea repetat a aceleiai tulpini;antibioterapie cu vancomicin numai in infecii sistemice (sau: aminoglicozide, clindamicina).

B. cereus colonii hemolitice

B. cereus testul lecitinazei (+)

Alte specii Bacillus de interes medicalB. brevis, B.circulans, B.licheniformis, B.subtilis pot fi izolate din diverse infecii oportuniste la imunodepresai: pneumonii, pleurezii, pericardite, peritonite, osteomielite, meningite, endocardite, fasciite, mionecroze;B.subtilis poate determina toxiinfecii alimentare sau infecii oculare;ubicvitatea acestora impune aceleai criterii de semnificaie clinic a izolatelor ca i pentru B.cereus;vancomicina reprezint antibioticul de elecie;sporii de B. subtilis i B. stearothermophilus sunt folosii ca indicatori biologici ai eficienei sterilizrii la etuv sau autoclav;B. polymyxa, B. licheniformis, B. brevis produc antibiotice.